pcr實(shí)驗(yàn)考試題及答案

單項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）1.PCR反應(yīng)的本質(zhì)是？A.DNA復(fù)制B.RNA轉(zhuǎn)錄C.蛋白質(zhì)合成D.細(xì)胞增殖2.PCR反應(yīng)中Taq酶的作用是？A.解開(kāi)雙鏈B.連接引物C.合成DNAD.降解模板3.PCR反應(yīng)的引物一般是？A.DNA雙鏈B.RNA單鏈C.DNA單鏈D.蛋白質(zhì)4.PCR反應(yīng)的溫度循環(huán)不包括？A.95℃B.55℃C.37℃D.72℃5.PCR反應(yīng)體系中不需要的是？A.dNTPB.模板DNAC.葡萄糖D.引物6.下列哪種不是PCR反應(yīng)的緩沖液成分？A.Tris-HClB.MgCl2C.NaClD.SDS7.PCR反應(yīng)中延伸溫度一般是？A.95℃B.55℃C.72℃D.37℃8.用于PCR反應(yīng)的模板可以是？A.基因組DNAB.mRNAC.蛋白質(zhì)D.以上都可以9.PCR反應(yīng)中變性的目的是？A.使引物結(jié)合B.解開(kāi)雙鏈C.合成新鏈D.降解模板10.PCR技術(shù)最早由誰(shuí)發(fā)明？A.穆利斯B.沃森C.克里克D.桑格答案：1.A2.C3.C4.C5.C6.D7.C8.A9.B10.A多項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）1.PCR反應(yīng)體系包括？A.模板DNAB.引物C.Taq酶D.dNTP2.PCR反應(yīng)的基本步驟有？A.變性B.退火C.延伸D.終止3.以下哪些可作為PCR反應(yīng)的引物設(shè)計(jì)原則？A.長(zhǎng)度合適B.特異性強(qiáng)C.避免自身互補(bǔ)D.堿基隨機(jī)分布4.PCR反應(yīng)中可能用到的儀器有？A.PCR儀B.離心機(jī)C.移液器D.顯微鏡5.影響PCR反應(yīng)結(jié)果的因素有？A.模板質(zhì)量B.引物濃度C.Taq酶活性D.反應(yīng)體系pH6.PCR技術(shù)可應(yīng)用于？A.基因克隆B.基因診斷C.物種鑒定D.蛋白質(zhì)表達(dá)7.以下哪些是PCR反應(yīng)的緩沖液作用？A.維持pH穩(wěn)定B.提供離子環(huán)境C.激活Taq酶D.抑制非特異性擴(kuò)增8.PCR反應(yīng)中退火溫度與哪些有關(guān)？A.引物長(zhǎng)度B.引物GC含量C.模板濃度D.Taq酶用量9.用于PCR反應(yīng)的dNTP包括？A.dATPB.dCTPC.dGTPD.dTTP10.PCR反應(yīng)中模板DNA的純度要求包括？A.無(wú)蛋白質(zhì)污染B.無(wú)RNA污染C.無(wú)核酸酶污染D.無(wú)重金屬污染答案：1.ABCD2.ABC3.ABC4.ABC5.ABCD6.ABC7.ABCD8.AB9.ABCD10.ABC判斷題（每題2分，共10題）1.PCR反應(yīng)不需要模板。（）2.Taq酶不耐高溫。（）3.引物的長(zhǎng)度越長(zhǎng)越好。（）4.PCR反應(yīng)只能擴(kuò)增DNA。（）5.變性溫度越高越好。（）6.退火溫度過(guò)低會(huì)導(dǎo)致非特異性擴(kuò)增增加。（）7.PCR反應(yīng)體系中dNTP濃度越高越好。（）8.模板DNA量越多，PCR結(jié)果越好。（）9.PCR技術(shù)可用于檢測(cè)病毒核酸。（）10.PCR反應(yīng)中不需要控制反應(yīng)體積。（）答案：1.×2.×3.×4.√5.×6.√7.×8.×9.√10.×簡(jiǎn)答題（總4題，每題5分）1.簡(jiǎn)述PCR反應(yīng)的基本原理。以模板DNA為模板，通過(guò)高溫變性解開(kāi)雙鏈，引物退火結(jié)合到模板上，Taq酶在適宜溫度下延伸合成新鏈，經(jīng)過(guò)多次循環(huán)擴(kuò)增出大量目的DNA片段。2.PCR反應(yīng)體系中各成分的作用是什么？模板DNA提供擴(kuò)增模板，引物引導(dǎo)擴(kuò)增，Taq酶合成DNA，dNTP提供原料，緩沖液維持反應(yīng)環(huán)境穩(wěn)定。3.影響PCR反應(yīng)結(jié)果的主要因素有哪些？包括模板質(zhì)量、引物設(shè)計(jì)與濃度、Taq酶活性、反應(yīng)溫度、dNTP濃度、緩沖液成分等。4.PCR技術(shù)有哪些應(yīng)用？可用于基因克隆、基因診斷、物種鑒定、疾病診斷、法醫(yī)鑒定、遺傳分析等。討論題（總4題，每題5分）1.如何優(yōu)化PCR反應(yīng)條件以獲得更好結(jié)果？可根據(jù)模板、引物等調(diào)整變性、退火、延伸溫度和時(shí)間，優(yōu)化引物設(shè)計(jì)，控制各成分濃度，選擇合適緩沖液，確保反應(yīng)體系純凈無(wú)雜質(zhì)。2.PCR反應(yīng)中出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增怎么辦？適當(dāng)提高退火溫度，優(yōu)化引物設(shè)計(jì)，減少模板量，調(diào)整緩沖液成分，檢查反應(yīng)體系是否有污染。3.簡(jiǎn)述PCR技術(shù)在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用及意義。用于疾病診斷如檢測(cè)病原體核酸，基因診斷輔