1、北航生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)院 北京生物醫(yī)學(xué)工程 維普資訊 :/ cqvip 第 卷 第 期 年 月 北 京 生 物 醫(yī)學(xué) 工 程 雙向凝膠 電泳在臨床血漿蛋 白質(zhì)組學(xué)研究中的技術(shù)難點(diǎn)和解決方法羅 小 云 吳 慶 華中 圖 分 類(lèi) 號(hào) 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 文章 編 號(hào) 隨 著 雙 向 電 泳 技 術(shù) 中 固相 化 梯 度 的 發(fā) 明 、 電 噴 霧 質(zhì) 譜 、基 質(zhì)輔 助 激 光 解 析 電 離 飛 行 時(shí) 間 質(zhì) 譜 技 術(shù) 的 應(yīng) 用 ， 蛋 白質(zhì) 組 學(xué) 技 術(shù) 已 經(jīng) 越 來(lái) 越 多 的 應(yīng) 用 于 疾 病 的 研 究 中 。 臨 臨 床 血 漿 蛋 白質(zhì) 組 研 究 的 難 點(diǎn) 漿 蛋 白質(zhì) 組 成

2、分 種 類(lèi) 繁 多 血床蛋 白質(zhì) 組 學(xué) 已經(jīng) 成 為 目前 醫(yī) 學(xué) 研 究 中 的 熱 點(diǎn) 。 血 液 標(biāo) 本 因取 材 簡(jiǎn) 便 、應(yīng) 用 價(jià) 值 高 ， 因此 血 漿 蛋 白質(zhì) 組 學(xué) 最 具 有 應(yīng)用 前 景 ，并 成 為 臨床 蛋 白質(zhì) 組 學(xué) 研 究 中關(guān) 注 的 重 要 問(wèn)題 。 臨床 血 漿 蛋 白質(zhì) 組 學(xué) 主 要 是 采 用 比 較 蛋 白 質(zhì) 組 學(xué) 進(jìn) 行 研 究 ，通 過(guò) 比擬 患 者 和 健 康 人 、疾 病 的 不 同 時(shí) 期 、疾 病 的 不 同類(lèi) 型 的 血 漿 蛋 白 質(zhì) 組 的 表 達(dá) ，在 血 漿 或 血 清 中 篩 選 疾病 相 關(guān) 性 的 蛋 白 、抗

3、 原 、抗 體 或 標(biāo) 志 物 ，對(duì) 于 疾 病 的 血漿 蛋 白質(zhì) 組 不 僅 含 由 肝 臟 、小 腸 等 合 成 的 蛋 白 如 白 蛋 白 ，而 且 包 含 的 免 疫 球 蛋 白 的 種類(lèi) 可 達(dá) 上 千 萬(wàn) 種 。 另 外 ， 疾 病 或 生 理過(guò) 程 中 組 織 釋 放 入 血 的 泄 漏 蛋 白 可 達(dá) 萬(wàn) 多種 ， 以 內(nèi)分 泌 腺 體 等 分 泌 釋 放 入 血 通 過(guò) 血 循 環(huán) 進(jìn) 行 功 能 調(diào) 節(jié) 的各 種 肽 類(lèi) 激 素 ，還 有 細(xì) 菌 感 染 或 寄 生 蟲(chóng) 等 釋 放 入 血 的 外 源性 蛋 白 等 ， 因此 蛋 白種 類(lèi) 極 其 豐 富 。 血 漿 蛋

