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文檔簡(jiǎn)介
1、會(huì)計(jì)學(xué)1DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)和蛋白質(zhì)技術(shù)高頻考點(diǎn)突破高頻考點(diǎn)突破專專題題5DNA和和蛋蛋白白質(zhì)質(zhì)技技術(shù)術(shù)基礎(chǔ)自主梳理基礎(chǔ)自主梳理命題視角剖析命題視角剖析即時(shí)達(dá)標(biāo)訓(xùn)練即時(shí)達(dá)標(biāo)訓(xùn)練第1頁(yè)/共30頁(yè)基礎(chǔ)自主梳理基礎(chǔ)自主梳理一、血紅蛋白的提取和分離一、血紅蛋白的提取和分離1凝膠色譜法:也稱凝膠色譜法:也稱_,是根據(jù)相對(duì),是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法。分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法。2電泳電泳(1)概念:電泳是指概念:電泳是指_在電場(chǎng)的作用下發(fā)在電場(chǎng)的作用下發(fā)生遷移的過(guò)程。生遷移的過(guò)程。(2)特點(diǎn):電泳利用待分離樣品中各種分子特點(diǎn):電泳利用待分離樣品中各種分子_的差異以及分子本身的大小
2、、的差異以及分子本身的大小、_的不同的不同,使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度,從而實(shí)現(xiàn)樣,使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度,從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離。品中各種分子的分離。分配色譜法分配色譜法帶電粒子帶電粒子帶電性質(zhì)帶電性質(zhì)形狀形狀第2頁(yè)/共30頁(yè)3實(shí)驗(yàn)操作實(shí)驗(yàn)操作(1)樣品處理:通過(guò)紅細(xì)胞的洗滌、攪拌、離樣品處理:通過(guò)紅細(xì)胞的洗滌、攪拌、離心等操作收集到血紅蛋白溶液。心等操作收集到血紅蛋白溶液。(2)粗分離:通過(guò)透析去除血紅蛋白溶液中的粗分離:通過(guò)透析去除血紅蛋白溶液中的_較小的雜質(zhì)。較小的雜質(zhì)。(3)純化:通過(guò)純化:通過(guò)_分離相對(duì)分子質(zhì)分離相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)。量不同的蛋白質(zhì)。(4)純度鑒定
3、:用純度鑒定:用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行樣品純度鑒定。樣品純度鑒定。相對(duì)分子質(zhì)量相對(duì)分子質(zhì)量凝膠色譜法凝膠色譜法第3頁(yè)/共30頁(yè)二、二、PCR技術(shù)擴(kuò)增技術(shù)擴(kuò)增DNA片段片段1PCR技術(shù)技術(shù)(1)PCR:_的簡(jiǎn)稱,是一種體外的簡(jiǎn)稱,是一種體外迅速擴(kuò)增迅速擴(kuò)增_的技術(shù)。的技術(shù)。(2)擴(kuò)增方向:總是從子鏈的擴(kuò)增方向:總是從子鏈的5端向端向_端延伸。端延伸。(3)引物特點(diǎn):是一小段引物特點(diǎn):是一小段_或或DNA,能與,能與DNA母母鏈的一段堿基序列互補(bǔ)配對(duì),用于鏈的一段堿基序列互補(bǔ)配對(duì),用于PCR的引物長(zhǎng)的引物長(zhǎng)度通常為度通常為_(kāi)個(gè)核苷酸。個(gè)核苷酸。(4)原理:原理:DNA復(fù)
