第2章紫外—可見分光光度法(UltravioletandVisible[UV—Vis]Spectrophotometry)2.1紫外—可見吸收光譜(UV—VisAbsorptionSpectroscopy)2.2Lambert—Beeer定律2.3紫外—可見分光光度計(UY—YisSpectrophotometer)2.4分析條件的選擇(OptimizationofAnalyticalCondition)2.5紫外—可見分光光度法的應用(ApplicationsofUV—VisSpectrophotometry)第2章紫外—可見分光光度法12．1紫外—可見吸收光譜(一)分子吸收光譜的形成2．1紫外—可見吸收光譜2摩爾吸光系數(shù)課件3(二)紫外-可見吸收光譜的電子躍遷類型預備知識：價電子：σ電子→飽和的σ鍵

π電子不飽和的π鍵n電子軌道：電子圍繞原子或分子運動的幾率軌道不同，電子所具有能量不同基態(tài)與激發(fā)態(tài)：電子吸收能量，由基態(tài)→激發(fā)態(tài)c成鍵軌道與反鍵軌道：σ<π<n<π*<σ*(二)紫外-可見吸收光譜的電子躍遷類型預備知識：價電子：σ4摩爾吸光系數(shù)課件5電子躍遷類型：1.σ→σ*躍遷：飽和烴（甲烷，乙烷）E很高，λ<150nm（遠紫外區(qū)）2.n→σ*躍遷：含雜原子飽和基團（—OH，—NH2）E較大，λ150~250nm（真空紫外區(qū)）3.π→π*躍遷：不飽和基團（—C＝C—，—C＝O）E較小，λ~200nm體系共軛，E更小，λ更大4.n→π*躍遷：含雜原子不飽和基團（—C≡N，C＝O）E最小，λ200~400nm（近紫外區(qū)）按能量大?。害摇?>

n→σ*>

π→π*>

n→π*電子躍遷類型：1.σ→σ*躍遷：按能量大?。害摇?65．電荷轉(zhuǎn)移吸收光譜摩爾吸光系數(shù)課件76．配位體場吸收光譜6．配位體場吸收光譜8摩爾吸光系數(shù)課件9(三)、相關(guān)的基本概念1．吸收光譜（吸收曲線）：不同波長光對樣品作用不同，吸收強度不同以λ~A作圖next2．吸收光譜特征：定性依據(jù)吸收峰→λmax吸收谷→λmin肩峰→λsh末端吸收→飽和σ-σ躍遷產(chǎn)生(三)、相關(guān)的基本概念1．吸收光譜（吸收曲線）：10摩爾吸光系數(shù)課件113．生色團（發(fā)色團）：能吸收紫外-可見光的基團有機化合物：具有不飽和鍵和未成對電子的基團具n電子和π電子的基團產(chǎn)生n→π*躍遷和π→π*躍遷躍遷E較低例：C＝C；C＝O；C＝N；—N＝N—

4．助色團：本身無紫外吸收，但可以使生色團吸收峰加強同時使吸收峰長移的基團有機物：連有雜原子的飽和基團例：—OH，—OR，—NH—，—NR2—，—X3．生色團（發(fā)色團）：能吸收紫外-可見光的基團4．助色團：本12續(xù)前5．紅移和藍移：由于化合物結(jié)構(gòu)變化（共軛、引入助色團取代基）或采用不同溶劑后

