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房明1、大孔樹脂的預(yù)處理大孔樹脂AB-8,NKA-9,NKA-2(采購(gòu)于南開大學(xué)化工廠)。未經(jīng)處理的大孔樹脂常含有致孔劑、分散劑、交聯(lián)劑、防腐劑、引發(fā)劑和一些未聚合的單體,使用前必須進(jìn)行預(yù)處理,可以除去這些可能的有機(jī)殘留物。吸附樹脂通常以濕態(tài)保存,如果暴露在空氣中,樹脂可能部分干燥失水。為使樹脂再度水合,應(yīng)把脫水的吸附樹脂放在乙醇或其他水溶性溶劑(如丙酮、甲醇)中充分浸泡,以便從孔中趕出氣泡。因此先用蒸餾水洗三次,再用95%乙醇洗五次然后浸泡24小時(shí)使其充分溶脹,用95%乙醇洗至流出液加入三倍體積水不變渾濁為止,再用蒸餾水將樹脂洗至無味,用4倍體積5%Hcl溶液浸泡3小時(shí),用蒸餾水洗至中性,再用4倍體積2%NaoH溶液浸泡3小時(shí),用蒸餾水洗至中性,用95%乙醇浸泡備用。2、 P-胡蘿卜素提取液的制備稱取5g螺旋藻粉,用150ml丙酮:甲醇(6:4)的混合提取液在固液比為l:30(g:ml),溫度40攝氏度,提取時(shí)間50分鐘條件下提取0-胡蘿卜素。提取液離心后取200》l上清液于10ml容量瓶中用石油醚定容。以石油醚為空白,測(cè)定吸光度,計(jì)算提取液中的0-胡蘿卜素濃度。測(cè)定吸光度值為0.481,計(jì)算得提取液中0-胡蘿卜素濃度為93.775》g/ml。3、 比較三種樹脂的吸附率稱取經(jīng)過預(yù)處理的三種樹脂各5g,分別加入50ml0-C提取液,在30°C(呂爽?胡蘿卜中0-胡蘿卜素的提取、純化及其穩(wěn)定性研究[D].陜西:陜西師范大學(xué),2007.)下震蕩吸附24h,過濾,然后分別取200》l慮液于10ml容量瓶中用石油醚定容,測(cè)定吸光度值,計(jì)算三種樹脂吸附后溶液的0-C濃度。同時(shí)計(jì)算三種樹脂的吸附量(》g/g)和吸附率。吸附量公式如下:吸附壘=(c0-Cj)xvDwC:吸附前母液濃度(》g/ml)0C:吸附后濾液濃度(》g/ml)1V:吸附溶液體積(ml)0w:樹脂干重(g)吸附率公式如下:吸附率=(c0-cjCDx100%C:吸附前母液濃度(卩g/ml)0C:吸附后濾液濃度(卩g/ml)1計(jì)算結(jié)果如下:樹脂類型C0C1V0w吸附量吸附率NKA-993.7627.61505661.6670.56%NKA-293.7625.05505687.2673.29%AB-893.7627.81505659.6970.35%王子娜、周杏子、曾紅勝、夏爾核桃發(fā)酵飲料試驗(yàn)計(jì)劃(1)1.測(cè)核桃粕的蛋白質(zhì)含量(重點(diǎn))和脂肪含量(已有數(shù)據(jù),自己測(cè)一遍)堿液去皮:在90~100°C,1%的NaOH溶液中燙漂2.5~3分鐘后,立即冷卻,用清水反復(fù)漂洗并手工去皮。磨漿時(shí)溫度對(duì)蛋白質(zhì)溶出率的影響。(需要1的數(shù)據(jù))發(fā)酵飲料的各項(xiàng)指標(biāo)(初步定,還要完善)指標(biāo)項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)感官指標(biāo)色澤(色)根據(jù)以往文獻(xiàn)制定感官評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)氣味(香)根據(jù)以往文獻(xiàn)制定感官評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)口味(味)根據(jù)以往文獻(xiàn)制定感官評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)組織狀態(tài)(形)根據(jù)以往文獻(xiàn)制定感官評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