2025年醫(yī)衛(wèi)類病理學(xué)技術(shù)(中級(jí))專業(yè)知識(shí)-相關(guān)專業(yè)知識(shí)參考題庫含答案解析一、單選題（共35題）1.在組織固定過程中，以下哪種固定劑能使細(xì)胞內(nèi)的糖原保存良好，常用于糖原染色時(shí)的固定？【選項(xiàng)】A.10%中性緩沖甲醛B.Bouin液C.Carnoy液D.戊二醛【參考答案】C【解析】Carnoy液（乙醇-氯仿-冰醋酸混合液）能迅速滲透組織，凝固蛋白質(zhì)并溶解脂類，特別適用于糖原、核酸等物質(zhì)的固定，避免糖原在水中溶解。A選項(xiàng)的甲醛會(huì)使糖原部分溶解；B選項(xiàng)的Bouin液含苦味酸，易導(dǎo)致糖原分解；D選項(xiàng)的戊二醛主要用于電鏡樣本，對(duì)糖原固定效果不佳。2.胃腸道活檢標(biāo)本進(jìn)行HE染色時(shí)，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞核染色模糊，可能的原因是？【選項(xiàng)】A.蘇木素染色時(shí)間過長(zhǎng)B.鹽酸乙醇分化不足C.組織固定不充分D.脫水透明步驟延遲【參考答案】C【解析】組織固定不充分會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)交聯(lián)不足，細(xì)胞結(jié)構(gòu)（尤其是細(xì)胞核）在后續(xù)處理中易降解，造成核染色模糊。A選項(xiàng)會(huì)導(dǎo)致核過染；B選項(xiàng)表現(xiàn)為細(xì)胞核殘留過多染料；D選項(xiàng)主要影響切片透明度，但不直接導(dǎo)致核模糊。3.免疫組化檢測(cè)中，采用檸檬酸鹽緩沖液（pH6.0）進(jìn)行抗原修復(fù)時(shí)，最適合的修復(fù)方法是？【選項(xiàng)】A.酶消化法（如胰蛋白酶）B.微波熱修復(fù)法C.高壓熱修復(fù)法D.室溫孵育法【參考答案】B【解析】微波熱修復(fù)法通過溫和加熱使遮蔽的抗原表位暴露，適用于多數(shù)抗體（如ER、PR等），且檸檬酸鹽緩沖液（pH6.0）是其常用介質(zhì)。A選項(xiàng)適合細(xì)胞間質(zhì)抗原（如膠原）；C選項(xiàng)用于頑固抗原（如Ki-67），但易致組織脫片；D選項(xiàng)無修復(fù)效果。4.制作骨髓穿刺涂片進(jìn)行Wright-Giemsa染色時(shí)，染色偏藍(lán)的可能原因是？【選項(xiàng)】A.染色時(shí)間過短B.緩沖液pH值偏高（>7.2）C.自來水沖洗替代緩沖液D.甲醇固定不充分【參考答案】B【解析】Wright-Giemsa染色依賴pH6.4~6.8的磷酸鹽緩沖液維持染料電離平衡，pH＞7.2時(shí)嗜酸性染料結(jié)合減少，嗜堿性染料（亞甲藍(lán)）顯色增強(qiáng)，導(dǎo)致整體偏藍(lán)。A選項(xiàng)使細(xì)胞著色淺；C選項(xiàng)會(huì)引入堿性自來水干擾pH；D選項(xiàng)導(dǎo)致細(xì)胞脫落或染色不均。5.采用PAS染色法顯示基底膜時(shí)，對(duì)照切片經(jīng)淀粉酶消化后應(yīng)呈現(xiàn)？【選項(xiàng)】A.基底膜陽性變?yōu)殛幮訠.基底膜仍呈陽性C.上皮內(nèi)糖原陽性消失D.