4GB/Txxxxx—202×第3部分：非還原蛋白質(zhì)多肽分析液相色譜質(zhì)譜（LC-MS）法警示：使用本文件的人員應(yīng)有正規(guī)實驗室工作的實踐經(jīng)驗。本文件并未指出所有可能的安全問題。使用者有責任采取適當?shù)陌踩徒】荡胧⒈ＷC符合國家有關(guān)法規(guī)規(guī)定的條件。本文件規(guī)定了非還原蛋白質(zhì)多肽分析液相色譜質(zhì)譜（LC-MS）法測定紡織品中特種動物毛纖維混合物組分（綿羊毛、山羊絨、牦牛絨、羊駝毛、駱駝毛、安哥拉兔毛）的定性定量方法。注1：本方法不適用于產(chǎn)地為吉爾吉斯斯坦和伊朗的山羊絨。非動物毛纖維組分可根據(jù)GB/T2910（所有部分）測定，再將兩部分的結(jié)果結(jié)合起來以確定整體纖維含量。本方法根據(jù)FZ/T01057系列標準基于光學顯微鏡觀察纖維的外觀形態(tài)進行初步的鑒別。本方法不適用于同物種的動物纖維同時出現(xiàn)的情況（如山羊絨和馬海毛的混合物）。注2：此種情況下，定量檢測使用鏡檢法分析（例如GB/T40905（所有部分。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，凡是注日期的引用文件，僅該日期的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T2910.1紡織品-定量化學分析-第一部分：試驗通則（GB/T2910.1-2009，ISO1833-1：2006）GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法（GB/T6682-2008，ISO3696，MOD）GB/T40905紡織品山羊絨、綿羊毛、其他特種動物纖維及其混合物定量分析(GB/T40905.1-2021,GB/T40905.2-2022,ISO17751,MOD)GB/T42699.1-2023紡織品某些動物毛纖維蛋白質(zhì)組定性和定量分析第1部分：還原蛋白質(zhì)多肽分析液相色譜質(zhì)譜（LC-ESI-MS）法3術(shù)語與定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。動物毛纖維animalhairfibre自動物毛囊生長具有多細胞結(jié)構(gòu)、由角蛋白組成的纖維。如綿羊毛、山羊絨、牦牛絨、駱駝毛、安哥拉兔毛等。3.2?？芺ovidae偶蹄目反芻動物，包括絨山羊、綿羊和牦牛。GB/Txxxxx—202×3.3駱駝科camelidae偶趾有蹄類哺乳動物，包括駱駝、羊駝。3.4蛋白質(zhì)protein在生物內(nèi)發(fā)揮重要作用的氨基酸聚合體。3.5多肽peptide由少于50個氨基酸脫水縮合而成的小片段蛋白質(zhì)（3.4）。3.6標記多肽markerpeptide用于鑒別、回收和純化的蛋白質(zhì)（3.4）部分。3.7質(zhì)譜色譜圖masschromatogram特定的核質(zhì)比的色譜圖。3.8總離子流圖totalionchromatogramTIC所有被分離組分產(chǎn)生的質(zhì)譜峰的集合體色譜圖。3.9選擇性離子檢測selectedionmonitoringSIM對選定的某個或數(shù)個特征質(zhì)量峰m/z進行傳輸/檢測的質(zhì)譜圖掃描模式。4縮略語4.1A：峰面積4.2W：混合比例4.3Br：牛科動物纖維比例4.4Cr：駱駝科動物纖維比例4.5ka:羊駝毛或駱駝毛的校正因子4.6kc:山羊絨校正因子4.7kr:安哥拉兔毛校正因子GB/Txxxxx—202×64.8ky:牦牛絨校正因子4.9m/z:質(zhì)核比，m為帶電粒子的質(zhì)量數(shù)，z為帶電粒子電荷數(shù)5原理機械研磨完的纖維不經(jīng)蛋白還原反應(yīng)而直接進行胰蛋白酶消化。