)理化指標(biāo)總固形物含量無標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)含量無標(biāo)準(zhǔn)脂肪含量無標(biāo)準(zhǔn)總糖量無標(biāo)準(zhǔn)酸度無標(biāo)準(zhǔn)PH值無標(biāo)準(zhǔn)離心沉淀率無標(biāo)準(zhǔn)乳酸菌群數(shù)無標(biāo)準(zhǔn)衛(wèi)生指標(biāo)菌洛總數(shù)數(shù)W100cfu/ml大腸菌群數(shù)W3MPN/100ml霉菌W20cfu/ml酵母菌W20cfu/ml致病菌數(shù)不得檢出郭瑤實(shí)驗(yàn)題目:螺旋藻的微波真空冷凍干燥實(shí)驗(yàn)一、標(biāo)準(zhǔn)曲線法測(cè)定蛋白質(zhì)含量實(shí)驗(yàn)上學(xué)期在做測(cè)定總蛋白含量的預(yù)實(shí)驗(yàn)時(shí),沒有進(jìn)行蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線的測(cè)定,所以下個(gè)星期會(huì)先進(jìn)行蛋白質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定。方法一:以下是我通過查閱文獻(xiàn)獲得的考馬斯亮藍(lán)G-250染色比色法(Bradford法)測(cè)定蛋白質(zhì)含量的方法:(1)原理考馬斯亮藍(lán)G-250是一種有機(jī)染料,在游離狀態(tài)下呈紅色,在稀酸溶液中與蛋白質(zhì)中的堿性氨基酸(特別是精氨酸)和芳香族氨基酸殘基結(jié)合后變?yōu)樗{(lán)色,其最大吸收峰的位置也由465nm變?yōu)?95nm。蛋白質(zhì)質(zhì)量為1?1000陰,蛋白質(zhì)-色素結(jié)合物在595nm波長(zhǎng)下的吸收度與蛋白質(zhì)含量呈正比,故可用蛋白質(zhì)的定量測(cè)定。(2)試劑標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)溶液:稱取10mg牛血清蛋白,用蒸餾水配成100yg/ml和1000yg/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液??捡R斯亮藍(lán)G-250蛋白試劑:稱取lOOmg考馬斯亮藍(lán)G-250,溶于50ml90%乙醇中,加入85%(質(zhì)量濃度)的磷酸100m1,最后用蒸餾水定容到1000m1。此溶液在常溫下可放置一個(gè)月。(3)操作方法I?樣品處理及制備液體樣品直接或稀釋后即可測(cè)定。II.標(biāo)準(zhǔn)曲線制作(1) 0?100卩g/ml標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作:取6支10ml干凈的具塞試管,按照表2取樣.塞蓋后,將各試管中溶液縱向倒轉(zhuǎn)混合,放置2min后用1cm比色杯在595nm波長(zhǎng)下比色,記錄各管測(cè)定的吸光度值A(chǔ)595nm并制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。(2) 0?1000卩g/ml標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作:另取6支10ml干凈的具塞試管,按照表3取樣.其余步驟同(1)操作,做蛋白質(zhì)濃度為0?1000卩g/ml的標(biāo)準(zhǔn)曲線。