吸收峰位置向長波方向的移動，叫紅移（長移）

吸收峰位置向短波方向移動，叫藍移（紫移，短移）6．增色效應和減色效應

增色效應：吸收強度增強的效應

減色效應：吸收強度減小的效應7．強帶和弱帶：

εmax>105→強帶

εmin<103→弱帶續(xù)前5．紅移和藍移：6．增色效應和減色效應13摩爾吸光系數(shù)課件14摩爾吸光系數(shù)課件152．2Lambert—Beer定律(一)透射比和吸光度2．2Lambert—Beer定律16一、Lamber-Beer定律：吸收光譜法基本定律描述物質(zhì)對單色光吸收強弱與液層厚度和待測物濃度的關(guān)系假設(shè)一束平行單色光通過一個吸光物體一、Lamber-Beer定律：吸收光譜法基本定律描述物質(zhì)對17續(xù)前取物體中一極薄層續(xù)前取物體中一極薄層18續(xù)前討論：1．Lamber-Beer定律的適用條件（前提）入射光為單色光溶液是稀溶液2．該定律適用于固體、液體和氣體樣品3．在同一波長下，各組分吸光度具有加和性應用：多組分測定續(xù)前討論：1．Lamber-Beer定律的適用條件（前提）192．吸光系數(shù)兩種表示法：

1）摩爾吸光系數(shù)ε：在一定λ下，C=1mol/L，L=1cm時的吸光度2）百分含量吸光系數(shù)/比吸光系數(shù)：在一定λ下，C=1g/100ml，L=1cm時的吸光度3）兩者關(guān)系2．吸光系數(shù)兩種表示法：20(四)偏離Beer定律的因素依據(jù)Beer定律，A與C關(guān)系應為經(jīng)過原點的直線偏離Beer定律的主要因素表現(xiàn)為以下兩個方面（一）光學因素（二）化學因素(四)偏離Beer定律的因素依據(jù)Beer定律，A與C關(guān)系應21（一）光學因素

1．非單色光的影響：

Beer定律應用的重要前提——入射光為單色光

照射物質(zhì)的光經(jīng)單色器分光后并非真正單色光其波長寬度由入射狹縫的寬度和棱鏡或光柵的分辨率決定為了保證透過光對檢測器的響應，必須保證一定的狹縫寬度這就使分離出來的光具一定的譜帶寬度（一）光學因素1．非單色光的影響：照射物質(zhì)的光經(jīng)單色器分光22續(xù)前2．雜散光的影響：

雜散光是指從單色器分出的光不在入射光譜帶寬度范圍內(nèi)，與所選波長相距較遠雜散光來源：儀器本身缺陷；光學元件污染造成雜散光可使吸收光譜變形，吸光度變值3．反射光和散色光的影響：反射光和散色光均是入射光譜帶寬度內(nèi)的光直接對T產(chǎn)生影響散射和反射使T↓，A↑，吸收光譜變形注：一般可用空白對比校正消除4．非平行光的影響：使光程↑，A↑，吸收光譜變形續(xù)前2．雜散光的影響：3．反射光和散色光的影響：23（二）化學因素Beer定律適用的另一個前提：稀溶液濃度過高會使C與A關(guān)系偏離定律（二）化學因素Beer定律適用的另一個前提：稀溶液242．3紫外—可見分光光度計(一)主要組成部件2．3紫外—可見分光光度計251．光源：2．單色器：包括狹縫、準直鏡、色散元件棱鏡——對不同波長的光折射率不同色散元件分出光波長不等距光柵——衍射和干涉分出光波長等距鎢燈或鹵鎢燈——可見光源350~1000nm氫燈或氘燈——紫外光源200~360nm1．光源：2．單色器：包括狹縫、準直鏡、色散元件26續(xù)前3．吸收池：玻璃——能吸收UV光，僅適用于可見光區(qū)石英——不能吸收紫外光，適用于紫外和可見光區(qū)要求：匹配性（對光的吸收和反射應一致）4．檢測器：將光信號轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘柕难b置5．記錄裝置：訊號處理和顯示系統(tǒng)光電池光電管光電倍增管二極管陣列檢測器續(xù)前3．吸收池：5．記錄裝置：訊號處理和顯示系統(tǒng)光電池27(二)紫外—可見分光光度計的類型

紫外—可見分光光度計的類型很多，但可歸納為三種類型，即單光束分光光度計、雙光束分光光度計和雙波長分光光度計。(二)紫外—可見分光光度計的類型281．單光束分光光度計

