1、名師點撥學(xué)科：生物7教學(xué)內(nèi)容：生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定開始學(xué)m【實驗指導(dǎo)】一、實驗原理某些化學(xué)試劑能夠使生物組織中的有關(guān)有機化合物，產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)?？扇苄赃€原糖（如葡萄糖、果糖）與斐林試劑發(fā)生作用，可以生成磚紅色沉淀。裴林試 劑實際是cu2+的堿性溶液，能使具有白由醛基或酮基的糖氧化，cu2+則被還原成磚紅色的 cu20沉淀。反應(yīng)式為：ch2oh （choii） 4ch0+2cu（oh）2->ch2oh （choii） 1cooh+cu2o i +2iiq脂肪可以被蘇丹iii染液染成橘黃色。蘇丿'hii在脂肪屮的溶解度比在酒精屮的溶解度人, 當(dāng)用蘇丹iii的

2、酒粹溶液處理含有脂肪的牛物組織吋，酒精中的蘇丹iii進入脂肪中，將脂肪染 成橘黃色。蛋白質(zhì)與雙縮膿試劑發(fā)生作用，可以產(chǎn)生紫色反應(yīng)。具有兩個或兩個以上肽鍵的化侖物 皆可與雙縮豚試劑產(chǎn)牛紫色反應(yīng)。蛋口質(zhì)的肽鍵在堿性溶液屮能與c+絡(luò)合成紫紅色的化合 物。顏色深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比。二、目的要求初步學(xué)會鑒定生物組織屮可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的基木方法。三、材料用具1. 實驗材料（1）做可溶性還原糖的鑒定實驗，應(yīng)該選擇含糖量較高、顏色為口色或近于口色的植 物組織，以蘋果、梨為最好。（2）做脂肪的鑒定實驗，應(yīng)該選擇富含脂肪的種了，以花生種了為最好，實驗前需浸 泡34 ho（3）做蛋白質(zhì)的鑒定實驗，可用浸

3、泡12d的黃豆種了（或用豆?jié){），或用雞蛋蛋白。2. 儀器和試劑（1）儀器：剪刀，解剖刀，雙面刀片，試管，試管架，試管夾，大小燒杯，小量筒， 滴管，玻璃漏斗，酒精燈，三腳架，石棉網(wǎng)，火柴，研缽，石英砂，紗布，載玻片，蓋玻片, 毛筆吸水紙，顯微鏡。（2）試劑：斐林試劑（主要山質(zhì)量濃度為0. 1 g/ml的m0h溶液和質(zhì)量濃度為0. 05 g/ml 的cusoj溶液配制而成），蘇丹iii或蘇丹iv染液，雙縮姝試劑，體積分數(shù)為50%的酒精溶液， 蒸僻水。四、實驗的方法、步驟1. 可溶性還原糖的鑒定制備牛幽糾樣液取材，研磨.過濾収2ml組織樣液注入試管向試管注入2 ml剛配制的斐林試劑加熱和觀察2. 脂

4、肪的鑒定制備生物組織實驗材料去種皮，削平面，切片染色滴23滴蘇丹染液色23分鐘制備牛物組織樣液取材，研制，過濾的如牛、4取1支試管注入黃、+、卄預(yù)留組織樣液 '仕入恥、樣液豆紐織樣液2譏任試劑奩薄h上滴12滴體積分數(shù)為50%酒精溶液去浮色洗上浮色 制作臨時裝丿1放在顯微鏡下觀察（先低倍鏡后高倍鏡）3.蛋白質(zhì)的鑒定a加入ml雙縮嫌試劑a注入試劑再加入34滴雙縮jk試劑b,搖勻觀察顏色變化五、實驗成功的關(guān)鍵及注意事項1. 實驗成功的關(guān)鍵在于實驗材料的選樣（1）nj*溶性還原糖的鑒定實驗小，最理想的實驗材料是含糖量較高的生物組織（或器 官），而且組織的顏色較淺，或近于白色的。經(jīng)試驗比較，顏色

5、反應(yīng)的明顯程度依次為蘋果、 梨、口色甘藍葉、口蘿卜。（2）脂肪的鑒定實驗屮，實驗材料最好選用富含脂肪的種了，且徒手切片要成功。（3）蛋白質(zhì)的鑒定實驗，最好選用富含蛋白質(zhì)的生物組織，植物材料常用的是大豆， 動物材料常用的是雞蛋。2. 注意事項（1）斐林試劑很不穩(wěn)定，故應(yīng)將組成斐林試劑的甲液（0.1 g/譏的n&0i1溶液）和乙液 （0. 05 g/ml的cus（h溶液）分別配制、儲存,使用時，再臨時配制,將45滴乙液滴入2 ml 甲液中，配完后立即使用。（2）雙縮服試劑的使用，應(yīng)先加試劑a（0.1 g/ml的naoh溶液），造成堿性的反應(yīng)環(huán)境, 再加試劑b（0.01 g/ml的cusoq