4、制原理。復(fù)制原理。(5)條件:條件:DNA模板、分別與兩條模板鏈相結(jié)合的模板、分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種兩種_,四種脫氧核苷酸、耐熱的,四種脫氧核苷酸、耐熱的_,同時(shí)控制溫度。,同時(shí)控制溫度。多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)DNA片段片段3RNA2030引物引物DNA聚合酶聚合酶第4頁(yè)/共30頁(yè)2過(guò)程過(guò)程(1)變性:當(dāng)溫度上升到變性:當(dāng)溫度上升到_以上時(shí),雙鏈以上時(shí),雙鏈DNA解解旋為單鏈。旋為單鏈。(2)復(fù)性:溫度下降為復(fù)性:溫度下降為50 左右時(shí),兩種左右時(shí),兩種_通過(guò)堿通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)與基互補(bǔ)配對(duì)與_結(jié)合。結(jié)合。(3)延伸:當(dāng)溫度上升到延伸:當(dāng)溫度上升到72 左右時(shí),四種脫氧核苷酸左右時(shí),
5、四種脫氧核苷酸在在_的作用下,根據(jù)的作用下,根據(jù)_原則合成原則合成新的新的DNA鏈。鏈。3結(jié)果:結(jié)果:DNA聚合酶只能特異性地復(fù)制處于聚合酶只能特異性地復(fù)制處于_序列,使這段固定長(zhǎng)度的序列呈序列,使這段固定長(zhǎng)度的序列呈_擴(kuò)增。擴(kuò)增。90 引物引物兩條單鏈兩條單鏈DNADNA聚合酶聚合酶堿基互補(bǔ)配對(duì)堿基互補(bǔ)配對(duì)兩個(gè)引物之間的兩個(gè)引物之間的DNA指數(shù)指數(shù)第5頁(yè)/共30頁(yè)高頻考點(diǎn)突破高頻考點(diǎn)突破DNA的粗提取與鑒定的粗提取與鑒定1基本原理基本原理(1)血細(xì)胞在蒸餾水中易吸水而導(dǎo)致細(xì)胞膜血細(xì)胞在蒸餾水中易吸水而導(dǎo)致細(xì)胞膜和核膜的破裂,據(jù)此可得含核和核膜的破裂,據(jù)此可得含核DNA的溶液。的溶液。(2)D
6、NA在不同濃度的在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同溶液中溶解度不同,在,在0.14 mol/L的的NaCl溶液中溶解度最低。溶液中溶解度最低。(3)DNA不溶于酒精溶液;不被蛋白酶所水解不溶于酒精溶液;不被蛋白酶所水解;可被二苯胺染成藍(lán)色。;可被二苯胺染成藍(lán)色。第6頁(yè)/共30頁(yè)金手指駕校網(wǎng) 金手指駕駛員考試2016第7頁(yè)/共30頁(yè)2方法目的方法目的方法目的溶于NaCl溶液中并稀釋(1)NaCl溶液物質(zhì)的量濃度為2 mol/L時(shí),DNA溶解,而部分蛋白質(zhì)發(fā)生鹽析而生成沉淀,通過(guò)過(guò)濾可除去部分蛋白質(zhì)及不溶于NaCl溶液的雜質(zhì)(2)當(dāng)NaCl溶液稀釋至0.14 mol/L時(shí),DNA析出,過(guò)濾可除去
7、溶于NaCl溶液的部分蛋白質(zhì)和其他雜質(zhì)加入嫩肉粉嫩肉粉中含木瓜蛋白酶,水解蛋白質(zhì)加入冷卻酒精(95%)DNA析出,除去溶于酒精的蛋白質(zhì)加入二苯胺,并沸水浴鑒定DNA第8頁(yè)/共30頁(yè)(1)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中兩次用到蒸餾水,第一次目的是使實(shí)驗(yàn)過(guò)程中兩次用到蒸餾水,第一次目的是使成熟的雞血細(xì)胞漲破釋放出成熟的雞血細(xì)胞漲破釋放出DNA,第二次目的是,第二次目的是稀釋稀釋NaCl溶液,使溶液,使DNA從溶液中析出。從溶液中析出。(2)預(yù)冷的酒精溶液具有以下優(yōu)點(diǎn)預(yù)冷的酒精溶液具有以下優(yōu)點(diǎn)抑制核酸水解酶活性,防止抑制核酸水解酶活性,防止DNA降解。降解。降低分子運(yùn)動(dòng)易于形成沉淀析出。降低分子運(yùn)動(dòng)易于形成沉淀析出。低
8、溫有利于增加低溫有利于增加DNA分子柔韌性,減少斷裂。分子柔韌性,減少斷裂。【易誤警示】【易誤警示】本實(shí)驗(yàn)用雞血細(xì)胞作實(shí)驗(yàn)材料,不能本實(shí)驗(yàn)用雞血細(xì)胞作實(shí)驗(yàn)材料,不能用哺乳動(dòng)物的成熟紅細(xì)胞,原因是哺乳動(dòng)物的成熟紅細(xì)用哺乳動(dòng)物的成熟紅細(xì)胞,原因是哺乳動(dòng)物的成熟紅細(xì)胞內(nèi)無(wú)細(xì)胞核,但它可以作為血紅蛋白提取和制備細(xì)胞胞內(nèi)無(wú)細(xì)胞核,但它可以作為血紅蛋白提取和制備細(xì)胞膜的理想材料。膜的理想材料。第9頁(yè)/共30頁(yè)即時(shí)應(yīng)用即時(shí)應(yīng)用(隨學(xué)隨練,輕松奪冠隨學(xué)隨練,輕松奪冠)1在在“DNA的粗提取與鑒定的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中,將提取獲得實(shí)驗(yàn)中,將提取獲得的的DNA的黏稠物的黏稠物(還含有許多雜質(zhì)還含有許多雜質(zhì))分別處
