2025/10/10版權(quán)所有(C)北京普析通用湖北分公司12025/10/10版權(quán)所有(C)北京普析通用湖北分公司2BeijingPurkinjeGeneralInstrumentCo.,Ltd.紫外可見分光光度計(jì)應(yīng)用與日常維護(hù)2025/10/10版權(quán)所有(C)北京普析通用湖北分公司3簡(jiǎn)單回顧主要部件儀器展示比色皿的沾污問題試樣的光解與防止紫外區(qū)常用溶劑的最短可用波長(zhǎng)測(cè)樣不穩(wěn)定的原因常見的非儀器問題鎢燈、氘燈的更換主要內(nèi)容2025/10/10版權(quán)所有(C)北京普析通用湖北分公司4目的多年的經(jīng)驗(yàn)、教訓(xùn)、體會(huì)與大家交流和共賞適用性強(qiáng)，提高儀器使用者的應(yīng)用水平從客觀視角看待國(guó)產(chǎn)紫外的現(xiàn)狀，正確對(duì)待國(guó)貨。

日常分析對(duì)儀器的性能需求、價(jià)格、后期使用及維護(hù)成本。尖端有距離，但日常分析不需要。

物質(zhì)對(duì)光的吸收是選擇性的，利用被測(cè)物質(zhì)對(duì)某波長(zhǎng)的光的吸收來了解物質(zhì)的特性，這就是光譜法。

測(cè)定被測(cè)物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)的光的吸收強(qiáng)度（吸光度），以波長(zhǎng)為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)作圖，得出該物質(zhì)在測(cè)定波長(zhǎng)范圍的吸收曲線。簡(jiǎn)單回顧2025/10/10版權(quán)所有(C)北京普析通用湖北分公司6物質(zhì)對(duì)光的吸收遵循如下規(guī)律朗伯定律：物質(zhì)對(duì)光的吸收與其厚度成正比比爾定律：物質(zhì)對(duì)光的吸收與其濃度成正比朗伯—比爾定律：朗伯、比定律的結(jié)合以上條件成立的必需條件：濃度適當(dāng)

試樣濃度大多取10μg/ml～100μg/ml（相當(dāng)0.3～0.7Abs左右）為最佳

簡(jiǎn)單回顧2025/10/10版權(quán)所有(C)北京普析通用湖北分公司7紫外-可見分光光度法(ultraviolet-visiblespectrophotometry,UV-VIS)

按所吸收光的波長(zhǎng)區(qū)域不同，分為紫外分光光度法和可見分光光度法，合稱為紫外-可見分光光度法。

它是利用物質(zhì)的分子或離子對(duì)紫外可見波段范圍（150nm到800nm）單色輻射的吸收或反射強(qiáng)度來進(jìn)行物質(zhì)的定性分析、定量分析或結(jié)構(gòu)分析的方法。所依據(jù)的光譜是分子或離子吸收入射光中特定波長(zhǎng)的光而產(chǎn)生的吸收光譜。簡(jiǎn)單回顧紫外-可見分光光度法的特點(diǎn)：

1與其它光譜分析方法相比，其儀器設(shè)備和操作都比較簡(jiǎn)單，費(fèi)用少，分析速度快;2靈敏度高;3

選擇性好;4精密度和準(zhǔn)確度較高;5用途廣泛。

簡(jiǎn)單回顧紫外-可見分光光度計(jì)光源；單色器；吸收池；檢測(cè)器；顯示與數(shù)據(jù)處理；簡(jiǎn)單回顧2025/10/10版權(quán)所有(C)北京普析通用湖北分公司10

在紫外可見分光光度計(jì)中，常用的光源有兩類：熱輻射光源和氣體放電光源

光源

熱輻射光源用于可見光區(qū)，如鎢燈和鹵鎢燈；氣體放電光源用于紫外光區(qū)，如氫燈和氘燈。主要部件2025/10/10版權(quán)所有(C)北京普析通用湖北分公司11

吸收池又稱比色皿或比色杯，按材料可分為玻璃吸收池和石英吸收池

玻璃比色皿不能用于紫外區(qū)。 區(qū)分方法:可用儀器實(shí)測(cè)紫外區(qū)200nm波長(zhǎng)處的吸光度值。吸收池主要部件2025/10/10版權(quán)所有(C)北京普析通用湖北分公司12因比色皿的使用不當(dāng)易導(dǎo)致數(shù)據(jù)重復(fù)性差 角度、位置變化、表面潔凈度、污染程度注意：粘接的比色皿不適合裝濃硫酸、不適合用高于25瓦的超聲波機(jī)清洗吸收池主要部件2025/10/10版權(quán)所有(C)北京普析通用湖北分公司13

檢測(cè)器的作用是檢測(cè)光信號(hào)，并將光信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)?，F(xiàn)今使用的分光光度計(jì)大多采用光電管或光電倍增管作為檢測(cè)器。檢測(cè)器主要部件