膠原纖維陽性增強(qiáng)【參考答案】B【解析】PAS染色中，基底膜陽性反應(yīng)源于糖蛋白（如IV型膠原），其多糖成分不受淀粉酶消化影響，故消化后仍呈陽性。C選項(xiàng)正確描述糖原消化結(jié)果，但與題干無關(guān)；D選項(xiàng)膠原纖維需特殊染色（如Masson）顯示，PAS不特異性標(biāo)記。6.熒光原位雜交（FISH）檢測(cè)HER2基因擴(kuò)增時(shí)，判定陽性的標(biāo)準(zhǔn)是？【選項(xiàng)】A.HER2/CEP17信號(hào)比≥2.0B.HER2基因平均拷貝數(shù)≥4.0C.＞10%細(xì)胞呈簇狀信號(hào)D.HER2蛋白IHC染色3+【參考答案】A【解析】FISH檢測(cè)HER2擴(kuò)增以HER2基因信號(hào)數(shù)與17號(hào)染色體著絲粒（CEP17）信號(hào)數(shù)的比值≥2.0為核心標(biāo)準(zhǔn)。B選項(xiàng)未考慮CEP17多倍體干擾；C選項(xiàng)為輔助判讀特征；D選項(xiàng)屬免疫組化標(biāo)準(zhǔn)，非FISH結(jié)果。7.使用光學(xué)顯微鏡觀察剛果紅染色的淀粉樣物質(zhì)時(shí)，在偏振光下應(yīng)呈現(xiàn)？【選項(xiàng)】A.橘紅色背景，蘋果綠雙折光B.藍(lán)色背景，黃色雙折光C.紅色背景，無折光性D.綠色背景，紅色雙折光【參考答案】A【解析】剛果紅染色后，淀粉樣物質(zhì)在普通光鏡下呈橘紅色，在偏振光下因β折疊結(jié)構(gòu)產(chǎn)生特征性蘋果綠雙折光。B選項(xiàng)為Masson三色染色中膠原的表現(xiàn)；C、D選項(xiàng)不符合淀粉樣物質(zhì)的光學(xué)特性。8.在冷凍切片制作過程中，組織溫度降至多少時(shí)最適宜切片？【選項(xiàng)】A.-4℃至-10℃B.-15℃至-20℃C.-25℃至-30℃D.-35℃至-40℃【參考答案】B【解析】多數(shù)組織在-15℃~-20℃時(shí)達(dá)到最佳硬度平衡：溫度過高（如A選項(xiàng)）會(huì)因組織軟化導(dǎo)致切片壓縮；溫度過低（如C、D選項(xiàng)）則組織脆性增加，易碎裂或成粉末。9.用于顯示神經(jīng)髓鞘的LuxolFastBlue染色法中，分化過度會(huì)導(dǎo)致？【選項(xiàng)】A.髓鞘與背景對(duì)比不清B.髓鞘完全脫色C.神經(jīng)元胞體假陽性著色D.膠原纖維異常染色【參考答案】B【解析】LuxolFastBlue染色后需用鋰碳酸鹽溶液分化至灰質(zhì)背景無色、髓鞘藍(lán)色。分化過度會(huì)使髓鞘染料被完全洗脫，失去特異性著色。A選項(xiàng)為分化不足表現(xiàn)；C、D選項(xiàng)與該染色法無關(guān)。10.在電鏡樣本制備中，鋨酸后固定的主要作用是？【選項(xiàng)】A.增加組織硬度B.保存膜性結(jié)構(gòu)及脂類C.增強(qiáng)核酸染色對(duì)比度D.促進(jìn)重金屬滲透【參考答案】B【解析】鋨酸能與不飽和脂肪酸結(jié)合，穩(wěn)定細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)并賦予電子密度，是電鏡中脂類保存的關(guān)鍵步驟。