9、理如下:分別處理如下:第一,放入第一,放入0.14 mol/L的的NaCl溶液中,攪拌后過(guò)濾溶液中,攪拌后過(guò)濾,得濾液,得濾液A和黏稠物和黏稠物a。第二,放入第二,放入2 mol/L的的NaCl溶液中,攪拌后過(guò)濾,溶液中,攪拌后過(guò)濾,得濾液得濾液B和黏稠物和黏稠物b。第三,放入冷卻的第三,放入冷卻的95%的酒精溶液中,攪拌后過(guò)的酒精溶液中,攪拌后過(guò)濾,得濾液濾,得濾液C和黏稠物和黏稠物c。以上過(guò)程獲得的濾液和黏稠物中,因含以上過(guò)程獲得的濾液和黏稠物中,因含DNA少少而可以丟棄的是而可以丟棄的是_。第10頁(yè)/共30頁(yè)解析:解析:在不同濃度的在不同濃度的NaCl溶液中,溶液中,DNA的溶解度的溶解
10、度不同。在不同。在0.14 mol/L的的NaCl溶液中溶液中DNA溶解度溶解度最小,最小,DNA析出,呈絲狀物,過(guò)濾后存在于黏稠析出,呈絲狀物,過(guò)濾后存在于黏稠物物a中;在中;在2 mol/L的的NaCl溶液中溶液中DNA溶解度最溶解度最大,所以大,所以DNA溶解,過(guò)濾后存在于濾液溶解,過(guò)濾后存在于濾液B中中;酒精可使;酒精可使DNA分子凝集,因此,在冷卻的分子凝集,因此,在冷卻的95%的酒精溶液中的酒精溶液中DNA凝集,呈絲狀物,過(guò)凝集,呈絲狀物,過(guò)濾后存在于黏稠物濾后存在于黏稠物c中。中。答案:答案:A、b、C第11頁(yè)/共30頁(yè)比較細(xì)胞內(nèi)比較細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制與體外復(fù)制與體外DNA擴(kuò)增擴(kuò)增
11、(PCR)第12頁(yè)/共30頁(yè)【拓展深化】【拓展深化】引物是指能夠與引物是指能夠與DNA母鏈母鏈的一段堿基序列互補(bǔ)配對(duì)的一小段的一段堿基序列互補(bǔ)配對(duì)的一小段DNA或或RNA。DNA聚合酶只能特異地復(fù)制處于兩個(gè)引物之間的聚合酶只能特異地復(fù)制處于兩個(gè)引物之間的DNA序列,使這段固定長(zhǎng)度的序列呈指數(shù)擴(kuò)增。序列,使這段固定長(zhǎng)度的序列呈指數(shù)擴(kuò)增。第13頁(yè)/共30頁(yè)即時(shí)應(yīng)用即時(shí)應(yīng)用(隨學(xué)隨練,輕松奪冠隨學(xué)隨練,輕松奪冠)2PCR利用了利用了DNA熱變性的原理,熱變性的原理,PCR儀實(shí)際儀實(shí)際上也是一種能自動(dòng)調(diào)控溫度的儀器。對(duì)上也是一種能自動(dòng)調(diào)控溫度的儀器。對(duì)PCR過(guò)過(guò)程中程中“溫度的控制溫度的控制”的下列說(shuō)
12、法錯(cuò)誤的是的下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A酶促反應(yīng)需要高的溫度,是為了確保模板的單鏈酶促反應(yīng)需要高的溫度,是為了確保模板的單鏈B延伸的溫度必須大于復(fù)性溫度,而小于變性溫度延伸的溫度必須大于復(fù)性溫度,而小于變性溫度CDNA聚合酶不能熱變性,要用耐高溫的聚合酶聚合酶不能熱變性,要用耐高溫的聚合酶DDNA解旋酶不能熱變性,為了確保模板是單鏈解旋酶不能熱變性,為了確保模板是單鏈第14頁(yè)/共30頁(yè)解析:解析:選選D。PCR是一種體外是一種體外DNA擴(kuò)增技術(shù)。擴(kuò)增技術(shù)。DNA雙鏈的解開(kāi)不需要解旋酶,靠高溫使其雙鏈的解開(kāi)不需要解旋酶,靠高溫使其變性,雙螺旋結(jié)構(gòu)解體,雙鏈分開(kāi);復(fù)性前變性,雙螺旋結(jié)構(gòu)解體,雙鏈分開(kāi);復(fù)