其光路示意圖如前面的圖所示，經(jīng)單色器分光后的一束平行光，輪流通過參比溶液和樣品溶液．以進行吸光度的測定。這種簡易型分光光度計結(jié)構(gòu)簡單，操作方便，維修容易，適用于常規(guī)分析。國產(chǎn)722型、751型、724型、英國SP500型以及BackmanDU—8型等均屬于此類光度計。特點：使用時來回拉動吸收池→移動誤差對光源要求高比色池配對1．單光束分光光度計特點：292．雙光束分光光度計特點：不用拉動吸收池，可以減小移動誤差對光源要求不高可以自動掃描吸收光譜

2．雙光束分光光度計特點：303．雙波長分光光度計特點：利用吸光度差值定量消除干擾和吸收池不匹配引起的誤差3．雙波長分光光度計特點：31(三)分光光度計的校正(三)分光光度計的校正322．4分析條件的選擇(一)儀器測量條件1選擇適宜的吸光度范圍2選擇入射光波長和狹縫的寬度。2．4分析條件的選擇33

(二)反應條件的選擇顯色反應一般應滿足下述要求：(i)反應的生成物必須在紫外、可見光區(qū)有較強的吸光能力，即摩爾吸光系數(shù)較大，反應有較高的選擇性；(ii)反應生成物應當組成恒定、穩(wěn)定性好．顯色條件易于控制等、這樣才能保證測量結(jié)果有良好的重現(xiàn)性；(iii)對照性要好．2．溶液酸度的影響(二)反應條件的選擇34(三)參比溶液的選擇

1．溶劑參比2．試劑參比3．試樣參比4．平行操作溶液參比(三)參比溶液的選擇35(四)干擾及消除方法

在光度分析中，體系內(nèi)存在的干擾物質(zhì)的影響有以下幾種情況：干擾物質(zhì)本身有顏色或與顯色劑形成有色化合物，在測定條件下也有吸收；在顯色條件下，干擾物質(zhì)水解，析出沉淀使溶液混濁，致使吸光度的測定無法進行；與待測離子或顯色劑形成更穩(wěn)定的配合物．使顯色反應不能進行完全。(四)干擾及消除方法36可以采用以下幾種方法來消除這些下擾作用：(1)控制酸度(2)選擇適當?shù)难诒蝿?3)利用生成惰性配合物(4)選擇適當?shù)臏y量波長(5)分離可以采用以下幾種方法來消除這些下擾作用：372．5紫外—可見分光光度法的應用(一)定性分析2．5紫外—可見分光光度法的應用381．Woodward-Fieser規(guī)則1．Woodward-Fieser規(guī)則392．Scott規(guī)則2．Scott規(guī)則40(二)結(jié)構(gòu)分析