6、溶液）。（3）在鑒定可溶性糖的實驗中，對試管中的溶液進行加熱時，試管底部不要觸及燒杯 底部，另外，試管口不要朝向?qū)嶒炚?，以免沸騰的溶液沖岀試管，造成燙傷。（4）在蛋口質(zhì)的鑒定實驗中，若用雞蛋清作實驗材料，必須稀釋，以免實驗后粘住試 筲，不易洗刷。（5）在鑒定脂肪的實驗中，若用花生種了作實驗材料，必須提前浸泡34小時，浸泡 時間短了，不容易切片，浸泡時間過長，則組織太軟，切下的薄片不易成形，染色時間不宜 過長?！净A(chǔ)訓(xùn)練】一、選擇題1. 可川于鑒定牛物組織屮町溶性還原糖的試劑是a. 斐林試劑b. 雙縮腺試劑c. 蘇丹iii染液d. 蘇丹iv染液解析：斐林試劑能與還原性糖發(fā)生顏色反應(yīng)，出現(xiàn)磚紅色沉

7、淀，雙縮腺試劑鑒定蛋口質(zhì), 蘇丹iii、蘇丹iv鑒定脂肪。答案：a2. 対斐林試劑和雙縮腋試劑的配方，叔述不正確的是a. 都含有naoh溶液和cusch溶液b. 斐林試劑的配制是將45滴0. 05 g/ml的cuso.（溶液滴入2 ml 0. 1 g/ml的naoh溶液中 即成c. 雙縮服試劑是將34滴0.01 g/ml的cusch溶液滴入2 ml 0. 1 g/ml的naoh溶液中混合 而成的d. 雙縮豚試劑含有兩種試劑：質(zhì)量濃度為0. 1 g/ml的naoii溶液和質(zhì)量濃度為0. 01 g/ml 的cusov溶液解析：斐林試劑和雙縮嫌試劑的化學(xué)成分相同，但配制時使用的劑量和濃度及加入試劑

8、的順序不同。斐林試劑的配制是將45滴0.05 g/n）l的cusod容液滴入2 mlo. 1 g/ml的naoh溶 液中即成，必須現(xiàn)川現(xiàn)配。雙縮脈試劑是丿ij質(zhì)量濃度為0.01 g/汕的naoh溶液和質(zhì)量濃度為 0.01 g/ml的cuso溶液配制而成的，使用時先向待檢樣品中加入2 mlo. 1 g/ml的naoii溶液， 振蕩搖勻，再向試管中加入34滴0. 01 g/ml的硫酸銅溶液，搖蕩均勻。答案：c3. 用斐林試劑鑒定可溶性還原糖時，溶液顏色的變化過程為a. 無色一磚紅色（沉淀）b. 淺藍色一磚紅色（沉淀）c. 淺藍色一藍色一磚紅色（沉淀）d. 淺藍色一棕色一磚紅色（沉淀）解析：考查對實

9、驗現(xiàn)象的觀察能力。斐林試劑由質(zhì)量濃度為0. 1 g/ml的蛍氧化鈉溶液和 質(zhì)量濃度為0. 05 £/mi的硫酸銅溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡藍色的cu（oh） 2沉淀。 cu （0h） 2與加入的葡萄糖在加熱的條件卜能夠生成磚紅色的on。沉淀，而葡萄糖本身氧化 成葡萄糖酸。反應(yīng)之初，綸成的cu2。沉淀較少，而藍色的cu （0h） 2沉淀較多，二者的綜合效 應(yīng)使溶液呈棕色，隨著反應(yīng)的進行，磚紅色的012。增多，溶液變成磚紅色。答案:d4. 在用雙縮腺試劑鑒定蛋白質(zhì)實驗時，正確的操作是a. 2 ml蛋白稀釋液先加0.1 g/ml的naoh,再加34滴0. 01 g/ml的cusc