A選項(xiàng)為戊二醛的功能；C選項(xiàng)需結(jié)合鈾、鉛染色；D選項(xiàng)指脫水前的處理步驟。11.關(guān)于組織固定劑的選擇，下列說法錯(cuò)誤的是：【選項(xiàng)】A.中性甲醛適用于大多數(shù)常規(guī)病理標(biāo)本的固定B.Bouin液對(duì)糖原和脂肪的保存效果較好C.95%乙醇常用于細(xì)胞涂片的快速固定D.戊二醛電鏡標(biāo)本固定后可長(zhǎng)期保存【參考答案】B【解析】1.Bouin液含苦味酸，會(huì)溶解脂肪和部分糖原，不適用于需保留這些成分的標(biāo)本。2.A項(xiàng)正確，中性甲醛是最常用固定劑；C項(xiàng)正確，乙醇是細(xì)胞學(xué)涂片常用固定劑；D項(xiàng)正確，戊二醛適配電鏡標(biāo)本的長(zhǎng)期固定需求。12.HE染色中，分化的關(guān)鍵步驟是：【選項(xiàng)】A.蘇木精染色后水洗B.1%鹽酸乙醇分化C.伊紅染色后脫水D.二甲苯透明【參考答案】B【解析】1.分化指用1%鹽酸乙醇選擇性去除細(xì)胞核過染的蘇木精，控制染色深度。2.A項(xiàng)為中止染色反應(yīng)，C、D與染色強(qiáng)度調(diào)控?zé)o關(guān)。13.PAS染色中，陽性反應(yīng)顯示的組織成分為：【選項(xiàng)】A.膠原纖維B.黏液和糖原C.黑色素顆粒D.網(wǎng)狀纖維【參考答案】B【解析】1.PAS反應(yīng)通過高碘酸氧化糖類產(chǎn)生醛基，與無色品紅結(jié)合顯紫紅色。2.A項(xiàng)用Masson三色染色顯示；C項(xiàng)常用Fontana法；D項(xiàng)用鍍銀染色。14.檢測(cè)細(xì)胞凋亡最特異的方法是：【選項(xiàng)】A.蘇木精-伊紅染色B.TUNEL法C.吉姆薩染色D.免疫組化Bcl-2染色【參考答案】B【解析】1.TUNEL法標(biāo)記DNA斷裂末端，凋亡細(xì)胞呈陽性。2.A、C僅顯示形態(tài)學(xué)變化；D檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白，特異性較低。15.免疫組化染色中，抗原修復(fù)的主要目的是：【選項(xiàng)】A.去除組織內(nèi)源性酶B.暴露被甲醛交聯(lián)掩蓋的抗原表位C.降低非特異性背景染色D.提高組織通透性【參考答案】B【解析】1.甲醛固定導(dǎo)致蛋白交聯(lián)，抗原表位被封閉，需通過加熱或酶解法修復(fù)。2.A項(xiàng)需使用過氧化物酶阻斷劑；C項(xiàng)通過血清封閉實(shí)現(xiàn)；D項(xiàng)需使用Triton等通透劑。16.熒光原位雜交（FISH）技術(shù)主要用于檢測(cè)：【選項(xiàng)】A.蛋白質(zhì)表達(dá)水平B.基因擴(kuò)增與染色體易位C.病原體抗原定位D.細(xì)胞增殖活性【參考答案】B【解析】1.FISH通過熒光標(biāo)記核酸探針與靶DNA雜交，可視化基因異常。2.A項(xiàng)常用免疫組化；C項(xiàng)多用免疫熒光；D項(xiàng)使用Ki-67標(biāo)記。17.組織脫鈣不徹底對(duì)后續(xù)處理的影響是：【選項(xiàng)】A.切片易碎裂B.染色背景加深C.細(xì)胞核著色淺淡D.免疫組化假陰性【參考答案】A【解析】1.鈣鹽殘留使組織硬度不均，切片時(shí)易產(chǎn)生刀痕或碎裂。