1．判別順反異構(gòu)體反式異構(gòu)體空間位阻?。曹棾潭容^高2．判別互變異構(gòu)體(二)結(jié)構(gòu)分析41(三)定量分析單組分的定量方法多組分的定量方法(三)定量分析42二、定量分析（一）單組分的定量方法1．吸光系數(shù)法2．標準曲線法3．對照法：外標一點法二、定量分析（一）單組分的定量方法1．吸光系數(shù)法43續(xù)前1．吸光系數(shù)法（絕對法）續(xù)前1．吸光系數(shù)法（絕對法）44續(xù)前2．標準曲線法續(xù)前2．標準曲線法45續(xù)前3．對照法：外標一點法注：當樣品溶液與標準品溶液的稀釋倍數(shù)相同時續(xù)前3．對照法：外標一點法注：當樣品溶液與標準品溶液的46第3章紅外光譜法(InfraredSpectrometry，IR)3.1概述(Introduction)3.2基本原理(Principle)3.3紅外光譜儀(InfraredSpectrograph)3.5試樣的處理和制備(TreatmentandPreparationofSamples)3.5紅外光譜法的應用(ApplicationsoflnfraredSpectrometry)第3章紅外光譜法473．1概述(一)紅外光區(qū)的劃分3．1概述48摩爾吸光系數(shù)課件49(二)紅外光譜法的特點紅外光譜法主要研究在振動小伴隨有偶極矩變化的化合物。因此除了單原子分子和同核分子，幾乎所有的有機化合物在紅外光區(qū)均有吸收。紅外吸收譜帶的波數(shù)位置、波峰的數(shù)目及其強度．反映了分子結(jié)構(gòu)上的特點，可以用來鑒定未知物的分子結(jié)構(gòu)組成或確定其化學基團；而吸收譜帶的吸收強度與分子組成或其化學基團的含量有關(guān)．可用作進行定量分析和純度鑒定。紅外光譜分析對氣體、液體、固體樣品都可測定，具有用量少、分析速度快、不破壞試樣等特點，使紅外光譜法成為現(xiàn)代分析化學和結(jié)構(gòu)化學的不可缺少的工具。(二)紅外光譜法的特點503．2基本原理(一)產(chǎn)生紅外吸收的條件(1)輻射光子具有的能量與發(fā)生振動躍遷所需的躍遷能量相等(2)輻射與物質(zhì)之間有偶合作用3．2基本原理51(二)雙原子分子的振動(二)雙原子分子的振動52(三)多原子分子的振動1．簡正振動2．簡正振動的基本形式(1)伸縮振動(2)變形振動(又稱彎曲振動或變角振動)(三)多原子分子的振動53摩爾吸光系數(shù)課件543．基本振動的理論數(shù)3．基本振動的理論數(shù)55(四)基團頻率1．官能團具有特征吸收頻率2．基團頻率區(qū)和指紋區(qū)(1)基團頻率區(qū)(四)基團頻率56摩爾吸光系數(shù)課件57(2)指紋區(qū)(可以分為兩個區(qū)域)(2)指紋區(qū)(可以分為兩個區(qū)域)583．影響基團頻率的因素(1)電子效應3．影響基團頻率的因素59(ii)共軛效應(C效應)(ii)共軛效應(C效應)60(iii)中介效應(M效應)當含有孤對電子的原子(O、N、S等)與具有多重鍵的原子相連時、也可起類似的共軛作用．稱為中介效應(iii)中介效應(M效應)61(2)氫鍵的影響

氫鍵的形成使電子云密度平均化，從而使伸縮振動頻率降低。(2)氫鍵的影響62摩爾吸光系數(shù)課件63

(3)振動偶合

當兩個振動頻率相同或相近的基因相鄰并具有一公共原子時，由于一個鍵的振動通過公共原子使另一個鍵的長度發(fā)生改變．產(chǎn)生一個“微擾’，從而形成了強烈的振動相互作用。其結(jié)果是使振動頻率發(fā)生變化，一個向高頻移動．一個向低頻移動，譜帶分裂。(3)振動偶合644．常見官能團的特征吸收頻率4．常見官能團的特征吸收頻率65摩爾吸光系數(shù)課件663.3紅外光譜儀

目前主要有兩類紅外光譜儀．它們是色散型紅外光譜儀和Fourier變換紅外光譜儀。3.3紅外光譜儀67(二)Fourier變換紅外光譜儀(二)Fourier變換紅外光譜儀68摩爾吸光系數(shù)課件69摩爾吸光系數(shù)課件70摩爾吸光系數(shù)課件713．4試樣的處理和制備(一)紅外光譜法對試樣的要求紅外光譜的試樣可以是氣體、液體或固體，一般應符合以下要求：(1)試樣應該是單一組分的純物質(zhì)(2)試樣中不應含有游離水。木本身有紅外吸收，會嚴重干擾樣品譜，而且會侵蝕吸收池的鹽窗。(3)試樣的濃度和測試厚度應選擇話當，以使光譜圖中的大多數(shù)吸收峰的透射比處于10％一80％范圍內(nèi)3．4試樣的處理和制備72