4、白是 復(fù) 雜 多 樣 的 蛋 白質(zhì) 組 一診 斷 、治 療 的 檢 測(cè) 、預(yù) 后 等 具 有 指 導(dǎo) 意 義 ，為 疾 病 的 病 因 學(xué) 和病 理 生理 、治 療 等 提 供 線(xiàn) 索 。 目前 血 漿 蛋 白 質(zhì) 組 學(xué)在疾 病 研 究 中應(yīng) 用 的 越 來(lái) 越 多 ，如 肺 癌。 胃癌 、前 列 腺 、種 蛋 白 即 可包 含 有 蛋 白 前 體 、剪 切 體 、糖 基 化 、 水解后 肽段 等 多 種形 式 。 同 時(shí) 還 存 在 蛋 白 一蛋 白 復(fù) 合 物 、蛋 白 一糖 類(lèi) 、蛋 白 與 脂 類(lèi) 等 復(fù) 合 物 。 因 此 在 電泳 圖 譜 上 、 同一癌 、乳 癌 、肝 癌 ，卵

5、 巢癌 等 患 者 血 清 中均 發(fā) 現(xiàn) 有 特種 蛋 白 可 表 現(xiàn) 為 多 個(gè) 點(diǎn) ，代 表 蛋 白 的各 種修 飾 體 、亞 基 、 異 的 腫瘤 標(biāo) 志 物 。 在 心 梗 、心 功 能 衰 竭 患 者 中 也 尋 找 到 特肽段 。 同樣 多 個(gè) 蛋 白 點(diǎn) 鑒 定 出 來(lái) 可 能 是 同 一 蛋 白。 因此 增異 的 生物 標(biāo) 志 。 目前雖 然 已 有 基 于 質(zhì) 譜 分 析 的 血 漿 蛋 白 質(zhì) 組學(xué) 的各 種 技 術(shù) ，但 是仍 處 于 初 級(jí) 階 段 。雙 向 凝 膠 電泳 作 為 唯 一 能 同 時(shí) 平 行 進(jìn) 行 大 量 蛋 白復(fù) 合 物 的 定 量 表 達(dá) 檢加 了

6、研 究 的 復(fù) 雜性 和 難 度 ，但 也 提 供 了 研 究 蛋 白 復(fù) 合 物 和 蛋 白 質(zhì)結(jié) 構(gòu) 與 功 能 變 化 的 線(xiàn) 索 。蛋 白 質(zhì) 組 學(xué) 技 術(shù) 對(duì) 于 發(fā) 現(xiàn) 復(fù) 雜 生 物 基 質(zhì) 中特 異 性 蛋 白 的 氨 基 酸 序 列 和 轉(zhuǎn) 錄 后 的調(diào) 節(jié) 是 一 種 敏 感 性 較 高 的 有 效 方 法 。例 如 對(duì) 血 漿 胰 蛋 白 一 抗 酶 同 工 酶 在 正 常 人 和 三 種 不 同 的 胰 蛋 白酶 缺 陷 和 先 一 抗測(cè) 的 技 術(shù) ，仍 是 目前 最 為 廣 泛 研 究 和 應(yīng) 用 的 主 要 技 術(shù) 。 目 前 的 固相 梯 度 蛋 白 電泳 技

7、 術(shù) 改 進(jìn) 了 以 前 兩 性 載 體 電 解 質(zhì) 雙 向凝 膠 電 泳 在 可 重 復(fù) 性 、操 作 性 、分 辨 率 等 方 面 的 缺天 性 糖 基 化 異 常 的 多 肽 序 列 和 糖 基 化 的 特 性 鑒 定 。 此 外血 漿 中 含 有 各 種 鹽 類(lèi) 、電 解 質(zhì) 、糖 類(lèi) 、脂 類(lèi) 、核 苷 酸 、 以 及 代 謝 產(chǎn) 物 等 ，這 些 均 不 利 于 雙 向 電 泳 的 分 離 。含 鹽 過(guò) 多 導(dǎo) 致 蛋 白質(zhì) 條 紋 拖 尾 現(xiàn) 象 。 血 漿 蛋 白質(zhì) 組 含 量 差 異 大 點(diǎn) 。 多 重 窄 范 圍 膠 條 可 提 高 分 辨 率 ，結(jié) 合 樣 品 的 預(yù) 分

