黃酮類化合物二、理化性質(zhì)一、概述三、提取與別離第四章黃酮類化合物四、結(jié)構(gòu)鑒定黃酮化合物是植物中分布最廣的一類物質(zhì),幾乎每種植物中都有。據(jù)估計(jì)，經(jīng)植物光合作用所固定的碳2%轉(zhuǎn)變?yōu)辄S酮類化合物或與其密切相關(guān)的其他化合物，大局部的鞣質(zhì)也是由黃酮類化合物轉(zhuǎn)變來(lái)的。黃酮對(duì)植物的生長(zhǎng),發(fā)育,開(kāi)花,結(jié)果以及抵御異物的侵襲其著重要的作用.由于其分布廣,局部化合物在植物中較高,而且多數(shù)化合物容易以結(jié)晶形式獲得,所以他是較早被人類發(fā)現(xiàn)的一類天然產(chǎn)物.

很早已前黃酮主要用作染料19世紀(jì)后開(kāi)始化學(xué)和生理活性研究1974黃酮化合物1674苷元902,苷7221978220019802721199964672006>9000黃酮類化合物具有一定生理活性,雖然不及生物堿作用強(qiáng),由于分布廣泛,種類繁多,因此這類化合物的研究比較廣泛和深入,是天然產(chǎn)物中的一類重要的化合物.新橙皮糖基

〔一〕、定義黃酮類化合物(flavonoids)：是泛指兩個(gè)苯環(huán)〔A-與B-環(huán)〕通過(guò)中央三碳鏈相互聯(lián)結(jié)而成的一系列化合物。即結(jié)構(gòu)一、概述

一、概述根本母核：

黃酮類化合物多具有顏色，在植物體內(nèi)大局部與糖結(jié)合成甙，一局部以游離形式存在。而且生理活性多種多樣，引起了國(guó)內(nèi)外的廣重視，研究進(jìn)展很快。如蘆?。航档脱芡ㄍ感糟y杏葉提取物：降低血膽固醇一、概述

〔二〕分類分類依據(jù)：a：中央三碳鏈的氧化程度、b：B-環(huán)聯(lián)接位置〔2-或3-位〕c：三碳鏈?zhǔn)欠駱?gòu)成環(huán)狀可將重要的天然黃酮類化合物分類如下所示。一、概述〔二〕分類1.黃酮及黃酮醇三碳鏈局部結(jié)構(gòu) 黃酮類 (flavones) 黃酮醇 (flavonol) 一、概述〔二〕分類1.黃酮及黃酮醇

一、概述黃芩素

〔二〕分類2.二氫黃酮及二氫黃酮醇二氫黃酮類 二氫黃酮醇類

花色素類 (anthocyanidins)一、概述

〔二〕分類2.二氫黃酮及二氫黃酮醇

一、概述杜鵑素二氫槲皮素

異黃酮類二氫異黃酮類

一、概述〔二〕分類3.異黃酮及二氫異黃酮

一、概述〔二〕分類3.異黃酮及二氫異黃酮大豆素

查耳酮類二氫查耳酮類

一、概述〔二〕分類4.查耳酮及二氫查耳酮類

一、概述〔二〕分類4.查耳酮及二氫查耳酮類新橙皮糖基柑橘苷二氫查耳酮2’-羥基查耳酮

一、概述〔二〕分類4.查耳酮及二氫查耳酮類二氫黃酮一、概述新紅花苷〔無(wú)色〕初期淡黃色紅花苷〔黃色〕中期深黃色醌式紅花苷〔紅色〕后期紅色〔二〕分類5.橙酮類〔噢類〕

一、概述硫磺菊素

〔二〕分類6.花色素類 及黃烷醇類

花色素類 黃烷-3-醇類黃烷-3,4-二醇類

一、概述+

〔二〕分類6.花色素類 及黃烷醇類

一、概述矢車菊素?zé)o色矢車菊素

〔二〕分類7.魚(yú)藤酮類

一、概述

Amorphigenolb12-a-羥醛魚(yú)滕酮(12a-hydroxyretenoids)

2-hydroxypachyrrhigoneC脫氫魚(yú)滕酮(dehydroretenoids)

a魚(yú)滕酮(retenoids)

dehydrolineone

〔二〕分類8.紫檀素類

一、概述

a..6a-羥基紫檀素(6a-hydroxypetercarpans)

b.紫檀烯(petercarpenes)

〔二〕分類9.雙苯吡酮類(酮類)