表2低濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線制作管號(hào)123456100pg/ml標(biāo)準(zhǔn)蛋白液/ml00.020.040.060.080.10蒸餾水/ml1.000.980.960.940.920.90考馬斯亮藍(lán)G-250試劑/ml555555蛋白質(zhì)含量/pg020406080100A 595nm 1表3高濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線制作管號(hào)1234561000pg/ml標(biāo)準(zhǔn)蛋白液/ml00.20.40.60.81.0蒸餾水/ml1.000.80.60.40.20考馬斯亮藍(lán)G-250試劑/ml555555蛋白質(zhì)含量/pg02004006008001000A 595nm 1III.樣品提取液中蛋白質(zhì)的濃度的測(cè)定另取三支10ml具塞試管,各吸取提取液0.1ml(做三個(gè)重復(fù))和蒸餾水0.9ml,加入5ml考馬斯亮藍(lán)G-250蛋白試劑,充分混合,放置2min后用1cm比色杯在595nm下比色,記錄吸光度值A(chǔ)595m,并通過標(biāo)準(zhǔn)曲線查得待測(cè)樣品提取液中蛋白質(zhì)的含量xQg)。以標(biāo)準(zhǔn)曲線1號(hào)試管做空白。(4)注意事項(xiàng)本法在蛋白質(zhì)濃度為0~100mg/l呈良好的線性關(guān)系,不可使用石英比色皿(因不易洗去染色),可用玻璃比色皿,使用后立即用少量95%的乙醇蕩洗。[注]:以上方法參考文獻(xiàn)[1]謝筆鈞,何慧?食品分析[M].北京:科技出版社,2009.180-181方法二:這個(gè)實(shí)驗(yàn)方法是借鑒張琨和郭萌之前在測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)的方法:標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液的配置:用0.15mol/L的Nacl配置lmg/mL的牛血清蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液,按照表4進(jìn)行取樣。表4蛋艮白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲1線制作管號(hào)1234561000pg/ml標(biāo)準(zhǔn)蛋白液/ml00.010.020.030.040.050.15mol/LNacl溶液/ml0.10.090.080.070.060.05考馬斯亮藍(lán)G-250試劑/ml333333蛋白質(zhì)含量/pg/ml0100200300400500A595nm搖勻,1小時(shí)內(nèi)以1號(hào)試管為對(duì)照,在595nm下比色。疑問:以上兩種方法的原理基本一致,但是我不確定加入的考馬斯亮藍(lán)G-250試劑的多少,會(huì)不會(huì)對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線的測(cè)定產(chǎn)生影響。二、螺旋藻粉品質(zhì)測(cè)定實(shí)驗(yàn)指標(biāo)的選取總蛋白和藻藍(lán)蛋白的含量具體方法在之前的實(shí)驗(yàn)進(jìn)展報(bào)告中已經(jīng)提到??偺腔蚨嗵堑暮繙y(cè)定意義:螺旋藻中除了富含蛋白質(zhì)外,還含有較多的碳水化合物,它們約占藻粉重量的15%,這些糖類物質(zhì)以其獨(dú)特的生物活性引起了人們的重視。另外,螺旋藻的細(xì)胞壁較薄并且其中纖維素含量較低,使得螺旋藻便于被消化吸收。經(jīng)過試驗(yàn)證實(shí),螺旋藻多糖具有許多藥用功效:①具有抗0H氧化的能力;②增強(qiáng)核酸內(nèi)切酶活性和DNA修復(fù)合成能力,可以抗輻射引起的胸腺與脾臟萎縮、血清溶血素減少及脾臟抗體形成細(xì)胞功能的抑制作用,因此具防癌抗癌作用;③促進(jìn)骨髓造血功能,并能明顯升高白細(xì)胞水平;④對(duì)免疫功能有廣泛的調(diào)節(jié)作用,提高機(jī)體免疫力??