13、性前,在耐高溫的,在耐高溫的DNA聚合酶的作用下根據(jù)堿基互補(bǔ)聚合酶的作用下根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的配對(duì)原則合成新的DNA,因此延伸的溫度要大,因此延伸的溫度要大于復(fù)性溫度,小于變性溫度。于復(fù)性溫度,小于變性溫度。第15頁(yè)/共30頁(yè)血紅蛋白的提取和分離血紅蛋白的提取和分離1方法及原理方法及原理方法原理凝膠色譜法根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)電泳法各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身大小、形狀的不同來(lái)分離蛋白質(zhì)。第16頁(yè)/共30頁(yè)2.實(shí)驗(yàn)操作程序?qū)嶒?yàn)操作程序(1)樣品處理樣品處理紅細(xì)胞的洗滌:除去雜蛋白,以利于后續(xù)步驟紅細(xì)胞的洗滌:除去雜蛋白,以利于后續(xù)步驟的分離純化;的分離純化;血紅蛋白的釋
14、放:使紅細(xì)胞破裂,血紅蛋血紅蛋白的釋放:使紅細(xì)胞破裂,血紅蛋白釋放出來(lái);白釋放出來(lái);分離血紅蛋白溶液:經(jīng)過(guò)離心使血紅蛋白和其分離血紅蛋白溶液:經(jīng)過(guò)離心使血紅蛋白和其他雜質(zhì)分離開(kāi)來(lái),便于下一步對(duì)血紅蛋白的純化他雜質(zhì)分離開(kāi)來(lái),便于下一步對(duì)血紅蛋白的純化。第17頁(yè)/共30頁(yè)(2)粗分離粗分離透析:除去樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較小透析:除去樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)。的雜質(zhì)。(3)純化:一般采用凝膠色譜法對(duì)血紅蛋白進(jìn)行分離和純化:一般采用凝膠色譜法對(duì)血紅蛋白進(jìn)行分離和純化。純化。(4)純度鑒定:一般用純度鑒定:一般用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法聚丙烯酰胺凝膠電泳法來(lái)測(cè)定蛋白質(zhì)的分子量,即對(duì)血紅蛋白進(jìn)行純度鑒
15、定來(lái)測(cè)定蛋白質(zhì)的分子量,即對(duì)血紅蛋白進(jìn)行純度鑒定。【易誤警示】【易誤警示】相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過(guò)凝相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過(guò)凝膠時(shí),相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部膠時(shí),相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,而相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)只能在凝膠外的通道,而相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)只能在凝膠外部移動(dòng),因此蛋白質(zhì)分子彼此分離。部移動(dòng),因此蛋白質(zhì)分子彼此分離。第18頁(yè)/共30頁(yè)即時(shí)應(yīng)用即時(shí)應(yīng)用(隨學(xué)隨練,輕松奪冠隨學(xué)隨練,輕松奪冠)3在血紅蛋白的整個(gè)提取過(guò)程中,不斷用磷酸緩沖在血紅蛋白的整個(gè)提取過(guò)程中,不斷用磷酸緩沖液處理的目的是液處理的目的是(多選多選)()A防止血紅蛋白