所得多肽使用LC-MS進行分析。利用物種特異的標記多肽峰面積計算得到各組分含量。6試劑除非另有說明，在分析中僅使用分析純試劑。6.1丙酮，純度≥99.5%。6.2水，GB/T6682規(guī)定的三級水。6.3碳酸氫銨(NH4HCO3)溶液(25mmol/L)：-197.5mgNH4HCO3，純度≥96%-加水（6.2）溶解至100mL。6.4胰蛋白酶,還原甲基修飾的豬胰蛋白酶，測序級。6.5乙腈，色譜級，純度≥99.8%。6.6甲酸，純度≥98%。6.7胰蛋白酶溶液：-胰蛋白酶(6.4)20μg-0.1%的甲酸（6.6）200μL.7儀器和器具通常實驗室使用的以及某些特殊的儀器如下。7.1加熱罩（套）：用于控制溫度+50℃-150℃。7.2研磨儀：球磨儀，低溫研磨裝置或其他等效設(shè)備，用于將材料制成極細的粉末。7.3膜過濾器：具有0.22um孔徑，PTFE材質(zhì)，用于液體過濾的裝置。7.4恒溫金屬?。河糜趯ξ⒘侩x心管進行37℃加熱。7.5管式混合器：用于微量離心管和LC進樣瓶的渦旋震蕩30min。7.6離心機：具有10000rpm轉(zhuǎn)速。7.7LC-MS：液相色譜質(zhì)譜儀，配電噴霧離子源（ESI），用于檢測200m/z(u)至1500m/z(u)離子的檢測。注u）是原子質(zhì)量單位，SI單位。7.8LC進樣瓶：應(yīng)為玻璃或聚甲基戊烯材質(zhì)。7.9LC柱：十八烷基（C-18）硅膠反相色譜柱。7.10天平：精度至少為0.001g。GB/Txxxxx—202×78試驗步驟8.1樣品準備總體要求是測試樣品要有批次代表性。取樣方法因樣品形式而異。不同種類的樣品取樣制樣相關(guān)術(shù)語應(yīng)與GB2910.1保持一致。8.2初步鑒定去除非纖維物質(zhì)和非動物纖維后，根據(jù)GB/T40905（所有部分使用光學顯微鏡或電鏡根據(jù)纖維的外觀形態(tài)對動物纖維的種類做初步的定性判斷。8.3脫脂洗滌8.3.1將1g纖維放入茄形燒瓶，加入200mL的丙酮（6.1）置于加熱罩上（7.1）回流30min。若樣品干凈此步驟可以省略。纖維的數(shù)量可根據(jù)實際情況調(diào)整。8.3.2將脫脂的纖維從回收燒瓶中取出，置于空氣中晾干。樣品的準備也可選用GB/T42699.1中所述的方法。8.4纖維的粉末化使用研磨儀（7.2）將已晾干的纖維（8.3.2）粉碎至平均長度短于100μm的纖維粉末，用顯微鏡觀察測量以確認。充分混合纖維以獲得具有代表性的樣本。8.5胰蛋白酶酶解8.5.1稱取約20mg的纖維粉末置于離心管中。若稱取的纖維多于20mg，則應(yīng)等比例增加8.5.2中NH4HCO3溶液和8.5.3中胰蛋白酶溶液的用量。8.5.2加入600μLNH4HCO3溶液(6.3）震蕩10~30min。8.5.3加入20μL胰蛋白酶溶液（6.7）37℃孵浴20h至24h。8.5.4使用離心機（7.6）離心3min，取上清蛋白溶解液。使用膜過濾器（7.3）過濾，將液體轉(zhuǎn)移入LC進樣瓶待測。注：也可以使用針筒過濾或是其他過濾方法。8.6多肽標記8.6.1選擇可作為纖維物種分類的多肽標記，詳見附錄A和附錄C。顯微鏡（8.2）初步鑒定和表1可以作為選擇的參考。表1標記肽與可鑒別動物類群的對應(yīng)關(guān)系纖維名稱標記名稱標記名稱標記Cas1Cas2）Yak1Yak2）GB/Txxxxx—202×8兔Ang1Ang2） 8.6.2優(yōu)化LC-MS參數(shù)，使用合成的多肽（附錄A和附錄C中的氨基酸序列）或者純動物纖維提取的多肽進行保留時間的確認。8.7LC-MS檢測8.7.1將5μL樣品注射至LC柱（7.9）。使用含有0.1%甲酸和含0.1%甲酸的乙腈作為流動相，不斷提高乙腈的濃度形成梯度，進行色譜分析。初始濃度為乙腈5%。附錄B中給出了LC參數(shù)的示例。8.7.2在SIM模式操作質(zhì)譜儀。監(jiān)控附錄A和附錄C中所述的選定的標記（優(yōu)先使用后綴1的標記）。附錄B給出了質(zhì)譜參數(shù)的示例。8.7.3積分每個多肽標記的峰面積。當使用目標峰困難時，可以使用附錄A和附錄C中所述的附加多肽標記（后綴2和后綴3)。注：建議必要時使用合成的多肽或者純動物纖維提取的多肽確認更新保留時間。8.8觀察數(shù)據(jù)的有效性評價見附錄C。8.9校正因子的計算8.9.1校正因子由于每種標記多肽來源的蛋白種類不同等原因，標記肽的峰面積與相應(yīng)動物纖維量不一定成正比（見8.9.2）。在這些情況下，應(yīng)通過實驗確定多肽與其他肽的校正因子以量化其混合比例。此外，當分析條件修改時應(yīng)更新校正因子。8.9.2Cas1相較于She1和Yak1的校正因子（kc）8.9.2.1至少分析質(zhì)量比為50%的山羊絨和50%的綿羊毛混合物3次。8.9.2.2根據(jù)每次分析的She1（Ashe1)的峰面積和Cas1（Acas1）的峰面積計算Ashe1/Acas1的值。8.9.2.3山羊絨的校正因子（kc）通過Ashe1/Acas1的平均值計算得到。8.9.3Yak2對She2，She3和Cas2的校正因子（ky）8.9.3.1分析質(zhì)量比為50%的山羊絨和50%的牦牛絨混合物至少3次。8.9.3.2根據(jù)每次分析Cas2（Acas2)的峰面積和Yak2（Ayak2）的峰面積計算Acas2/Ayak2的值。8.9.3.3牦牛絨的校正因子（ky)用Acas2/Ayak2的平均值計算的得到。8.9.4羊駝和駱駝毛的校正因子（ka）8.9.4.1分析質(zhì)量比為50%的羊駝毛（絨）和50%的綿羊毛混合物至少3次。8.9.4.2根據(jù)每次分析Fbv1（Afbv1)的峰面積和Fcm1（Acm1）的峰面積計算Afbv1/Afcm1的值。GB/Txxxxx—202×98.9.4.3羊駝和駱駝毛的校正因子（ka)用Afbv1/Afcm1的平均值計算的得到。見附錄C的例子。8.9.5安哥拉兔的校正因子（kr）8.9.5.1至少分析質(zhì)量比為50%的安哥拉兔毛和50%的綿羊毛混合物3次。8.9.5.2根據(jù)每次分析Fbv1（Afbv1)的峰面積和Ang1（Aang1）的峰面積計算Afbv1/Aang1的值。8.9.5.3安哥拉兔的校正因子（kr）用Afbv1/Aang1的平均值計算的得到。8.10混合比例的計算8.10.1山羊絨，綿羊毛和牦牛絨混合比例的計算使用8.10.2，8.10.3，8.10.4計算混合比例。優(yōu)先使用8.10.2，當峰位置不穩(wěn)定時（8.9.2，8.9.3，8.9.4和8.9.5），可使用8.10.3和8.10.4來計算混合比例。附錄E給出了用于驗證方法的實驗室間重復結(jié)果。8.10.2She1，Cas1，Yak1和Kc的計算使用公式（1）—（3）計算混合比例。Wsheepwool=Ashe1/(Ashe1+kc×Acas1+Ayak1)×100(1)Wcashmere=kc×Acas1/(Ashe1+kc×Acas1+Ayak1)×100(2)Wyak=Ayak1/(Ashe1+kc×Acas1+Ayak1)×100(3)式中Wsheepwool是綿羊毛的混合比例，%；Wcashmer是山羊絨的混合比例，%；Wyak是牦牛絨的混合比例，%；Ashe1是She1的峰面積；Acas1是Cas1的峰面積；Ayak1是Yak1的峰面積。8.10.3She2，She3，Cas2,Yak2和Ky的計算使用公式（4）—（6）計算混合比例。Wsheepwool=(Ashe2+Ashe3)/(Ashe2+Ashe3+Acas2+ky×Ayak2)×100(4)Wcashmere=Acas2/(Ashe2+Ashe3+Acas2+ky×Ayak2)×100(5)Wyak=ky×Acas2/(Ashe2+Ashe3+Acas2+ky×Ayak2)×100(6)其中Wsheepwool是綿羊毛的混合比例，%；Wcashmere是山羊絨的混合比例，%；Wyak是牦牛絨的混合比例，%；Ashe2是She2的峰面積；GB/Txxxxx—202×Ashe3是She3的峰面積；Acas2是Cas2的峰面積；Ayak2是Yak2的峰面積。8.10.4She1,She2,She3,Cas2和Yak1的計算當Ashe1不為0時，使用公式（7）—（10）計算混合比例。Ashe2+3=Ashe2+Ashe3(7)Wsheepwool=1/(1+Acas2/Ashe2+3+Ayak1/Ashe1)×100(8)Wcashmere=(Acas2/Ashe2+3)/(1+Acas2/Ashe2+3+Ayak1/Ashe1)×100(9)Wyak=(Ayak/Ashe1)/(1+Acas2/Ashe2+3+Ayak1/Ashe1)×100(10)式中Wsheepwool是綿羊毛的混合比例，%；Wcashmere是山羊絨的混合比例，%；Wyak是牦牛絨的混合比例，%；Ashe1是She1的峰面積；Ashe2是She2的峰面積；Ashe3是She3的峰面積；Acas2是Cas2的峰面積；Ayak1是Yak1的峰面積；Ashe2+3是She2和She3的面積之和。8.10.5駱駝毛，羊駝毛和安哥拉兔毛的混合計算使用公式（11）—（18）計算混合比例。駱駝，羊駝和安哥拉兔毛的多肽標記可用后綴2的代替后綴1?；旌螦cam1時使用Aalp1,混合Acam2時使用Aalp2。Br=Afbv1/(Afbv1+ka×Afcm1+kr×Aang1)(11)Cr=(ka×Afcm1)/(Afvb1+ka×Afcm1+kr×Aang1)(12)Wangora=(kr×Aang1)/(Afbv1+ka×Afcm1+kr×Aang1)×100(13)Wsheepwool=Br×Wsheepwool(見8.10.1)(14)Wcashmere=Br×Wcashmere(見8.10.1)(15)Wyak=Br×Wyak(見8.10.1)(16)Walpaca=Cr×Aalp1/(Aalp1+Acam1)×100(17)Wcamel=Cr×Acam1/(Aalp1+Acam1)×100(18)式中Br代表?？苿游锩谋壤?；GB/Txxxxx—202×Cr代表駱駝科動物毛的比例；Wangora是安哥拉兔毛的混合比例，%；Wsheepwool是綿羊毛的混合比例，%；Wcashmere是山羊絨的混合比例，%；Wyak是牦牛絨的混合比例，%；Walpaca是羊駝毛的混合比例，%；Wcamel是駱駝毛的混合比例，%；Afbv1是Fbv1的峰面積；Afcm1是Fcm1的峰面積；Aang1是Ang1的峰面積；Aalp1是Alp1的峰面積；Acam1是Cam1的峰面積。具體示例見附錄C。9試驗報告試驗報告應(yīng)至少包括以下內(nèi)容：a)本文件的編號；b)待測樣品描述；c)試驗結(jié)果，包括質(zhì)譜的詳細信息；d)任何偏離本文件的細節(jié)；e)任何觀察到的異?，F(xiàn)象；f)試驗日期。附錄A（資料性）山羊絨、綿羊毛和牦牛絨的多肽標記GB/Txxxxx—202×A.1多肽標記信息-識別的動物種屬，哺乳動物-蛋白質(zhì)，角蛋白，Ⅱ型-氨基酸序列，F(xiàn)AAFIDK-相對分子質(zhì)量，810.43-質(zhì)譜示例，見附錄D圖D.1。A.1.2Fbv1-識別的動物種屬，?？?蛋白質(zhì)，角蛋白，Ⅱ型-氨基酸序列，AQYDDIASR-相對分子質(zhì)量，1037.48-質(zhì)譜示例，見附錄D圖D.1。A.1.3Cas1-識別的動物種屬，山羊-蛋白質(zhì)，角蛋白34，Ⅰ型-氨基酸序列，SDLEAQVESLKEELLFLK-相對分子質(zhì)量，2090.12-質(zhì)譜示例，見附錄D圖D.1。