(二)制樣方法1氣態(tài)試樣可在玻璃氣槽內(nèi)進行測定，它的兩端粘有紅外透光的NaCl或KBr窗片。先將氣槽抽真空，再將試樣注入。2．液體和溶液試樣常用的方法有：(i)液體池法。沸點較低，揮發(fā)性較大的試祥，可注入封閉液體池中，液層厚度一般為0．01—1mm。(ii)液膜法。沸點較高的試樣，直接滴在兩塊鹽片之間，形成液膜。(二)制樣方法73

2．固體試樣

常用的方法有：(i)壓片法。將1-2mg試祥與200mg純KBr研細混勻．置于模具中，用油壓機上壓成透明薄片，即可用于測定。試樣和KBr都應經(jīng)干保處理．研磨到粒度小于2um，以免散射光影響。(ii)石蠟糊法。將干燥處理后的試樣研細，與液體石蠟或全氟代烴混合．調(diào)成糊狀，夾在鹽片中測定。液體石蠟油自身的吸收帶簡單。但此法不能用來研究飽和烷烴的吸收情況。(iii)薄膜法，主要用于高分子化合物的測定?？蓪⑺鼈冎苯蛹訜崛塾|后涂制或壓制成膜。也可將試樣溶解在低沸點的易揮發(fā)溶劑中，涂在鹽片上，待溶劑揮發(fā)后成膜來測定。2．固體試樣743．5紅外光譜法的應用（一）定性分析1．己知物的鑒定2．未知物結(jié)構(gòu)的測定圖譜解析一般先從基團頻率區(qū)的最強譜帶入手，推測未知物可能含有的基團，判斷不可能含有的基團。再從指紋區(qū)的譜帶來進一步驗證，找出可能含有基團的相關(guān)峰，用一組相關(guān)峰來確認一個基團的存在。對于簡單化合物，確認幾個基團之后，使可初步確定分子結(jié)構(gòu)．然后查對標準譜圖核實。3．5紅外光譜法的應用75(二)定量分析(二)定量分析76摩爾吸光系數(shù)課件77

第2章紫外—可見分光光度法(UltravioletandVisible[UV—Vis]Spectrophotometry)2.1紫外—可見吸收光譜(UV—VisAbsorptionSpectroscopy)2.2Lambert—Beeer定律2.3紫外—可見分光光度計(UY—YisSpectrophotometer)2.4分析條件的選擇(OptimizationofAnalyticalCondition)2.5紫外—可見分光光度法的應用(ApplicationsofUV—VisSpectrophotometry)第2章紫外—可見分光光度法782．1紫外—可見吸收光譜(一)分子吸收光譜的形成2．1紫外—可見吸收光譜79摩爾吸光系數(shù)課件80(二)紫外-可見吸收光譜的電子躍遷類型預備知識：價電子：σ電子→飽和的σ鍵

π電子不飽和的π鍵n電子軌道：電子圍繞原子或分子運動的幾率軌道不同，電子所具有能量不同基態(tài)與激發(fā)態(tài)：電子吸收能量，由基態(tài)→激發(fā)態(tài)c成鍵軌道與反鍵軌道：σ<π<n<π*<σ*(二)紫外-可見吸收光譜的電子躍遷類型預備知識：價電子：σ81摩爾吸光系數(shù)課件82電子躍遷類型：1.σ→σ*躍遷：飽和烴（甲烷，乙烷）E很高，λ<150nm（遠紫外區(qū)）2.n→σ*躍遷：含雜原子飽和基團（—OH，—NH2）E較大，λ150~250nm（真空紫外區(qū)）3.π→π*躍遷：不飽和基團（—C＝C—，—C＝O）E較小，λ~200nm體系共軛，E更小，λ更大4.n→π*躍遷：含雜原子不飽和基團（—C≡N，C＝O）E最小，λ200~400nm（近紫外區(qū)）按能量大小：σ→σ*>

