【高考生物】2026步步高大一輪復(fù)習(xí)講義第九單元生物技術(shù)與工程第九單元生物技術(shù)與工程第49講傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用與發(fā)酵工程課標(biāo)內(nèi)容(1)舉例說(shuō)明日常生活中的某些食品是運(yùn)用傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)的。(2)闡明發(fā)酵工程利用現(xiàn)代工程技術(shù)及微生物的特定功能，工業(yè)化生產(chǎn)人類(lèi)所需產(chǎn)品。(3)舉例說(shuō)明發(fā)酵工程在醫(yī)藥、食品及其他農(nóng)牧業(yè)生產(chǎn)上有重要的應(yīng)用價(jià)值?？键c(diǎn)一傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用1.發(fā)酵與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)(1)發(fā)酵2.腐乳制作3.制作泡菜(1)作用菌種植物體表面天然的乳酸菌。(2)原理在無(wú)氧條件下，乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸。反應(yīng)簡(jiǎn)式為C6H12O6eq\o(→,\s\up7(酶))2C3H6O3(乳酸)＋能量。(3)方法步驟提醒營(yíng)造“無(wú)氧環(huán)境”的3項(xiàng)措施：選擇的泡菜壇密封性要好；加入蔬菜后要注入煮沸冷卻的鹽水，使鹽水沒(méi)過(guò)全部菜料；蓋上壇蓋后要在壇蓋邊沿的水槽中注滿水。4.制作果酒和果醋(1)果酒制作與果醋制作的比較(2)果酒和果醋的制作步驟及目的果酒和果醋改進(jìn)裝置及其分析裝置的使用：使用該裝置制作果酒時(shí)，應(yīng)該關(guān)閉充氣口；制作果醋時(shí)，應(yīng)將充氣口連接充氣泵，輸入空氣。(1)“杏花村酒”的釀制，酵母菌只進(jìn)行無(wú)氧呼吸。(2022·湖南卷，7D)(×)提示釀酒初期酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖，然后酵母菌通過(guò)無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精。(2)葡萄果皮上有酵母菌和醋酸菌，制作好葡萄酒后，可直接通入無(wú)菌空氣制作葡萄醋。(2022·江蘇卷，16C)(×)提示制作好葡萄酒后，打開(kāi)瓶蓋，蓋上一層紗布，空氣中的醋酸菌會(huì)進(jìn)入發(fā)酵液中大量繁殖，進(jìn)行葡萄醋的發(fā)酵。(3)果醋發(fā)酵時(shí)，乙醇既是乙酸發(fā)酵的底物，又可以抑制雜菌繁殖。(2021·遼寧卷，8A)(√)(4)果醋發(fā)酵時(shí)，用重鉻酸鉀測(cè)定乙酸含量變化時(shí)，溶液灰綠色逐日加深。(2021·江蘇卷，14D)(×)提示酸性重鉻酸鉀能檢驗(yàn)酒精，不能檢驗(yàn)乙酸含量變化。(1)腐乳與豆腐相比，所含有機(jī)物的種類(lèi)和能量有哪些變化？為什么？提示腐乳中有機(jī)物的種類(lèi)增加了，所含的能量卻減少了。因?yàn)槎垢械牡鞍踪|(zhì)被分解成了小分子的肽和氨基酸。(2)制作泡菜時(shí)配制的鹽水為什么要先煮沸，再冷卻使用？提示煮沸的原因：一是為了殺死鹽水中的雜菌，二是為了排出溶解的氧氣；冷卻是防止溫度過(guò)高殺死發(fā)酵所需要的乳酸菌。(3)制作葡萄酒的過(guò)程中，每隔12h左右擰松瓶蓋，目的是什么？能否打開(kāi)瓶蓋？為什么？提示擰松瓶蓋的目的是放出CO2，防止發(fā)酵瓶?jī)?nèi)因氣壓過(guò)大而爆裂。不能打開(kāi)瓶蓋，因?yàn)橐苊怆s菌污染發(fā)酵液。(4)乙酸發(fā)酵時(shí)，無(wú)論是利用糖源還是酒精，都需要打開(kāi)通氣閥，請(qǐng)說(shuō)明其原因。提示醋酸菌是一種好氧細(xì)菌，在發(fā)酵過(guò)程中始終需要氧氣，如果氧氣中斷則會(huì)引起醋酸菌的死亡?？枷驀@泡菜、果酒和果醋制作，考查科學(xué)探究能力1.(2023·山東卷，12)以下是以泡菜壇為容器制作泡菜時(shí)的4個(gè)處理：①沸鹽水冷卻后再倒入壇中；②鹽水需要浸沒(méi)全部菜料；③蓋好壇蓋后，向壇蓋邊沿的水槽中注滿水；④檢測(cè)泡菜中亞硝酸鹽的含量。下列說(shuō)法正確的是()A.①主要是為了防止菜料表面的醋酸菌被殺死B.②的主要目的是用鹽水殺死菜料表面的雜菌C.③是為了使氣體只能從泡菜壇排出而不能進(jìn)入D.④可檢測(cè)到完整發(fā)酵過(guò)程中亞硝酸鹽含量逐漸降低答案C解析鹽水煮沸是為了殺滅雜菌，冷卻之后使用是為了保證乳酸菌等微生物的生命活動(dòng)不受影響，A錯(cuò)誤；②鹽水需要浸沒(méi)全部菜料，造成無(wú)氧環(huán)境，有利于乳酸菌無(wú)氧呼吸，B錯(cuò)誤；③蓋好壇蓋后，向壇蓋邊沿的水槽中注滿水，能達(dá)到排氣減壓、隔絕空氣、防止雜菌污染等目的，C正確；腌制泡菜過(guò)程中亞硝酸鹽的含量先增多后減少，D錯(cuò)誤。2.(2024·中原名校聯(lián)考)有關(guān)泡菜中亞硝酸鹽含量的研究表明，亞硝酸鹽的含量高低和亞硝酸鹽含量峰值時(shí)間的早晚與食鹽的濃度有關(guān)(如圖)，下列有關(guān)敘述不正確的是()A.食鹽的濃度越高，亞硝酸鹽生成越快，亞硝酸鹽含量峰值出現(xiàn)的越早B.取食泡菜時(shí)，時(shí)間別太長(zhǎng)，防止空氣進(jìn)入C.臭味的產(chǎn)生可能與取食過(guò)程中帶入壇內(nèi)油脂類(lèi)物質(zhì)有關(guān)D.所用的食鹽水經(jīng)煮沸后可除去水中的氧氣并殺滅雜菌答案A解析從圖中可以看出，亞硝酸鹽含量上升最快的是食鹽濃度為5%時(shí)，其峰值出現(xiàn)最早，當(dāng)食鹽濃度上升到7%，亞硝酸鹽含量上升相對(duì)較慢，峰值出現(xiàn)的相對(duì)較晚，A錯(cuò)誤；泡菜的制作原理是利用乳酸菌在無(wú)氧條件下進(jìn)行乳酸發(fā)酵，所以取食泡菜時(shí)，時(shí)間別太長(zhǎng)，防止空氣進(jìn)入，對(duì)乳酸菌有抑制作用，B正確；如果在取食過(guò)程中混入油脂，可能會(huì)破壞發(fā)酵過(guò)程，使泡菜出現(xiàn)臭味，C正確；泡菜制作過(guò)程中，所用的食鹽水經(jīng)煮沸后可除去水中的氧氣并殺滅雜菌，D正確。3.(2022·湖北卷，11)關(guān)于白酒、啤酒和果酒的生產(chǎn)，下列敘述錯(cuò)誤的是()A.在白酒、啤酒和果酒的發(fā)酵初期需要提供一定的氧氣B.白酒、啤酒和果酒釀制的過(guò)程也是微生物生長(zhǎng)繁殖的過(guò)程C.葡萄糖轉(zhuǎn)化為乙醇所需的酶既存在于細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，也存在于線粒體D.生產(chǎn)白酒、啤酒和果酒的原材料不同，但發(fā)酵過(guò)程中起主要作用的都是酵母菌答案C解析在白酒、啤酒和果酒的發(fā)酵初期需要提供一定的氧氣，讓酵母菌大量繁殖，再進(jìn)行酒精發(fā)酵，A正確；白酒、啤酒和果酒釀制的過(guò)程也是微生物生長(zhǎng)繁殖的過(guò)程，如發(fā)酵初期酵母菌大量繁殖，B正確；酒精發(fā)酵利用的菌種是酵母菌，葡萄糖轉(zhuǎn)化為乙醇所需的酶存在于細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，不存在于線粒體中，C錯(cuò)誤，D正確。4.(2024·武漢開(kāi)學(xué)考)果酒、果醋發(fā)酵的實(shí)質(zhì)是細(xì)胞代謝過(guò)程中物質(zhì)的轉(zhuǎn)化過(guò)程，下圖是傳統(tǒng)果酒和果醋發(fā)酵過(guò)程中的物質(zhì)轉(zhuǎn)化(①～⑤表示物質(zhì)轉(zhuǎn)化過(guò)程)。下列相關(guān)分析正確的是()A.與①③相比較，①②有利于酵母菌的繁殖B.不發(fā)生在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)的過(guò)程只有①③C.醋酸菌細(xì)胞含有催化④⑤⑥過(guò)程所需的酶D.④⑤過(guò)程與⑥過(guò)程的區(qū)別是糖類(lèi)和氧氣是否充足答案C解析①②過(guò)程是無(wú)氧呼吸，有利于酵母菌產(chǎn)生乙醇，①③過(guò)程是有氧呼吸，有利于酵母菌大量繁殖，A錯(cuò)誤；不發(fā)生在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)的過(guò)程只有③，③過(guò)程是酵母菌有氧呼吸第二、三階段，發(fā)生的場(chǎng)所是線粒體，B錯(cuò)誤；醋酸菌既能利用糖類(lèi)進(jìn)行乙酸發(fā)酵，也能利用乙醇進(jìn)行乙酸發(fā)酵，推測(cè)醋酸菌細(xì)胞內(nèi)含有催化④⑤⑥過(guò)程所需的酶，C正確；④⑤過(guò)程與⑥過(guò)程均需要充足的氧氣，糖源是否充足是④⑤過(guò)程與⑥過(guò)程的區(qū)別，D錯(cuò)誤。考點(diǎn)二發(fā)酵工程及其應(yīng)用1.發(fā)酵工程利用微生物的特定功能，通過(guò)現(xiàn)代工程技術(shù)，規(guī)模化生產(chǎn)對(duì)人類(lèi)有用的產(chǎn)品。2.發(fā)酵工程基本環(huán)節(jié)3.啤酒發(fā)酵的工業(yè)化生產(chǎn)流程及操作目的4.發(fā)酵工程的特點(diǎn)5.發(fā)酵工程的應(yīng)用1.啤酒生產(chǎn)中，發(fā)酵是重要環(huán)節(jié)，發(fā)酵后期，如果密封不嚴(yán)，啤酒會(huì)變酸，你知道這是發(fā)生了什么變化嗎？提示醋酸菌是一種好氧細(xì)菌，若啤酒發(fā)酵罐密封不嚴(yán)，酒精就會(huì)在醋酸菌的作用下被氧化產(chǎn)生乙醛，最后變?yōu)橐宜帷?.微生物肥料使作物增產(chǎn)的原理是_________________________________________________________________________________________________________。提示微生物在代謝過(guò)程中產(chǎn)生的有機(jī)酸、生物活性物質(zhì)等能增進(jìn)土壤肥力，改良土壤結(jié)構(gòu)，促進(jìn)植株生長(zhǎng)3.微生物農(nóng)藥防治農(nóng)林害蟲(chóng)的原理是_______________________________________________________________________________________________________。提示利用微生物或其代謝物來(lái)防治病蟲(chóng)害考向結(jié)合發(fā)酵工程的應(yīng)用，考查科學(xué)探究1.(2023·浙江6月選考，12)關(guān)于小曲白酒的釀造過(guò)程，下列敘述錯(cuò)誤的是()A.糖化主要是利用霉菌將淀粉水解為葡萄糖B.發(fā)酵液樣品的蒸餾產(chǎn)物有無(wú)酒精，可用酸性重鉻酸鉀溶液檢測(cè)C.若釀造過(guò)程中酒變酸，則發(fā)酵壇密封不嚴(yán)D.蒸熟并攤晾的原料加入糟醅，立即密封可高效進(jìn)行酒精發(fā)酵答案D解析糖化主要是利用霉菌產(chǎn)生的淀粉酶將淀粉水解為葡萄糖，A正確；可用酸性重鉻酸鉀溶液檢測(cè)酒精，若存在酒精則溶液呈現(xiàn)灰綠色，B正確；若釀造過(guò)程中酒變酸，則可能是發(fā)酵壇密封不嚴(yán)，導(dǎo)致醋酸菌在有氧條件下將乙醇氧化為乙酸，C正確；蒸熟并攤晾的原料加入糟醅，不能馬上密封，需要提供氧氣先讓糟醅中的好氧型霉菌將原料中的淀粉糖化，以及讓酵母菌進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖，D錯(cuò)誤。