16、被氧氣氧化防止血紅蛋白被氧氣氧化B血紅蛋白是一種堿性物質(zhì),需要酸中和血紅蛋白是一種堿性物質(zhì),需要酸中和C防止色譜柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡,影響洗脫效果防止色譜柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡,影響洗脫效果D讓血紅蛋白處在穩(wěn)定的讓血紅蛋白處在穩(wěn)定的pH范圍內(nèi),維持其結(jié)構(gòu)范圍內(nèi),維持其結(jié)構(gòu)和功能和功能解析:解析:選選CD。在血紅蛋白的提取過(guò)程中,不斷用磷酸。在血紅蛋白的提取過(guò)程中,不斷用磷酸緩沖液處理的目的是防止色譜柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡,影響洗脫緩沖液處理的目的是防止色譜柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡,影響洗脫效果,同時(shí)為了讓血紅蛋白保持在體內(nèi)所處的環(huán)境,以效果,同時(shí)為了讓血紅蛋白保持在體內(nèi)所處的環(huán)境,以維持其結(jié)構(gòu)和功能。維持其結(jié)構(gòu)和功能。第19頁(yè)/共3
17、0頁(yè)命題視角剖析命題視角剖析緊扣教材重點(diǎn)緊扣教材重點(diǎn)PCR原理及過(guò)程原理及過(guò)程 PCR是一種體外迅速擴(kuò)增是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段片段的方法,用于放大特定的的方法,用于放大特定的DNA片段,數(shù)小時(shí)內(nèi)片段,數(shù)小時(shí)內(nèi)可使目的基因片段擴(kuò)增到數(shù)百萬(wàn)個(gè)拷貝的分子可使目的基因片段擴(kuò)增到數(shù)百萬(wàn)個(gè)拷貝的分子生物學(xué)技術(shù)。生物學(xué)技術(shù)。PCR需要模板需要模板DNA、引物、脫氧、引物、脫氧核糖核苷酸和核糖核苷酸和DNA聚合酶等條件。下圖為模板聚合酶等條件。下圖為模板DNA分子及分子及2種引物,請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題:種引物,請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題:第20頁(yè)/共30頁(yè)(1)PCR的全稱是的全稱是_。PCR與體內(nèi)與體內(nèi)DNA復(fù)制的復(fù)制
18、的不同之處主要表現(xiàn)在溫度環(huán)境的不同,在不同之處主要表現(xiàn)在溫度環(huán)境的不同,在PCR中先用中先用95 高溫處理的目的是高溫處理的目的是_;而這一過(guò)程中在細(xì)胞內(nèi)是通過(guò)而這一過(guò)程中在細(xì)胞內(nèi)是通過(guò)_實(shí)現(xiàn)的。實(shí)現(xiàn)的。(2)在在PCR技術(shù)中所需要的引物實(shí)質(zhì)上是一種技術(shù)中所需要的引物實(shí)質(zhì)上是一種_。請(qǐng)?jiān)趫D中繪出引物結(jié)合。請(qǐng)?jiān)趫D中繪出引物結(jié)合的位置。的位置。(3)若將若將1個(gè)個(gè)DNA分子拷貝分子拷貝10次,則需要在緩沖液中至次,則需要在緩沖液中至少加入少加入_個(gè)引物。個(gè)引物。(4)DNA子鏈復(fù)制的方向是子鏈復(fù)制的方向是_,這是,這是由于由于_。第21頁(yè)/共30頁(yè)【嘗試解答】【嘗試解答】(1)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)使多聚
19、酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)使DNA變性變性(使使DNA的兩條鏈解開(kāi)的兩條鏈解開(kāi))解旋酶的催化解旋酶的催化(2)單鏈單鏈DNA或或RNA分子,見(jiàn)右圖分子,見(jiàn)右圖(3)(2112)(4)5到到3DNA聚合酶只能從引物的聚合酶只能從引物的3端拼接單個(gè)脫氧核苷酸分子端拼接單個(gè)脫氧核苷酸分子第22頁(yè)/共30頁(yè)【解析】【解析】本題考查考生對(duì)本題考查考生對(duì)PCR技術(shù)的理解,屬于技術(shù)的理解,屬于知識(shí)識(shí)記和理解層次的考查,符合高考對(duì)選修內(nèi)知識(shí)識(shí)記和理解層次的考查,符合高考對(duì)選修內(nèi)容考查的特點(diǎn)。容考查的特點(diǎn)。PCR技術(shù)又稱多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),在技術(shù)又稱多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),在PCR中先用中先用95高溫處理的目的是使高溫處理的目的是使DNA
