腸道感染細(xì)菌第1頁(yè)/共69頁(yè)復(fù)習(xí)思考題：1．請(qǐng)敘述主要五種血清型的致病性大腸桿菌的致病特點(diǎn)。2．志賀菌屬的致病物質(zhì)及其作用機(jī)制。3．試說(shuō)不耐熱腸毒素的特性與作用機(jī)制。4．簡(jiǎn)述沙門(mén)菌屬的致病物質(zhì)與致病類(lèi)型有哪些？5．在診斷傷寒或副傷寒時(shí)，試述O及H抗體的特點(diǎn)與分析。6.試述霍亂腸毒素的致病機(jī)制。7.簡(jiǎn)述霍亂的特點(diǎn)和防治原則。第2頁(yè)/共69頁(yè)第1節(jié)埃希菌(Escherichia)埃希菌屬有5個(gè)種，其中大腸埃希菌最常見(jiàn),大腸埃希菌又名大腸桿菌。分類(lèi)：正常菌群條件致病菌致病菌價(jià)值：1糞便污染的衛(wèi)生學(xué)檢測(cè)指標(biāo)

2在分子生物學(xué)和基因工程中是重要的實(shí)驗(yàn)材料菌群失調(diào)、寄居部位改變第3頁(yè)/共69頁(yè)一、生物學(xué)性狀G–、中等大桿菌、有周鞭毛、菌毛(圖）營(yíng)養(yǎng)要求不高。腸道鑒別培養(yǎng)基形成有色菌落乳糖發(fā)酵試驗(yàn)+

發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣,不產(chǎn)生H2S

典型的大腸桿菌IMViC試驗(yàn)為“++–

–”抗熱,55℃、60分鐘仍存活；膽鹽、煌綠等對(duì)大腸桿菌有抑制作用

第4頁(yè)/共69頁(yè)抗原（O、H、K）——血清型（O：K：H）O抗原：LPS最外層的特異性多糖；刺激機(jī)體產(chǎn)生IgM抗體；采用加熱煮沸的菌體制作抗原；呈顆粒狀凝集。H抗原：鞭毛抗原；IgG抗體；用福爾馬林固定制作抗原；絮狀凝集。K抗原：O抗原外層，分L、A、B三型，實(shí)質(zhì)上是菌毛、莢膜抗原，與細(xì)菌的侵襲力有關(guān)。第5頁(yè)/共69頁(yè)第6頁(yè)/共69頁(yè)第7頁(yè)/共69頁(yè)第8頁(yè)/共69頁(yè)吲哚第9頁(yè)/共69頁(yè)二、致病性1.致病物質(zhì)一般毒力因子：LPS、莢膜、Ⅲ型分泌系統(tǒng)：細(xì)菌向真核細(xì)胞內(nèi)輸送毒性基因產(chǎn)物的效應(yīng)系統(tǒng)。特殊毒力因子黏附素（CFA、AAF、BfP、緊密素、Ipa等）外毒素（Stx、ST、LT等）第10頁(yè)/共69頁(yè)2.所致疾病

腸外感染內(nèi)源性感染化膿性感染大腸埃希菌敗血癥新生兒大腸埃希菌性腦膜炎泌尿道感染UPEC(uropathogenicE.coli)胃腸炎外源性

表現(xiàn)為急性腹瀉，有五種類(lèi)型：

ETEC、EIEC、EPEC、EHEC、EAEC第11頁(yè)/共69頁(yè)腸產(chǎn)毒素性大腸埃希菌（enterotoxigenicE.coli,ETEC）嬰幼兒和旅游者腹瀉的重要病原菌。致病物質(zhì)：腸毒素定植因子（colonizationfactorantigen,CFA-Ⅰ

Ⅱ

Ⅲ）第12頁(yè)/共69頁(yè)不耐熱腸毒素（heatlabileenterotoxin,LT）和耐熱腸毒素（heatstableenterotoxin,ST）A亞單位：毒性部分B亞單位：結(jié)合部位LT-Ⅰ激活腺苷環(huán)化酶ATP轉(zhuǎn)變?yōu)镃AMPCAMP↑腸黏膜細(xì)胞分泌亢進(jìn)腹瀉STa激活鳥(niǎo)苷環(huán)化酶CGMP↑腹瀉第13頁(yè)/共69頁(yè)腸侵襲性大腸埃希菌（enteroinvasiveE.coli,EIEC）侵犯較大的兒童和成人