1、高檔-紫外可見分光光度計(jì)TU-1950TU-1950紫外可見分光光度計(jì)儀器展示

1、高檔-紫外可見分光光度計(jì)19系列TU-1901/1900紫外可見分光光度計(jì)儀器展示

2、中檔-紫外可見分光光度計(jì)18系列181系列（準(zhǔn)雙光束）/188系列（雙光束）儀器展示

3、普及型-紫外可見分光光度計(jì)T6系列

T6紫外可見分光光度計(jì)儀器展示2025/10/10版權(quán)所有(C)北京普析通用湖北分公司18比色皿的沾污問題重視比色皿的沾污問題的重要性 在日常的分析工作中，許多工作者往往不大重視比色皿的沾污問題。其實(shí)，這個(gè)非常重要。比色皿沾污會(huì)直接嚴(yán)重影響分析測(cè)試的結(jié)果如何鑒別比色皿是否被沾污

肉眼觀察：如果有污點(diǎn)，就應(yīng)清除掉；可用高級(jí)擦鏡紙、軟的黃鼠狼毛筆等柔軟的物質(zhì)擦洗

儀器檢查：光譜掃描方式或光度測(cè)量模式下，設(shè)好參數(shù)(波長(zhǎng)、測(cè)光方式等)；空著儀器的樣池架；蓋上樣品室蓋板、校零；比色皿內(nèi)裝入3/4高度蒸餾水，并正確放入試樣池架內(nèi)，使之處于光路中；掃描或讀數(shù)；根據(jù)參考值分析顯示的結(jié)果以區(qū)分比色皿是否臟污。

參考方法：從光譜長(zhǎng)波至短波，顯示平滑。參考值：400nm以上，應(yīng)小于0.08Abs，從400nm至200nm吸光度平滑上升過渡，200nm應(yīng)小于0.13Abs，如果發(fā)現(xiàn)有超出限象，可以按方法清潔再測(cè)試，各波長(zhǎng)下Abs降至最低可判斷為凈潔。2025/10/10版權(quán)所有(C)北京普析通用湖北分公司19比色皿的沾污問題如何解決比色皿沾污的問題

用洗液清洗：當(dāng)發(fā)比色皿被沾污時(shí)可用洗液清洗。但有些比色皿被沾污用洗液清洗是解決不了問題的。如比色皿被粘著力很強(qiáng)的物質(zhì)沾污（如被木質(zhì)素沾污），或特濃的試樣沾污，并且凝結(jié)在比色皿的通光面上，用洗液清洗是不行的

用超聲波清洗：當(dāng)發(fā)比色皿被沾污時(shí)，可用＜20瓦的玻璃儀器清洗超聲波超洗半小時(shí)，一般都能解決問題。但是要特別注意，不能用大功率超聲波來清洗比色皿，否則，會(huì)損壞比色皿。 此外，還應(yīng)特別注意的是，不能用金屬棒或硬的木棒(如牙簽等)重擦比色皿，否則，也會(huì)損壞比色皿的通光面。還不能用帶易掉毛的工具(如劣質(zhì)紙、劣質(zhì)棉花等)擦拭比色皿的受光面，不要用洗潔精之類的清潔劑。以免影響測(cè)量。2025/10/10版權(quán)所有(C)北京普析通用湖北分公司20注意防止試樣的光解所謂光解，是指試樣在紫外光的照射下會(huì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。

試樣的光解是從事紫外可見分光光度計(jì)的分析工作者會(huì)經(jīng)常碰到的一個(gè)棘手的問題。許多使用者，特別是年輕的分析測(cè)試工作者，因?yàn)槿狈?jīng)驗(yàn)，往往碰到試樣的光解時(shí)，不會(huì)判斷，反而認(rèn)為是儀器不好，去找儀器的問題。結(jié)果事倍功半如何處理有光解的試樣

一般可以采用兩種方法處理；其一，把試樣存放在棕色瓶中保存，因?yàn)樽厣坎煌缸贤夤?，可以防止試樣光解；其二，將存放試樣的瓶子，用黑紙包住，也同樣可防止試樣光解。這兩種方法，都可以有效的解決防止試樣光解的問題。2025/10/10版權(quán)所有(C)北京普析通用湖北分公司21如何判斷被測(cè)試樣有光解現(xiàn)象呢？ 這是年輕的分析工作者們感到棘手的問題；其實(shí)，很好判斷。首先要看規(guī)律；對(duì)同一個(gè)試樣多次測(cè)量，看其吸光度值是否都是向同一個(gè)方向變化；例如:在多次測(cè)試中，吸光度值從第一次到最后一次測(cè)試的數(shù)據(jù)都是一直在減小，或一直在增大，這就可能是光解現(xiàn)象所引起的，即試樣可能有光解。如果不是向同一個(gè)方向變化，在多次測(cè)試中，吸光度值有時(shí)增大，有時(shí)減小，就可以肯定不是光解所致，應(yīng)另找原因；如果多次測(cè)試的數(shù)據(jù)是向同一個(gè)方向變化，這時(shí)，可將試樣倒進(jìn)比色皿中，放在比色皿架上，蓋好樣品室蓋，作一次測(cè)試后，不要把試樣取出來；而將樣品室的光路用文獻(xiàn)卡片擋住，待半小時(shí)后取去文獻(xiàn)卡，再重復(fù)測(cè)試多次；如果試樣有光解特性，其測(cè)試的數(shù)據(jù)就會(huì)不變。如果試樣沒有光解，而是其它原因使測(cè)試數(shù)據(jù)不穩(wěn)定，則測(cè)試的數(shù)據(jù)仍然會(huì)不斷在變化。這時(shí)分析測(cè)試工作者，應(yīng)再找不穩(wěn)定的原因。注意防止試樣的光解2025/10/10版權(quán)所有(C)北京普析通用湖北分公司22紫外區(qū)常用溶劑的最短可用波長(zhǎng)

溶劑nm溶劑nm溶劑nm溶劑nm二硫化碳380四氯化碳265乙醚220二甲替甲酰胺270丙酮330甲酸甲脂260乙腈2151,2-二氧乙烷230吡啶305乙酸、乙脂260乙醇210對(duì)二氧六環(huán)220四氯乙烯290氯仿245正乙烷220乙酸正丁脂260甲苯285二氯甲烷235異丙醇210異辛烷<210苯280甘油220甲醇210甲基環(huán)已烷21096%硫酸210環(huán)已烷<210正丁烷2102,2,4-三甲戊烷215水<2102025/10/10版權(quán)所有(C)北京普析通用湖北分公司23測(cè)樣不穩(wěn)定和不準(zhǔn)確的原因市電不穩(wěn)

如：大功率用電器的啟停(空調(diào)、烘箱、大型電機(jī)、電爐等)比色皿的原因 如：紫外區(qū)錯(cuò)用玻璃比色皿；臟污；比色皿質(zhì)量差；操作原因 如：參數(shù)設(shè)置不當(dāng)；樣池架設(shè)置不當(dāng)；比色皿放置傾斜、晃動(dòng)；取放比色皿方向不豎直，用力過大使樣池架挪位等。樣品自身的問題 如：空白值過大、樣品濃度過高，超出動(dòng)態(tài)線性范圍；試劑等被污染或純度不高；有氣泡；樣品顯色在變化，未穩(wěn)定；有懸浮或沉淀物；見光分解；揮發(fā)、溶劑使用不當(dāng)?shù)拳h(huán)境影響 如：溫度、濕度、粉塵、電場(chǎng)、磁場(chǎng)、振動(dòng)等影響儀器自身或PC機(jī)的原因

如：光源及光學(xué)器件、電路、機(jī)械、計(jì)算機(jī)病毒等2025/10/1024常見的非儀器問題自檢時(shí)提示樣品池電機(jī)項(xiàng)失敗，或有常異響聲； 樣品室內(nèi)放置有干燥劑或雜物，造成機(jī)械卡住。自檢時(shí)提示光源電機(jī)項(xiàng)失??； 樣池架類型設(shè)置錯(cuò)誤(樣品池類型與使用樣池?cái)?shù)的區(qū)別)、自檢時(shí)樣品池架內(nèi)放有比色皿或其它物件擋了光、光源未點(diǎn)亮或老化、損壞等。自檢時(shí)提示鎢燈能量低或提示氘燈能量低； 同上一條原因自檢時(shí)提示氘燈能量高 附件類型設(shè)置錯(cuò)誤(非積分球附件錯(cuò)設(shè)置成積分球)2025/10/10版權(quán)所有(C)北京普析通用湖北分公司25鎢燈、氘燈的更換鎢燈座鎢燈座固定釘光源反射鏡氘燈卡子氘燈鎢燈鎢燈固定釘入射狹縫

注意：在更換氘燈及鎢燈時(shí)注意保護(hù)光源反射鏡鏡 面，禁止觸摸鏡面以及擦拭鏡面。

2025/10/10版權(quán)所有(C)北京普析通用湖北分公司26鎢燈、氘燈的更換鎢燈更換 儀器需要更換鎢燈一般有這幾種情況如:鎢燈不亮、玻璃表面變黃或變黑、燈體漏氣變白等。 儀器的鎢燈設(shè)計(jì)為插座型，鎢燈已套裝在鎢燈座上,出廠前已調(diào)好，更換時(shí)打開光源室，松開2個(gè)鎢燈座固定螺釘，取下鎢燈座。松開鎢燈固定螺釘取下壞鎢燈，將新鎢燈換上并調(diào)整鎢燈，使燈絲中心與鎢燈座底部距離為40mm，之后擰緊鎢燈固定螺釘。 將換