8、 離 技 術(shù) ，可 以 分 辨 以 上 個(gè) 蛋 白 常 規(guī) 可 達(dá) 蛋 白 以 及 小 于 的 蛋 白點(diǎn) 。 雙 向 凝 膠 電 泳 不 像 液 相 色譜 質(zhì)譜 鑒 定 那 樣 無(wú) 法 鑒 定 等 電 點(diǎn) 、分 子 量 或 需 要 穩(wěn) 定 同 位 素 標(biāo) 記 進(jìn) 行 定 量 。 雙 向 凝 膠 電 泳 的 另 一 大 優(yōu) 點(diǎn) 是 能同 時(shí) 很 容 易 顯 示 多 種 蛋 白轉(zhuǎn) 錄 后 調(diào) 節(jié) 的 變 化 酸 化 、糖 磷 基 化 、蛋 白 溶 解 。血 漿 蛋 白質(zhì) 組 含 量 差 異 大 ，也 就 是 血 漿 動(dòng) 態(tài) 范 圍很 大 。 高 豐 度 蛋 白濃 度 達(dá) ，低 豐 度 蛋 白如 一

9、 些 細(xì) 胞 因 子 級(jí)等 可 在 ，甚 至 白 蛋 白 、免 疫 球 蛋 白 、轉(zhuǎn) 鐵 蛋 。 白 、纖 維 蛋 白原 、 巨 球 蛋 白 、抗 胰 蛋 白酶 、補(bǔ) 體 一 一 固相 梯 度 的 雙 向凝 膠 電 泳 和 質(zhì) 譜 鑒 定 技 術(shù) 目前 仍是 蛋 白 質(zhì) 組 學(xué) 的 主 要 手 段 。 本 文 對(duì) 基 于 雙 向 凝 膠 電 泳 技 術(shù)片 段 、結(jié) 合 珠 蛋 白等 ，其 含 量 占 血 漿 蛋 白 質(zhì) 組 的 。 更 具 有 臨 床 應(yīng) 用 價(jià) 值 的 低 豐 度 蛋 白僅 約 。 高 豐 度 蛋 白 對(duì) 低 豐 度 蛋 白影 響較 大 ，在 雙 向 凝 膠 電泳 圖 譜 中

10、 可 以 干 擾 低 豐度 蛋 白 的表 達(dá) 和 鑒 別 。 因此 如 何 盡 量 避 免 或 減 少 高 豐 度 蛋 白 的影 響 ，提 高 低 豐 度 蛋 白 的 分 辨 率 是 目前 臨 床 血 漿 蛋的 血 漿 蛋 白 質(zhì) 組 學(xué) 研 究 的 難 點(diǎn) 和 最 新 的 研 究 方 法 進(jìn) 行 闡述 。 基 金 項(xiàng) 目 ： 國(guó) 家 自然 科 學(xué) 基 金 資 助 作 者 單 位 ： 首 都 醫(yī) 科 大 學(xué) 附 屬 北 京 安 貞 醫(yī) 院 血 管 外 科 京 北 白質(zhì) 組 學(xué) 的一 個(gè) 主 要 技 術(shù) 難 點(diǎn) 。 血 漿 雙 向 凝 膠 電 泳 在 樣 品 制 備 和 分 離 方面 常 用 方

11、 法 去 鹽 、去 脂 作 者 簡(jiǎn) 介 ： 羅 小云 一 ，男 ，主 要 從 事 血 管 外 科 臨 床 和 基 礎(chǔ)研 究。 維普資訊 :/ cqvip 第 期雙 向 凝 膠 電 泳 在 臨 床 血 漿 蛋 白質(zhì) 組 學(xué) 研 究 中 的技 術(shù) 難 點(diǎn) 和 解 決 方 法 去鹽 、去 脂 ，增 加 蛋 白 的 溶 解 性 。 樣 品 的 制 備 主 要 包 括 減 少 雜 質(zhì) 影 響 、減 少 蛋 白 酶 的 消 化 作 用 、增 加 蛋 白 的 溶 解 性 。血 漿 經(jīng) 過(guò) 簡(jiǎn) 單 的 裂 解 液 稀 釋 后 ， 即 可 上 樣 電泳 。 但 電泳 前 去 鹽 、去 脂 ，血 漿 蛋 白 的