10、h溶液b. 2 ml蛋白稀釋液先加34滴0.01 g/ml的cuso.,溶液，再加0. 1 g/ml的naoh溶液c. 2 ml蛋白稀釋液,同時加入0.1 g/ml的naoh和0. 01 g/ml的cusch混合液d. 在naoh和cus（h混合液中加入2 ml蛋白稀釋液解析：雙縮腺試劑的成分是質(zhì)量濃度為0. 1 g/ml的naoii溶液和質(zhì)量濃度為0. 01 g/ml的 cusoj溶液。在堿性溶液naoipp,蛋口質(zhì)能與ci/+作川形成紫色的絡(luò)合物。在實驗時，應(yīng)先 向蛋口稀釋液中加入0. 1 g/ml的naoh溶液，混合均勻,造成-個堿性環(huán)境，然后再加0.01 g/ml 的cusch溶液34

11、滴，才能出現(xiàn)紫色反應(yīng)。若先加入cus（h,再加naoh,則容易生成藍色的cu（0h） 2沉淀，而對實驗現(xiàn)象有遮蔽作用。答案：a5. 川蘇丹iii染液對脂肪紐織進行染色時，可川來沖洗浮色的藥品是a. hc1b. h2oc. 50%的酒精d. 無水酒椿解析：因為蘇丹iii易溶于50%酒精中，故選c。答案：c6. 下列物質(zhì)屮，能被蘇丹iv染液染成紅色的是a. 馬鈴薯塊莖b. 浸軟的花生種子c. 蛋清液d. 蘋果答案:b7. 下列哪個實驗用到顯微鏡a. 可溶性還原糖的鑒定b. 蛋白質(zhì)的鑒定c脂肪的鑒定d.淀粉的鑒定答案:c8. 下列哪紐試劑在使川過程屮，必須經(jīng)過加熱a. 斐林試劑鑒定可溶性還原糖的過程

12、中b. 蘇丹iii和蘇丹iv染液在鑒定動物組織中的脂肪時c. 雙縮腺試劑鑒定蛋白質(zhì)時d. 碘化鉀溶液鑒定淀粉時答案：a9. 某組織細胞被蘇丹iii試劑染成橘黃色，被染色的物質(zhì)是a. 葡萄糖b. 脂肪c. 蛋白質(zhì)d. 蘋果組織液解析：蘇丹iii試劑與脂肪發(fā)生顏色反應(yīng)呈現(xiàn)橘黃色，因此被染色的物質(zhì)應(yīng)該是脂肪。 答案：b10. 下列糖中能與斐林試劑反應(yīng)產(chǎn)生磚紅色沉淀的是a. 淀粉b. 果糖c. 蔗糖d. 纖維素解析：斐林試劑用于鑒定可溶性還原糖，果糊是可溶性還原旃，其他幾項都不是還原糖。答案:b11. 花牛種子子葉細胞內(nèi)的圓形透亮的小顆粒與蘇丹iii染液發(fā)牛了顏色反應(yīng)，形成a. 藍色b. 紅色c. 黃

13、色d. 紫色答案：c12. 某學(xué)生在顯微鏡下觀察落花生了葉的切片，當(dāng)轉(zhuǎn)動細準(zhǔn)焦螺旋時，有一部分細胞看 得清晰，另一部分細胞較模糊，這是由于a. 反光鏡未調(diào)節(jié)好r.標(biāo)本切得厚薄不均c. 細調(diào)節(jié)器未調(diào)節(jié)好d. 顯微鏡物鏡損壞答案:b13. 可溶性糖的鑒定中，制備牛物組織樣液時加入少許石英砂，其目的是a. 研轉(zhuǎn)充分b. 防止糖被破壞c. 防止反應(yīng)d. 無作用答案：a14. 卜列哪一項沒有顯色反應(yīng)a. 用碘處理淀粉b. 用碘處理麥芽糖c. 用斐林試劑處理葡萄糖d. 用雙縮試劑處理蛋白質(zhì)解析：a項呈現(xiàn)藍色，c項呈現(xiàn)磚紅色沉淀，d項呈現(xiàn)紫色反應(yīng)，只有b項無顏色反應(yīng)。答案：b15. 下列關(guān)于冇關(guān)物質(zhì)鑒定的顯