n→σ*>

π→π*>

n→π*電子躍遷類型：1.σ→σ*躍遷：按能量大?。害摇?835．電荷轉(zhuǎn)移吸收光譜摩爾吸光系數(shù)課件846．配位體場吸收光譜6．配位體場吸收光譜85摩爾吸光系數(shù)課件86(三)、相關(guān)的基本概念1．吸收光譜（吸收曲線）：不同波長光對樣品作用不同，吸收強度不同以λ~A作圖next2．吸收光譜特征：定性依據(jù)吸收峰→λmax吸收谷→λmin肩峰→λsh末端吸收→飽和σ-σ躍遷產(chǎn)生(三)、相關(guān)的基本概念1．吸收光譜（吸收曲線）：87摩爾吸光系數(shù)課件883．生色團（發(fā)色團）：能吸收紫外-可見光的基團有機化合物：具有不飽和鍵和未成對電子的基團具n電子和π電子的基團產(chǎn)生n→π*躍遷和π→π*躍遷躍遷E較低例：C＝C；C＝O；C＝N；—N＝N—

4．助色團：本身無紫外吸收，但可以使生色團吸收峰加強同時使吸收峰長移的基團有機物：連有雜原子的飽和基團例：—OH，—OR，—NH—，—NR2—，—X3．生色團（發(fā)色團）：能吸收紫外-可見光的基團4．助色團：本89續(xù)前5．紅移和藍移：由于化合物結(jié)構(gòu)變化（共軛、引入助色團取代基）或采用不同溶劑后

吸收峰位置向長波方向的移動，叫紅移（長移）

吸收峰位置向短波方向移動，叫藍移（紫移，短移）6．增色效應和減色效應

增色效應：吸收強度增強的效應

減色效應：吸收強度減小的效應7．強帶和弱帶：

εmax>105→強帶

εmin<103→弱帶續(xù)前5．紅移和藍移：6．增色效應和減色效應90摩爾吸光系數(shù)課件91摩爾吸光系數(shù)課件922．2Lambert—Beer定律(一)透射比和吸光度2．2Lambert—Beer定律93一、Lamber-Beer定律：吸收光譜法基本定律描述物質(zhì)對單色光吸收強弱與液層厚度和待測物濃度的關(guān)系假設(shè)一束平行單色光通過一個吸光物體一、Lamber-Beer定律：吸收光譜法基本定律描述物質(zhì)對94續(xù)前取物體中一極薄層續(xù)前取物體中一極薄層95續(xù)前討論：1．Lamber-Beer定律的適用條件（前提）入射光為單色光溶液是稀溶液2．該定律適用于固體、液體和氣體樣品3．在同一波長下，各組分吸光度具有加和性應用：多組分測定續(xù)前討論：1．Lamber-Beer定律的適用條件（前提）962．吸光系數(shù)兩種表示法：

1）摩爾吸光系數(shù)ε：在一定λ下，C=1mol/L，L=1cm時的吸光度2）百分含量吸光系數(shù)/比吸光系數(shù)：在一定λ下，C=1g/100ml，L=1cm時的吸光度3）兩者關(guān)系2．吸光系數(shù)兩種表示法：97(四)偏離Beer定律的因素依據(jù)Beer定律，A與C關(guān)系應為經(jīng)過原點的直線偏離Beer定律的主要因素表現(xiàn)為以下兩個方面（一）光學因素（二）化學因素(四)偏離Beer定律的因素依據(jù)Beer定律，A與C關(guān)系應98（一）光學因素

1．非單色光的影響：

Beer定律應用的重要前提——入射光為單色光

照射物質(zhì)的光經(jīng)單色器分光后并非真正單色光其波長寬度由入射狹縫的寬度和棱鏡或光柵的分辨率決定為了保證透過光對檢測器的響應，必須保證一定的狹縫寬度這就使分離出來的光具一定的譜帶寬度（一）光學因素1．非單色光的影響：照射物質(zhì)的光經(jīng)單色器分光99續(xù)前2．雜散光的影響：