一、概述異芒果素

〔二〕分類9.雙苯吡酮類(酮類)

一、概述

〔二〕分類9.高異黃酮類

一、概述〔二〕分類10.其他類少數(shù)黃酮類化合物結(jié)構(gòu)較為復(fù)雜，如水飛薊素(silybin)為黃酮木脂體類化合物。一、概述而榕堿(ficine)及異榕堿(isoficine)那么為生物堿型黃酮。一、概述一、概述其他分類方法；平面型分子：黃酮、黃酮醇、查耳酮、花色素類非平面型分子：二氫黃酮、二氫黃酮醇、異黃酮一、概述二、理化性質(zhì)一、概述三、提取與別離第四章黃酮類化合物四、結(jié)構(gòu)鑒定

1、性狀黃酮類化合物多為結(jié)晶性固體，少數(shù)〔如黃酮甙類〕為無(wú)定形粉末。二、黃酮類化合物的理化性質(zhì)2、顏色黃酮的色原酮局部無(wú)色，在2-位上引入苯環(huán)后，即形成交叉共軛體系，使共軛鏈延長(zhǎng)，因而呈現(xiàn)出顏色。

二、黃酮類化合物的理化性質(zhì)2、顏色黃酮、黃酮醇及其甙類：多顯灰黃~黃色，查耳酮：黃~橙黃色，異黃酮：顯微黃色，二氫黃酮、二氫黃酮醇：不顯色。

二、黃酮類化合物的理化性質(zhì)

2、顏色

在上述黃酮、黃酮醇分子中，尤其在7-位及4’-位引入—OH及—OCH3等供電基后，化合物的顏色加深，但在其它位置引入—OH、—OCH3等供電基影響較小。

花色甙及其甙元的顏色隨pH不同而改變，一般顯紅色(pH7)、紫色(pH8.5)、藍(lán)色(pH8.5)等顏色。二、黃酮類化合物的理化性質(zhì)

3、旋光性甙元中，二氫黃酮、二氫黃酮醇、黃烷及黃烷醇具有手性碳，具旋光性，其余黃酮類無(wú)旋光性。甙類結(jié)構(gòu)中含糖的局部結(jié)構(gòu)，故均有旋光性，且多為左旋。二、黃酮類化合物的理化性質(zhì)

二氫黃酮類 二氫黃酮醇類 (flavanones) (flavanonols)

黃烷-3,4-二醇類(flavan-3,4-diols) 二、黃酮類化合物的理化性質(zhì)

黃烷-3-醇類(flavan-3-ols)二、黃酮類化合物的理化性質(zhì)4、溶解度一般來(lái)說(shuō)，游離甙元：難溶或不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、醋酸乙酯、乙醚等有機(jī)溶劑及稀堿液中。非平面型親水性大于平面型分子?；ㄉ霸不ㄇ嗨亍愁悾阂噪x子形式存在，水溶度較大。黃酮類甙元分子中羥基數(shù)越多，水中的溶解度越大。

二、黃酮類化合物的理化性質(zhì)

4、溶解度黃酮甙類：水溶性比相應(yīng)甙元為大；糖鏈越長(zhǎng)，那么水溶度越大，一般易溶于熱水、甲醇、乙醇等強(qiáng)極性溶劑中，但難溶或不溶于苯、氯仿等有機(jī)溶劑中。二、黃酮類化合物的理化性質(zhì)

5、酸堿性酸性黃酮類化合物因分子中多含有游離酚羥基，故顯酸性，可溶于堿性溶液中。酸性強(qiáng)弱順序依次為：7，4’-二OH7-或4’-OH一般酚OH5-OH。此性質(zhì)可用于提取、別離及鑒定工作。二、黃酮類化合物的理化性質(zhì)

5、酸堿性堿性 黃酮類化合物分子中-吡喃酮環(huán)上的1-位氧原子，因有未共用的電子對(duì)，故表現(xiàn)微弱的堿性，可與強(qiáng)無(wú)機(jī)酸，如濃硫酸、鹽酸等生成〔金羊〕鹽，但生成的〔金羊〕鹽不穩(wěn)定，加水可分解。二、黃酮類化合物的理化性質(zhì)

6、顯色反響1〕鹽酸-鎂粉〔或鋅粉〕反響：

二、黃酮類化合物的理化性質(zhì)