2.(2024·安徽安慶調(diào)研)下列關(guān)于發(fā)酵工程基本環(huán)節(jié)的敘述，正確的是()A.需要根據(jù)確定的菌種選擇合適的原料配制培養(yǎng)基，且一般需要反復(fù)實(shí)驗(yàn)B.需要對(duì)培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備進(jìn)行消毒，以防止因雜菌污染導(dǎo)致的產(chǎn)量下降C.選育出的菌種可以直接接種，也可以先進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)后再進(jìn)行接種D.計(jì)算機(jī)控制系統(tǒng)可以通過(guò)正反饋機(jī)制，使發(fā)酵罐內(nèi)的發(fā)酵全過(guò)程處于最佳狀態(tài)答案A解析需要對(duì)培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備進(jìn)行滅菌，以防止因雜菌污染導(dǎo)致的產(chǎn)量下降，B錯(cuò)誤；選育出的菌種不能直接接種，要先進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)后再進(jìn)行接種，C錯(cuò)誤；計(jì)算機(jī)控制系統(tǒng)可以通過(guò)負(fù)反饋機(jī)制，使發(fā)酵罐內(nèi)的發(fā)酵全過(guò)程處于最佳狀態(tài)，D錯(cuò)誤。3.(2024·山東濟(jì)寧模擬)下列有關(guān)發(fā)酵技術(shù)在食品加工中應(yīng)用的敘述，錯(cuò)誤的是()A.為了避免雜菌污染，乳酸菌發(fā)酵酸奶時(shí)在牛奶中添加一定量的抗生素B.為了提高果酒品質(zhì)，應(yīng)先用蒸餾水沖洗1～2次再去枝梗最后再榨汁C.為了防止果酒變酸，果酒發(fā)酵應(yīng)避免排氣時(shí)空氣進(jìn)入及發(fā)酵引起的升溫D.在果醋發(fā)酵過(guò)程中，要適時(shí)通過(guò)充氣口充氣，有利于醋酸菌的代謝答案A解析乳酸菌發(fā)酵酸奶時(shí)在牛奶中不能添加抗生素，因?yàn)榭股貢?huì)殺死乳酸菌，A錯(cuò)誤。1.(2022·湖北卷，14)廢水、廢料經(jīng)加工可變廢為寶。某工廠利用果糖生產(chǎn)廢水和沼氣池廢料生產(chǎn)蛋白質(zhì)的技術(shù)路線如圖所示。下列敘述正確的是()A.該生產(chǎn)過(guò)程中，一定有氣體生成B.微生物生長(zhǎng)所需碳源主要來(lái)源于沼氣池廢料C.該生產(chǎn)工藝?yán)梦⑸飬捬醢l(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)蛋白質(zhì)D.沼氣池廢料和果糖生產(chǎn)廢水在加入反應(yīng)器之前需要滅菌處理答案A解析據(jù)圖可知，該生產(chǎn)過(guò)程中有釀酒酵母的參與，酵母菌呼吸作用會(huì)產(chǎn)生二氧化碳，故該生產(chǎn)過(guò)程中，一定有氣體生成，A正確；糖類(lèi)是主要的能源物質(zhì)，微生物生長(zhǎng)所需的碳源主要來(lái)源于果糖生產(chǎn)廢水，B錯(cuò)誤；分析圖示可知，該技術(shù)中有連續(xù)攪拌反應(yīng)器的過(guò)程，該操作可以增加微生物與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的接觸面積，此外也可增大溶解氧含量，故據(jù)此推測(cè)該生產(chǎn)工藝?yán)梦⑸锏挠醒醢l(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)蛋白質(zhì)，C錯(cuò)誤；沼氣生產(chǎn)利用的是厭氧微生物，在連續(xù)攪拌反應(yīng)器中厭氧微生物會(huì)被抑制，因此沼氣池廢料無(wú)需滅菌，D錯(cuò)誤。2.(2023·浙江1月選考，19)某同學(xué)想從泡菜汁中篩選耐高鹽乳酸菌，進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)：取泡菜汁樣品，劃線接種于一定NaCl濃度梯度的培養(yǎng)基，經(jīng)培養(yǎng)得到了單菌落。下列敘述正確的是()A.培養(yǎng)基pH需偏堿性 B.泡菜汁需多次稀釋后才能劃線接種C.需在無(wú)氧條件下培養(yǎng) D.分離得到的微生物均為乳酸菌答案C解析因?yàn)槿樗峋?jīng)過(guò)無(wú)氧呼吸會(huì)產(chǎn)生乳酸，故其生活的環(huán)境是酸性的，培養(yǎng)基pH需偏酸性，A錯(cuò)誤；多次劃線能起到稀釋的作用，泡菜汁無(wú)需多次稀釋，B錯(cuò)誤；乳酸菌是厭氧型微生物，只能在無(wú)氧條件下培養(yǎng)，C正確；泡菜汁中還有酵母菌等其他雜菌，因此分離得到的微生物還有其他菌，D錯(cuò)誤。3.(2021·重慶卷，25)人類(lèi)很早就能制作果酒，并用果酒進(jìn)一步發(fā)酵生產(chǎn)果醋。(1)人們利用水果及附著在果皮上的________菌，在18～30℃、無(wú)氧條件下釀造果酒；利用乙酸菌在________條件下，將酒精轉(zhuǎn)化成乙酸釀得果醋。釀造果醋時(shí)，得到了乙酸產(chǎn)率較高的醋酸菌群，為進(jìn)一步純化獲得優(yōu)良醋酸菌菌種，采用的接種方法是________。(2)先釀制果酒再生產(chǎn)果醋的優(yōu)勢(shì)有________(多選，填編號(hào))。①先釀制果酒，發(fā)酵液能抑制雜菌的生長(zhǎng)，有利于提高果醋的產(chǎn)率②釀制果酒時(shí)形成的醋酸菌膜，有利于提高果醋的產(chǎn)率③果酒有利于溶出水果中的風(fēng)味物質(zhì)并保留在果醋中(3)果酒中的酒精含量對(duì)果醋的乙酸產(chǎn)率會(huì)產(chǎn)生一定的影響。某技術(shù)組配制發(fā)酵液研究了初始酒精濃度對(duì)乙酸含量的影響，結(jié)果見(jiàn)下圖。該技術(shù)組使用的發(fā)酵液中，除酒精外還包括的基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有________(填寫(xiě)兩種)。據(jù)圖可知，乙酸發(fā)酵的最適初始酒精濃度是________；酒精濃度為10%時(shí)乙酸含量最低，此時(shí)，若要盡快提高乙酸含量，可采取的措施有_________________________________________________________________________________________________________________________(填寫(xiě)兩個(gè)方面)。答案(1)酵母30～35℃、有氧稀釋涂布平板法(或平板劃線法)(2)①②③(3)氮源、無(wú)機(jī)鹽、水(任寫(xiě)兩種)5%～7%(或6%)通入無(wú)菌空氣，適當(dāng)提高溫度等(合理即可)解析(1)釀酒時(shí)人們利用的是果皮上天然的酵母菌進(jìn)行發(fā)酵，醋酸菌發(fā)酵果醋的條件為30～35℃、有氧。純化菌種采用平板劃線法或稀釋涂布平板法。(2)釀制果酒需要缺氧、呈酸性的環(huán)境，使大部分微生物無(wú)法生長(zhǎng)，可以提高產(chǎn)品的純度和產(chǎn)率；果酒釀制過(guò)程中表面形成的醋酸菌膜，是醋酸菌大量繁殖形成的，醋酸菌增多，有利于提高果醋的產(chǎn)率；果酒有利于溶出水果中的風(fēng)味物質(zhì)并保留在果醋中。(3)發(fā)酵液也相當(dāng)于醋酸菌的培養(yǎng)基，要為醋酸菌的生長(zhǎng)提供碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽，酒精可以作為碳源，還需要有氮源、水和無(wú)機(jī)鹽。從柱狀圖中可看出，當(dāng)初始酒精濃度為5%～7%(或6%)時(shí)乙酸含量最高，故最適初始酒精濃度為5%～7%(或6%)。酒精濃度為10%時(shí)，可以根據(jù)醋酸菌的好氧性通入無(wú)菌空氣或適當(dāng)提高溫度等來(lái)加大產(chǎn)率。限時(shí)強(qiáng)化練(時(shí)間：40分鐘)【對(duì)點(diǎn)強(qiáng)化】考點(diǎn)一傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用1.(2021·湖南卷，3)中國(guó)的許多傳統(tǒng)美食制作過(guò)程蘊(yùn)含了生物發(fā)酵技術(shù)。下列敘述正確的是()A.泡菜制作過(guò)程中，酵母菌將葡萄糖分解成乳酸B.饅頭制作過(guò)程中，酵母菌進(jìn)行呼吸作用產(chǎn)生CO2C.米酒制作過(guò)程中，將容器密封可以促進(jìn)酵母菌生長(zhǎng)D.酸奶制作過(guò)程中，后期低溫處理可產(chǎn)生大量乳酸菌答案B解析在泡菜制作過(guò)程中，乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸，A錯(cuò)誤；在饅頭制作過(guò)程中，酵母菌進(jìn)行細(xì)胞呼吸產(chǎn)生CO2，從而使饅頭變得松軟，B正確；在米酒制作過(guò)程中，將容器密封的目的是讓酵母菌進(jìn)行無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精，將容器密封不利于酵母菌生長(zhǎng)，C錯(cuò)誤；在酸奶制作過(guò)程中，后期低溫處理的目的是抑制微生物的生長(zhǎng)，延長(zhǎng)保質(zhì)期，D錯(cuò)誤。2.(2021·山東卷，12)葡萄酒的制作離不開(kāi)酵母菌。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A.無(wú)氧條件下酵母菌能存活但不能大量繁殖B.自然發(fā)酵制作葡萄酒時(shí)起主要作用的菌是野生型酵母菌C.葡萄酒的顏色是葡萄皮中的色素進(jìn)入發(fā)酵液形成的D.制作過(guò)程中隨著發(fā)酵的進(jìn)行發(fā)酵液中糖含量增加答案D解析酵母菌是兼性厭氧菌，既可以進(jìn)行有氧呼吸(徹底的氧化分解，釋放大量的能量，有利于酵母菌的繁殖)，又可以進(jìn)行無(wú)氧呼吸(釋放少量能量，產(chǎn)生酒精和二氧化碳)，A正確；自然發(fā)酵制作葡萄酒的菌種主要來(lái)自葡萄皮表面的野生型酵母菌，B正確；制作的葡萄酒的顏色來(lái)自葡萄皮中的色素，C正確；隨著發(fā)酵的進(jìn)行，酵母菌進(jìn)行呼吸作用，消耗糖，所以發(fā)酵液中糖含量減少，D錯(cuò)誤。3.(2024·廣東深圳調(diào)研)據(jù)《史記·大宛列傳》記載，張騫奉漢武帝之命，出使西域，看到“宛左右以蒲陶(即葡萄)為酒，富人藏酒至萬(wàn)馀石，久者數(shù)十歲不敗”。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A.選擇新鮮的葡萄釀酒，在榨汁前對(duì)葡萄的處理是先清洗葡萄再去除枝梗B.“久者數(shù)十歲不敗”的原因是酸性、缺氧及含酒精的酒液中，微生物的繁殖受到抑制C.為了提高葡萄汁的出汁率，可在榨汁時(shí)加入果膠酶D.若最終獲得的果酒偏酸，最可能的原因是醋酸菌無(wú)氧發(fā)酵產(chǎn)生了乙酸答案D解析若最終獲得的果酒偏酸，最可能的原因是裝置密閉不嚴(yán)導(dǎo)致空氣進(jìn)入，醋酸菌進(jìn)行有氧發(fā)酵產(chǎn)生了乙酸，D錯(cuò)誤。4.