A.1.4She1-識別的動物種屬，綿羊-蛋白質(zhì)，蛋白S100A3-氨基酸序列，Acetyl-ASLLEQALATLVK-相對分子質(zhì)量，1397.97-質(zhì)譜示例，見附錄D圖D.1。-識別的動物種屬，牦牛（牛）-蛋白質(zhì)，蛋白S100A3-氨基酸序列，Acetyl-ASLLEQALATLVR-相對分子質(zhì)量，1425.97GB/Txxxxx—202×-質(zhì)譜示例，見附錄D圖D.1。A.1.6Cas2-識別的動物種屬，山羊-氨基酸序列，YSCQLNQVQSLINVESQLAEIR-相對分子質(zhì)量，2633.36-質(zhì)譜示例，見附錄D圖D.1。-識別的動物種屬，綿羊-氨基酸序列，YSCQLSQVQSLIVNVESQLAEIR-相對分子質(zhì)量，2606.34-質(zhì)譜示例，見附錄D圖D.1。-識別的動物種屬，綿羊-氨基酸序列，YSCQLNQVQSLIVSVESQLAEIR-相對分子質(zhì)量，2606.34-質(zhì)譜示例，見附錄D圖D.1。-識別的動物種屬，牦牛（牛）-氨基酸序列，YSSQLAQVQGLIGNVESQLAEIR-相對分子質(zhì)量，2502.32-質(zhì)譜示例，見附錄D圖D.1。A.2LC-MS分析的多肽標記特點選擇離子LC-MS分析結(jié)果見表A.1.表A.1LC-MS分析的選擇離子標記名稱錐體電壓akV保留時間min使用目的Cmm1406.2227數(shù)據(jù)的可靠性評價Fbv1519.7428?？频亩緾as1697.713223.0山羊絨的定量She1699.993230.6綿羊毛的定量713.993231.0牦牛絨的定量Cas2878.793729.2山羊絨的定量She2869.783729.4綿羊毛的定量She3869.783729.8綿羊毛的定量3725.2牦牛絨的定量bA.3多肽標記的TIC例子圖A.1顯示了表1中合成多肽標記的TIC示例（那些后綴為1的）。LC-MS分析條件如附錄B所示。標引序號說明：T保留時間（min)P1Fbv1P2Cmm1P3Cas1P4She1P5Yak1圖A.1-合成混合多肽標記的TIC圖GB/Txxxxx—202×LC-MS的分析條件B.1總則本章附錄給出了LC-MS分析條件的示例。該條件需經(jīng)使用合成或者純動物纖維提取后的多肽標記調(diào)整優(yōu)化。B.2LC分析條件B.2.1LC柱—反向C18柱—粒徑5μm—柱規(guī)格2.0mm×150mm或等同性能色譜柱。B2.2柱溫，40℃B2.3溶劑—溶劑A,含有0.1%甲酸的水—溶劑B，含有0.1%甲酸的乙腈B.2.4梯度—0-3min無梯度95%A—3-40min,從95%A至40%A—40-42min,從40%A至0%A—42-47min,無梯度0%A—47-49min,0%A至95%A—49-59min,無梯度95%AB2.5流速，0.2mL/minB2.6進樣量，5μLB.3MS分析條件B.3.1毛細管電壓，3.5kVB.3.2離子源溫度，150℃B.3.3干燥氣體溫度，350℃B.3.4載氣流量（N2），50L/hB.3.5干燥氣體流速（N2600L/hB.3.6SIM模式—離子化模式，ESI+GB/Txxxxx—202×—溶劑延遲，0.01s—掃描延遲，0.05s—監(jiān)測離子，見附錄A和附錄C—柱壓，見附錄A和附錄CB.4數(shù)據(jù)的驗證根據(jù)如下判斷標準通過同一各質(zhì)譜途中多肽Cmm1基線噪音和相疊峰的情況來評判質(zhì)譜效果?！擟mm1的峰面積低于基線噪音100倍的時候LC-MS數(shù)據(jù)無效?！敺宓亩嚯臉擞浶∮贑mm1峰面積的0.1%的時候，檢查峰形態(tài)和保留時間。B.5標準曲線圖B.1顯示了山羊絨和綿羊毛混合物定量標曲。混合物中山羊絨和綿羊毛的混合比例從10%-90%。標引序號說明：X山羊絨含量（%）Y計算的山羊絨含量（%）擬合曲線：Y=0.9738X+2.0981決定系數(shù)：R2=0.9859圖B.1-山羊絨與綿羊毛混合物的定量曲線B.6kc計算值從0.85-2.30.（資料性）GB/Txxxxx—202×駱駝絨、羊駝毛和安哥拉兔毛的分析C.1通則用于駱駝絨、羊駝毛和安哥拉兔毛混合物分析的步驟如本章所述。C.2多肽標記信息C.2.1Fcm1-識別的動物物屬，駱駝科-蛋白質(zhì)，角蛋白，Ⅱ型-氨基酸序列，EQYDDIVR-相對分子質(zhì)量，1036.49-質(zhì)譜示例，見圖D.1和附錄D。C.2.2Cam1-識別的動物種屬，駱駝-蛋白質(zhì)，蛋白S100A3-氨基酸序列，Acetyl-TSPLEQALATIISSFQR-相對分子質(zhì)量，1903.01-質(zhì)譜示例，見圖D.1和附錄D。C.2.3Alp1-識別的動物種屬，羊駝-蛋白質(zhì)，蛋白S100A3-氨基酸序列，Acetyl-TSPLEQALATIISSFQR-相對分子質(zhì)量，1903.01-質(zhì)譜示例，見圖D.1和附錄D。C.2.4Ang1-識別的動物種屬，安哥拉（兔）-蛋白質(zhì)，角蛋白，Ⅱ型-氨基酸序列，AQYDDIATR-相對分子質(zhì)量，1051.50-質(zhì)譜示例，見圖D.1和附錄D。C.2.5Cam2-識別的動物種屬，駱駝GB/Txxxxx—202×-蛋白質(zhì)，角蛋白相關(guān)蛋白13-氨基酸序列，SSFDSPTYFSSR-相對分子質(zhì)量，1376.60-質(zhì)譜示例，見圖D.1和附錄D。C.2.6Alp2-識別的動物種屬，羊駝-蛋白質(zhì)，角蛋白相關(guān)蛋白13-氨基酸序列，SSFDSPNYFSSR-相對分子質(zhì)量，1392.60-質(zhì)譜示例，見圖D.1和附錄D。C.2.7Ang2-識別的動物種屬，安哥拉（兔）-氨基酸序列，EVEEWFTTQTEELNK-相對分子質(zhì)量，1881.87-質(zhì)譜示例，見圖D.1和附錄D。C.3LC-MS分析多肽標記特征表C.1-選擇離子LC-MS分析結(jié)果標記名稱錐體電壓akV保留時間min使用意圖Fcm1519.2530駱駝科的定量Cam1952.513732.8駱駝絨的定量Alp1953.503733.3羊駝絨的定量Ang1526.7530安哥拉兔毛的定量Cam1690.8035駱駝絨的定量Alp2693.3035羊駝絨的定量Ang2941.9437安哥拉兔毛的定量C.4多肽標記TIC參考示例圖C.1顯示了表A.1和表C.1中合成多肽標記的TIC示例（那些后綴為1的）。LC-MS分析條件如附GB/Txxxxx—202×錄B所示。注：Fbv1的某些同位素峰會在Fcm1的SIM圖中觀察到，反之亦然。Cam1的某些同位素峰會在Alp1的SIM圖中觀察到，反之亦然。標引序號說明：T保留時間（min)P1Fbv1P2AngelP3Fcm1P4Cmm1P5Cas1P6She1P7Yak1P8Cam1P9Alp1圖C.1-合成混合多肽標記物的TIC圖（資料性）GB/Txxxxx—202×多肽標記的質(zhì)譜圖示例D.1通則圖D.1展示了附錄A和附錄C中純綿羊毛，山羊絨，牦牛絨，駱駝毛，羊駝毛，安哥拉兔毛及其合成混合物的SIM質(zhì)譜圖。LC-MS分析條件如附錄B所述。a)Cmm1-SIM(406.22m/z)質(zhì)譜圖b)Fbv1-SIM(519.74m/z)質(zhì)譜圖c)Cas1-SIM(697.71m/z)質(zhì)譜圖d)She1-SIM(699.99m/z)質(zhì)譜圖GB/Txxxxx—202×e)Yak1-SIM(713.99m/z)質(zhì)譜圖f)Cas2-SIM(878.79m/z)質(zhì)譜圖g)She2,She3-SIM(869.78m/z)質(zhì)譜圖h)Yak2-SIM(835.11m/z)質(zhì)譜圖i)Fcm1-SIM(519.