偺呛繙y(cè)定方法:繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線取六支干燥潔凈的試管,按表5順序加入試劑,進(jìn)行測(cè)定。以吸光值為縱坐標(biāo),各溶液標(biāo)準(zhǔn)濃度(mg/mL)為橫坐標(biāo),作圖得標(biāo)準(zhǔn)曲線。表5總糖含量標(biāo)準(zhǔn)曲線實(shí)驗(yàn)Table5Thetestofstandardcurveofthecontentofcarbohydrate混勻后,沸水浴加熱2min,取出后用流動(dòng)水冷卻至室溫。各管加入蒸餾水9mL,在540nm波長(zhǎng)下測(cè)吸光值。樣品制備每個(gè)樣品取2g藻粉加6mol/LHCLlOmL后,加蒸餾水15mL,沸水浴加熱30min,用I.KI檢查水解是否完全。水解完全后,加入1滴酚酞,用10%Na0H中和至微紅,定容至100mL。樣品測(cè)定將上述待測(cè)液過濾后,取lmL加入2mLDNS試劑混勻后,沸水浴加熱2min,用流動(dòng)水冷卻。加入蒸餾水9mL,在540nm波長(zhǎng)下測(cè)吸光值。樣品中總糖含量計(jì)算根據(jù)樣品提取液測(cè)定的0。540和糖含量標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算提取液中總糖濃度,再結(jié)合樣品重量計(jì)算樣品中總糖的含量。[注]:以上方法參考文獻(xiàn):[2]梁妍.不同碳源對(duì)螺旋藻生長(zhǎng)影響及不同干燥方式對(duì)螺旋藻營(yíng)養(yǎng)成分影響[D]?山東:魯東大學(xué),2009.多糖的測(cè)定方法:取螺旋藻干粉20g,加入240mlPH10的氫氧化鈉溶液,80°C間歇攪拌提取6h,離心,上清液用10%鹽酸調(diào)pH7.0,加質(zhì)量濃度為5%的三氯乙酸沉淀蛋白質(zhì),離心,上清液再用質(zhì)量濃度為5%的三氯乙酸沉淀,上清液加4倍體積乙醇,離心,用有機(jī)溶劑洗滌,真空干燥得白色粉末。產(chǎn)品中多糖質(zhì)量含量為93.8%,蛋白質(zhì)質(zhì)量含量為5.94%,產(chǎn)品提取率為1.30%?1.37%。[注]:以上測(cè)量方法參考文獻(xiàn):[3]錢志剛,螺旋藻多糖提取新工藝研究[J].淮海工學(xué)院學(xué)報(bào).2000,9(2):50-52討論:測(cè)量多糖的方法中,每次所需藻粉20g有些多。用微波真空冷凍干燥每次獲得的藻粉不到10g。但是要是減少藻粉的用量,我擔(dān)心測(cè)量結(jié)果不夠準(zhǔn)確。所以想選擇測(cè)量總糖這個(gè)指標(biāo),不單獨(dú)測(cè)定總糖含量。粗脂肪含量測(cè)定測(cè)定意義:螺旋藻中粗脂肪含量約為3%?9%,其中脂肪酸含量占螺旋藻總量的4.9%?5.7%。在這些脂肪酸中,不飽和脂肪酸占有較大比例,特別是Y亞麻酸,可達(dá)干重的1.7%左右,具有降低血脂、軟化血管的作用,對(duì)防治關(guān)節(jié)炎、心臟病、兒童的特異反應(yīng)性濕疹、婦女經(jīng)前綜合癥、帕金森癥及Zn的缺乏也有一定的效果,而且沒有副作用。但除人奶外,其它動(dòng)植物中y一亞麻酸的含量很低。測(cè)定方法:提取每個(gè)樣品取2g藻粉,加入10mL氯仿,20mL甲醇和8mL水。混合震蕩提取2h。離心5000r/min條件下離心10min。3.分層取上清夜加入分液漏斗中,再向分液漏斗中加入10mL氯仿和10mL水,靜置分層,分離出下層氯仿層,置于己干燥至恒重的培養(yǎng)皿中烘干。4.稱重干燥至恒重,稱重,減去培養(yǎng)皿重量,即為粗脂肪重量。Y-亞麻酸和P-胡蘿卜素的測(cè)量螺旋藻中Y-亞麻酸和B-胡蘿卜素的含量相對(duì)也比較多,具體的測(cè)量方法我還在通過閱讀文獻(xiàn)進(jìn)行學(xué)習(xí)。文獻(xiàn)中用高效液相色譜法測(cè)量B-胡蘿卜素的較多,大多數(shù)用氣相色譜測(cè)Y-亞麻酸。