(2024·遼寧大連調(diào)研)白酒是蒸餾酒的一種，蒸餾酒的一般制備過(guò)程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是()eq\a\vs4\al(蒸煮過(guò)的原料,（高粱、稻米）)eq\o(→,\s\up7(曲霉等),\s\do7(糖化作用))葡萄糖等eq\o(→,\s\up7(酵母等),\s\do7(發(fā)酵作用))含乙醇的發(fā)酵物eq\o(→,\s\up7(蒸餾))蒸餾酒A.對(duì)原料進(jìn)行蒸煮的目的之一是利用高溫殺死雜菌B.曲霉與酵母在結(jié)構(gòu)上的主要區(qū)別是有無(wú)成形的細(xì)胞核C.原料經(jīng)糖化作用后可為酵母提供碳源、氮源等營(yíng)養(yǎng)成分D.發(fā)酵作用會(huì)先后經(jīng)歷有氧條件和無(wú)氧條件兩個(gè)階段答案B解析曲霉與酵母都是真菌，都有成形的細(xì)胞核，B錯(cuò)誤。考點(diǎn)二發(fā)酵工程及其應(yīng)用5.(2023·江蘇南通調(diào)研)酸豆角因?yàn)樗岽?、營(yíng)養(yǎng)豐富和能增進(jìn)食欲而成為家常小菜。下圖是家庭制作酸豆角的主要流程，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()豆角去筋后洗凈、晾干→加鹽揉搓至翠綠色→放入泡菜壇、注入涼開(kāi)水→添加適量香辛料和白酒→密閉、腌制1～2周A.豆角的酸脆主要與乳酸菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生乳酸有關(guān)B.“加鹽揉搓至翠綠色”利用了葉綠素能夠溶解于高濃度NaCl溶液的特性C.食材等加入泡菜壇時(shí)不能裝得太滿，以防止壇口雜菌侵入影響產(chǎn)品的品質(zhì)D.加入的食鹽、香辛料、白酒等不僅能增加食品風(fēng)味，也能防止雜菌污染答案B解析制作酸豆角的原理是乳酸菌在無(wú)氧條件下進(jìn)行無(wú)氧呼吸產(chǎn)生乳酸，乳酸使豆角變得酸脆，A正確；“加鹽揉搓至翠綠色”利用了植物細(xì)胞滲透失水的原理，使豆角細(xì)胞的水分減少，而葉綠素易溶于有機(jī)溶劑，B錯(cuò)誤；食材等加入泡菜壇時(shí)不能裝得太滿，以保證鹽水能沒(méi)過(guò)所有菜料，防止雜菌污染影響產(chǎn)品的品質(zhì)，C正確；加入的食鹽、香辛料、白酒等一方面能抑制微生物生長(zhǎng)，防止雜菌污染，另一方面能增加食品風(fēng)味，D正確。6.(2023·江蘇海門(mén)期中)傳說(shuō)杜康的兒子墨塔在一次釀酒時(shí)發(fā)酵過(guò)頭，直至第21天開(kāi)缸時(shí)，發(fā)現(xiàn)酒液已變酸但香氣撲鼻，酸甜可口，于是他結(jié)合“甘一日”和“酉”字，給這種酸水起名為“醋”，下列有關(guān)敘述正確的是()A.釀酒過(guò)程中發(fā)酵液出現(xiàn)的氣體都是在酵母菌細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中產(chǎn)生的B.釀酒時(shí)糖類(lèi)未耗盡，酵母菌的發(fā)酵也會(huì)停止，由pH上升和酒精含量增多導(dǎo)致C.墨塔釀酒反成醋可能是由于發(fā)酵裝置密封不嚴(yán)造成的，若適當(dāng)升溫則醋味更濃D.統(tǒng)計(jì)活酵母菌數(shù)量時(shí)，可用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法，統(tǒng)計(jì)的結(jié)果比實(shí)際數(shù)目低答案C解析酵母菌是兼性厭氧型生物，也可進(jìn)行有氧呼吸，在線粒體基質(zhì)中產(chǎn)生CO2，A錯(cuò)誤；在釀酒的過(guò)程中，糖類(lèi)即使未耗盡，酵母菌的發(fā)酵過(guò)程也會(huì)停止，原因可能是pH降低和酒精含量增多，對(duì)發(fā)酵起抑制作用，導(dǎo)致酵母菌發(fā)酵停止，B錯(cuò)誤；酒變酸是醋酸菌發(fā)酵的結(jié)果，墨塔釀酒反成醋的原因可能是：發(fā)酵裝置密封不嚴(yán)，導(dǎo)致醋酸菌混入發(fā)酵液中，由于果醋發(fā)酵的溫度高于果酒發(fā)酵溫度，故若適當(dāng)升溫則醋味更濃，C正確；用顯微鏡直接計(jì)數(shù)所統(tǒng)計(jì)的菌體是活菌體和死菌體的總和，統(tǒng)計(jì)的結(jié)果比實(shí)際數(shù)目偏多，D錯(cuò)誤。7.(2022·山東卷，14)青霉菌處在葡萄糖濃度不足的環(huán)境中時(shí)，會(huì)通過(guò)分泌青霉素殺死細(xì)菌，以保證自身生存所需的能量供應(yīng)。目前已實(shí)現(xiàn)青霉素的工業(yè)化生產(chǎn)，關(guān)于該生產(chǎn)過(guò)程，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A.發(fā)酵液中的碳源不宜使用葡萄糖B.可用深層通氣液體發(fā)酵技術(shù)提高產(chǎn)量C.選育出的高產(chǎn)菌株經(jīng)擴(kuò)大培養(yǎng)后才可接種到發(fā)酵罐中D.青霉素具有殺菌作用，因此發(fā)酵罐不需嚴(yán)格滅菌答案D解析青霉菌處于葡萄糖濃度不足的環(huán)境中會(huì)通過(guò)分泌青霉素殺死細(xì)菌，因此發(fā)酵液中的碳源不宜使用葡萄糖，A正確；青霉菌的代謝類(lèi)型為異養(yǎng)需氧型，可用深層通氣液體發(fā)酵技術(shù)提高產(chǎn)量，B正確；選育出的高產(chǎn)青霉素菌株經(jīng)擴(kuò)大培養(yǎng)純化后，才可接種到發(fā)酵罐中進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)，C正確；為了防止細(xì)菌、其他真菌等微生物的污染，獲得純凈的青霉素，發(fā)酵罐仍需嚴(yán)格滅菌，D錯(cuò)誤。8.(2024·遼寧遼陽(yáng)模擬)啤酒是以麥芽汁為原料，經(jīng)釀酒酵母發(fā)酵制得的。傳統(tǒng)啤酒釀造過(guò)程中，發(fā)酵在敞開(kāi)式發(fā)酵池中進(jìn)行，麥芽汁中接入酵母后通入大量無(wú)菌空氣，之后會(huì)產(chǎn)生大量氣體翻騰逸出，在麥芽汁表面形成25～30cm厚的氣泡層(泡蓋)，然后停止通氣，進(jìn)入靜止發(fā)酵階段。一段時(shí)間后可得啤酒。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A.用赤霉素溶液浸泡大麥種子可以有效促進(jìn)α－淀粉酶合成，增加麥芽汁中可發(fā)酵糖的含量B.靜止發(fā)酵階段酵母菌主要進(jìn)行無(wú)氧呼吸C.泡蓋的形成是由于酵母菌有氧呼吸產(chǎn)生CO2，能將麥芽汁與空氣隔絕D.麥芽汁僅能為釀酒酵母的發(fā)酵過(guò)程提供碳源和水答案D解析赤霉素能促進(jìn)種子萌發(fā)，制作麥芽汁之前用含有赤霉素的溶液浸泡大麥種子，可以有效促進(jìn)α－淀粉酶合成，將淀粉水解為麥芽糖，進(jìn)而增加麥芽汁中可發(fā)酵糖的含量，A正確；麥芽汁不僅能為釀酒酵母的發(fā)酵過(guò)程提供碳源和水，還能提供氮源、無(wú)機(jī)鹽，D錯(cuò)誤。9.(2024·廣東湛江調(diào)研)發(fā)酵工程在我國(guó)食品工業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)及農(nóng)牧業(yè)等許多領(lǐng)域都得到了廣泛的應(yīng)用。下列相關(guān)敘述正確的是()A.主要利用毛霉水解大豆原料中的蛋白質(zhì)，經(jīng)淋洗后可釀制成醬油產(chǎn)品B.利用酵母菌等發(fā)酵生產(chǎn)的單細(xì)胞蛋白屬于分泌蛋白，可作為食品添加劑C.將病原體的抗原基因轉(zhuǎn)入適當(dāng)?shù)奈⑸锛?xì)胞，可獲得用作疫苗的表達(dá)產(chǎn)物D.利用發(fā)酵工程生產(chǎn)的微生物農(nóng)藥防治病蟲(chóng)害屬于化學(xué)防治答案C解析以大豆為主要原料，利用產(chǎn)生蛋白酶的霉菌(如黑曲霉)，將原料中的蛋白質(zhì)水解成小分子的肽和氨基酸，然后經(jīng)淋洗、調(diào)制后可以釀制成醬油產(chǎn)品，A錯(cuò)誤；用酵母菌等生產(chǎn)的單細(xì)胞蛋白可作為食品添加劑，單細(xì)胞蛋白指的是微生物菌體，不屬于分泌蛋白，B錯(cuò)誤；可以將乙肝病毒的抗原基因轉(zhuǎn)入酵母菌通過(guò)發(fā)酵工程制備乙肝疫苗，C正確；微生物農(nóng)藥是利用微生物或其代謝物來(lái)防治病蟲(chóng)害的，微生物農(nóng)藥是生物防治的重要手段，D錯(cuò)誤。10.(2023·江蘇南通海安期末)下列關(guān)于發(fā)酵工程及其應(yīng)用的敘述，正確的是()A.分離、提純獲得微生物細(xì)胞本身或其代謝產(chǎn)物是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)B.利用黑曲霉水解大豆中的蛋白質(zhì)，經(jīng)過(guò)淋洗、調(diào)制成醬油產(chǎn)品C.利用酵母菌發(fā)酵產(chǎn)生的單細(xì)胞蛋白屬于分泌蛋白，可制成微生物飼料D.利用放線菌產(chǎn)生的井岡霉素防治水稻枯紋病屬于化學(xué)防治答案B解析發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)，發(fā)酵罐培養(yǎng)的環(huán)境條件會(huì)影響微生物的生長(zhǎng)、繁殖，也會(huì)影響微生物代謝產(chǎn)物的形成，A錯(cuò)誤；以大豆為主要原料，利用產(chǎn)生黑曲霉將大豆原料中的蛋白質(zhì)水解成小分子的肽和氨基酸，然后經(jīng)淋洗、調(diào)制可以制成醬油產(chǎn)品，B正確；單細(xì)胞蛋白即微生物菌體，不是微生物的分泌蛋白，C錯(cuò)誤；利用放線菌通過(guò)發(fā)酵工程產(chǎn)生的井岡霉素可以用來(lái)防治水稻枯紋病，這種治理不會(huì)對(duì)環(huán)境造成影響，屬于生物防治，D錯(cuò)誤。【綜合提升】11.(2024·廣東揭陽(yáng)模擬)泡菜古稱菹，是為了利于長(zhǎng)時(shí)間存放而經(jīng)過(guò)發(fā)酵的蔬菜，古法制作用瓷壇密封，安全衛(wèi)生。泡菜制作時(shí)使用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%～20%的鹽水，只要乳酸含量達(dá)到一定的濃度，并使產(chǎn)品隔絕空氣，就可以達(dá)到久貯的目的。下列敘述正確的是()A.乳酸菌不具有耐鹽特性，制作泡菜時(shí)盡量少放食鹽B.泡菜壇使用前需要清洗干凈，并用70%酒精進(jìn)行滅菌處理C.正常乳酸發(fā)酵時(shí)，會(huì)有部分醋酸菌繁殖，以致發(fā)酵液pH下降D.乳酸菌是一種原核生物，可以將糖類(lèi)氧化成乳酸，無(wú)氣體產(chǎn)生答案D解析泡菜制作時(shí)食鹽濃度過(guò)低，可能導(dǎo)致雜菌大量繁殖，故泡菜制作時(shí)使用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%～20%的鹽水為宜，A錯(cuò)誤；70%酒精進(jìn)行的是消毒處理，B錯(cuò)誤；泡菜制作時(shí)需要密封以隔絕空氣，而醋酸菌屬于好氧細(xì)菌，故正常乳酸發(fā)酵時(shí)不會(huì)有醋酸菌繁殖，C錯(cuò)誤；乳酸菌是一種原核生物，在無(wú)氧條件下可以將糖類(lèi)氧化成乳酸，該過(guò)程無(wú)氣體產(chǎn)生，D正確。12.(2024·遼寧大連模擬)《齊民要術(shù)》記載了一種稱為“動(dòng)酒酢(‘酢’同‘醋’)法”的釀醋工藝：“大率酒一斗，用水三斗，合甕盛，置日中曝之。