14、色反應(yīng)，哪一項是不正確的a. 用斐林試劑處理匍萄糖顯磚紅色b. 用蘇丹iii處理脂肪顯橘黃色c. 用雙縮腺處理蛋白質(zhì)顯紫色d. 用碘處理果糖呈紫色解析：a、b、c的顏色反應(yīng)都正確,d不出現(xiàn)顏色反應(yīng)。答案：d二、非選擇題16. 根據(jù)“生物組織屮可溶性糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定”實驗，回答問題：（1）實驗原理是依據(jù)牛物組織屮的有機物與某些化學(xué)試劑所產(chǎn)牛的反應(yīng),鑒定生物組織中某種有機物的存在。（2）鑒定成熟梨果肉內(nèi)存在還原性糖所用的試劑是,該試劑與細胞內(nèi)可溶性糖屮的還原性糖如發(fā)生作用，形成色的沉淀，該沉淀是。（3）鑒定花牛子葉存在脂肪，所用的試劑是；若用物理方法鑒定脂肪的存在，請敘述鑒定方法-（4）鑒定

15、黃豆組織屮存在蛋白質(zhì)時，先向試管內(nèi)注入2 nil黃豆組織樣液；然后向試管內(nèi)加入2汕雙縮魔試劑a,搖勻；再向試管內(nèi)加入34滴雙縮腋試劑b,搖勻。為什么只加3 4滴雙縮豚劑b而不能過量？ o（5）鑒定蛋清組織中存在蛋口質(zhì)吋，為何充分稀釋？ o（6）做鑒定糖和蛋白質(zhì)的實驗時，在鑒定z前，可以留出一部樣液，以做z用,這樣會增強說服力。答案：（1）顏色（2）斐林試劑衙萄糖、果糖磚紅cu20 （3）蘇丹iii烘烤花牛種子后, 把子葉放在白紙上用手指擠壓，白紙上會出現(xiàn)透明的油跡，說明子葉中含有脂肪（4）加入 過量的雙縮腺試劑b, cusoj在堿性溶液屮生成人雖藍色cu（0h）2沉淀，會遮蔽所產(chǎn)生的紫色 （5

16、）如果蛋清液稀釋不夠，與雙縮嫌試劑發(fā)牛反應(yīng)后會粘固在試管的內(nèi)壁上，使反應(yīng)不容 易徹底，并且試管也不容易刷洗干凈（6）與鑒定后的樣液的顏色變化作對比17. 用下列實驗材料做鑒定實驗，從理論上分析能否成功，試說明道理。（1）用綠色葉片做可溶性還原糖的鑒定實驗；（2）用篦麻種了做脂肪鑒定實驗；（3）用新鮮牛奶做蛋白質(zhì)鑒定實驗。答案：（1）不能成功。因為綠色葉片的顏色對于鑒定實驗中的顏色反應(yīng)有遮蔽作用。（2）能成功。因為篦麻種子中含有鮫多的脂肪，但必須切片鮫薄。（3）不能成功。因為新鮮牛奶屮含有大量的還原性糖，有可能與雙縮腺試劑屮的cu2+ 發(fā)生顏色反應(yīng)，干擾蛋白質(zhì)鑒定實驗中的顏色反應(yīng)。18. 根據(jù)下

17、表中的實驗結(jié)果回答問題：鑒定反應(yīng)實驗結(jié)果實驗一葡萄糖+斐林試劑磚紅色實驗二蔗糖液+斐林試劑無反應(yīng)實驗廠蔗糖液蔗糖酶產(chǎn)物+斐林試劑磚紅色（1）等量葡萄糖和蔗糖溶液，分別加入等量斐林試劑，用小火加熱23分鐘后，兩者顏色反應(yīng)不同。這表明斐林試劑可用鑒別o（2）蔗糖液以蔗糖酶處理后，與斐林試劑呈磚紅色反應(yīng)，這個事實說明o答案：（1）葡萄糖（2）蔗糖被蔗糖酶分解后的產(chǎn)物中有葡萄糖19. 鑒定黃豆組織中存在蛋白質(zhì)時，先向試管內(nèi)注入2汕黃豆組織樣液；然后向試管內(nèi)注入2皿雙縮脈試劑a （溶液），搖勻；再向試管內(nèi)加入34滴雙縮味試劑b （溶液）,這樣實驗才能成功，原因是:加入雙縮81試劑b僅為34滴，不能過量，為什么？ o答案：0. 1 g/ml的naoh 0.01 g/ml的cusoa在堿性溶液中，蛋白質(zhì)容易與ci?發(fā)生紫 色反應(yīng) 否則就容易生成藍色cu（oh）2沉淀對實驗現(xiàn)象有遮蔽作用20. 蘇丹iii染液可以把脂肪染成色，染色后要用酒精沖洗浮色，用酒精沖洗的原因是0答案：橘黃蘇丹iii染液易溶解于酒精中21. 通常情況下，正常人的尿液中沒有葡萄糖。當(dāng)-次食用大量糖吋，尿液中是否有葡 萄糖存在？試運用對照的