雜散光是指從單色器分出的光不在入射光譜帶寬度范圍內(nèi)，與所選波長相距較遠雜散光來源：儀器本身缺陷；光學元件污染造成雜散光可使吸收光譜變形，吸光度變值3．反射光和散色光的影響：反射光和散色光均是入射光譜帶寬度內(nèi)的光直接對T產(chǎn)生影響散射和反射使T↓，A↑，吸收光譜變形注：一般可用空白對比校正消除4．非平行光的影響：使光程↑，A↑，吸收光譜變形續(xù)前2．雜散光的影響：3．反射光和散色光的影響：100（二）化學因素Beer定律適用的另一個前提：稀溶液濃度過高會使C與A關(guān)系偏離定律（二）化學因素Beer定律適用的另一個前提：稀溶液1012．3紫外—可見分光光度計(一)主要組成部件2．3紫外—可見分光光度計1021．光源：2．單色器：包括狹縫、準直鏡、色散元件棱鏡——對不同波長的光折射率不同色散元件分出光波長不等距光柵——衍射和干涉分出光波長等距鎢燈或鹵鎢燈——可見光源350~1000nm氫燈或氘燈——紫外光源200~360nm1．光源：2．單色器：包括狹縫、準直鏡、色散元件103續(xù)前3．吸收池：玻璃——能吸收UV光，僅適用于可見光區(qū)石英——不能吸收紫外光，適用于紫外和可見光區(qū)要求：匹配性（對光的吸收和反射應一致）4．檢測器：將光信號轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘柕难b置5．記錄裝置：訊號處理和顯示系統(tǒng)光電池光電管光電倍增管二極管陣列檢測器續(xù)前3．吸收池：5．記錄裝置：訊號處理和顯示系統(tǒng)光電池104(二)紫外—可見分光光度計的類型

紫外—可見分光光度計的類型很多，但可歸納為三種類型，即單光束分光光度計、雙光束分光光度計和雙波長分光光度計。(二)紫外—可見分光光度計的類型1051．單光束分光光度計

其光路示意圖如前面的圖所示，經(jīng)單色器分光后的一束平行光，輪流通過參比溶液和樣品溶液．以進行吸光度的測定。這種簡易型分光光度計結(jié)構(gòu)簡單，操作方便，維修容易，適用于常規(guī)分析。國產(chǎn)722型、751型、724型、英國SP500型以及BackmanDU—8型等均屬于此類光度計。特點：使用時來回拉動吸收池→移動誤差對光源要求高比色池配對1．單光束分光光度計特點：1062．雙光束分光光度計特點：不用拉動吸收池，可以減小移動誤差對光源要求不高可以自動掃描吸收光譜

2．雙光束分光光度計特點：1073．雙波長分光光度計特點：利用吸光度差值定量消除干擾和吸收池不匹配引起的誤差3．雙波長分光光度計特點：108(三)分光光度計的校正(三)分光光度計的校正1092．4分析條件的選擇(一)儀器測量條件1選擇適宜的吸光度范圍2選擇入射光波長和狹縫的寬度。2．4分析條件的選擇110

(二)反應條件的選擇顯色反應一般應滿足下述要求：(i)反應的生成物必須在紫外、可見光區(qū)有較強的吸光能力，即摩爾吸光系數(shù)較大，反應有較高的選擇性；(ii)反應生成物應當組成恒定、穩(wěn)定性好．顯色條件易于控制等、這樣才能保證測量結(jié)果有良好的重現(xiàn)性；(iii)對照性要好．2．溶液酸度的影響(二)反應條件的選擇111(三)參比溶液的選擇