12、完 全 溶 解 和 解 聚 有 助 于 獲 得 良好 電 泳 圖 譜 。 目前 傳 統(tǒng) 的 方 法 是 在 血 漿 樣 品 中 加 入 的 十二 烷 基 硫 酸 鈉 和 二 硫 蘇 糖醇 蛋 白的 同 時(shí) ，也 有 可 能 非 特 異 性 的 去 除 其 他 一 些 蛋 白 ，因 為 有 許 多 蛋 白在 血 液 中 是 和 白 蛋 白 結(jié) 合 轉(zhuǎn) 運(yùn) 的 ， 因 此 在 利用 時(shí) 必 須 考 慮 所 檢 測(cè) 的 蛋 白 是 否 與 白蛋 白結(jié) 合 ，否 那么 有 可 能 無(wú) 法得 到 目標(biāo) 的蛋 白點(diǎn) 。 預(yù) 分 離 血漿樣品 的預(yù)分 離是 雙 向凝 膠 電泳技 術(shù)提 高 分辨 率 ， 特

13、別 是 檢 測(cè) 低 豐 度 蛋 白 的有 效 方 法 。 血 漿 電 泳 前 樣 品 的 預(yù) 分 離 根據(jù) 蛋 白所 帶 的 離 子 、分 子 大 小 、 以 及 親 和 特 性 先 分成 不 同 的 組 分 ，再 進(jìn) 行 雙 向 電泳 ，有 助 于 蛋 白各 組 分 的 富然 后 加 熱 。 再 行 雙 向 凝 膠 電 泳 ，可 明 顯 改 善 圖 譜 ，增 加 蛋 白 的表 達(dá) 量 。 目前 采 用 該 方 法 的 二 維 凝 膠 電 泳 圖譜 已 建 成 數(shù) 據(jù) 庫(kù) ， 在 網(wǎng) 上 可 以 進(jìn) 行 查 詢(xún) 。 然 可 促 進(jìn) 蛋 白 質(zhì) 的可 溶 性 ，但 是 一 種 強(qiáng) 去 污 雖 劑

14、 ，可 以使 蛋 白充 分 變 性 。 的 負(fù) 離 子 性 可 影 響 樣 品 的 等 電點(diǎn) ，因 此 在 等 電 聚 焦 前 用 兩 性 離 子 或 非 離 子 去 污 劑 將 樣 品 中 應(yīng) 稀 釋 量 濃 度 以下 ， 降低 副作 用 。 質(zhì) 等 比擬 了 血 漿 的 三 氯 乙 酸 、丙 酮 、 氯 仿 醇 、硫 甲酸 銨 和超 濾 的 方 法 。 三 氯 乙 酸 、丙 酮 、超 濾 等 可 更 有 效 的集 ，特 別 適 于 低 豐 度 蛋 白 的分 析 。 多 維 色 譜 預(yù) 分 離 是 將 血 漿 利 用 離 子 交 換 、 分 子 篩 、染 料 配 基 、 凝 結(jié) 素 、金 屬

15、 鰲 合 成 層 析 等 多 種 分 離 方 法 結(jié) 合 在 一 起 ，可 明顯 提 高 蛋 白 的 檢 測(cè) 能 力 。 等 報(bào) 道 采 用 多 維 液 相 色 譜 ，雙 向 凝 膠 電 泳 結(jié) 合 基 質(zhì) 輔 助 激 光 解 析 四 極 桿 飛 行 時(shí) 間 和 離 子 阱 液 相 色 譜 串聯(lián) 質(zhì) 譜 技 術(shù) 對(duì) 病 ， 型 糖 尿 病 、充 血 性 心 力 衰 竭 患 者 的 血 清 標(biāo) 記 物 及 進(jìn) 行 鑒 定 ，鑒 定 出 種 疾 病 血清 中 高 表 達(dá) 的 蛋 白 。其 中 在 病 和 健 收集 蛋 白 和去 鹽 ，硫 酸 銨 能 有 效 的 去 處 白蛋 白 ，但 沉 淀 法喪