七日后當(dāng)臭，衣(指菌膜)生，勿得怪也，但停置，勿移動(dòng)，撓攪之。數(shù)十日，醋成?！毕铝杏嘘P(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.該方法的原理是醋酸菌在缺少糖源時(shí)可將乙醇最終轉(zhuǎn)化為乙酸B.加水的目的是對(duì)酒進(jìn)行稀釋，避免酒精濃度過(guò)高殺死醋酸菌C.“衣”位于變酸的酒表面，是由原酒中的酵母菌大量繁殖形成的D.撓攪有利于酒精與醋酸菌充分接觸，還可以增加溶液中的溶解氧答案C解析“衣”位于變酸的酒表面，是由醋酸菌大量繁殖形成的，C錯(cuò)誤。13.(2024·山東濱州模擬)我國(guó)制作泡菜歷史悠久。《中饋錄》中記載：“泡鹽菜法，定要覆水壇。此壇有一外沿如暖帽式，四周內(nèi)可盛水；壇口上覆一蓋，浸于水中，使空氣不得入內(nèi)，則所泡之菜不得壞矣。泡菜之水，用花椒和鹽煮沸，加燒酒少許……如有霉花，加燒酒少許。壇沿外水須隔日一換，勿令其干?！毕铝姓f(shuō)法錯(cuò)誤的是()A.“壇口上覆一蓋，浸于水中”有利于保持壇內(nèi)的無(wú)氧環(huán)境B.“泡菜之水，用花椒和鹽煮沸”的目的之一是殺菌C.“霉花”主要由酵母菌增殖形成，酵母菌往往來(lái)自蔬菜D.“壇沿外水須隔日一換，勿令其干”以保證壇內(nèi)適宜濕度答案D解析“壇口上覆一蓋，浸于水中”的目的是阻止空氣進(jìn)入壇內(nèi)，有利于保持壇內(nèi)的無(wú)氧環(huán)境，A正確；“泡菜之水，用花椒和鹽煮沸”的目的包括提升泡菜味道、除去水中氧氣和殺菌，防止雜菌污染，B正確；“霉花”指泡菜的白膜，主要是由蔬菜表面帶有的酵母菌增殖形成的，C正確；“壇沿外水須隔日一換，勿令其干”的目的是阻止空氣進(jìn)入，保持壇內(nèi)的無(wú)氧環(huán)境，D錯(cuò)誤。14.(2024·河北衡水統(tǒng)考)啤酒生產(chǎn)的簡(jiǎn)要流程如圖所示，制麥時(shí)用赤霉素溶液浸泡大麥種子，糖化主要將麥芽中的淀粉等有機(jī)物水解為小分子。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A.在整個(gè)發(fā)酵過(guò)程中，要始終保持嚴(yán)格的無(wú)菌、厭氧環(huán)境B.用赤霉素溶液浸泡大麥種子，目的是促進(jìn)α－淀粉酶合成C.在接種酵母菌前進(jìn)行冷卻處理，是為了避免殺死酵母菌菌種D.包裝后放置的啤酒變酸且產(chǎn)生表面菌膜，一般可從菌膜中分離得到醋酸菌答案A解析酵母菌是兼性厭氧型微生物，在整個(gè)發(fā)酵過(guò)程中，要先通氣使酵母菌大量繁殖，然后保持嚴(yán)格的無(wú)菌、厭氧環(huán)境，使其無(wú)氧呼吸進(jìn)行發(fā)酵，A錯(cuò)誤；包裝后放置的啤酒變酸且產(chǎn)生表面菌膜，一般可從菌膜中分離得到醋酸菌，D正確。15.(2024·廈門(mén)外國(guó)語(yǔ)學(xué)校期中)如圖所示為發(fā)酵工程生產(chǎn)產(chǎn)品的流程圖，據(jù)圖回答：(1)若能生產(chǎn)人生長(zhǎng)激素的工程菌是通過(guò)①培育的，①應(yīng)該是________________；若高產(chǎn)青霉素菌種是通過(guò)②培育的，②應(yīng)該是___________________________。(2)根據(jù)培養(yǎng)基的用途，可以將它們分為_(kāi)_______培養(yǎng)基和________培養(yǎng)基。各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有________________等營(yíng)養(yǎng)成分。培養(yǎng)基在使用之前要用________法進(jìn)行滅菌。(3)整個(gè)過(guò)程的中心環(huán)節(jié)是________，在該時(shí)期要隨時(shí)取樣檢測(cè)培養(yǎng)基中的________等。同時(shí)，要嚴(yán)格控制________________等發(fā)酵條件，因?yàn)榄h(huán)境條件不僅會(huì)影響微生物的生長(zhǎng)繁殖，而且會(huì)影響微生物________的形成。(4)在發(fā)酵過(guò)程中要不斷攪拌的目的是：①_______________________________；②_________________________________________________________________。(5)發(fā)酵產(chǎn)品分離、提純時(shí)要根據(jù)產(chǎn)品的類(lèi)型不同選擇合適的方法。如果發(fā)酵產(chǎn)品是菌體本身，常常采用________等方法分離、提純；如果發(fā)酵產(chǎn)品是微生物的代謝物，還要根據(jù)________采取適當(dāng)?shù)姆椒ǚ蛛x、提純。答案(1)基因工程誘變育種(2)選擇鑒別碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽高壓蒸汽滅菌(濕熱滅菌)(3)發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵微生物數(shù)量、產(chǎn)物濃度溶氧量、pH和溫度代謝物(4)增加溶氧量使菌種與培養(yǎng)液充分接觸，提高原料的利用率(5)過(guò)濾、沉淀產(chǎn)物的性質(zhì)16.(2024·廣東湛江模擬)某小組利用塑料飲水杯、充氧泵、空氣過(guò)濾器、回旋式單向閥、硅膠管等材料制作的一種新型的果酒、果醋兩用發(fā)酵裝置，如下圖。請(qǐng)分析回答：(1)制作果酒和果醋利用的微生物分別是________、________。(2)圖中________和不銹鋼氣泡石能對(duì)發(fā)酵罐中的培養(yǎng)液進(jìn)行充氧操作，________能對(duì)通入的空氣進(jìn)行無(wú)菌過(guò)濾，從而對(duì)發(fā)酵罐中的培養(yǎng)液實(shí)現(xiàn)無(wú)菌換氣。(3)釀制果酒時(shí)一般將溫度控制在________℃，圖示裝置一般要先通氣后緊閉軟管夾，通氣的目的是________________________。若要檢測(cè)果汁發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生，可從出料口取2mL發(fā)酵液加入試管，再滴加0.5mL________溶液，觀察是否呈現(xiàn)________色。(4)圖中排氣構(gòu)件由回旋式單向閥通過(guò)硅膠塞連接于排氣口而成，使用前先在單向閥內(nèi)裝入約1/3體積冷卻的開(kāi)水，這樣處理的主要好處有_______________________________________________________________________(至少答出兩點(diǎn))。答案(1)酵母菌醋酸菌(2)充氧泵空氣過(guò)濾器(3)18～30使酵母菌生長(zhǎng)繁殖酸性重鉻酸鉀灰綠(4)能將發(fā)酵過(guò)程產(chǎn)生的氣體及時(shí)排出發(fā)酵罐；可通過(guò)單向閥中氣泡的生成了解發(fā)酵狀況；能有效隔絕外界空氣對(duì)發(fā)酵介質(zhì)的氧化及外界雜菌的污染；排氣不需要人工控制，使用方便第50講微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用課標(biāo)內(nèi)容(1)闡明在發(fā)酵工程中防止雜菌污染是獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的前提。(2)闡明無(wú)菌技術(shù)是在操作過(guò)程中，保持無(wú)菌物品與無(wú)菌區(qū)域不被微生物污染的技術(shù)。(3)舉例說(shuō)明通過(guò)調(diào)整培養(yǎng)基的配方可有目的地培養(yǎng)某種微生物。(4)概述平板劃線法和稀釋涂布平板法是實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行微生物分離和純化的常用方法。(5)概述稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計(jì)數(shù)法是測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法?？键c(diǎn)一微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)1.培養(yǎng)基的配制(1)培養(yǎng)基的概念、類(lèi)型和用途(2)培養(yǎng)基的配方①主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽。②其他條件：pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和氧氣。如下表：微生物乳酸菌霉菌細(xì)菌厭氧微生物特殊需求添加維生素pH調(diào)至酸性pH調(diào)至中性或弱堿性無(wú)氧2.無(wú)菌技術(shù)(1)目的獲得純凈的培養(yǎng)物。(2)關(guān)鍵防止雜菌污染。(3)常用方法消毒和滅菌。(4)無(wú)菌技術(shù)的主要方法及適用對(duì)象(連一連)3.微生物的純培養(yǎng)(1)概念辨析(2)酵母菌純培養(yǎng)的操作步驟下圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖，請(qǐng)分析并回答下列問(wèn)題：(1)獲得圖A效果和圖B效果的接種方法分別是什么？______________________。(2)某同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成了一片，最可能的原因是什么？應(yīng)當(dāng)怎樣操作才可避免此種現(xiàn)象？___________________________________________________________________。(3)接種操作為什么一定要在火焰附近進(jìn)行？___________________________________________________________________。提示(1)獲得圖A效果的接種方法為稀釋涂布平板法，獲得圖B效果的接種方法為平板劃線法(2)最可能的原因是菌液濃度過(guò)高或劃線時(shí)在劃下一區(qū)域前未將接種環(huán)灼燒滅菌；采取的措施是增大稀釋倍數(shù)或每次劃新區(qū)域前先將接種環(huán)灼燒滅菌(3)火焰附近存在著無(wú)菌區(qū)域1.倒平板的操作步驟①培養(yǎng)基要冷卻到50℃左右時(shí)開(kāi)始倒平板。溫度過(guò)高會(huì)燙手，過(guò)低培養(yǎng)基又會(huì)凝固。②要使錐形瓶的瓶口通過(guò)酒精燈火焰。通過(guò)灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。③倒平板時(shí)，要用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開(kāi)一條稍大于瓶口的縫隙，不要完全打開(kāi)，以免雜菌污染培養(yǎng)基。④平板冷凝后，要將平板倒置。因?yàn)槠桨謇淠?，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，平板倒置后，既可避免培養(yǎng)基表面的水分過(guò)快地?fù)]發(fā)，又可防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。2.平板劃線法操作步驟(1)實(shí)驗(yàn)成功關(guān)鍵點(diǎn)(2)平板劃線法操作中幾次灼燒接種環(huán)的目的考向1結(jié)合培養(yǎng)基的配制和無(wú)菌技術(shù)，考查科學(xué)思維1.