1．溶劑參比2．試劑參比3．試樣參比4．平行操作溶液參比(三)參比溶液的選擇112(四)干擾及消除方法

在光度分析中，體系內(nèi)存在的干擾物質(zhì)的影響有以下幾種情況：干擾物質(zhì)本身有顏色或與顯色劑形成有色化合物，在測定條件下也有吸收；在顯色條件下，干擾物質(zhì)水解，析出沉淀使溶液混濁，致使吸光度的測定無法進行；與待測離子或顯色劑形成更穩(wěn)定的配合物．使顯色反應不能進行完全。(四)干擾及消除方法113可以采用以下幾種方法來消除這些下擾作用：(1)控制酸度(2)選擇適當?shù)难诒蝿?3)利用生成惰性配合物(4)選擇適當?shù)臏y量波長(5)分離可以采用以下幾種方法來消除這些下擾作用：1142．5紫外—可見分光光度法的應用(一)定性分析2．5紫外—可見分光光度法的應用1151．Woodward-Fieser規(guī)則1．Woodward-Fieser規(guī)則1162．Scott規(guī)則2．Scott規(guī)則117(二)結(jié)構(gòu)分析

1．判別順反異構(gòu)體反式異構(gòu)體空間位阻?。曹棾潭容^高2．判別互變異構(gòu)體(二)結(jié)構(gòu)分析118(三)定量分析單組分的定量方法多組分的定量方法(三)定量分析119二、定量分析（一）單組分的定量方法1．吸光系數(shù)法2．標準曲線法3．對照法：外標一點法二、定量分析（一）單組分的定量方法1．吸光系數(shù)法120續(xù)前1．吸光系數(shù)法（絕對法）續(xù)前1．吸光系數(shù)法（絕對法）121續(xù)前2．標準曲線法續(xù)前2．標準曲線法122續(xù)前3．對照法：外標一點法注：當樣品溶液與標準品溶液的稀釋倍數(shù)相同時續(xù)前3．對照法：外標一點法注：當樣品溶液與標準品溶液的123第3章紅外光譜法(InfraredSpectrometry，IR)3.1概述(Introduction)3.2基本原理(Principle)3.3紅外光譜儀(InfraredSpectrograph)3.5試樣的處理和制備(TreatmentandPreparationofSamples)3.5紅外光譜法的應用(ApplicationsoflnfraredSpectrometry)第3章紅外光譜法1243．1概述(一)紅外光區(qū)的劃分3．1概述125摩爾吸光系數(shù)課件126(二)紅外光譜法的特點紅外光譜法主要研究在振動小伴隨有偶極矩變化的化合物。因此除了單原子分子和同核分子，幾乎所有的有機化合物在紅外光區(qū)均有吸收。紅外吸收譜帶的波數(shù)位置、波峰的數(shù)目及其強度．反映了分子結(jié)構(gòu)上的特點，可以用來鑒定未知物的分子結(jié)構(gòu)組成或確定其化學基團；而吸收譜帶的吸收強度與分子組成或其化學基團的含量有關(guān)．可用作進行定量分析和純度鑒定。紅外光譜分析對氣體、液體、固體樣品都可測定，具有用量少、分析速度快、不破壞試樣等特點，使紅外光譜法成為現(xiàn)代分析化學和結(jié)構(gòu)化學的不可缺少的工具。(二)紅外光譜法的特點1273．2基本原理(一)產(chǎn)生紅外吸收的條件(1)輻射光子具有的能量與發(fā)生振動躍遷所需的躍遷能量相等(2)輻射與物質(zhì)之間有偶合作用3．2基本原理128(二)雙原子分子的振動(二)雙原子分子的振動129(三)多原子分子的振動1．簡正振動2．簡正振動的基本形式(1)伸縮振動(2)變形振動(又稱彎曲振動或變角振動)(三)多原子分子的振動130摩爾吸光系數(shù)課件1313．基本振動的理論數(shù)3．基本振動的理論數(shù)132(四)基團頻率1．官能團具有特征吸收頻率2．基團頻率區(qū)和指紋區(qū)(1)基團頻率區(qū)(四)基團頻率133摩爾吸光系數(shù)課件134(2)指紋區(qū)(可以分為兩個區(qū)域)(2)指紋區(qū)(可以分為兩個區(qū)域)1353．影響基團頻率的因素(