16、失 蛋 白較 多 ，此 法 不 常 用 。 此外 可 以 采 用 離 心 超 濾 的 方 法 對(duì) 血 漿 去 鹽 去 脂 分 離 。 這 樣 對(duì)于 蛋 白點(diǎn) 分 離 更 清 晰 ，蛋 白 點(diǎn) 增 加 。 樣 品 加 入 裂 解 液 后 ，應(yīng) 用 分 子 篩 用 離 心 過(guò) 濾 的 方 法 ，將 鹽 、脂 類(lèi) 等 過(guò) 濾 掉 。分 子 篩 的 截 流 分 子 量 應(yīng) 盡 量 小 ，避 免 蛋 白 的 丟 失 。在樣 品制 備 的 過(guò) 程 中 ，有 一 個(gè) 通 用 原 那么 就 是 盡 可 能 簡(jiǎn) 單 ， 重 復(fù)性 好 、最 低 限 度 減 少 蛋 白 的 改 變 ， 以 防 出 現(xiàn) 雙 向 凝

17、膠 電 泳 時(shí) 出 現(xiàn) 人 工 蛋 白點(diǎn) 。 去 除 高 豐 度 蛋 白 康對(duì) 照 的 患 者 血 清 中 中 的 組 分 中 玻 璃 粘 連 蛋 白 性 糖 蛋 白 、脂 蛋 白 、 酸 、 因 子 片 段 、 富 含 組 氨 酸 的 糖 蛋 白 含 量 具 有 區(qū) 別 。 等 采 用 離 子 交 換 和 分 子 篩 層 析 、去 高 豐 度 蛋 白等 方 法 后 等 得 到 個(gè) 組分 ，進(jìn) 行 雙 向凝 膠 電泳 后 得 到 個(gè) 蛋 白點(diǎn) ，有 個(gè) 蛋白被 質(zhì) 譜 鑒 定 。 低 豐 度 蛋 白 的檢 測(cè) 還 可 根 據(jù) 蛋 白質(zhì) 等 電 點(diǎn) 的 不 同 進(jìn) 行樣 品 的制 備 的 另 一

18、 重 要 技 術(shù) 就 是 去 除 高 豐 度 蛋 白。 目 分 離 。等 點(diǎn) 電聚 焦 預(yù) 分 離 血 漿 通 過(guò) 等 點(diǎn) 膜 將 血 漿 離 成 不 同 的組 分 ，結(jié) 合 多種 窄膠 條 電 泳 ，可 明顯 提 高等 電點(diǎn) 相 近 的蛋 白 的分 辨 率 ，特 別 適 合 于 消 除 白蛋 白高 豐 度 的 影 響 。 等 利用 微 量 溶 液 等 電 聚 焦 進(jìn) 行 初 步 分 餾 ，再 行 雙 向 凝 膠 電 泳 ，使 電 泳 的 上 樣 量 至 少 提 高 了 倍 。血 漿 樣 品 的預(yù) 分 離 是 目前 較 先 進(jìn) 的 方 法 ， 缺 點(diǎn) 是 設(shè) 備 要 求 高 ，操 作 復(fù)雜 、

19、耗 時(shí) 。 多重 窄范 圍 膠 條 多重 窄 范 圍 膠 條 可 提 高 雙 向 凝 膠 電 泳 中 低 豐 度 蛋 白的 分 辨 率 。 以往 盡 管 增 加 上 樣 量 和提 高 總 蛋 白 的溶 解 度 能增 加 分 離 時(shí) 的低 豐 度 蛋 白 的 量 ，但 同 時(shí) 增 加 了 高 豐 度 蛋 白 的 負(fù)荷 ，且 造 成 蛋 白 的 疊 加 效 應(yīng) 而 影 響 分 離 ，而 且 血 漿 蛋 白大 部 分 聚 集 在 在 和 等 電點(diǎn) 之 間 。 窄 膠 的 微制 備技 術(shù) 可 以進(jìn) 行 樣 品 的 等 點(diǎn) 聚 焦 更 深 一 步 的 分 離 ，使 用 窄 范 圍 的 膠 條 ，蛋 白

20、的 承 載 能 力 獲 得 了提 高 ， 可 增 加 上 樣 量 ，并 使 圖譜 的分 辨 率 得 到 明 顯 的 改 善 。使 用窄 梯 度 膠 可 放 大分 辨 效 果 ， 確度 可 達(dá) 。 精 此 外 血漿 蛋 白 大 多在 ， ，因 此 采 用 非 線(xiàn) 性 膠 條 可 增 加 圖譜 大 部 分 的分 辨 率 。 而 且 有 條 來(lái) 處 理 極 堿 膠性 蛋 白 。除 了常 規(guī) 應(yīng) 用 的 、 長(zhǎng) 膠 條 ， 目前 已 有 報(bào) 道 成 功 應(yīng) 用 的 膠 條 。 前 可 采 用 染 料 、免 疫 等 多 種 層 析 方 法 去 除 高 豐 度 蛋 白 。 以前 廣泛 采用 染 料 親 和

21、 層 析 去 除 血 漿 或 血 清 中蛋 白 ， 目前 已有 免 疫 親 和 層 析 去 除 白 蛋 白 。 利 用 蛋 白 免 疫 親 和 層 析 柱 吸 附 去 除 免 疫 球 蛋 白 、 。 等 比擬 了幾 種 去除 血 漿 高 豐 度 蛋 白 白蛋 白 免 疫 球蛋 白 、 胰 蛋 白酶 、轉(zhuǎn) 鐵 蛋 白 、結(jié) 合 珠 蛋 白 親 ， 抗 ， 和 基 質(zhì) 包 括 活 性 染 料 、蛋 白 和 ，認(rèn) 為 多 種 多 克 隆 抗 體 是 最 佳 的 方 法 。 采 用 多 種 成 分 的 多 克 隆 抗 體 免 疫 親 和 層 析 ， 去 除 白 蛋 白 、免 疫 球 蛋 白 、轉(zhuǎn) 鐵

22、蛋 白 、結(jié) 合 珠 蛋 白 、 胰 一 抗 蛋 白酶 、血 紅 素結(jié) 合 蛋 白 、 甲狀 腺 素 運(yùn) 載 蛋 白 、 糖 蛋 一 白 、 酸性 糖蛋 白 、 一 球 蛋 白 和 纖 維 蛋 白 原 后 在 雙 向 一 巨 凝 膠 電泳 圖 譜 上 可 至 少 個(gè) 新 的 蛋 白點(diǎn) 得 到 顯 示 。 目前 已 有 多種 商 業(yè) 化 試 劑 盒 用 于 血 漿 蛋 白 樣 品 的 預(yù) 處理 。 公 司 的 多 重 親 和 去 除 系 統(tǒng) 采 用 種 多 克 隆 抗 體 可 去 除 占血 漿 的 白蛋 白 、免 疫 球 蛋 白 、轉(zhuǎn) 鐵 蛋 白 、纖 維 蛋 白 原 、 一一 巨 球 蛋 白等