6、顯色反響1〕鹽酸-鎂粉〔或鋅粉〕反響： 多數(shù)黃酮、黃酮醇、二氫黃酮及二氫黃酮醇類化合物顯橙紅~紫紅色，少數(shù)顯紫~藍(lán)色。查耳酮、橙酮、兒茶素類不顯色。異黃酮類一般不顯色。二、黃酮類化合物的理化性質(zhì)

6、顯色反響2〕四氫硼鈉〔鉀〕反響： NaBH4是對(duì)二氫黃酮類化合物專屬性較高的一種復(fù)原劑。與二氫黃酮類化合物產(chǎn)生紅~紫色。其它黃酮類化合物均不顯色。

二、黃酮類化合物的理化性質(zhì)

6、顯色反響3〕鋁鹽： 生成的絡(luò)合物多為黃色〔max=415nm〕，并有熒光，可用于定性及定量分析。常用試劑為1%三氯化鋁或硝酸鋁溶液。

二、黃酮類化合物的理化性質(zhì)

6、顯色反響4〕鋯鹽： 多用2%二氯氧化鋯〔ZrOCl2〕甲醇溶液。黃酮類化合物分子中有游離的3-或5-OH存在時(shí)，均可反響生成黃色的鋯絡(luò)合物。

二、黃酮類化合物的理化性質(zhì)

6、顯色反響4〕鋯鹽： 3-OH，4-酮基絡(luò)合物的穩(wěn)定性5-OH，4-酮基絡(luò)合物〔僅二氫黃酮醇除外〕?！籍?dāng)反響液中接著參加枸櫞酸后，5-羥基黃酮的黃色溶液顯著褪色，而3-羥基黃酮溶液仍呈鮮黃色〔鋯—枸櫞酸反響〕〗。二、黃酮類化合物的理化性質(zhì)

6、顯色反響5〕鎂鹽： 二氫黃酮、二氫黃酮醇類與醋酸鎂的甲醇溶液，加熱可顯天藍(lán)色熒光，假設(shè)具有C5-OH，色澤更為明顯。而黃酮、黃酮醇及異黃酮類等那么顯黃~橙黃~褐色。二、黃酮類化合物的理化性質(zhì)

6、顯色反響6〕硼酸顯色反響： 在無(wú)機(jī)酸或有機(jī)酸存在條件下，5-羥基黃酮及2’-羥基查耳酮可與硼酸反響，呈亮黃色并帶黃綠色熒光。二、黃酮類化合物的理化性質(zhì)

6、顯色反響7〕氯化鍶〔SrCl2〕： 在氨性甲醇溶液中，可與分子中具有鄰二酚羥基結(jié)構(gòu)的黃酮類化合物生成綠色~棕色乃至黑色沉淀。二、黃酮類化合物的理化性質(zhì)

6、顯色反響8〕堿性試劑顯色反響：在日光及紫外光下，通過(guò)紙斑反響，觀察樣品用氨蒸氣和其他堿性試劑處理后的色變深的情況。當(dāng)分子中有鄰二酚羥基取代或3,4’-二羥基取代時(shí)，在堿液中很快氧化，最后生成綠棕色沉淀。二、黃酮類化合物的理化性質(zhì)

說(shuō)明各化合物的結(jié)構(gòu)類型練習(xí)

說(shuō)明各化合物的結(jié)構(gòu)類型練習(xí)練習(xí)黃酮類化合物結(jié)構(gòu)中有一個(gè)帶_____性的氧原子，能與_____形成yang鹽。2.黃酮類化合物就整個(gè)分子而言，由于具有多個(gè)_____基，故呈___性，能溶于____性水液中。其酸性強(qiáng)弱順序依次為_(kāi)___>____>____>____。3.黃酮類化合物的根本骨架為_(kāi)__，其主要結(jié)構(gòu)類型是依據(jù)___、___及___某特點(diǎn)而分類。選擇題1.某中藥的甲醇提取液，HCl-Mg粉反響時(shí)，溶液顯醬紅色，而加HCl后升起的泡沫呈紅色，那么該提取液中可能含有：A.異黃酮B.查耳酮C.橙酮D.黃酮醇2.四氫硼鈉是一種專屬性較高的復(fù)原劑，只作用于：A.黃酮B.二氫黃酮〔醇〕C.異黃酮D.查耳酮3.與醋酸鎂顯天藍(lán)色熒光的化合物為：A.二氫黃酮B.黃酮C.黃酮醇D.異黃酮4.某化合物有：①四氫硼鈉反響呈紫紅色；②氯化鍶反響陽(yáng)性；③鋯-枸椽酸反響黃色褪去等性質(zhì)，那么該化合物應(yīng)為：判斷正誤能與鹽酸-鎂粉產(chǎn)生橙紅色反響的化合物一定是黃酮類化合物。2.與鋯-枸椽酸反響產(chǎn)生陽(yáng)性結(jié)果的化合物是5-羥基黃酮。3.黃酮類化合物在7，4‘位連有-OH后，酸性增強(qiáng)。4.黃酮類化合物多為有色物質(zhì)，因其色原酮局部具有顏色。5.與FeCl3顯色的反響為黃酮類化合物的專屬反響。6.黃酮類化合物5-OH較一般酚-OH酸性弱。二、理化性質(zhì)一、概述三、提取與別離第四章黃酮類化合物〔一〕提取黃酮甙類以及極性稍大的甙元：一般可用丙酮、醋酸乙酯、乙醇提取。一些多糖甙類可用沸水提取?；ㄇ嗨仡惢衔铮涸谔崛r(shí)，可參加少量酸〔0.1%鹽酸，應(yīng)當(dāng)慎用，防止發(fā)生水解〕。大多數(shù)黃酮甙元：宜用氯仿、乙醚、醋酸乙酯等中極性溶劑提取，而對(duì)多甲氧基黃酮類游離甙元，甚至可用苯等低極性溶劑進(jìn)行提取。

三、黃酮類化合物的提取與別離

1.溶劑萃取法利用黃酮類化合物與混入的雜質(zhì)極性不同，選用不同溶劑進(jìn)行萃取可到達(dá)精制純化目的。例如植物葉子的醇浸液，可用石油醚處理，以便除去葉綠素、胡蘿卜素等脂溶性色素。而某些藥料水溶液那么可參加多倍量濃醇，以沉淀除去蛋白質(zhì)、多糖類等水溶性雜質(zhì)。三、黃酮類化合物的提取與別離

1.溶劑萃取法三、黃酮類化合物的提取與別離乙醇浸膏乙醚萃取液水液萃取液溶于水，乙醚萃取乙酸乙酯或正丁醇萃取黃酮苷元黃酮苷

2.堿提取酸沉淀法黃酮類大多具有酚羥基，有弱酸性，易溶于堿性水，故可用堿性水提取，再于堿水提取液中參加酸，黃酮甙元及水溶性較小的黃酮甙類即可沉淀析出。此法簡(jiǎn)便易行，如蘆丁、橙皮甙、黃芩甙的提取都應(yīng)用了這個(gè)方法。三、黃酮類化合物的提取與別離槐米濾液藥渣蘆丁6倍H2O，煮沸，石灰乳調(diào)pH8，煮沸20-30分鐘，趁熱過(guò)濾沉淀4倍H2O，煮沸20-30分鐘，趁熱過(guò)濾濾液60-70度，鹽酸調(diào)pH5-6，靜置，抽濾重結(jié)晶三、黃酮類化合物的提取與別離

在用堿酸法進(jìn)行提取純化時(shí)，應(yīng)當(dāng)注意所用堿液濃度不宜過(guò)高，以免在強(qiáng)堿性下，尤其加熱進(jìn)破壞黃酮母核。在加酸酸化時(shí)，酸性也不宜過(guò)強(qiáng)，以免生成〔金羊〕鹽，致使析出的黃酮類化合物又重新溶解，降低產(chǎn)品收率。當(dāng)藥料中含有大量果膠、粘液等不溶性雜質(zhì)時(shí)，如花、果類藥材，宜用石灰乳或石灰水代替其它堿性水溶液進(jìn)行提取，以使上述含羥基的雜質(zhì)生成鈣鹽沉淀，不致溶出。這也有利于黃酮類化合物的純化處理。三、黃酮類化合物的提取與別離3.大孔吸附樹(shù)脂法植物的水或稀醇提取液參加到大孔吸附樹(shù)脂柱上，先用水洗去雜質(zhì)，再用不同濃度的乙醇依次洗脫，用HCl-Mg粉反響檢測(cè)，即可得到較純的黃酮類成分，最后用濃醇洗柱至完全。三、黃酮類化合物的提取與別離

〔二〕、別離1.柱層析法別離黃酮類化合物常用的吸附劑或載體有硅膠、聚酰胺及纖維素粉等。此外，也有用氧化鋁、氧化鎂及硅藻土等。

三、黃酮類化合物的提取與別離

〔1〕.硅膠柱層析：此法應(yīng)用范圍最廣，主要適于別離異黃酮、二氫黃酮、二氫黃酮醇及高度甲基化〔或乙?；车狞S酮及黃酮醇類。少數(shù)情況下，在加水去活化后也可用于別離極性較大的化合物，如多羥基黃酮醇及其甙類等。常用洗脫系統(tǒng):苷元:氯仿-甲醇苷:氯仿-甲醇-水乙酸乙酯-丙酮-水三、黃酮類化合物的提取與別離〔2〕.聚酰胺柱層析：對(duì)別離黃酮類化合物來(lái)說(shuō)，聚酰胺是較為理想的吸附劑?？捎糜趧e離各種類型的黃酮類化合物，包括甙及甙元、查耳酮與二氫黃酮等

三、黃酮類化合物的提取與別離聚酰胺別離黃酮類化合物的原理：

三、黃酮類化合物的提取與別離聚酰胺分子中酰胺基與黃酮類化合物分子中羥基形成氫鍵締合而產(chǎn)生吸附作用。吸附力越大，越難洗脫。其吸附強(qiáng)度主要取決于以下幾個(gè)方面：

a：與黃酮類化合物分子中酚羥基的數(shù)目有關(guān)，酚羥基的數(shù)目越多，吸附力越強(qiáng)。三、黃酮類化合物的提取與別離其吸附強(qiáng)度主要取決于以下幾個(gè)方面：b：與酚羥基的位置有關(guān)，酚羥基所處的位置易形成分子內(nèi)氫鍵，那么吸附力減弱。三、黃酮類化合物的提取與別離其吸附強(qiáng)度主要取決于以下幾個(gè)方面：c：分子中芳香化程度越高、共軛雙鍵多者那么吸附力強(qiáng)。三、黃酮類化合物的提取與別離其吸附強(qiáng)度主要取決于以下幾個(gè)方面：

d：不同類型黃酮化合物，吸附強(qiáng)弱順序?yàn)椋寒慄S酮<二氫黃酮醇<黃酮<黃酮醇先后流出順序一般是：

異黃酮二氫黃酮醇黃酮黃酮醇三、黃酮類化合物的提取與別離其吸附強(qiáng)度主要取決于以下幾個(gè)方面：e：甙元相同，吸附強(qiáng)弱順序?yàn)椋喝沁?lt;雙糖甙<單糖甙<甙元洗脫先后順序一般是：叁糖甙雙糖甙單糖甙甙元

三、黃酮類化合物的提取與別離其吸附強(qiáng)度主要取決于以下幾個(gè)方面：f：與溶劑介質(zhì)有關(guān)，溶劑與聚酰胺或黃酮類化合物形成氫鍵的能力越強(qiáng),那么其洗脫能力越強(qiáng).溶劑洗脫能力順序：水<甲醇(乙醇)<丙酮<氫氧化鈉水溶液<甲酰胺<二甲基酰胺<尿素水溶液

三、黃酮類化合物的提取與別離1.某植物的提取物含有相同苷元的三糖苷、雙糖苷、單糖苷及它們的苷元，欲用聚酰胺進(jìn)行別離，以含水甲醇(含醇量遞增)洗脫，最后出來(lái)的化合物是：A.苷元B.三糖苷C.雙糖苷D.單糖苷√2.以下化合物在聚酰胺柱上，用醇作溶劑洗脫時(shí)，其出柱先后順序應(yīng)為：①②③④

B.③①②④

C.①②④③D.②①③④√

(3).葡聚糖疑膠(Sephadexgel)柱層析：對(duì)于黃酮類化合物的別離，主要用兩種型號(hào)的凝膠：Sephadex-G型及Sephadex-LH-20型。三、黃酮類化合物的提取與別離

葡聚糖凝膠別離黃酮類化合物的機(jī)理是：別離游離黃酮時(shí):主要靠吸附作用。凝膠對(duì)黃酮類化合物的吸附程度取決于游離酚羥基的數(shù)目。別離黃酮甙時(shí):主要靠分子篩作用。在洗脫時(shí)，黃酮甙類大體上是按分子量由大到小的順序流出柱體，三、黃酮類化合物的提取與別離

葡聚糖凝膠柱層析中常用的洗脫劑有：堿性水溶液〔如0.1mol/LNH4OH〕，含鹽水溶液(0.5mol/LNaCl等)。(2)醇及含水醇，如甲醇，甲醇-水〔不同比例〕、正丁醇-甲醇(3:1)、乙醇等。(3)其它溶劑：如含水丙酮、甲醇-氯仿等。三、黃酮類化合物的提取與別離

〔二〕、別離2.梯度pH萃取法梯度pH萃取法適合于酸性強(qiáng)弱不同的黃酮甙元的別離?？梢詫⒒旌衔锶苡谟袡C(jī)溶劑〔如乙醚〕后，依次用5%NaHCO3、5%Na2CO3、0.2%NaOH及4%NaOH水溶液萃取，來(lái)到達(dá)別離的目的。

三、黃酮類化合物的提取與別離〔二〕、別離2.梯度pH萃取法酸性可溶于堿液7，4-二OH5%NaHCO3,7-或4-OH5%Na2CO3一般OH0.2%NaOH液5-OH4%NaOH三、黃酮類化合物的提取與別離強(qiáng)弱強(qiáng)弱以下化合物用pH梯度法進(jìn)行別離時(shí)，從EtOAc中，用5%NaHCO3、0.2%NaOH、4%NaOH的水溶液依次萃取，先后萃取出的順序應(yīng)為：A.①②③B.③②①C.①③②D.③①②√

某藥材含有以下化合物,以圖示過(guò)程提取,別離。請(qǐng)判斷各化合物在圖中的位置：D

別離流程示意圖：EFABDC二、理化性質(zhì)一、概述三、提取與別離第四章黃酮類化合物四、黃酮類化合物的鑒定與結(jié)構(gòu)測(cè)定四、黃酮類化合物的檢識(shí)與結(jié)構(gòu)測(cè)定

目前主要采用的方法有：①與標(biāo)準(zhǔn)品或與文獻(xiàn)對(duì)照PPC或TLC得到的Rf或hRf值〔Rf100〕,初步檢識(shí)和測(cè)定。②分析比照樣品在甲醇溶液中及參加酸、堿或金屬鹽類試劑后得到的UV光譜③1H-NMR④13C-NMR⑤MS〔一〕、層析法在黃酮類鑒定中的作用

1.紙層析(PPC)苷類成分可采用雙向展開(kāi)：第一相展開(kāi)采用醇性溶劑，如BAW系統(tǒng)〔正丁醇:醋酸:水4:1:5上層〕；第二相展開(kāi)用水性溶劑，如2%-5%醋酸，乙酸-濃鹽酸-水〔30:3:10〕苷元那么多采用醇性溶劑；花色苷及其苷元，可用含鹽酸或醋酸的溶劑。顯色劑：紫外燈，氨水，2%AlCl3甲醇溶液〔一〕、層析法在黃酮類鑒定中的作用

1.紙層析(PPC)第一相展開(kāi)采用醇性溶劑，⑴結(jié)構(gòu)類型相同的化合物，極性越大，Rf值越小。⑵苷元相同時(shí)，Rf值依次為：苷元>雙糖苷>三糖苷

〔一〕、層析法在黃酮類鑒定中的作用

1.紙層析(PPC)第二相展開(kāi)用水性溶劑，⑴苷元相同時(shí)，Rf值與上相反，依次為：三糖苷>雙糖苷>苷元⑵不同結(jié)構(gòu)類型的苷元，平面型分子Rf值小于非平面型分子。〔一〕、層析法在黃酮類鑒定中的作用2.薄層層析(TLC)

１〕硅膠薄層用于弱極性黃酮較好。常用展開(kāi)劑:甲苯:甲酸甲酯:甲酸〔5:4:1〕；苯:甲醇〔95:5〕苯:甲醇:冰醋酸〔35:5:5〕等。化合物極性越大,Rf值越小.

〔一〕、層析法在黃酮類鑒定中的作用2.薄層層析(TLC)

２〕聚酰胺層析適用范圍廣，可別離含游離酚羥基或其苷類。常用展開(kāi)系統(tǒng)：乙醇：水〔3：2〕；丙酮：水〔1：1〕等?！獭?二)、紫外光譜在黃酮類鑒定中的應(yīng)用

可用于確定黃酮母核類型及確定某些位置是否含有羥基。一般程序：①測(cè)定樣品在甲醇中的UV譜以了解母核類型；②在甲醇溶液中分別參加各種診斷試劑后測(cè)UV譜和可見(jiàn)光譜以了解3,5,7,3’,4’有無(wú)羥基及鄰二酚羥基；③苷類可水解后〔或先甲基化再水解〕，再用上法測(cè)苷元的UV譜以了解糖的連接位置。

1、黃酮類化合物在甲醇中的UV譜特征溶劑：MeOH四、黃酮類化合物的波譜