以上是我根據(jù)螺旋藻中的主要營(yíng)養(yǎng)成分,選取的幾個(gè)測(cè)量指標(biāo)。張琨修改論文1、 重點(diǎn)修改引言部分,修改內(nèi)容如下:“朱劼等人通過冷凍干燥,利用超聲波協(xié)同等電點(diǎn)沉淀法優(yōu)化工藝得到藻藍(lán)蛋白的含量4.36%的螺旋藻提取液,然而,目前以提高活性物質(zhì)藻藍(lán)蛋白質(zhì)量濃度為目的優(yōu)化螺旋藻真空干燥加工技術(shù)的研究仍未有報(bào)道。因此,本研究采用響應(yīng)面分析法,以螺旋藻藻藍(lán)蛋白質(zhì)量濃度為指標(biāo),對(duì)鈍頂螺旋藻的真空干燥工藝進(jìn)行優(yōu)化,與其他干燥方法相比,減少熱敏活性物質(zhì)的損失,提高藻藍(lán)蛋白提取率,以實(shí)現(xiàn)快速、低溫、安全提取螺旋藻中有效成分,對(duì)于提高螺旋藻粉的干燥品質(zhì)和產(chǎn)品質(zhì)量具有參考意義?!?、 文章已報(bào)給農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào)審批,需終審、排版,繼續(xù)等待報(bào)社郵件。完成小鼠急性實(shí)驗(yàn)(同王菲、房明、王子娜師姐)灌胃雞冠花籽油,觀察生理特征,以及小鼠常規(guī)飼養(yǎng)工作。■完成畢設(shè)中期檢查■翻譯英文文獻(xiàn)并進(jìn)行格式修改目前正參考《Val-Glu-Pro對(duì)原發(fā)性高血壓大鼠的體內(nèi)降壓作用》,將《One-WeekAntihypertensiveEffectoflle-GIn-ProinSpontaneouslyHypertensiveRat》翻譯成中文。下周,將第一篇文章翻譯完畢進(jìn)入格式修改部分。宋莎莎設(shè)計(jì)并實(shí)施了溶劑、溫度、pH、催化劑的量得單因素實(shí)驗(yàn)1、催化劑的單因素實(shí)驗(yàn)(一)編號(hào)12345紅棗多糖0.503g0.504g0.504g0.503g0.503g檸檬酸鈉0.3g0.5g1.00g1.50g2.00g溶于40ml蒸餾水邊加入0.5molL-1FeCl3邊調(diào)整pH值為8,在溫度為70*的水中水浴1h,離心除去沉淀,用70%的乙醇沉淀,靜置過夜,4000rpm離心5min獲得粗產(chǎn)品。放在45oC溫度的恒溫烘箱中(真空干燥箱的油泵都?jí)牧耍┖娓?,稱量質(zhì)量。2、溶劑單因素實(shí)驗(yàn)(一)編號(hào)rj1rj2rj3rj4rj5紅棗多糖0.507g0.507g0.508g0.504g0.504g溶劑水體積30ml35ml40ml45ml50ml不加催化劑邊加入0.5molL-1FeCl3邊調(diào)整pH值為8,在溫度為70*的水中水浴1h,離心除去沉淀,用70%的乙醇沉淀,靜置過夜,4000rpm離心5min獲得粗產(chǎn)品。放在45oC溫度的恒溫烘箱中烘干。結(jié)果:稱量質(zhì)量為編號(hào)rj1rj2rj3rj4rj5產(chǎn)品質(zhì)量0.145g0.175g0.170g0.168g0.172g3、溶劑單因素實(shí)驗(yàn)(二)編號(hào)rj1*rj2*rj3*rj4*rj5*紅棗多糖0.505g0.500g0.500g0.502g0.502g溶劑水體積30ml35ml40ml45ml50ml不加催化劑邊加入0.5molL-1FeCl3邊調(diào)整pH值為8,在溫度為70*的水中水浴1h,離心除去沉淀,用70%的乙醇沉淀,靜置過夜,4000rpm離心5min獲得粗產(chǎn)品。放在45oC溫度的恒溫烘箱中烘干。4、pH單因素實(shí)驗(yàn)(二)編號(hào)Ph1Ph2Ph3Ph3反應(yīng)pH67910稱取0.5g紅棗多糖溶于40ml蒸餾水中,調(diào)整pH值分別為6
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