2.B、C與固定或染色有關(guān)；D由抗原破壞導(dǎo)致，非脫鈣不足引起。18.酶組織化學(xué)染色中，需避光保存的底物是：【選項(xiàng)】A.DAB（二氨基聯(lián)苯胺）B.AEC（3-氨基-9-乙基咔唑）C.BCIP/NBTD.新復(fù)紅【參考答案】B【解析】1.AEC在光照下易氧化分解，需避光保存。2.DAB和BCIP/NBT對(duì)光穩(wěn)定；新復(fù)紅為常規(guī)染料，無避光要求。19.制備冰凍切片時(shí)，組織最佳冷凍溫度是：【選項(xiàng)】A.-10℃B.-20℃C.-40℃D.-80℃【參考答案】B【解析】1.-20℃可快速冷凍組織且避免冰晶過度形成，平衡切片質(zhì)量與操作效率。2.溫度過高（-10℃）冷凍慢，冰晶多；過低（-40℃以下）增加組織脆性。20.微波技術(shù)在病理制片中的應(yīng)用不包括：【選項(xiàng)】A.加速組織脫水B.促進(jìn)免疫組化染色C.快速石蠟包埋D.熱誘導(dǎo)抗原修復(fù)【參考答案】C【解析】1.石蠟包埋需恒溫冷臺(tái)操作，微波無法加速該過程。2.A可通過微波縮短脫水時(shí)間；B、D利用微波熱能增強(qiáng)反應(yīng)效率。21.用于顯示糖原的染色方法是？【選項(xiàng)】A.HE染色B.PAS染色C.蘇丹III染色D.剛果紅染色【參考答案】B.PAS染色【解析】PAS染色（高碘酸-希夫反應(yīng)）是顯示糖原、黏液和基底膜的常用方法，其原理是高碘酸氧化糖原中的乙二醇基生成醛基，醛基與希夫試劑結(jié)合形成紅色沉淀。A選項(xiàng)HE染色是常規(guī)染色，不特染糖原；C選項(xiàng)蘇丹III用于染色脂肪；D選項(xiàng)剛果紅用于淀粉樣物染色。22.組織脫水過程中，下列哪種試劑不能作為脫水劑使用？【選項(xiàng)】A.乙醇B.丙酮C.甲醛D.正丁醇【參考答案】C.甲醛【解析】甲醛是常用的固定劑，而非脫水劑。脫水劑需具備與水互溶并能置換組織中水分的特性。A、B、D選項(xiàng)乙醇、丙酮、正丁醇均為常見脫水劑，其中高濃度乙醇（如95%、100%）為最常用脫水劑。23.免疫組織化學(xué)技術(shù)中，最常用于標(biāo)記抗體的酶是？【選項(xiàng)】A.辣根過氧化物酶（HRP）B.堿性磷酸酶（AP）C.葡萄糖氧化酶D.β-半乳糖苷酶【參考答案】A.辣根過氧化物酶（HRP）【解析】辣根過氧化物酶（HRP）因其穩(wěn)定性高、顯色靈敏度強(qiáng)、底物選擇多樣（如DAB、AEC），成為免疫組化最常用的酶標(biāo)物。B選項(xiàng)堿性磷酸酶次之，多用于雙重染色；C、D選項(xiàng)在免疫組化中應(yīng)用較少。24.電子顯微鏡樣本制備中，鋨酸固定的主要作用是？【選項(xiàng)】A.保護(hù)核酸結(jié)構(gòu)B.交聯(lián)蛋白質(zhì)C.保存脂類結(jié)構(gòu)D.增強(qiáng)組織硬度【參考答案】C.保存脂類結(jié)構(gòu)【解析】鋨酸是電鏡樣本固定關(guān)鍵試劑，能與不飽和脂肪酸結(jié)合，穩(wěn)定細(xì)胞膜等脂類結(jié)構(gòu)，同時(shí)輕微交聯(lián)蛋白質(zhì)。A選項(xiàng)核酸保護(hù)需用戊二醛；B選項(xiàng)主要交聯(lián)劑為戊二醛；D選項(xiàng)增強(qiáng)硬度需通過環(huán)氧樹脂包埋實(shí)現(xiàn)。25.冷凍切片最適宜的切片厚度為？【選項(xiàng)】A.1-2μmB.4-8μmC.10-15μmD.20-30μm【參考答案】B.4-8μm【解析】冷凍切片因組織未脫水，質(zhì)地較脆，過?。ㄈ?-2μm）易碎裂，過厚（如20-30μm）則細(xì)胞重疊。4-8μm既能保證結(jié)構(gòu)完整，又滿足病理診斷需求。A選項(xiàng)用于樹脂包埋半薄切片；C、D選項(xiàng)通常用于特殊研究。26.HE染色中，蘇木精對(duì)哪種細(xì)胞成分親和力最強(qiáng)？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞質(zhì)B.膠原纖維C.細(xì)胞核D.紅細(xì)胞【參考答案】C.細(xì)胞核【解析】蘇木精為堿性染料，主要結(jié)合細(xì)胞核內(nèi)帶負(fù)電荷的DNA/RNA，呈現(xiàn)藍(lán)色。A選項(xiàng)細(xì)胞質(zhì)由酸性伊紅染色；B選項(xiàng)膠原纖維呈粉紅色（伊紅）；D選項(xiàng)紅細(xì)胞因含血紅蛋白顯橙紅色。27.常用于顯示淀粉樣物質(zhì)的染色方法是？【選項(xiàng)】A.剛果紅染色B.油紅O染色C.鍍銀染色D.阿爾新藍(lán)染色【參考答案】A.剛果紅染色【解析】剛果紅能與淀粉樣物質(zhì)β折疊結(jié)構(gòu)特異性結(jié)合，偏振光下呈蘋果綠雙折光。B選項(xiàng)油紅O用于脂肪染色；C選項(xiàng)鍍銀染色用于神經(jīng)纖維、網(wǎng)狀纖維；D選項(xiàng)阿爾新藍(lán)染色酸性黏多糖。28.石蠟包埋的主要優(yōu)點(diǎn)是？【選項(xiàng)】A.組織收縮小B.制片周期短C.操作成本低D.透明效果最佳【參考答案】D.透明效果最佳【解析】石蠟?zāi)芡耆珴B透組織并提供良好透明度和適度硬度，是優(yōu)質(zhì)切片的基礎(chǔ)。A選項(xiàng)石蠟包埋組織收縮率高于冷凍切片；B選項(xiàng)制片需脫水透明等步驟，周期較長(zhǎng)；C選項(xiàng)成本高于冷凍切片但低于樹脂包埋。29.下列哪種固定劑會(huì)引起組織過度硬化？【選項(xiàng)】A.中性福爾馬林B.Bouin液C.Zenker液D.Carnoy液【參考答案】D.Carnoy液【解析】Carnoy液含無水乙醇、氯仿和冰醋酸，穿透力強(qiáng)但易導(dǎo)致組織脆硬，尤其長(zhǎng)時(shí)間固定時(shí)。A選項(xiàng)中性福爾馬林為最溫和常用固定劑；B選項(xiàng)Bouin液含苦味酸，對(duì)肌肉固定佳；C選項(xiàng)Zenker液含汞鹽，適合造血組織。30.用于細(xì)胞核形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察的首選染色組合是？【選項(xiàng)】A.甲苯胺藍(lán)-伊紅B.HE染色C.瑞氏-吉姆薩染色D.革蘭染色【參考答案】B.HE染色【解析】HE染色中蘇木精清晰顯示核形態(tài)（如染色質(zhì)分布、核分裂象），伊紅對(duì)比染色胞質(zhì)及間質(zhì)，為病理診斷金標(biāo)準(zhǔn)。A選項(xiàng)用于特殊染色；C選項(xiàng)為血液涂片染色；D選項(xiàng)用于細(xì)菌分類。31.在病理組織處理過程中，下列哪種固定液最適合用于電鏡標(biāo)本的制備？【選項(xiàng)】A.10%中性緩沖福爾馬林B.Bouin液C.戊二醛D.Zenker液【參考答案】C【解析】1.電鏡標(biāo)本要求固定液能快速滲透且對(duì)超微結(jié)構(gòu)破壞小。戊二醛（C）可通過交聯(lián)蛋白質(zhì)分子穩(wěn)定細(xì)胞結(jié)構(gòu)，是電鏡制樣的首選固定液。2.10%中性緩沖福爾馬林（A）主要用于常規(guī)光鏡標(biāo)本，滲透速度較慢。3.Bouin液（B）含苦味酸，易使組織收縮，僅用于特殊染色。4.Zenker液（D）含汞鹽，需脫汞處理，不適用于電鏡。32.免疫組織化學(xué)染色中，抗原修復(fù)最常用的方法是？【選項(xiàng)】A.酶消化法B.微波加熱法C.高壓加熱法D.酸水解【參考答案】B【解析】1.微波加熱法（B）通過加熱破壞甲醛交聯(lián)的甲基橋，恢復(fù)抗原表位，是當(dāng)前最普遍的方法，操作簡(jiǎn)便且效果穩(wěn)定。2.酶消化法（A）適用于部分特定抗原（如角蛋白），但可能過度消化導(dǎo)致組織脫落。3.高壓加熱法（C）修復(fù)效果強(qiáng)，但易造成組織脫片。4.酸水解（D）主要用于DNA暴露，不適用于常規(guī)抗原修復(fù)。33.下列哪種染色可用于顯示淀粉樣物質(zhì)？【選項(xiàng)】A.剛果紅染色B.蘇丹III染色C.PAS染色D.革蘭染色【參考答案】A【解析】1.剛果紅染色（A）與淀粉樣物質(zhì)結(jié)合后呈磚紅色，且在偏振光下呈蘋果綠雙折光，是特異性檢測(cè)方法。2.蘇丹III染色（B）用于脂質(zhì)染色。3.PAS染色（C）主要標(biāo)記多糖和基膜。4.革蘭染色（D）用于細(xì)菌分類，與淀粉樣物質(zhì)無關(guān)。34.HE染色中，細(xì)胞核被染成藍(lán)色的原理是？【選項(xiàng)】A.蘇木素與DNA磷酸基結(jié)合B.伊紅與胞質(zhì)蛋白結(jié)合C.蘇木素與RNA結(jié)合D.伊紅與核酸結(jié)合【參考答案】A【解析】1.蘇木素為堿性染料，通過明礬媒介與DNA磷酸基（帶負(fù)電）結(jié)合（A），使細(xì)胞核呈藍(lán)色。2.伊紅（B、D）為酸性染料，與帶正電的胞質(zhì)蛋白結(jié)合，染色呈粉紅色。3.RNA結(jié)合（C）并非主要機(jī)制，蘇木素主要靶向DNA。35.冰凍切片最適用于以下哪種病理診斷場(chǎng)景？【選項(xiàng)】A.長(zhǎng)期保存教學(xué)標(biāo)本B.術(shù)中快速病理診斷C.骨髓活檢染色D.回顧性研究【參考答案】B【解析】1.冰凍切片（B）可快速制片（15-20分鐘），滿足術(shù)中確定腫瘤性質(zhì)或切緣的需求。2.長(zhǎng)期保存需石蠟包埋（A），因冰凍組織易降解。3.骨髓活檢（C）常用塑料包埋以提高切片質(zhì)量。4.回顧性研究（D）依賴石蠟切片的穩(wěn)定性。二、多選題（共35題）1.關(guān)于組織固定，下列說法中正確的是？【選項(xiàng)】A.中性福爾馬林的pH值應(yīng)嚴(yán)格維持在7.0B.多聚甲醛固定速度比甲醛快C.固定液的量應(yīng)為組織體積的5-10倍D.固定時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致抗原丟失E.Bouin固定液適合保存脂類結(jié)構(gòu)【參考答案】B、C、D【解析】A錯(cuò)誤，中性福爾馬林實(shí)際需用磷酸鹽緩沖液調(diào)節(jié)至pH7.2-7.4。B正確，多聚甲醛分子量小，滲透更快。C是標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范，避免固定不均。D正確，過度交聯(lián)可掩蓋抗原表位。E錯(cuò)誤，Bouin液含苦味酸會(huì)溶解脂類，適用于結(jié)締組織染色。2.免疫組化染色中，可能造成假陽性的操作包括？【選項(xiàng)】A.未阻斷內(nèi)源性過氧化物酶B.抗原熱修復(fù)時(shí)間不足C.一抗?jié)舛冗^高D.未使用非免疫動(dòng)物血清封閉E.DAB顯色時(shí)間過長(zhǎng)【參考答案】A、C、D、E【解析】A正確，內(nèi)源性酶會(huì)催化顯色劑產(chǎn)生背景著色；C導(dǎo)致非特異性結(jié)合；D使非特異位點(diǎn)未被封閉；E過度顯色擴(kuò)大陽性范圍。B錯(cuò)誤，修復(fù)不足導(dǎo)致假陰性。3.下列特殊染色方法與對(duì)應(yīng)應(yīng)用匹配正確的是？【選項(xiàng)】A.PAS染色——顯示基底膜B.剛果紅——淀粉樣物質(zhì)C.維多利亞藍(lán)——網(wǎng)狀纖維D.Masson三色——肌纖維E.蘇丹III——黑色素【參考答案】A、B、D【解析】C錯(cuò)誤，維多利亞藍(lán)染彈性纖維（網(wǎng)狀纖維用銀染）；E錯(cuò)誤，蘇丹III染脂質(zhì)（黑色素用Fontana-Masson）。A、B、D均屬經(jīng)典染色應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)。4.關(guān)于冷凍切片操作，必須注意的是？【選項(xiàng)】A.組織需經(jīng)充分固定后再冷凍B.OCT包埋劑需完全覆蓋組織C.切片厚度通常為4-6μmD.遇鈣化組織應(yīng)延長(zhǎng)冷凍時(shí)間E.染蘇木素時(shí)需延長(zhǎng)分化時(shí)間【參考答案】B、C、E【解析】A錯(cuò)誤，未固定組織直接冷凍可保存更多抗原；D錯(cuò)誤，鈣化組織需先脫鈣處理；B確保切片完整性；C符合診斷需求；E因冷凍切片易掉片需增強(qiáng)染色效果。5.下列哪些情況需進(jìn)行退鏡檢？【選項(xiàng)】A.胃鏡活檢顯示“慢性萎縮性胃炎”B.結(jié)腸息肉切除標(biāo)本切緣陽性C.宮頸活檢提示CINIID.乳腺癌保乳手術(shù)標(biāo)本切緣<1mmE.甲狀腺細(xì)針穿刺見可疑癌細(xì)胞【參考答案】B、D【解析】B、D涉及切緣安全需補(bǔ)充取材；A、C屬明確診斷無需重復(fù)；E需結(jié)合細(xì)胞學(xué)與影像學(xué)綜合判斷，退鏡檢不適用。6.符合實(shí)驗(yàn)室生物安全二級(jí)（BSL-2）要求的是？【選項(xiàng)】A.處理結(jié)核桿菌培養(yǎng)物B.涉及HIV的血清學(xué)檢測(cè)C.操作需在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行D.配備高壓蒸汽滅菌器E.實(shí)驗(yàn)室門應(yīng)自動(dòng)關(guān)閉【參考答案】B、C、D、E【解析】A錯(cuò)誤（需BSL-3）；B屬標(biāo)準(zhǔn)BSL-2范疇；C必需防護(hù)氣溶膠；D、E是設(shè)施基礎(chǔ)要求；E確保氣流控制。7.組織脫水透明流程中，二甲苯的作用包括？【選項(xiàng)】A.溶解石蠟B.置換脫水劑C.增強(qiáng)組織折光性D.去除組織內(nèi)水分E.促進(jìn)染色滲透【參考答案】B、C【解析】A錯(cuò)誤（溶解的是脫水劑）；D屬于乙醇作用；E無關(guān)。B正確，作為脫水劑與石蠟的過渡介質(zhì)；C提供透明度使切片易觀察。8.影響HE染色質(zhì)量的關(guān)鍵因素有？【選項(xiàng)】A.蘇木素染液氧化程度B.伊紅染色后酒精脫水時(shí)間C.分化液使用溫度D.切片厚薄均勻度E.封片膠的pH值【參考答案】A、B、D【解析】A影響核著色強(qiáng)度；B脫水不足致伊紅褪色；D影響透光性與染色均一性；C分化液溫度影響小；E中性封片膠即可。9.下列試劑與?；奉悇e匹配正確的是？【選項(xiàng)】A.苦味酸——爆炸品B.二甲苯——易燃液體C.中性樹膠——腐蝕品D.疊氮鈉——?jiǎng)《酒稥.鋨酸——生殖毒性【參考答案】A、B、D、E【解析】C錯(cuò)誤（中性樹膠無腐蝕性）；A干燥時(shí)易爆；B閃點(diǎn)低易燃；D毒性極強(qiáng)；E鋨酸蒸氣影響生殖系統(tǒng)均屬規(guī)范分類。10.采用TUNEL法檢測(cè)細(xì)胞凋亡時(shí)需排除？【選項(xiàng)】A.組織自溶區(qū)B.壞死細(xì)胞核碎片C.活躍轉(zhuǎn)錄的細(xì)胞D.巨噬細(xì)胞吞噬體E.有絲分裂中期細(xì)胞【參考答案】A、B【解析】TUNEL檢測(cè)DNA斷裂末端，A自溶和B壞死均有DNA斷裂，需結(jié)合形態(tài)學(xué)鑒別；C、E不產(chǎn)生斷裂；D吞噬體無細(xì)胞核。11.下列有關(guān)組織固定液的選擇，正確的是：【選項(xiàng)】A.電鏡樣本常選用戊二醛和鋨酸雙重固定B.骨髓活檢推薦使用Bouin液以減少組織收縮C.10%中性緩沖福爾馬林是常規(guī)病理活檢的首選固定液D.Zn-福爾馬林更適合保存核酸用于分子檢測(cè)E.Carnoy液適用于糖原染色樣本的固定【參考答案】A、C、D、E【解析】1.**A正確**：電鏡需超微結(jié)構(gòu)保存，戊二醛交聯(lián)蛋白，鋨酸固定脂類并增加電子密度。2.**B錯(cuò)誤**：Bouin液含冰醋酸易致骨組織脫鈣，骨髓活檢宜用Zenker液或中性福爾馬林。3.**C正確**：10%中性緩沖福爾馬林能減少甲醛色素沉積，是常規(guī)組織固定的金標(biāo)準(zhǔn)。4.**D正確**：Zn-福爾馬林可降低RNA降解速率，優(yōu)于傳統(tǒng)福爾馬林。5.**E正確**：Carnoy液（乙醇-氯仿-冰醋酸）快速固定并阻止糖原溶解。12.關(guān)于特殊染色的應(yīng)用，下列描述正確的有：【選項(xiàng)】A.剛果紅染色用于淀粉樣物質(zhì)，偏振光下呈蘋果綠雙折光B.PAS染色可顯示基底膜、真菌壁及中性黏液物質(zhì)C.Masson三色染色中膠原纖維被染成紅色D.網(wǎng)狀纖維染色（如Gomori法）需使用銀氨溶液浸染E.蘇丹Ⅲ染色可標(biāo)記脂肪栓塞中的脂滴【參考答案】A、B、D、E【解析】1.**A正確**：剛果紅與淀粉樣物質(zhì)結(jié)合，偏振光下特征性雙折光是診斷要點(diