第八章水衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第1頁(yè)第一節(jié)水中細(xì)菌及其分布衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)——包括飲水衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)知識(shí)內(nèi)容包含飲用水中致病微生物檢驗(yàn)方法和控制方法。水包含雨雪水、河流湖泊水、地下水、海水水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第2頁(yè)一、雨雪中細(xì)菌分布種類(lèi)、數(shù)量：與空氣、地面潔凈程度相關(guān)空氣新鮮高山或鄉(xiāng)村所下雨、雪中細(xì)菌極少，工業(yè)區(qū)或城市雨、雪水中細(xì)菌較多，同時(shí)雨雪中末期中細(xì)菌數(shù)量小于早期細(xì)菌數(shù)量；地面為水泥地面較土壤對(duì)于雨雪細(xì)菌污染要少得多。因?yàn)橛暄┲衅渌廴疚飿O少，偏遠(yuǎn)缺水地域搜集水泥地面雨雪水用于飲用在衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)方面而言是可行。水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第3頁(yè)二、河流、湖泊水種類(lèi)：與污染源有著親密關(guān)系數(shù)量：決定于水中各種營(yíng)養(yǎng)物濃度，環(huán)境影響因子比如，受到醫(yī)院污水、垃圾污染，病原菌數(shù)量將會(huì)很大，受到農(nóng)業(yè)土壤污染藻類(lèi)數(shù)量將會(huì)猛增。因?yàn)榧?xì)菌不喜歡陽(yáng)光、好附著在固體上，因而水底和岸邊細(xì)菌數(shù)量高于水面和河、湖中央細(xì)菌。水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第4頁(yè)三、地下水四、海水種類(lèi)、數(shù)量：極少在深層地下水中甚至?xí)](méi)有細(xì)菌。所以地下水是最為理想飲用水源。原因：土壤過(guò)濾淡水中細(xì)菌數(shù)量多少并不能完全決定飲用時(shí)衛(wèi)生安全程度，只有能引發(fā)疾病病原菌數(shù)量多少才直接決定飲用時(shí)安全。種類(lèi)：嗜鹽細(xì)菌以及一些耐低溫、高壓特殊細(xì)菌，沒(méi)有病原細(xì)菌普通海水中因?yàn)楹}量很高，普通為3.2~4%，淡水類(lèi)細(xì)菌不能生存，其中都是一些所以淡化海水在衛(wèi)生方面是可靠。水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第5頁(yè)第二節(jié)水中病原細(xì)菌水中細(xì)菌只有極少一部分是致病菌，致病菌必須經(jīng)由特定路徑進(jìn)入人體，才會(huì)引發(fā)疾病。如破傷風(fēng)梭菌侵入傷口會(huì)引發(fā)破傷風(fēng)，而吞入則不發(fā)病提問(wèn)：為何？這主要是因?yàn)樗鼈兏髯蕴厥饬?xí)性、人體不一樣器官微環(huán)境不一樣所致。水中病原菌主要是經(jīng)水傳輸并需由消化道傳染。水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第6頁(yè)一、傷寒桿菌病癥：傷寒或副傷寒。表現(xiàn)：連續(xù)發(fā)燒，牽涉到淋巴組織，脾臟腫大，軀干上出現(xiàn)紅斑，胃腸壁潰瘍產(chǎn)生腹瀉。傷寒沙門(mén)氏菌水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第7頁(yè)（一）、生理生態(tài)種類(lèi)：傷寒沙門(mén)氏菌、副傷寒沙門(mén)氏菌和乙型副傷寒沙門(mén)氏菌。大小：0．6~0．7×2．0~4．0um特征：不生芽孢和莢膜，周生鞭毛，革藍(lán)氏陰性反應(yīng)，加熱到60℃，30min能夠殺死，對(duì)5%石炭酸，可抵抗5min。水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第8頁(yè)（二）、致病機(jī)理經(jīng)過(guò)內(nèi)毒素致病內(nèi)毒素是其細(xì)胞壁成份，化學(xué)成份為脂多糖，當(dāng)細(xì)菌死亡分裂時(shí)會(huì)釋放到環(huán)境中。水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第9頁(yè)二、痢疾桿菌痢疾桿菌可引發(fā)細(xì)菌性痢疾(與阿米巴痢疾不一樣)，癥狀為急性腹瀉，通常大便中有血及粘液，一些病例中有發(fā)燒。（1）、生理生態(tài)種類(lèi)：痢疾桿菌(痢疾志賀氏菌)、副痢疾桿菌水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第10頁(yè)痢疾桿菌加熱到60℃能耐10min，對(duì)1％石炭酸，可抵抗半小時(shí)。傳輸方式：食物和飲用水電鏡照片使用是結(jié)晶紫單染色，若革蘭氏染色則為陰性紅色水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第11頁(yè)（二）、致病機(jī)理三、霍亂弧菌大致與傷寒桿菌類(lèi)似，只是痢疾桿菌內(nèi)毒素主要損害了人體腸道細(xì)胞，引發(fā)腸道痙攣、腹瀉等癥狀。病癥：霍亂癥狀：輕型病例中，只造成腹瀉。在較嚴(yán)重或較經(jīng)典病例中，除腹瀉外，癥狀還包含嘔吐、“米湯樣”大便、腹疼和昏迷等。病程短，嚴(yán)重經(jīng)常在癥狀出現(xiàn)后12h內(nèi)死亡。水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第12頁(yè)（一）、生理生態(tài)形態(tài)：微彎曲桿狀大?。?.3~0.6×1.0~5．0um，特征：一根較粗鞭毛，革蘭氏陰性反應(yīng)，沒(méi)有莢膜與芽孢。在60℃下能耐10min，在1％石炭酸中能抵抗5min，能耐受較高堿度。傳輸方式：水及食物，與病人或帶菌動(dòng)物接觸電鏡照片使用是結(jié)晶紫單染色，若革蘭氏染色則為陰性紅色水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第13頁(yè)（二）、致病機(jī)理

由口進(jìn)入人體釋放出外毒素

霍亂弧菌小腸中大量繁殖破壞腸細(xì)胞膜腸細(xì)胞大量脫水、電解質(zhì)失衡腹瀉或休克、死亡霍亂曾經(jīng)猖獗一時(shí)，現(xiàn)在在我國(guó)已基本絕跡。這三種致病菌是水中最為常見(jiàn)致病菌，都屬于腸道傳染病菌，其它病原菌如變形桿菌、腸炎耶爾氏菌、沙雷氏菌引發(fā)癥狀較輕通常為腸炎，腸道傳染病主要是由病人帶菌糞便污染水體而傳輸。水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第14頁(yè)四、寄生蟲(chóng)真菌普通經(jīng)過(guò)接觸傳染，不經(jīng)過(guò)水傳輸，引發(fā)疾病原生動(dòng)物和小型后生動(dòng)物也由水傳輸，通常稱(chēng)為寄生蟲(chóng)。在當(dāng)前發(fā)覺(jué)幾千種原生動(dòng)物中只有20種能引發(fā)人類(lèi)疾病傳輸方式：除了飲水不衛(wèi)生外，更多是經(jīng)過(guò)食物以及昆蟲(chóng)血液傳輸如瘧疾是蚊子傳輸，食用生肉感染肉類(lèi)寄生蟲(chóng)等水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第15頁(yè)（一）、原蟲(chóng)引發(fā)人體疾病原生動(dòng)物又叫原蟲(chóng)，經(jīng)過(guò)飲水引發(fā)疾病原蟲(chóng)見(jiàn)下表。傳輸：蟲(chóng)卵經(jīng)過(guò)病人糞便污染水體水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第16頁(yè)（二）、蠕蟲(chóng)