23、 六 種 主 要 的 高 豐 度 蛋 白 ， 增 加 樣 品 的 上 樣 量 ， 明 顯 提 上下 豐 度蛋 白 的 檢 測(cè) 率 。但 該 方 法 的 缺 陷 是 去 除 白 維普資訊 :/ cqvip 北 京 生 物 醫(yī)學(xué) 工 程第 卷 目前 血漿 蛋 白 雙 向 凝 膠 電 泳 技 術(shù) 大 多 采 用 去 除 高 豐 度蛋 白 、多 維 色譜 預(yù) 分 離 、多 重 窄 范 圍膠 條 等 幾 種 方 法 的 綜合應(yīng) 用 。如 采 用 免 疫 親 和 層 析 去 除 高 豐 度 蛋 白結(jié) 合 離 子 交 換 和 分 子 篩層 析 后 質(zhì) 譜 可 鑒 定 出 血 清 中 小 于 濃 度 的 白介

24、 素 一，組 織 蛋 白酶 、肽 類(lèi) 激 素 等 。 ， ， ： ， ， ， ， ， ： ， ， ， ， ： 展 望 ， ， 一 ， 雖 然 雙 向凝 膠 電 泳 技 術(shù) 仍 有 很 多 局 限 性 ，在 自動(dòng) 化 、 重復(fù) 性 、靈 敏 度 等 還 有 待 于 改 進(jìn) ，但 仍 在 不 斷 的 改 進(jìn) 和 完 善 ，比方 目前 雙 向凝 膠 電 泳 的 定 量 分 析 還 可 采 用 熒 光 著 多 重染 料 著 色來(lái) 比擬 不 同 標(biāo) 本 圖 譜 的 蛋 白差 異 性 表 達(dá) 。 以及 利用 變 性 和 非 變 性 雙 向 凝 膠 電 泳 技 術(shù) 分 析 與 相 結(jié) 合 的 蛋 白等 雙

25、向 凝膠 電泳 一質(zhì) 譜 作 為 蛋 白 質(zhì) 組 學(xué) 中 最 為 直 。 觀(guān) 的 分 離 和鑒 定技 術(shù) ，是 目前 唯 一 能 在 一 張 凝 膠 同 時(shí) 分 離 成 千上 百 個(gè) 蛋 白 的 技 術(shù) 。 隨 著 蛋 白 質(zhì) 組 學(xué) 技 術(shù) 的 發(fā) 展 ，雙 向 凝膠 電 泳 技 術(shù) 將 在 臨 床 血 漿 蛋 白質(zhì) 組 學(xué) 研 究 中發(fā) 揮 重 要的作用。 ， ， ， ， ， ， ： ， ， ， ： ， ， ： ， ， ， ， ： 】 參 考 文 獻(xiàn) ， ， ， ， 一 ， ， ： ： ， ， ： ， ， ， ， ， ， ： ， ， ： ， ： ， ， ， ， ， ， ， ： ， ： ，

26、：， ， ， ， ， ， ， ： ， ， ： ， ， ， ， 【 ： ， ， ，： ， ， ， ， ， ，： ， ， ， ： ， ： ， ， ， ， ： ， ： ， ， ， ， ： ，： ， ， ， ， ， ， ： ， ， ， ， ，： ， ， ， 轉(zhuǎn) 第 頁(yè) 下 維普資訊 :/ cqvip 北 京 生 物 醫(yī)學(xué) 工 程第 卷，由 、 當(dāng) 決 定 ，稱(chēng) 為加 權(quán) 。在 中 ，如 不 考 慮 ， ，有 同 。 、加 權(quán) 程 度 的 圖 像 和 。 、 同時(shí) 加 權(quán) 的 圖像 。 一 定 時(shí) ，如， 小 于 參 考 文 獻(xiàn)張 澤 寶 ，等 醫(yī) 學(xué) 影 像 物 理 學(xué) 北 京 ：人 民 衛(wèi) 生 出 版 社 ： 船 這就是說(shuō) ， 大 的 組 織 有 強(qiáng) 信 號(hào) 亮 ，小 的 組 織 表 現(xiàn)為弱信