(2024·廣東深圳聯(lián)考)某同學(xué)將5個(gè)手指尖在貼有“洗手前”標(biāo)簽的固體培養(yǎng)基上輕輕按一下，然后用肥皂將該手洗干凈，再將5個(gè)手指尖在貼有“洗手后”標(biāo)簽的同種培養(yǎng)基上輕輕按一下。將這兩個(gè)培養(yǎng)皿放入37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后，發(fā)現(xiàn)貼有“洗手后”標(biāo)簽的培養(yǎng)皿中菌落較少。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.這個(gè)實(shí)驗(yàn)中需要進(jìn)行滅菌處理的材料用具有培養(yǎng)皿和培養(yǎng)基等B.“將手指尖在培養(yǎng)基上輕輕按一下”相當(dāng)于微生物培養(yǎng)中的接種C.從實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，洗手后的操作不會(huì)污染培養(yǎng)基D.培養(yǎng)基中的氮元素是微生物合成蛋白質(zhì)、核酸等物質(zhì)所必需的答案C解析從實(shí)驗(yàn)結(jié)果看，貼有“洗手后”標(biāo)簽的培養(yǎng)皿中菌落較少，并不能說(shuō)明洗手后的操作不會(huì)污染培養(yǎng)基，C錯(cuò)誤。2.(2024·西安高新一中模擬)在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物，需要人為地為微生物提供適宜的營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境條件。下列關(guān)于培養(yǎng)基配制的說(shuō)法正確的是()A.培養(yǎng)基中需要碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽齊全B.培養(yǎng)基中必須添加瓊脂C.培養(yǎng)基制備中均需調(diào)節(jié)pH至酸性D.無(wú)論哪種培養(yǎng)基均需要滅菌答案D解析培養(yǎng)固氮微生物時(shí)，培養(yǎng)基中可以不添加氮源，A錯(cuò)誤；只有配制固體(或半固體)培養(yǎng)基時(shí)才需要添加瓊脂，B錯(cuò)誤；適宜的pH是微生物生長(zhǎng)的必需條件，因此配制過(guò)程中需要調(diào)節(jié)pH，培養(yǎng)霉菌時(shí)一般需要將pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至中性或弱堿性，C錯(cuò)誤；培養(yǎng)基均需要滅菌，D正確?？枷?結(jié)合微生物的純培養(yǎng)，考查科學(xué)探究能力3.(2024·東北育才中學(xué)模擬)下列關(guān)于“酵母菌的純培養(yǎng)”實(shí)驗(yàn)的敘述，錯(cuò)誤的是()A.馬鈴薯?yè)v爛后的濾液中含有酵母菌生長(zhǎng)所需的多種營(yíng)養(yǎng)成分B.接種環(huán)滅菌時(shí)，頂端的環(huán)和環(huán)后的部分柄均需通過(guò)火焰灼燒C.平板劃線時(shí)，接種環(huán)應(yīng)在固體培養(yǎng)基表面輕輕地連續(xù)劃線D.完成平板劃線后，應(yīng)將平板立刻倒置培養(yǎng)以免污染培養(yǎng)基答案D解析馬鈴薯?yè)v爛后的濾液中含有酵母菌生長(zhǎng)所需的多種營(yíng)養(yǎng)成分，如碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽等，A正確；接種環(huán)滅菌時(shí)，頂端的環(huán)和環(huán)后的部分柄均需通過(guò)火焰灼燒，防止雜菌的污染，B正確；平板劃線時(shí)，接種環(huán)應(yīng)在固體培養(yǎng)基表面輕輕地連續(xù)劃線，防止劃破培養(yǎng)基表面，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的觀察，C正確；完成平板劃線后，待菌液被培養(yǎng)基吸收，再將平板倒置培養(yǎng)，D錯(cuò)誤。4.(2024·廣州聯(lián)考)為純化菌種，在鑒別培養(yǎng)基上劃線接種分解尿素的細(xì)菌，培養(yǎng)結(jié)果如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.為保證無(wú)菌操作，接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌B.倒平板后需間歇晃動(dòng)，以保證表面平整C.圖中Ⅰ、Ⅱ區(qū)的細(xì)菌數(shù)量均太多，應(yīng)從Ⅲ區(qū)挑取單菌落D.該實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)了單菌落，能達(dá)到菌種純化的目的答案B解析倒平板后無(wú)需晃動(dòng)，B錯(cuò)誤?？键c(diǎn)二微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)1.選擇培養(yǎng)基常見(jiàn)選擇培養(yǎng)基舉例①缺少氮源的培養(yǎng)基可以篩選能利用大氣中N2的微生物。②含青霉素的培養(yǎng)基可淘汰細(xì)菌，篩選出真菌。③無(wú)有機(jī)碳源的培養(yǎng)基可篩選出自養(yǎng)微生物。2.稀釋涂布平板法(1)系列稀釋操作取1mL上清液加入盛有9mL無(wú)菌水的試管中，依次等比稀釋。(2)涂布平板操作3.微生物的數(shù)量測(cè)定(1)利用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)①為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)為30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，并且在同一稀釋度下，應(yīng)至少對(duì)3個(gè)平板進(jìn)行重復(fù)計(jì)數(shù)，并求平均值。②統(tǒng)計(jì)結(jié)果往往比實(shí)際值少。(2)利用顯微鏡直接計(jì)數(shù)①需用特定的細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板。②統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般是活菌數(shù)和死菌數(shù)的總和。4.土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)的實(shí)驗(yàn)操作(1)實(shí)驗(yàn)原理(2)操作步驟(3)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析與評(píng)價(jià)5.分解纖維素的微生物的分離(1)分離方法與原理(2)纖維素分解菌的培養(yǎng)基成分及鑒定原理(1)血細(xì)胞計(jì)數(shù)板既可用于酵母菌的數(shù)量測(cè)定，也可用于細(xì)菌的數(shù)量測(cè)定。(2023·江蘇卷，7D)(×)提示血細(xì)胞計(jì)數(shù)板不適用于微小的細(xì)菌計(jì)數(shù)。(2)某同學(xué)欲分離產(chǎn)脲酶菌，可在選擇培養(yǎng)基中添加尿素作為唯一氮源。(2022·江蘇卷，3B)(√)(3)稀釋涂布平板法和平板劃線法均能得到單菌落，都可用于細(xì)菌計(jì)數(shù)。(2021·浙江6月選考，17C)(×)提示平板劃線法只能用于細(xì)菌分離，不能用于細(xì)菌計(jì)數(shù)。(4)利用尿素固體培養(yǎng)基可迅速殺死其他微生物，而保留利用尿素的微生物。(2020·浙江7月選考，19A)(×)提示尿素固體培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，以尿素為唯一氮源，不能利用尿素的微生物因缺乏可利用的氮源而不能在此培養(yǎng)基上生存，故尿素固體培養(yǎng)基的作用并不是迅速殺死這些微生物。1.為什么只有能分解尿素的微生物才能在尿素固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)？______________________________________________________________________________。提示分解尿素的微生物能合成脲酶，而脲酶可將尿素分解成氨，從而為微生物提供氮源2.在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌的原因是________________________________________________________________________________________。提示生物與環(huán)境具有相互依存關(guān)系，在富含纖維素的環(huán)境中，纖維素分解菌的含量相對(duì)較高，從這種土樣中獲得目的微生物的概率要高于普通環(huán)境3.在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅對(duì)纖維素分解菌進(jìn)行選擇形成透明圈的原因是__________________________________________________________________________________________________________________________________。提示剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物，而當(dāng)纖維素被纖維素分解菌分解后，復(fù)合物就無(wú)法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以這些菌為中心的透明圈考向1結(jié)合微生物的選擇培養(yǎng)，考查科學(xué)思維1.(2024·廣東佛山模擬)野生型大腸桿菌菌株能在基本培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，氨基酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變株無(wú)法合成某種氨基酸，只能在完全培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，下圖為純化某氨基酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變株的部分流程圖，①②③④代表培養(yǎng)基，A、B、C表示操作步驟，D、E為菌落。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.圖中①②④為基本培養(yǎng)基，③為完全培養(yǎng)基B.A操作的目的是提高突變頻率，增加突變株的數(shù)量C.B的正確操作是用涂布器把菌液均勻地涂布在②表面D.