引發(fā)人體疾病小型動(dòng)物又叫蠕蟲(chóng)，經(jīng)過(guò)飲水引發(fā)疾病蠕蟲(chóng)見(jiàn)下表水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第17頁(yè)由以上能夠看到，病原菌和病原蟲(chóng)都是經(jīng)過(guò)糞便污染水源而傳輸，所以防治飲用水傳染病關(guān)鍵是要嚴(yán)防水源被糞便污染。飲用水是否受到糞便污染檢測(cè)依據(jù)就是大腸菌群檢測(cè)法。水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第18頁(yè)第三節(jié)大腸菌群和生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)水中存在病原菌可能性很小，其它各種細(xì)菌種類(lèi)卻很多，要排除一切細(xì)菌而單獨(dú)檢出某種病原菌來(lái)，在培養(yǎng)分離技術(shù)上較為復(fù)雜，需較多人力和較長(zhǎng)時(shí)間。標(biāo)準(zhǔn)：普通不直接檢驗(yàn)水中病原菌，而是測(cè)定水中是否有腸道正常細(xì)菌存在。只有在特殊情況下，才直接檢驗(yàn)水中病原菌。判斷：檢出有腸道細(xì)菌，則表明水被糞便所污染，也說(shuō)明有被病原菌污染可能性。水中腸道細(xì)菌檢驗(yàn)，通常以檢測(cè)大腸菌群存在及數(shù)量來(lái)反應(yīng)。水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第19頁(yè)一、大腸菌群作為衛(wèi)生指標(biāo)依據(jù)和意義腸道正常細(xì)菌有3類(lèi)：大腸菌群、腸球菌和產(chǎn)氣莢膜桿菌。選作衛(wèi)生指標(biāo)細(xì)菌必須符合以下要求：(一)生理習(xí)性與腸道病原菌類(lèi)似，即在外界生存時(shí)間基本一致；（代表性）(二)在糞便中數(shù)量較多；（比病原菌多，不會(huì)漏檢）(三)檢驗(yàn)技術(shù)較簡(jiǎn)單;（操作方便）水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第20頁(yè)腸道細(xì)菌比較表水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第21頁(yè)由上表能夠看到，大腸菌群是三者中最具理想性細(xì)菌。只要飲用水中檢測(cè)出有大腸菌群存在則飲用水中可能含有病原細(xì)菌等，不然基本上能夠排除病原菌存在可能性。即使這只是水衛(wèi)生可信程度上一個(gè)檢驗(yàn)，但自19美國(guó)首次用大腸菌群作為飲用水衛(wèi)生檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)以來(lái)，實(shí)踐證實(shí)，符合這種標(biāo)準(zhǔn)飲用水引發(fā)各類(lèi)腸道傳染病確實(shí)大幅度下降，這說(shuō)明大腸菌群作為衛(wèi)生指標(biāo)確實(shí)是可靠。水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第22頁(yè)二、大腸菌群形態(tài)和生理特征大腸菌群是寄生于腸道中一群需氧和兼性厭氧，能在37℃培養(yǎng)24h內(nèi)使乳糖發(fā)酵產(chǎn)酸產(chǎn)氣革蘭氏陰性無(wú)芽胞桿菌總稱(chēng)。普通包含大腸埃希氏桿菌、產(chǎn)氣桿菌、枸櫞酸鹽桿菌和副大腸桿菌。這些寄生菌通常與人體組成互利共生關(guān)系，當(dāng)人體免疫力下降時(shí)，他們則有可能成為引發(fā)腸炎致病菌，他們中個(gè)別變種還會(huì)變?yōu)闃O具毒性病菌。如大腸埃希氏菌可引發(fā)幼兒腹瀉，引發(fā)美國(guó)和日本傳染病流行O-157也是大腸埃希氏菌變種菌株。這四種桿狀細(xì)菌與其它桿菌鏡檢無(wú)法區(qū)分，通常利用他們?cè)谏砩吓c其它細(xì)菌不一樣之處，用判別培養(yǎng)基加以判定，大腸菌群細(xì)菌區(qū)分情況見(jiàn)下表水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第23頁(yè)大腸菌群類(lèi)比表水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第24頁(yè)品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基又稱(chēng)遠(yuǎn)藤氏培養(yǎng)基，它是大腸桿菌判別測(cè)定時(shí)培養(yǎng)基，結(jié)合菌落特征和桿狀、革蘭氏染色陰性特征就能夠?qū)⒋竽c菌群與其它細(xì)菌區(qū)分開(kāi)來(lái)。之所以四種細(xì)菌展現(xiàn)不一樣菌落特征，主要是與它們分解乳酸能力強(qiáng)弱所決定。品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基配方碳源：乳酸10g氮源：蛋白胨10g緩沖劑（兼磷源）：磷酸氫二鉀3.5g指示劑：①5%堿性品紅乙醇溶液20ml②無(wú)水亞硫酸鈉5g溶劑：1000ml水凝固劑：瓊脂20~30g

水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第25頁(yè)亞硫酸鈉是強(qiáng)還原劑，它使溶液中品紅紅色煺去，形成無(wú)色品紅亞硫酸鈉復(fù)合物，細(xì)菌發(fā)酵乳酸，乳酸分解產(chǎn)物乙醛與亞硫酸鈉形成加合產(chǎn)物，使部分品紅釋放，顯示出品紅紫紅色，恢復(fù)紫紅色深淺與乳酸分解量成正比，因?yàn)檫@四種細(xì)菌分解乳酸能力有大小之分，故培養(yǎng)菌落顏色就有顏色上差異。大腸埃希氏菌分解乳酸能力最強(qiáng)，所以菌落顏色最深，而且釋放出大量品紅還能夠與代謝產(chǎn)物中乙酸或其它有機(jī)酸形成沉淀，沉淀會(huì)放出金屬光澤。副大腸桿菌因?yàn)椴荒芊纸馊樗幔蚨錇闊o(wú)色透明。水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第26頁(yè)三、生活飲用水細(xì)菌衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)基于長(zhǎng)久實(shí)踐證實(shí)，我國(guó)《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》GB5749-85關(guān)于飲用水中細(xì)菌標(biāo)準(zhǔn)與大腸菌群數(shù)量標(biāo)準(zhǔn)為1．細(xì)菌總數(shù)≤100個(gè)/ml2．大腸菌群≤3個(gè)/L對(duì)于用于處理后作為飲用水源水，即水源水（主要指自來(lái)水水場(chǎng)進(jìn)水）國(guó)家也有要求3．若只經(jīng)過(guò)加氯消毒即供作生活飲用水水源水，大腸菌群數(shù)平均每升不得超出1000個(gè)；經(jīng)過(guò)凈化處理及加氯消毒后供作生活飲用水源水，大腸菌群數(shù)平均每升不得超出10000個(gè)。前兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)是飲用水質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，第三個(gè)標(biāo)準(zhǔn)則是水源水篩選標(biāo)準(zhǔn)，確保水源水在后處理能力范圍內(nèi)能夠到達(dá)飲用水標(biāo)準(zhǔn)。水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第27頁(yè)第四節(jié)水衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)水衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)包含國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中細(xì)菌總數(shù)與大腸菌群兩個(gè)指標(biāo)測(cè)定。

一、細(xì)菌總數(shù)測(cè)定（一）測(cè)定方法將一定量水樣接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中，在37℃下培養(yǎng)24h后，數(shù)出生長(zhǎng)細(xì)菌菌落數(shù)，然后依據(jù)培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)出菌落數(shù)算出水中細(xì)菌數(shù)量。水樣量控制使菌落數(shù)在30~300個(gè)之間，過(guò)少時(shí)測(cè)量偶然誤差較大，過(guò)多時(shí)則單菌落輕易聚團(tuán)，難以準(zhǔn)確計(jì)數(shù)。水樣潔凈時(shí)能夠經(jīng)過(guò)調(diào)整接種水樣量控制，而較臟水則經(jīng)過(guò)調(diào)整稀釋倍數(shù)來(lái)控制。水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第28頁(yè)（二）測(cè)定范圍水中細(xì)菌總數(shù)實(shí)際上指是大部分好氧細(xì)菌、兼性厭氧細(xì)菌數(shù)量，其它厭氧細(xì)菌和少許不能在營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上生長(zhǎng)細(xì)菌不能被測(cè)出。（三）意義提問(wèn)：大腸菌群沒(méi)有超標(biāo)，而細(xì)菌總數(shù)超標(biāo)則意味什么？答案：水源水沒(méi)有受到糞便污染，而水廠(chǎng)殺菌設(shè)施工作欠佳。一旦水源水被糞便污染則殺菌設(shè)施很可能不能確保處理后大腸菌數(shù)達(dá)標(biāo)。意義：指導(dǎo)自來(lái)水廠(chǎng)運(yùn)行，檢測(cè)殺菌設(shè)施工況，確保水處理后效果。水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第29頁(yè)二、大腸菌群測(cè)定（一）測(cè)定方法大腸菌群測(cè)定方法有兩種，發(fā)酵法和濾膜法。1．發(fā)酵法發(fā)酵法是大腸菌群測(cè)定國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法。它實(shí)際上是MPN細(xì)菌計(jì)數(shù)法，分為三步。如圖A．初發(fā)酵目標(biāo)：水中大腸菌群存在是否初步判斷。水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第30頁(yè)A.初發(fā)酵方法為將水樣置于糖類(lèi)液體培養(yǎng)基中，在一定溫度下，經(jīng)一定時(shí)間培養(yǎng)后，觀(guān)察有沒(méi)有酸和氣體產(chǎn)生，即有沒(méi)有發(fā)酵，而初步確定有沒(méi)有大腸菌群存在。如采取含有葡萄糖或甘露醇培養(yǎng)基，則包含副大腸桿菌；如不考慮副大腸桿菌，則用乳糖培養(yǎng)基。因?yàn)樗谐竽c菌群外，還可能存在其它發(fā)酵糖類(lèi)物質(zhì)細(xì)菌，所以培養(yǎng)后如發(fā)覺(jué)氣體和酸并不一定能必定水中含有大腸菌群，還需依據(jù)這類(lèi)細(xì)菌其它特征進(jìn)行下兩階段檢驗(yàn)。水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第31頁(yè)水中能使糖類(lèi)發(fā)酵細(xì)菌除大腸菌群外，最常見(jiàn)有各種厭氧和好氧芽孢桿菌。在可能被糞便嚴(yán)重污染水中，這類(lèi)細(xì)菌數(shù)量比大腸菌群數(shù)量要少得多。在此情形下，本階段發(fā)酵普通即可被認(rèn)為確有大腸菌群存在。在比較清潔或加氯水中，因?yàn)檠挎叩挚沽^大，其數(shù)量可能相對(duì)地比較多，所以本試驗(yàn)即使產(chǎn)酸產(chǎn)氣，還不能必定是因?yàn)榇缶阂l(fā)，必須繼續(xù)進(jìn)行試驗(yàn)。試驗(yàn)中培養(yǎng)基中加入了酸堿指示劑紫色溴甲酚紫，產(chǎn)酸時(shí)指示劑變黃，同時(shí)培養(yǎng)基中口朝下放置了裝滿(mǎn)一樣培養(yǎng)基小試管，產(chǎn)氣時(shí)小試管中會(huì)封閉一段氣體，被作為培養(yǎng)中是否產(chǎn)氣依據(jù)。水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第32頁(yè)目標(biāo)：判定產(chǎn)酸產(chǎn)氣菌染色特征、好氧是否、芽孢特征。依據(jù)：大腸菌群在固體培養(yǎng)基上能夠在空氣生長(zhǎng)，革蘭氏染色呈陰性和不生芽孢特征B.平板分離水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第33頁(yè)復(fù)發(fā)酵在此階段，先將上一試驗(yàn)產(chǎn)酸菌種移植于品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基(遠(yuǎn)藤氏培養(yǎng)基)或伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基表面（劃線(xiàn)接種是為了分離出單菌落，防治菌落不純干擾結(jié)果），這一步氧氣能夠阻止厭氧芽抱桿菌生長(zhǎng)，而上述培養(yǎng)基所含染料物質(zhì)也有抑制許多其它細(xì)菌生長(zhǎng)作用。經(jīng)過(guò)培養(yǎng)，假如出現(xiàn)經(jīng)典大腸菌群菌落，則可認(rèn)為有這類(lèi)細(xì)菌存在。但為了深入必定，應(yīng)進(jìn)行革蘭氏染色檢驗(yàn)。因?yàn)檠挎邨U菌經(jīng)革蘭氏染色后普通呈陽(yáng)性，所依據(jù)染色結(jié)果，又可將大腸菌群與好氧芽孢桿菌區(qū)分開(kāi)來(lái)。假如革蘭氏染色檢驗(yàn)發(fā)覺(jué)有陰性無(wú)芽袍桿菌存在，則為了更深入驗(yàn)證，可作復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)。水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第34頁(yè)C.復(fù)發(fā)酵目標(biāo)：驗(yàn)證將可疑菌落再移植于糖類(lèi)培養(yǎng)基中，觀(guān)察其是否發(fā)酵，是否產(chǎn)酸產(chǎn)氣，最終必定有沒(méi)有大腸菌群存在。

對(duì)于自來(lái)水廠(chǎng)出水，初步發(fā)酵試驗(yàn)普通都在10個(gè)小發(fā)酵管和2個(gè)大發(fā)酵管(或發(fā)酵瓶)內(nèi)進(jìn)行，復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)則在小發(fā)酵管內(nèi)進(jìn)行。詳細(xì)操作見(jiàn)試驗(yàn)一章。依據(jù)必定有大腸菌群存在初步發(fā)酵試驗(yàn)發(fā)酵管或瓶數(shù)目及試驗(yàn)所用水樣量，即可利用數(shù)理統(tǒng)計(jì)原理，查表得出結(jié)果。（第八章試驗(yàn)164頁(yè)）水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第35頁(yè)水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第36頁(yè)也能夠計(jì)算出每升水樣中大腸菌群最可能數(shù)目(MPN)，下面是計(jì)算近似公式：如例題中100ml發(fā)酵瓶陰性，10ml發(fā)酵管中有三管被后兩步證實(shí)還有大腸菌群則查表也是11個(gè)，通常查表比計(jì)算更方便些。水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第37頁(yè)2．濾膜法濾膜法我們?cè)诘谌乱炎鬟^(guò)介紹，需要補(bǔ)充是也有最終證實(shí)試驗(yàn)步驟。3．存在問(wèn)題與其它方法A．發(fā)酵法與濾膜法弊端滯后——發(fā)酵法需72小時(shí)，濾膜法需30~48小時(shí)，不能及時(shí)指導(dǎo)生產(chǎn)質(zhì)量控制。B．以大腸菌群作為衛(wèi)生指標(biāo)弊端提問(wèn)：可能是什么？不能反應(yīng)水中病毒及除腸道病原菌外其它病原菌（如引發(fā)皮膚潰爛碳且桿菌）情況。大腸菌群細(xì)菌耐消毒劑能力以及體外存活時(shí)間都不及病毒，所以?xún)H測(cè)出大腸菌群數(shù)水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第38頁(yè)但因?yàn)槠渌≡饕墙?jīng)過(guò)接觸傷口、食物、空氣傳輸，因而在水中可能性與危害性能夠忽略，在必要時(shí)補(bǔ)充水中病毒檢驗(yàn)，這種弊端是能夠克服。C．其它方法a.電子顯微鏡法電子顯微鏡直接觀(guān)察這種方法鑒于國(guó)外一些大自來(lái)水廠(chǎng)，準(zhǔn)確高效，快速，但因?yàn)樵O(shè)備昂貴，應(yīng)用受到限制。水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第39頁(yè)b.糞大腸菌群法測(cè)定是副大腸桿菌因?yàn)楦贝竽c桿菌是糞便中特有，而其它大腸桿菌有野生種，這種方法測(cè)出結(jié)果比通常大腸菌群法更能反應(yīng)水樣近期受糞便污染情況。但存在漏檢弊端，應(yīng)用有所限制。當(dāng)前飲用水衛(wèi)生檢驗(yàn)亟待開(kāi)發(fā)一個(gè)全方面、準(zhǔn)確、快速、簡(jiǎn)便、價(jià)廉方法，以更為安全確實(shí)保飲水安全。水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第40頁(yè)第五節(jié)水中病毒及其檢驗(yàn)當(dāng)前已知經(jīng)過(guò)飲用水傳輸病毒主要是腸道病毒如脊髓灰質(zhì)炎（小兒麻痹）病毒、肝炎病毒、?？瞬《?、柯薩奇病毒。一、水中病毒種類(lèi)

水中上述病毒都呈球狀，耐酸、沒(méi)有包膜，在體外環(huán)境中比較穩(wěn)定，能存活較長(zhǎng)時(shí)間?？滤_奇病毒因?yàn)槭状伟l(fā)覺(jué)于美國(guó)柯薩奇而得名，埃可病毒則是它英文全名“人腸道孤病毒”（ECHO）縮寫(xiě)讀音，這幾個(gè)病毒疾病區(qū)分見(jiàn)下表。水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第41頁(yè)二、水中常見(jiàn)病毒水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第42頁(yè)三、水中病毒檢驗(yàn)（一）、必要性

因?yàn)椴《緦?duì)于普通水處理消毒方式耐受性比大腸菌群強(qiáng)，所以水中即使查不出大腸菌群，也無(wú)法排除水中依然存在病毒可能性。尤其是嚴(yán)重污染水源和城市污水回用于城市給水時(shí)，這一問(wèn)題尤為突出。所以對(duì)于這類(lèi)水體應(yīng)輔助進(jìn)行病毒檢驗(yàn)。但當(dāng)前因?yàn)闄z測(cè)方法還很不成熟，還沒(méi)有水中病毒檢驗(yàn)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第43頁(yè)（二）方法水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第44頁(yè)（三）存在問(wèn)題當(dāng)前病毒檢驗(yàn)還很不成熟，表達(dá)在1.漏檢任何一個(gè)試驗(yàn)動(dòng)物細(xì)胞都不能對(duì)水中可能存在全部病毒敏感地反應(yīng)；比如甲型肝炎病毒不能用這一方法檢測(cè)出。2．試驗(yàn)周期長(zhǎng)

試驗(yàn)周期隨不一樣病毒生長(zhǎng)快慢而定，短者兩三天，最長(zhǎng)甚至要等幾個(gè)星期，難以及時(shí)指導(dǎo)生產(chǎn)實(shí)踐；水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第45頁(yè)3．膜富集可靠性不高

這是因?yàn)椴《绢w粒很小，能夠經(jīng)過(guò)細(xì)菌濾膜，在膜富集時(shí)，一些病毒也有可能經(jīng)過(guò)濾膜。4．試驗(yàn)用動(dòng)物細(xì)胞起源困難

所以，只有在十分必要場(chǎng)所（如城市污水回用于城市給水），才把病毒檢驗(yàn)作為水質(zhì)常規(guī)檢測(cè)。實(shí)踐證實(shí)在水廠(chǎng)消毒設(shè)施正常工作時(shí)，普通水中沒(méi)有病毒存在。水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第46頁(yè)第六節(jié)水中微生物控制方法飲用水、游泳池水需要控制其中病原微生物；醫(yī)院污水必須徹底滅菌方可排放；水庫(kù)、湖泊需要控制藻類(lèi)生長(zhǎng)，以防水體缺氧；工業(yè)循環(huán)冷卻水及油田回注水需要控制管道腐蝕菌；水處理設(shè)施中需要控制引發(fā)污泥膨脹絲狀菌生長(zhǎng)；各種控制方法原理都是基于微生物生理特點(diǎn)。水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第47頁(yè)一、飲用水微生物控制方法普通經(jīng)砂濾、沉淀處理后，可去除較大寄生蟲(chóng)卵以及原蟲(chóng)，而病原菌和病毒需用其它方法去除，通常將水中病原菌和病毒去除稱(chēng)為消毒。伴隨時(shí)代發(fā)展，飲用水生產(chǎn)方式上改變，飲用水消毒方法有了許多新發(fā)展。當(dāng)前大致有以下一些方法。（一）煮沸法煮沸法是最原始方法，但卻最簡(jiǎn)便、有效，煮沸法直接快速破壞病原微生物蛋白質(zhì)，使其凝固發(fā)生不可逆變性，尤其適合用于家庭和野外工作環(huán)境。水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第48頁(yè)（二）加氯消毒加氯消毒是當(dāng)前國(guó)內(nèi)外自來(lái)水廠(chǎng)最慣用消毒方法，所使用氯包含液氯、漂白粉等。1．殺菌機(jī)理液氯

Cl2+H2OHOCl

+H++Cl-HOClH++OCl-漂白粉主要成份為Ca(ClO)2Ca(OCl)2Ca2++2OCl-

水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第49頁(yè)機(jī)理：氧化性使蛋白質(zhì)、核酸變性HOCl比OCl-更強(qiáng)一些。因?yàn)槲⑸锉砻嫫胀◣ж?fù)電荷，OCl-也是負(fù)電荷，較難靠近微生物，而HOCl是中性分子，可靠近并進(jìn)入微生物體內(nèi)，起輕易到破壞作用。水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第50頁(yè)與這兩種化合物類(lèi)似，凡是含有氧化性含氯化合物劇含有消毒能力，而且消毒能力與其氧化性強(qiáng)弱成正比。氧化性強(qiáng)弱通慣用有效氯來(lái)表示。2．有效氯計(jì)算有效氯表示含氯化合物氧化能力，用質(zhì)量%含量表示。式中35.5是氯原子摩爾質(zhì)量水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第51頁(yè)比如Cl2有效氯為100%，NaCl為0，沒(méi)有氧化性；次氯酸鈣（Cl+1）為56%，二氧化氯（Cl+4）為263%。二氧化氯因?yàn)橛行雀咔覠o(wú)副作用，已開(kāi)始作為殺菌劑使用，但價(jià)格貴，使用受到限制。因?yàn)橐郝仁腔噬a(chǎn)副產(chǎn)品，成本低，殺菌效率高，所以通常都以液氯作為自來(lái)水水廠(chǎng)最終殺菌辦法。水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第52頁(yè)3．氯投加效果

氯投加后消毒效果與劑量、消毒時(shí)間、水pH、水溫、水質(zhì)等原因相關(guān)。A．劑量與時(shí)間劑量要求：殺菌及保持一定余氯抑菌余氯指水中加氯一定時(shí)間后殘余Cl2、HOCl、OCl-中氧化態(tài)氯濃度。水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第53頁(yè)因?yàn)樗w微生物含量及其它還原性物質(zhì)量不一樣，不一樣水液氯初始投加量也在改變，我國(guó)制訂生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)以水中大腸菌群以及細(xì)菌總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)為依據(jù)，要求a.飲用水加氯消毒30min后，游離余氯不應(yīng)低0.3mg/L

以此決定液氯初始投加劑量。因?yàn)楦髯詠?lái)水廠(chǎng)管網(wǎng)長(zhǎng)度不等，在滿(mǎn)足以上要求后，過(guò)長(zhǎng)管線(xiàn)末端流到各個(gè)家庭自來(lái)水中余氯仍可能消減怠盡，難以確保有害微生物在管線(xiàn)中滋生。所以自來(lái)水廠(chǎng)飲用水中加氯量還必須能夠滿(mǎn)足b.管線(xiàn)最末端余氯不低于0.05mg/L。

水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第54頁(yè)確保:殺死水中全部腸道傳染病細(xì)菌。疏漏：病毒因?yàn)椴《灸褪苈榷拘阅芰^強(qiáng)，殺死水中病毒余氯量要比上述要求高2~20倍。而且水溫越低，余氯量還必須更大。普通而言，水病毒極少，實(shí)踐證實(shí)在設(shè)備正常運(yùn)行時(shí)經(jīng)過(guò)前期水處理混凝、沉淀、活性炭吸附后大部分病毒都被截留，少許病毒在加氯階段基本上被去除，所以通常只考慮水中病原菌殺滅。但這畢竟存在一定風(fēng)險(xiǎn)，當(dāng)前是否應(yīng)該提升加氯量徹底確保水中不存在病毒還沒(méi)有定論，相關(guān)問(wèn)題還需要更多理論和實(shí)踐論證。

水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第55頁(yè)液氯溶解以及次氯酸解離都是一個(gè)電離平衡過(guò)程，平衡后Cl2、HOCl、OCl-

濃度與溫度和pH相關(guān)，因?yàn)檫@三種物質(zhì)殺菌力強(qiáng)弱依次為HOCl＞OCl-＞Cl2所以一樣液氯初始投加量在不一樣pH與水溫消毒效果是不一樣。由平衡關(guān)系可知，

低pH、低水溫水中HOCl濃度高殺菌效果好。B.pH與水溫水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第56頁(yè)C.水質(zhì)水質(zhì)原因包含Cl-濃度、NH3、有機(jī)物。a.Cl-濃度反比

從氯溶解平衡能夠知道Cl-較大時(shí)，水中HOCl濃度較小，因而會(huì)使消毒效果下降。b.NH3反比

氨與氯很輕易反應(yīng)生成氯胺（NH2Cl），這種余氯Cl+1殺菌能力比次氯酸等弱，所以水中NH3高會(huì)降低消毒效果。但其它氯在水中太活潑，在水管中輕易消失，而氯胺比較穩(wěn)定，為確保住戶(hù)水龍頭流出水中余氯，通常優(yōu)質(zhì)本身不含有氨自來(lái)水中常添加一定量氨形成氯胺，確保消毒最終效果。水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第57頁(yè)C.有機(jī)物反比

有機(jī)物可與氯生成有害物質(zhì)，如氯與甲烷反應(yīng)會(huì)生成致癌物三氯甲烷，有鑒于此，除水廠(chǎng)澄清水消毒仍用氯以外，以往對(duì)含有機(jī)物多水源水或污水氯氣消毒法已被廢止，不再采取，改為其它方法。臭氧（O3）消毒是一個(gè)傳統(tǒng)方法，多用于歐洲。1．殺菌機(jī)理提問(wèn)：？臭氧含有極強(qiáng)氧化性，殺菌機(jī)理尚不完全清楚，可能是氧化細(xì)胞膜，氧化蛋白質(zhì)上還原性基團(tuán)，使細(xì)胞膜、蛋白質(zhì)變性殺死病菌。工業(yè)上臭氧是經(jīng)過(guò)氧氣紫外線(xiàn)激發(fā)產(chǎn)生。（三）臭氧消毒水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第58頁(yè)

紫外線(xiàn)照射

3O2

2O3

2．優(yōu)點(diǎn)與加氯消毒法比較，臭氧消毒有以下一些優(yōu)點(diǎn)A．速度快于氯氣；B．不會(huì)造成異臭異味；C．用于水源水前期消毒以及污水消毒時(shí)，不產(chǎn)生致癌物，同時(shí)還能氧化分解一些不可生物降解有機(jī)物，使之可被后續(xù)生物法去除。水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第59頁(yè)3.缺點(diǎn)臭氧消毒與加氯法相比也有一些不足之處A．不穩(wěn)定、易分解，不能工業(yè)化生產(chǎn)，只能現(xiàn)場(chǎng)用臭氧發(fā)生器制造，成本較高；B．沒(méi)有余量，沒(méi)有后續(xù)殺菌能力；成本問(wèn)題是限制臭氧消毒法使用主要原因，一旦在發(fā)生器技術(shù)上取得突破，臭氧消毒法很可能完全取代當(dāng)前加氯消毒法。水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)第60頁(yè)（四）紫外線(xiàn)消毒（五）過(guò)氧化氫（H2O2）消毒范圍：小規(guī)模水廠(chǎng)消毒和游泳池循環(huán)水消毒。優(yōu)點(diǎn)：產(chǎn)物無(wú)臭味無(wú)害設(shè)備簡(jiǎn)單提問(wèn)：缺點(diǎn)是什么？缺點(diǎn)：紫