20、分子中的分子中的氫鍵斷裂,兩條鏈解開(kāi),即使氫鍵斷裂,兩條鏈解開(kāi),即使DNA分子變性。引物是分子變性。引物是一種單鏈一種單鏈DNA或或RNA分子,它能與解開(kāi)的分子,它能與解開(kāi)的DNA母鏈母鏈的的3端結(jié)合,為端結(jié)合,為DNA聚合酶提供吸附位點(diǎn),使聚合酶提供吸附位點(diǎn),使DNA聚合聚合酶從引物的酶從引物的3端開(kāi)始連接脫氧核苷酸,從而決定了端開(kāi)始連接脫氧核苷酸,從而決定了DNA子鏈復(fù)制的方向是子鏈復(fù)制的方向是5到到3。在。在DNA分子擴(kuò)增時(shí),需分子擴(kuò)增時(shí),需要要2種引物,由于新合成的子鏈都需要引物作為復(fù)制的起種引物,由于新合成的子鏈都需要引物作為復(fù)制的起點(diǎn),故所需的引物數(shù)目等于新合成的點(diǎn),故所需的引物數(shù)
21、目等于新合成的DNA子鏈數(shù)目,即子鏈數(shù)目,即(22102)(2112)個(gè)。個(gè)。第23頁(yè)/共30頁(yè)洞察高考熱點(diǎn)洞察高考熱點(diǎn)DNA的粗提取的粗提取 (2010年高考江蘇卷年高考江蘇卷)某生物興趣小組開(kāi)展某生物興趣小組開(kāi)展DNA粗提取的相關(guān)探究活動(dòng),具體步驟如下:粗提取的相關(guān)探究活動(dòng),具體步驟如下:材料處理:稱取新鮮的花菜、辣椒和蒜黃各材料處理:稱取新鮮的花菜、辣椒和蒜黃各2份,每份份,每份10 g。剪碎后分成兩組,一組置于剪碎后分成兩組,一組置于20 、另一組置于、另一組置于20 條件下保存條件下保存24 h。DNA粗提?。捍痔崛。旱谝徊剑簩⑸鲜霾牧戏謩e放入研缽中,各加入第一步:將上述材料分別放入
22、研缽中,各加入15 mL研磨液,充分研磨。用兩層紗布過(guò)濾,取濾液備用研磨液,充分研磨。用兩層紗布過(guò)濾,取濾液備用。第24頁(yè)/共30頁(yè)第二步:先向第二步:先向6只小燒杯中分別注入只小燒杯中分別注入10 mL濾液,再濾液,再加入加入20 mL體積分?jǐn)?shù)為體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液,然后的冷酒精溶液,然后用玻璃棒緩緩地向一個(gè)方向攪拌,使絮狀物纏繞用玻璃棒緩緩地向一個(gè)方向攪拌,使絮狀物纏繞在玻璃棒上。在玻璃棒上。第三步:取第三步:取6支試管,分別加入等量的支試管,分別加入等量的2 mol/L NaCl溶液溶解上述絮狀物。溶液溶解上述絮狀物。DNA檢測(cè):在上述試管中各加入檢測(cè):在上述試管中各加入4 mL
23、二苯胺試二苯胺試劑,混合均勻后,置于沸水中加熱劑,混合均勻后,置于沸水中加熱5 min,待試,待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺,結(jié)果如下表。管冷卻后比較溶液的顏色深淺,結(jié)果如下表。第25頁(yè)/共30頁(yè)材料保存溫度花菜辣椒蒜黃20 20 (注:注:“”越多表示藍(lán)色越深越多表示藍(lán)色越深)分析上述實(shí)驗(yàn)過(guò)程,回答下列問(wèn)題:分析上述實(shí)驗(yàn)過(guò)程,回答下列問(wèn)題:(1)該探究性實(shí)驗(yàn)課題名稱是該探究性實(shí)驗(yàn)課題名稱是_。(2)第二步中第二步中“緩緩地緩緩地”攪拌,這是為了減少攪拌,這是為了減少_。第26頁(yè)/共30頁(yè)【嘗試解答】【嘗試解答】(1)探究不同材料和不同保存溫度對(duì)探究不同材料和不同保存溫度對(duì)DNA提取量的影響提取量的影響 (2)DNA斷裂斷裂 (3)等質(zhì)量的不同實(shí)驗(yàn)材料,在相同的保存溫度等質(zhì)量的不同實(shí)驗(yàn)材料,在相同的保存溫度下,從蒜黃提取的下,從蒜黃提取的DNA量最多低溫抑制了相關(guān)量最多低溫抑制了相關(guān)酶的活性,酶的活性,DNA降解速度慢降解速度
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