經(jīng)C過(guò)程原位影印及培養(yǎng)后，可從④中挑取D進(jìn)行純化培養(yǎng)答案A解析野生型大腸桿菌菌株能在基本培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，氨基酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變株無(wú)法合成某種氨基酸，只能在完全培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，根據(jù)題圖可知，圖中①②④為完全培養(yǎng)基，③為基本培養(yǎng)基，A錯(cuò)誤；紫外線可以提高突變的頻率，從而增加突變株的數(shù)量，B正確；B的正確操作是將菌液滴加到培養(yǎng)基表面，再用涂布器將菌液均勻地涂布在②表面，C正確；從圖中可知，D在基本培養(yǎng)基中無(wú)法生長(zhǎng)，在完全培養(yǎng)基中可生長(zhǎng)，說(shuō)明D是氨基酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變株菌落，故經(jīng)C過(guò)程原位影印及培養(yǎng)后，可從④中挑取D菌落進(jìn)行純化培養(yǎng)，D正確。2.(2024·江西新余調(diào)研)耐高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實(shí)用性。嗜熱菌可以在高溫環(huán)境中生存，其產(chǎn)生的淀粉酶最適溫度較高。篩選能產(chǎn)生耐高溫淀粉酶的嗜熱菌過(guò)程如圖1所示，其中Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基用碘液處理的結(jié)果如圖2所示。下列敘述正確的是()圖1圖2A.圖2中周?chē)伙@藍(lán)色的菌落含有所需菌種B.倒平板后對(duì)培養(yǎng)皿進(jìn)行高壓蒸汽滅菌C.淀粉是圖2所示固體培養(yǎng)基的唯一碳源D.甲、乙試管中均為選擇培養(yǎng)基答案A解析淀粉與碘液反應(yīng)呈現(xiàn)藍(lán)色，能分解淀粉的嗜熱菌在培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí)可釋放淀粉酶，分解培養(yǎng)基中的淀粉，故周?chē)伙@藍(lán)色的菌落含有所需菌種，A正確；倒平板前培養(yǎng)皿和培養(yǎng)基都已滅菌處理，因此倒平板后不需要對(duì)培養(yǎng)皿再進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，B錯(cuò)誤；據(jù)圖2可知，培養(yǎng)基上出現(xiàn)周?chē)@藍(lán)色的菌落和周?chē)伙@藍(lán)色的菌落，因此淀粉可能不是圖2所示固體培養(yǎng)基的唯一碳源，C錯(cuò)誤；圖1中①過(guò)程是梯度稀釋，②過(guò)程是用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種，因此甲、乙試管主要是對(duì)嗜熱菌樣品進(jìn)行稀釋，不具備選擇作用，不屬于選擇培養(yǎng)基，D錯(cuò)誤。考向2結(jié)合微生物的分離與計(jì)數(shù)，考查科學(xué)思維3.(2024·河北石家莊調(diào)研)北京冬奧會(huì)食堂讓各國(guó)運(yùn)動(dòng)健兒愛(ài)上中國(guó)味道，其餐余垃圾在垃圾集中點(diǎn)采用生化＋霧化＋膜過(guò)濾技術(shù)處理后，可以達(dá)到無(wú)二次污染的標(biāo)準(zhǔn)。為篩選對(duì)抗生素有抗性、高效降解淀粉的微生物，提高“生化”處理的效率，研究人員將餐余垃圾機(jī)械化處理后加入裝有無(wú)菌水的錐形瓶中制備餐余垃圾浸出液，然后進(jìn)行如圖所示操作，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A.餐余垃圾浸出液在接種前通常需要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌處理B.可用稀釋涂布平板法將餐余垃圾浸出液接種在X培養(yǎng)基上C.X培養(yǎng)基含有淀粉和抗生素，Y培養(yǎng)基是不含瓊脂的液體培養(yǎng)基D.圖中高效降解淀粉的微生物是⑤，可根據(jù)菌落特征初步判斷微生物類(lèi)型答案A解析若對(duì)餐余垃圾浸出液進(jìn)行高壓蒸汽滅菌會(huì)殺死菌種，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗，A錯(cuò)誤；微生物的接種方法包括稀釋涂布平板法和平板劃線法，可用稀釋涂布平板法將餐余垃圾浸出液接種在X培養(yǎng)基上，B正確；結(jié)合題意可知，本實(shí)驗(yàn)的目的是篩選對(duì)抗生素有抗性、高效降解淀粉的微生物，故圖中X培養(yǎng)基以淀粉為唯一碳源，且應(yīng)添加抗生素起選擇作用；Y培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基，進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，其中不含凝固劑瓊脂，C正確；淀粉遇碘變藍(lán)色，加入碘液后，能夠分解淀粉的菌落周?chē)霈F(xiàn)透明圈，圖中能高效降解淀粉的微生物是⑤(透明圈最大)，不同微生物形成的菌落特征不同，可根據(jù)菌落特征初步判斷微生物類(lèi)型，D正確。4.(2024·廣東湛江模擬)自生固氮菌是土壤中能獨(dú)立進(jìn)行固氮的細(xì)菌?？蒲腥藛T進(jìn)行了土壤中自生固氮菌的分離和固氮能力測(cè)定的研究，部分實(shí)驗(yàn)流程如圖。已知步驟④獲得的3個(gè)平板的菌落數(shù)分別為90、95、100，對(duì)照組平板為0。下列相關(guān)敘述正確的是()A.步驟②振蕩20min的目的是擴(kuò)大菌種數(shù)量，屬于選擇培養(yǎng)B.步驟④→⑤使用接種環(huán)劃線接種，使用前需要灼燒滅菌C.1g土壤中平均自生固氮菌數(shù)約為9.5×106個(gè)D.所用培養(yǎng)基應(yīng)加入碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、水和瓊脂答案C解析步驟②需充分振蕩的主要目的是使土壤中的微生物充分釋放到無(wú)菌水中，A錯(cuò)誤；由題圖可知，步驟⑤平板中的菌落分布均勻，故步驟④→⑤所用的接種工具是涂布器，接種方法是稀釋涂布平板法，B錯(cuò)誤；1g土壤中平均自生固氮菌數(shù)約為(90＋95＋100)/3÷0.1×104＝9.5×106(個(gè))，C正確；本實(shí)驗(yàn)需要分離的自生固氮菌可以利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈矗仕门囵B(yǎng)基中不能加入氮源，D錯(cuò)誤。兩種純化細(xì)菌的方法的比較項(xiàng)目平板劃線法稀釋涂布平板法純化原理通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面。經(jīng)數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離得到單菌落將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。稀釋度足夠高時(shí)，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單菌落主要步驟平板劃線操作系列稀釋操作和涂布平板操作接種工具接種環(huán)涂布器平板示意圖1.(2023·江蘇卷，7)下列關(guān)于細(xì)菌和酵母菌實(shí)驗(yàn)的敘述正確的是()A.通常酵母菌培養(yǎng)基比細(xì)菌培養(yǎng)基有更高的碳氮比B.通常細(xì)菌的生長(zhǎng)速度比酵母菌快，菌落比酵母菌菌落大C.通常細(xì)菌培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌法滅菌，酵母菌培養(yǎng)基用過(guò)濾除菌法除菌D.血細(xì)胞計(jì)數(shù)板既可用于酵母菌的數(shù)量測(cè)定，也可用于細(xì)菌的數(shù)量測(cè)定答案A解析微生物種類(lèi)不同，所需營(yíng)養(yǎng)物的碳氮比也不同，具有高碳氮比的生物需要高碳氮比的營(yíng)養(yǎng)物，反之則低；酵母菌的碳氮比高于細(xì)菌，所以培養(yǎng)酵母菌的培養(yǎng)基需要更高的碳氮比，A正確；通常細(xì)菌的生長(zhǎng)速度比酵母菌快，但形成的菌落不一定大于酵母菌菌落，這與細(xì)菌種類(lèi)有關(guān)，B錯(cuò)誤；微生物培養(yǎng)基通常都采用高壓蒸汽滅菌法滅菌，C錯(cuò)誤；血細(xì)胞計(jì)數(shù)板適用于酵母菌的計(jì)數(shù)，不適用于微小的細(xì)菌計(jì)數(shù)，D錯(cuò)誤。2.(2023·湖南卷，5)食品保存有干制、腌制、低溫保存和高溫處理等多種方法。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.干制降低食品的含水量，使微生物不易生長(zhǎng)和繁殖，食品保存時(shí)間延長(zhǎng)B.腌制通過(guò)添加食鹽、糖等制造高滲環(huán)境，從而抑制微生物的生長(zhǎng)和繁殖C.低溫保存可抑制微生物的生命活動(dòng)，溫度越低對(duì)食品保存越有利D.高溫處理可殺死食品中絕大部分微生物，并可破壞食品中的酶類(lèi)答案C解析干制能降低食品中的含水量，使微生物不易生長(zhǎng)和繁殖，進(jìn)而延長(zhǎng)食品保存時(shí)間，A正確；腌制通過(guò)添加食鹽、糖等制造高滲環(huán)境，從而抑制微生物的生長(zhǎng)和繁殖，B正確；低溫保存可以抑制微生物的生命活動(dòng)，但不是溫度越低越好，一般食品保存溫度為零上低溫，C錯(cuò)誤；高溫處理可殺死食品中絕大部分微生物，并通過(guò)破壞食品中的酶類(lèi)，降低酶類(lèi)對(duì)食品有機(jī)物的分解，有利于食品保存，D正確。3.(2022·湖北卷，5)滅菌、消毒、無(wú)菌操作是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常見(jiàn)的操作。下列敘述正確的是()A.動(dòng)、植物細(xì)胞DNA的提取必須在無(wú)菌條件下進(jìn)行B.微生物、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染C.為防止蛋白質(zhì)變性，不能用濕熱滅菌法對(duì)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌D.可用濕熱滅菌法對(duì)實(shí)驗(yàn)中所使用的微量離心管、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等進(jìn)行滅菌答案D解析動(dòng)、植物細(xì)胞DNA的提取不需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行，A錯(cuò)誤；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染，保證無(wú)菌環(huán)境，而微生物的培養(yǎng)一般不能加入抗生素，B錯(cuò)誤；一般用濕熱滅菌法對(duì)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，以防止雜菌污染，C錯(cuò)誤；可用濕熱滅菌法對(duì)實(shí)驗(yàn)中所使用的微量離心管、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等進(jìn)行滅菌，以防止雜菌污染，D正確。4.(2023·廣東卷，10)研究者擬從堆肥中取樣并篩選能高效降解羽毛、蹄角等廢棄物中角蛋白的嗜熱菌。根據(jù)堆肥溫度變化曲線(如圖)和選擇培養(yǎng)基篩選原理來(lái)判斷，下列最可能篩選到目標(biāo)菌的條件組合是()A.A點(diǎn)時(shí)取樣、尿素氮源培養(yǎng)基B.B點(diǎn)時(shí)取樣、角蛋白氮源培養(yǎng)基C.B點(diǎn)時(shí)取樣、蛋白胨氮源培養(yǎng)基D.C點(diǎn)時(shí)取樣、角蛋白氮源培養(yǎng)基答案D解析研究目的是篩選能高效降解羽毛、蹄角等廢棄物中角蛋白的嗜熱菌，因此目標(biāo)菌具有既要耐高溫，又要能夠高效降解角蛋白的功能，所以在C點(diǎn)時(shí)取樣，并且用角蛋白氮源培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)，D正確。5.(2022·江蘇卷，3)下列是某同學(xué)分離產(chǎn)脲酶菌的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，不合理的是()A.選擇農(nóng)田或公園土壤作為樣品分離目的菌株B.在選擇培養(yǎng)基中需添加尿素作為唯一氮源C.適當(dāng)稀釋樣品是為了在平板上形成單菌落D.可分解酚紅指示劑使其褪色的菌株是產(chǎn)脲酶菌株答案D解析農(nóng)田或公園土壤中含有較多的含脲酶的微生物，A正確；為了篩選可分解尿素的細(xì)菌，配制的培養(yǎng)基應(yīng)選擇尿素作為唯一氮源，產(chǎn)脲酶的微生物在該培養(yǎng)基上能生長(zhǎng)，B正確；當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，C正確；在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中，細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的pH升高，酚紅指示劑將變紅，因此在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，能對(duì)分離的菌種做進(jìn)一步鑒定，D錯(cuò)誤。6.(2023·山東卷，15)平板接種常用在微生物培養(yǎng)中。下列說(shuō)法正確的是()A.不含氮源的平板不能用于微生物培養(yǎng)B.平板涂布時(shí)涂布器使用前必須進(jìn)行消毒C.接種后未長(zhǎng)出菌落的培養(yǎng)基可以直接丟棄D.利用以尿素為唯一氮源的平板能分離出合成脲酶的微生物答案D解析不含氮源的平板可用于固氮菌的培養(yǎng)，A錯(cuò)誤；平板涂布時(shí)涂布器使用前必須滅菌，B錯(cuò)誤；使用后的培養(yǎng)基即使未長(zhǎng)出菌落也要在丟棄前進(jìn)行滅菌處理，不能直接丟棄，以免污染環(huán)境，C錯(cuò)誤；脲酶可以催化尿素分解，在以尿素為唯一氮源的平板上，能合成脲酶的微生物可以分解尿素獲得氮源而進(jìn)行生長(zhǎng)繁殖，不能合成脲酶的微生物因缺乏氮源而無(wú)法生長(zhǎng)，因此以尿素為唯一氮源的平板能分離出合成脲酶的微生物，D正確。7.(2023·全國(guó)乙卷，37改編)某研究小組設(shè)計(jì)了一個(gè)利用作物秸稈生產(chǎn)燃料乙醇的小型實(shí)驗(yàn)。其主要步驟是：先將粉碎的作物秸稈堆放在底部有小孔的托盤(pán)中，噴水浸潤(rùn)、接種菌T，培養(yǎng)一段時(shí)間后，再用清水淋洗秸稈堆(清水淋洗時(shí)菌T不會(huì)流失)，在裝有淋洗液的瓶中接種酵母菌，進(jìn)行乙醇發(fā)酵(酒精發(fā)酵)。實(shí)驗(yàn)流程如圖所示。回答下列問(wèn)題：(1)在粉碎的秸稈中接種菌T，培養(yǎng)一段時(shí)間后發(fā)現(xiàn)菌T能夠?qū)⒔斩捴械睦w維素大量分解，其原因是________________________________________________。(2)采用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)酵母菌，可以用淋洗液為原料制備培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中還需要加入氮源等營(yíng)養(yǎng)成分，氮源的主要作用是________________(答出1點(diǎn)即可)。(3)將酵母菌接種到滅菌后的培養(yǎng)基中，擰緊瓶蓋，置于適宜溫度下培養(yǎng)、發(fā)酵。擰緊瓶蓋的主要目的是__________________。但是在酵母菌發(fā)酵過(guò)程中，還需適時(shí)擰松瓶蓋，原因是______________________________________________________________。發(fā)酵液中的乙醇可用________________溶液檢測(cè)。(4)本實(shí)驗(yàn)收集的淋洗液中的________可以作為酵母菌生產(chǎn)乙醇的原料。與以糧食為原料發(fā)酵生產(chǎn)乙醇相比，本實(shí)驗(yàn)中乙醇生產(chǎn)方式的優(yōu)點(diǎn)是_________________________________________________________________________________。答案(1)菌T能夠產(chǎn)生纖維素酶，纖維素酶可將纖維素分解(2)為酵母菌蛋白質(zhì)合成提供原料(3)為酵母菌進(jìn)行無(wú)氧呼吸產(chǎn)生乙醇創(chuàng)造無(wú)氧條件乙醇發(fā)酵有CO2產(chǎn)生，擰松瓶蓋可以放出CO2，避免因瓶?jī)?nèi)氣壓過(guò)大引起危險(xiǎn)酸性重鉻酸鉀(4)葡萄糖節(jié)約糧食，實(shí)現(xiàn)了廢物利用解析(1)菌T能夠?qū)⒗w維素變成酵母菌發(fā)酵所需的葡萄糖，利用的是其能夠產(chǎn)生分解纖維素的酶，能夠高效催化纖維素分解。(2)N元素是構(gòu)成體內(nèi)一些物質(zhì)的必需元素，如氨基酸、核苷酸等。(3)擰緊瓶蓋的主要目的是營(yíng)造無(wú)氧條件。酵母菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生乙醇的同時(shí)還會(huì)產(chǎn)生二氧化碳，擰松瓶蓋可以釋放二氧化碳，防止容器壓力過(guò)大引起危險(xiǎn)。酸性條件下重鉻酸鉀溶液可以用來(lái)鑒定乙醇。(4)纖維素分解產(chǎn)生的葡萄糖可以用來(lái)作為發(fā)酵原材料，從社會(huì)責(zé)任感角度和實(shí)際生產(chǎn)角度出發(fā)分析即可，如節(jié)約糧食，生產(chǎn)成本低，實(shí)現(xiàn)了廢物利用，保護(hù)環(huán)境等。限時(shí)強(qiáng)化練(時(shí)間：40分鐘)【對(duì)點(diǎn)強(qiáng)化】考點(diǎn)一微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)1.(2024·東北育才中學(xué))地衣芽孢桿菌具有調(diào)節(jié)動(dòng)物腸道微生態(tài)平衡，增加動(dòng)物機(jī)體抗病能力的功能。仔兔飼喂地衣芽孢桿菌20～40天后，其免疫器官生長(zhǎng)發(fā)育迅速，血漿中T淋巴細(xì)胞值較對(duì)照組高。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.培養(yǎng)地衣芽孢桿菌時(shí)，需要將培養(yǎng)基調(diào)至酸性B.可用液體培養(yǎng)基對(duì)地衣芽孢桿菌擴(kuò)大培養(yǎng)C.使用后的培養(yǎng)基在丟棄前要經(jīng)過(guò)滅菌處理D.地衣芽孢桿菌改變了仔兔腸道菌群的結(jié)構(gòu)答案A解析地衣芽孢桿菌屬于細(xì)菌，其培養(yǎng)基一般呈中性或弱堿性，A錯(cuò)誤；液體培養(yǎng)基可使菌種與培養(yǎng)液更好地接觸，有利于菌種的擴(kuò)大培養(yǎng)，B正確；使用后的培養(yǎng)基在丟棄前要經(jīng)過(guò)滅菌處理，防止對(duì)環(huán)境造成污染，C正確；地衣芽孢桿菌能調(diào)節(jié)動(dòng)物腸道微生態(tài)平衡，改變了仔兔腸道菌群的結(jié)構(gòu)，D正確。2.(2024·山東濰坊模擬)金黃色葡萄球菌是一種常見(jiàn)的病原菌，在血平板(完全培養(yǎng)基中添加適量血液)上生長(zhǎng)時(shí)，可破壞菌落周?chē)募t細(xì)胞，使其褪色。某研究小組通過(guò)稀釋涂布平板法測(cè)定了某處土壤中金黃色葡萄球菌數(shù)量，相關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A.從功能上分類(lèi)，血平板屬于選擇培養(yǎng)基B.在制作血平板時(shí)需要在平板冷卻后加入血液，防止高溫破壞血細(xì)胞C.待涂布的菌液被培養(yǎng)基吸收后應(yīng)倒置培養(yǎng)，防止水分過(guò)度蒸發(fā)D.實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低答案A解析根據(jù)題干信息可知，血平板屬于鑒別培養(yǎng)基，A錯(cuò)誤。3.(2024·成都七中診斷)下圖為微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的有關(guān)操作，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.步驟①中，需將接種工具灼燒至變紅，以殺滅雜菌B.步驟②中，將接種工具冷卻時(shí)不宜距酒精燈火焰太遠(yuǎn)C.圖中接種方法的目的是使菌種逐漸稀釋，經(jīng)培養(yǎng)后獲得單個(gè)菌落D.接種后應(yīng)將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)，培養(yǎng)后可以根據(jù)結(jié)果進(jìn)行微生物計(jì)數(shù)答案D解析步驟①中，接種前灼燒接種環(huán)至變紅，目的是殺滅接種環(huán)上可能引起污染的微生物，A正確；步驟②中，將接種工具冷卻時(shí)不宜距酒精燈火焰太遠(yuǎn)，防止受到雜菌污染，B正確；圖中所示的接種方法是平板劃線法，目的是使接種的菌種逐漸稀釋，經(jīng)培養(yǎng)后獲得由單個(gè)菌體繁殖而來(lái)的菌落，C正確；圖示的平板劃線法不能用于微生物的計(jì)數(shù)，D錯(cuò)誤。4.(2024·漯河高中質(zhì)檢)下圖為實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)和純化酵母菌過(guò)程中的部分操作步驟，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A.①步驟使用的培養(yǎng)基是已經(jīng)滅菌的培養(yǎng)基B.①②③步驟操作時(shí)需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行C.③到④的過(guò)程中，接種環(huán)共灼燒了5次D.④步驟操作時(shí)，不能將第1區(qū)和第5區(qū)的劃線相連答案C解析接種環(huán)在每次劃線前和接種結(jié)束后都要通過(guò)灼燒來(lái)滅菌，所以③到④的過(guò)程中5次劃線操作前都要灼燒滅菌，接種結(jié)束后還需灼燒滅菌1次，防止造成污染，由此可見(jiàn)，③到④的過(guò)程中共需灼燒接種環(huán)6次，C錯(cuò)誤?？键c(diǎn)二微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)5.(2024·安徽淮北調(diào)研)平板劃線法和稀釋涂布平板法是分離并純化微生物的常用方法。下列相關(guān)敘述正確的是()A.平板劃線法分離微生物前一般需要將菌液進(jìn)行梯度等比稀釋B.細(xì)菌的純化培養(yǎng)通常比霉菌需要更高的溫度和更少的培養(yǎng)時(shí)間C.使用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的微生物數(shù)量是活菌和死菌的總和D.接種后的平板放置在搖床上倒置培養(yǎng)，防止雜菌的污染答案B解析平板劃線法分離微生物前一般不需要將菌液進(jìn)行梯度等比稀釋，A錯(cuò)誤；細(xì)菌的培養(yǎng)溫度一般為30～37℃，霉菌的培養(yǎng)溫度一般為25～28℃，B正確；使用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的微生物數(shù)量是活菌的數(shù)量，不包括死菌的數(shù)量，C錯(cuò)誤；接種后的平板放置在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，防止雜菌的污染，倒置培養(yǎng)的目的是防止皿蓋上的冷凝水滴落到平板表面，同時(shí)也能防止培養(yǎng)基中水分過(guò)快揮發(fā)，D錯(cuò)誤。6.(2024·江蘇南京、鹽城模擬)為了解病原微生物對(duì)四種抗生素的敏感程度，某研究小組進(jìn)行了相關(guān)藥敏實(shí)驗(yàn)，圖1為部分實(shí)驗(yàn)器材。將含有相同濃度的抗生素Ⅰ～Ⅳ四個(gè)大小相同的紙片分別貼在長(zhǎng)滿測(cè)試菌的平板上，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2。下列相關(guān)敘述正確的是()A.為獲得長(zhǎng)滿測(cè)試菌的平板，需要使用圖1中器材①②③B.圖2中Ⅱ形成的抑菌圈較小，可能是病原微生物對(duì)藥物較敏感C.圖2抑菌圈中的菌落可能是在抗生素Ⅳ作用下產(chǎn)生了突變株D.不同抗生素在平板上的擴(kuò)散速度不同會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果答案D解析為獲得長(zhǎng)滿測(cè)試菌的瓊脂平板，需要采用稀釋涂布平板法，該方法需要使用圖1中①酒精燈(操作需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行，酒精燈對(duì)涂布器進(jìn)行灼燒滅菌)、④涂布器和③培養(yǎng)基，②為接種環(huán)(接種工具)，是平板劃線法接種時(shí)需要使用的接種工具，用平板劃線法不能獲得長(zhǎng)滿測(cè)試菌的平板，A錯(cuò)誤；圖2中Ⅱ處透明圈最小，說(shuō)明此處微生物對(duì)該藥物敏感度最低，B錯(cuò)誤；突變株的出現(xiàn)不是在抗生素的作用下產(chǎn)生的，抗生素只能起選擇作用，C錯(cuò)誤。7.(2024·山東煙臺(tái)模擬)養(yǎng)殖業(yè)中常用的土霉素(一種抗生素)在畜禽類(lèi)糞便和污水中的殘留量較高?？蒲腥藛T欲篩選一種能高效降解土霉素的菌株，以解決養(yǎng)殖業(yè)廢棄物中土霉素含量超標(biāo)問(wèn)題。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.制備培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)先滅菌后定容再倒平板B.篩選時(shí)隨轉(zhuǎn)接次數(shù)的增加，土霉素的用量也應(yīng)逐步增加C.利用稀釋涂布平板法測(cè)得的高效降解土霉素菌株的密度較實(shí)際值低D.若計(jì)數(shù)時(shí)平板上菌落過(guò)于密集，則應(yīng)該進(jìn)一步提高稀釋的倍數(shù)答案A解析制備培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)先定容再滅菌，滅菌后定容容易導(dǎo)致培養(yǎng)基污染，A錯(cuò)誤。8.(2024·河北邢臺(tái)調(diào)研)屠宰場(chǎng)廢棄血污不經(jīng)過(guò)處理直接排放，會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染。傳統(tǒng)的處理方法有填埋法和焚燒法等。填埋法易造成地表環(huán)境、地下水資源污染。焚燒法處理會(huì)造成大氣污染，且廢棄物中所含的蛋白質(zhì)資源不能得到有效利用。研究人員以屠宰場(chǎng)血污堆積土壤為分離基質(zhì)，利用血平板培養(yǎng)基(添加了動(dòng)物血液)，分離出了高效降解血紅蛋白的菌株，并初步用于降解廢棄血液，生產(chǎn)氨基酸液態(tài)肥料。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.題述菌株分離純化過(guò)程中用到了稀釋涂布平板法和平板劃線法B.菌株培養(yǎng)后進(jìn)行計(jì)數(shù)，只能采用稀釋涂布平板法C.血平板培養(yǎng)基上透明水解圈大的菌落分泌的蛋白酶的活性往往較高D.利用該菌株降解廢棄血液可在保護(hù)環(huán)境的同時(shí)實(shí)現(xiàn)資源的可持續(xù)利用答案B解析菌株培養(yǎng)后進(jìn)行計(jì)數(shù)，除了采用稀釋涂布平板法外，還可以用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法，B錯(cuò)誤?！揪C合提升】9.(2024·山東棗莊模擬)如圖所示，自來(lái)水經(jīng)濾膜過(guò)濾后，轉(zhuǎn)移到牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上，適宜條件下培養(yǎng)48h，染色后統(tǒng)計(jì)變色菌落數(shù)目為165。下列說(shuō)法正確的是()A.若培養(yǎng)基含伊紅—亞甲基藍(lán)，大腸桿菌菌落呈藍(lán)綠色B.自來(lái)水中大腸桿菌濃度是33(個(gè)·L－1)，比真實(shí)值大C.為了提高準(zhǔn)確度，需設(shè)重復(fù)實(shí)驗(yàn)，但不用空白對(duì)照D.若培養(yǎng)基菌落數(shù)目大于300，可適當(dāng)減少自來(lái)水量答案D解析若培養(yǎng)基含伊紅—亞甲基藍(lán)，大腸桿菌菌落呈深紫色，有金屬光澤，A錯(cuò)誤；自來(lái)水中大腸桿菌濃度是165÷5＝33(個(gè)·L－1)，由于兩個(gè)或多個(gè)大腸桿菌可能長(zhǎng)成一個(gè)菌落，因此比真實(shí)值小，B錯(cuò)誤；為了提高準(zhǔn)確度，需設(shè)重復(fù)實(shí)驗(yàn)，同時(shí)需要設(shè)置空白對(duì)照，C錯(cuò)誤；若培養(yǎng)基菌落數(shù)目大于300，說(shuō)明細(xì)菌數(shù)目較多，可適當(dāng)減少自來(lái)水量，D正確。10.(2024·福州一中質(zhì)檢)對(duì)土壤中分解纖維素的微生物的研究與應(yīng)用，使人們能夠利用秸稈等廢棄物生產(chǎn)酒精，用纖維素酶處理服裝面料等。為了尋求高效降解纖維素的微生物，某科研團(tuán)隊(duì)進(jìn)行了纖維素優(yōu)勢(shì)分解菌的篩選實(shí)驗(yàn)。主要步驟如下：①制備培養(yǎng)基。②纖維素分解菌的分離、純化。取富集培養(yǎng)后的土樣培養(yǎng)液，經(jīng)適當(dāng)稀釋后，移取培養(yǎng)液各0.1mL分別接種到能分別篩選出細(xì)菌、真菌和放線菌的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行分離、純化培養(yǎng)。③纖維素分解菌的初篩。將已經(jīng)純化的菌株接種到同一個(gè)以纖維素為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，使用剛果紅染色法，根據(jù)培養(yǎng)基平板上透明圈直徑(H)與菌落直徑(h)比值的大小，初步篩選出纖維素優(yōu)勢(shì)分解菌。回答下列問(wèn)題：(1)實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物時(shí)，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是_______________________。(2)微生物的接種方法很多，最常用的是平板劃線法和________________。步驟甲和步驟乙是平板劃線操作中的兩個(gè)步驟，步驟甲的操作是將接種環(huán)放在火焰上灼燒，直到接種環(huán)的金屬絲燒紅；步驟乙的操作是將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中，蘸取一環(huán)菌液。從步驟甲至步驟乙的操作過(guò)程中，還需進(jìn)行的操作步驟是___________________________________________________________________。(3)微生物吸收無(wú)機(jī)鹽的作用是____________________________________________________________________________________________(答出兩點(diǎn)即可)。(4)步驟②③中，若將稀釋后且富含多種類(lèi)型微生物的土樣培養(yǎng)液直接涂布于同一個(gè)以纖維素為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，可能導(dǎo)致錯(cuò)過(guò)優(yōu)勢(shì)纖維素分解菌的發(fā)現(xiàn)，原因是__________________________________________________________。(5)接種在培養(yǎng)基上初篩分離得到的4個(gè)菌株的觀察結(jié)果如表。表中H/h的大小與纖維素酶的________有關(guān)。據(jù)表分析，降解纖維素能力最強(qiáng)的菌株是________(填菌株編號(hào))。菌株編號(hào)菌落直徑h/cm透明圈直徑H/cmH/h10.30.93.0020.30.62.0030.31.34.3340.62.03.33答案(1)防止雜菌的污染(2)稀釋涂布平板法在火焰旁冷卻接種環(huán)，并拔出裝有菌液的試管的棉塞，將試管口通過(guò)火焰(3)維持細(xì)胞和生物體的生命活動(dòng)；維持細(xì)胞的酸堿平衡(調(diào)節(jié)滲透壓；組成化合物)(4)不同種類(lèi)型的微生物之間產(chǎn)生種間競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系，生長(zhǎng)相互影響，不利于優(yōu)勢(shì)纖維素分解菌的發(fā)現(xiàn)(合理即可)(5)量與活性3解析(1)實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物時(shí)，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌的污染。(2)微生物的接種方法很多，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。步驟甲和步驟乙是平板劃線操作中的兩個(gè)步驟，步驟甲：將接種環(huán)放在火焰上灼燒，直到接種環(huán)的金屬絲燒紅；然后在火焰旁冷卻接種環(huán)，并拔出裝有菌液的試管的棉塞，將試管口通過(guò)火焰；然后是步驟乙：將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中，蘸取一環(huán)菌液。(3)微生物吸收無(wú)機(jī)鹽的作用是維持細(xì)胞和生物體的生命活動(dòng)；維持細(xì)胞的酸堿平衡等。(5)纖維素酶能將纖維素分解，從而產(chǎn)生透明圈，表格數(shù)據(jù)H與h比值的大小與纖維素酶的量和活性有關(guān)。表中H與h