致病機(jī)制：通過(guò)質(zhì)粒編碼的侵襲作用，黏附并侵襲結(jié)腸上皮細(xì)胞，細(xì)菌在細(xì)胞內(nèi)增殖、擴(kuò)散，導(dǎo)致組織破壞和炎癥發(fā)生。臨床表現(xiàn)類(lèi)似菌痢。第14頁(yè)/共69頁(yè)腸致病性大腸埃希菌（enteropathogenicE.coli,EPEC）致病機(jī)制：BfP(bundleformingpili)介導(dǎo)細(xì)菌與細(xì)胞疏松黏附；細(xì)菌主動(dòng)分泌的緊密素與宿主細(xì)胞膜上相應(yīng)受體緊密結(jié)合；細(xì)胞內(nèi)肌動(dòng)蛋白重排，微絨毛破壞。干擾腸道對(duì)液體的吸收功能。嬰幼兒腹瀉的主要病原體。第15頁(yè)/共69頁(yè)腸出血性大腸埃希菌（enterohemorrhagicE.coli,EHEC）出血性結(jié)腸炎、溶血性尿毒綜合征的病原體.O157：H7是最具代表性的血清型,食入消毒不完全的牛奶、肉類(lèi)而感染。志賀毒素(shigatoxins,stx)

StxA亞單位：毒性部分

B亞單位：結(jié)合部分腸絨毛結(jié)構(gòu)破壞吸收↓分泌↑腹瀉第16頁(yè)/共69頁(yè)腸集聚性大腸埃希菌（enteroaggregativeE.coli,EAEC）致病機(jī)制：質(zhì)粒介導(dǎo)集聚性黏附上皮細(xì)胞，阻止液體吸收引起嬰兒持續(xù)性腹瀉，脫水第17頁(yè)/共69頁(yè)三、微生物檢查1.臨床細(xì)菌檢查 致病性大腸埃希菌需血清學(xué)試驗(yàn)鑒定型別2.衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢查 以“大腸菌群數(shù)”作為飲水、食品等糞便污染的指標(biāo)之一；大腸菌群指數(shù)：每1000ml（g）樣品中的大腸菌群數(shù)。第18頁(yè)/共69頁(yè)大腸桿菌形態(tài)第19頁(yè)/共69頁(yè)大腸桿菌電鏡第20頁(yè)/共69頁(yè)菌毛電鏡第21頁(yè)/共69頁(yè)第2節(jié)志賀菌（Shigella)一、生物學(xué)性狀G–、直桿菌、有菌毛、無(wú)鞭毛SS平板上呈無(wú)色半透明菌落不分解乳糖、葡萄糖+、不產(chǎn)生H2SO抗原（分類(lèi)依據(jù)）包括群和型特異性抗原

K抗原無(wú)分類(lèi)意義

A群:痢疾志賀氏菌B群:福氏志賀氏菌

C群:鮑氏志賀氏菌D群:宋內(nèi)氏志賀氏菌抵抗力弱，對(duì)熱、酸敏感，糞便標(biāo)本立即送檢;

對(duì)抗生素敏感,但易形成抗藥性。第22頁(yè)/共69頁(yè)第23頁(yè)/共69頁(yè)二、致病性與免疫性1.致病物質(zhì)侵襲力（invasionplasmidantigen,IPa）內(nèi)毒素（主要因素）

①發(fā)熱,中毒性休克; ②破壞腸粘膜—膿血粘液便; ③腸壁植物神經(jīng)系統(tǒng)—腹痛、里急后重。外毒素（A群志賀菌Ⅰ型和Ⅱ型產(chǎn)生，稱志賀毒素Sxt）

第24頁(yè)/共69頁(yè)2.所致疾?。?/p>

傳染源：病人和帶菌者傳播途徑：糞—口途徑臨床類(lèi)型： 急性菌痢慢性菌?。?個(gè)月以上）急性中毒性菌痢:小兒為多見(jiàn),無(wú)明顯消化道癥狀,主要表現(xiàn)為全身性中毒癥狀。3.免疫性：主要靠消化道黏膜表面的SIgA第25頁(yè)/共69頁(yè)三、微生物學(xué)檢查

標(biāo)本采送:

1.服藥前取膿、血或粘液樣糞便。

2.糞便應(yīng)新鮮,要速送。體外糞便中如混有酸性尿或其它細(xì)菌大量產(chǎn)酸,能使本菌在數(shù)小時(shí)內(nèi)死亡。

3.中毒性菌痢者可取肛拭。分離培養(yǎng)生化反應(yīng)血清學(xué)鑒定四、防治原則早診斷、早隔離、早治療；口服減毒活疫苗第26頁(yè)/共69頁(yè)腸出血性大腸桿菌（EHEC）是近年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的危害嚴(yán)重的腸道致病菌。自1982年美國(guó)首次發(fā)現(xiàn)因該致病菌引起的食物中毒以來(lái)，腸出血性大腸桿菌O157:H7疫情開(kāi)始逐漸擴(kuò)散和蔓延，相繼在英國(guó)、加拿大等多個(gè)國(guó)家引起腹瀉暴發(fā)和流行。1996年日本報(bào)告病例逾萬(wàn)例，死亡9例。1999年我國(guó)部分地區(qū)發(fā)生了腸出血性大腸桿菌O157:H7感染性腹瀉的暴發(fā)。第27頁(yè)/共69頁(yè)臨床表現(xiàn)-1

腸出血性大腸桿菌O157：H7主要引起出血性腸炎、溶血性尿毒綜合癥和血栓性血小板減少性紫癜。出血性腸炎（HC）的典型臨床表現(xiàn)為：鮮血樣便、腹部痙攣性疼痛、低燒或不發(fā)燒?；颊呖杀憩F(xiàn)為先水樣腹瀉，約數(shù)小時(shí)至1天后轉(zhuǎn)為血性腹瀉。部分病例可發(fā)展為溶血性尿毒綜合癥、血小板減少性紫癜，若搶救不及時(shí)，危及生命。第28頁(yè)/共69頁(yè)臨床表現(xiàn)-2溶血性尿毒綜合癥（HUS）主要發(fā)生在兒童，常出現(xiàn)在腹瀉后數(shù)天或1-2周后，病例主要表現(xiàn)為血小板減少、溶血性貧血、急性腎功能衰竭三大特征。大多數(shù)HUS發(fā)生在急性腹瀉之后，兒童和老人易感。病死率一般在10%，個(gè)別可高達(dá)50%，約30%幸存者可表現(xiàn)出慢性腎衰、高血壓神經(jīng)系統(tǒng)損害等后遺癥。血栓性血小板減少性紫癜（TTP）主要發(fā)生在成年人，尤其老年人。病人主要表現(xiàn)為發(fā)熱、血小板減少、微血管異常、溶血性貧血、腎功能異常（包括血尿、蛋白尿、BUN或肌酐升高）、神經(jīng)系統(tǒng)損害（如頭痛、輕度癱瘓、昏迷、間歇性譫妄），病情發(fā)展迅速，病死率高，90天內(nèi)可有70%的病人死亡。第29頁(yè)/共69頁(yè)該毒素有一個(gè)A亞單位和5~6個(gè)B亞單位組成。B亞單位與宿主腸壁細(xì)胞糖脂受體結(jié)合，具有毒素活性的A亞單位進(jìn)入細(xì)胞，改變60s核糖體的組分，干擾蛋白質(zhì)的合成,細(xì)胞死亡，腸粘膜及血管內(nèi)皮細(xì)胞破壞，引起血液釋放到腸腔.編碼毒素的基因位于噬菌體上，可缺失而不產(chǎn)生。返回第30頁(yè)/共69頁(yè)第3節(jié)沙門(mén)菌(Salmonella)沙門(mén)菌屬按DNA同源性不同分為：腸道沙門(mén)菌和邦戈沙門(mén)菌。能感染人類(lèi)的大多位于腸道沙門(mén)菌腸道亞種，以傷寒沙門(mén)菌、甲型副傷寒沙門(mén)菌常見(jiàn)第31頁(yè)/共69頁(yè)一、生物學(xué)性狀G–、桿菌、都有周鞭毛、菌毛兼性厭氧，營(yíng)養(yǎng)要求不高，SS平板上形成無(wú)色半透明的S型菌落不分解乳糖；分解葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣（除傷寒沙門(mén)菌）；多產(chǎn)生H2S抗原（OHVi）

O抗原IgM類(lèi)抗體

H抗原IgG類(lèi)抗

Vi抗原Vi抗體（篩選帶菌者）對(duì)陽(yáng)光、熱、干燥、及酸敏感,在自然界中抵抗力很強(qiáng)，耐低溫，在水面中可存活1-3周，在糞便中可存活1-2月第32頁(yè)/共69頁(yè)第33頁(yè)/共69頁(yè)二、致病性與免疫性1.致病物質(zhì)：侵襲力（致病前提） 菌毛、SPI-Ⅰ、Sips Vi抗原 耐酸應(yīng)答基因內(nèi)毒素（主要物質(zhì)）腸毒素第34頁(yè)/共69頁(yè)2.所致疾病：

1）傷寒與副傷寒

2）食物中毒（最常見(jiàn)）：因食入未煮熟的病畜病禽的肉類(lèi)、蛋類(lèi)而發(fā)病。一般2-4天可恢復(fù)

3）敗血癥

4）無(wú)癥狀帶菌者3.免疫性： 病后獲得牢固免疫性，以細(xì)胞免疫為主。第35頁(yè)/共69頁(yè)三、微生物學(xué)檢查標(biāo)本采集：根據(jù)疾病類(lèi)別、病程、病情采集不同標(biāo)本，發(fā)病1周內(nèi)采血，2—3周內(nèi)取糞便、尿液,全程可取骨髓液。分離培養(yǎng)生化反應(yīng)血清學(xué)鑒定1.沙門(mén)菌的分離與鑒定第36頁(yè)/共69頁(yè)第37頁(yè)/共69頁(yè)2.血清學(xué)診斷——肥達(dá)試驗(yàn)（Widal）1）概念：用已知的傷寒沙門(mén)菌H、O抗原和副傷寒沙門(mén)菌的H抗原與患者血清做試管凝集試驗(yàn)，檢測(cè)患者血清中相應(yīng)抗體的含量，來(lái)輔助診斷傷寒與副傷寒。2）結(jié)果判斷傷寒：O≥1∶80H≥1∶160副傷寒：H≥1∶80O≥1∶80單份雙份

恢復(fù)期效價(jià)≥4倍初次效價(jià)第38頁(yè)/共69頁(yè)第39頁(yè)/共69頁(yè) O↑H↑腸熱癥可能性大 O↓H↓腸熱癥可能性小 O→H↑預(yù)防接種或非特異性回憶反應(yīng) O↑H→感染早期或其他沙門(mén)菌交叉感染3.帶菌者檢出分離出病原菌——最可靠；檢測(cè)Vi抗體。3）

H與O抗體診斷意義：第40頁(yè)/共69頁(yè)四、防治原則做好水源、食品的衛(wèi)生管理；感染動(dòng)物的肉類(lèi)、蛋等制品徹底烹飪；發(fā)現(xiàn)、鑒定、治療帶菌者。三種疫苗：注射用傷寒菌體疫苗、口服傷寒Ｔｙ２１ａ活疫苗、傷寒Vi莢膜多糖疫苗。常用氯霉素,氨芐青,環(huán)丙沙星。第41頁(yè)/共69頁(yè)第4節(jié) 霍亂弧菌弧菌屬（Ｖibrio)菌體短小、彎曲成弧形,革蘭陰性菌,單鞭毛廣泛分布于自然界，以水中最多與人類(lèi)感染常見(jiàn)有霍亂弧菌、副溶血性弧菌第42頁(yè)/共69頁(yè)【概述】

霍亂是由霍亂弧菌所致的烈性腸道傳染病,因其發(fā)病急，傳播快，是亞非大部分地區(qū)腹瀉的重要原因，故列為國(guó)際檢疫傳染病。在我國(guó)為甲類(lèi)傳染病。典型病例起病急驟，以劇烈腹瀉、嘔吐、脫水、肌肉痙攣、循環(huán)衰竭伴嚴(yán)重電解質(zhì)紊亂與酸堿失衡，甚或急性腎功能衰竭等為臨床特征。一般以輕癥多見(jiàn)，帶菌者亦較多，重癥及典型患者其病死率極高。

第43頁(yè)/共69頁(yè)WHO分類(lèi)：

WHO腹瀉控制中心根據(jù)弧菌的生化性狀、O抗原的特異性和致病性等的不同，將其分為三類(lèi)：第44頁(yè)/共69頁(yè)O1群霍亂弧菌：包括古典生物型和埃爾托生物型,1817-1923年發(fā)生6次世界性霍亂大流行,自1961年出現(xiàn)第七次世界大流行以后，埃爾托生物型成為霍亂的主要致病菌。不典型O1群霍亂弧菌：無(wú)致病性，雖可被多價(jià)O1群血清凝集，但不產(chǎn)生腸毒素。非O1群霍亂弧菌：其O抗原與O1群不相同，不能被O1群霍亂弧菌的多價(jià)血清所凝集，故統(tǒng)稱為不凝集弧菌。第45頁(yè)/共69頁(yè)1992年在印度和孟加拉等地區(qū)發(fā)生霍亂大流行，證實(shí)為一種新的非O1群霍亂弧菌血清型，后被命名為O139群霍亂弧菌。并可能標(biāo)志著第八次大流行的開(kāi)始。第46頁(yè)/共69頁(yè)一、生物學(xué)性狀（一）形態(tài)染色革蘭染色陰性。呈逗點(diǎn)狀或弧狀，有單根鞭毛，運(yùn)動(dòng)活潑（圖1）；有菌毛，無(wú)芽胞,莢膜（O139)。懸滴觀察穿梭樣/流星狀第47頁(yè)/共69頁(yè)(二）培養(yǎng)

霍亂弧菌在普通培養(yǎng)基中生長(zhǎng)良好，屬兼性厭氧菌。在堿性培養(yǎng)基生長(zhǎng)繁殖更快，pH8.8～9.2堿性蛋白胨水（圖2）中，可以快速增菌，并抑制其他細(xì)菌生長(zhǎng)。能在無(wú)鹽環(huán)境中生長(zhǎng)，在TCBS瓊脂上，為典型的黃色菌落（圖3）。第48頁(yè)/共69頁(yè)（三）生化反應(yīng)分解甘露醇、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。遲緩發(fā)酵乳糖，不分解阿拉伯膠糖。觸酶、氧化酶試驗(yàn)均陽(yáng)性。能產(chǎn)生靛基質(zhì)，亞硝酸鹽試驗(yàn)陽(yáng)性第49頁(yè)/共69頁(yè)0抗原0

1

群0

139

群古典生物型El-Tor生物型其它群引起霍亂散發(fā)性胃腸炎

（除0139外）(四）分類(lèi)第50頁(yè)/共69頁(yè)O1群霍亂弧菌的血清分型型別別名O抗原成份原型稻葉型A、C異型小川型A、B中間型彥島型A、B、C血清型：O1群的菌體抗原由A、B、C三個(gè)抗原成份組成第51頁(yè)/共69頁(yè)（五）抵抗力霍亂弧菌對(duì)熱、干燥、日光、化學(xué)消毒劑和酸均很敏感，耐堿而不耐酸?；魜y弧菌古典生物型對(duì)外環(huán)境抵抗力較弱，EL-Tor生物型抵抗力較強(qiáng)。第52頁(yè)/共69頁(yè)二、致病性和免疫性霍亂腸毒素(Ctx)

染色體上的基因編碼； 最強(qiáng)烈致瀉毒素，腸毒素的典型代表； 結(jié)構(gòu)及發(fā)病機(jī)理。 鞭毛、菌毛及其它毒力因子

1．致病物質(zhì)第53頁(yè)/共69頁(yè)第54頁(yè)/共69頁(yè)2.所致疾病及致病特點(diǎn)：①經(jīng)口感染②菌黏附于腸表面經(jīng)繁殖并產(chǎn)生腸毒素而致??；霍亂弧菌缺乏侵襲力,它不侵入血流,腸粘膜無(wú)明顯病變或僅有輕微炎癥反應(yīng)③臨床特點(diǎn)是無(wú)熱無(wú)痛無(wú)里急后重水樣便，嘔吐，腹瀉，脫水，體液及電解質(zhì)大量丟失，因循環(huán)衰竭而于數(shù)小時(shí)內(nèi)死亡。第55頁(yè)/共69頁(yè)

0

1

群感染機(jī)體后可獲得牢固免疫力腸道局部黏膜免疫（SIgA)是免疫基礎(chǔ)： 凝集黏膜表面的病菌使失去動(dòng)力 阻止病菌黏附 阻斷腸毒素結(jié)合

0139

群的保護(hù)性免疫以抗菌免疫為主（針對(duì)脂多糖和莢膜多糖等抗原）3.免疫性：第56頁(yè)/共69頁(yè)三、微生物學(xué)檢查

對(duì)首例病人應(yīng)快速診斷并作疫情報(bào)告；1.標(biāo)本(注意及時(shí)培養(yǎng)或適當(dāng)保存)2.方法:

直接鏡檢分離培養(yǎng)生化鑒定血清學(xué)試驗(yàn)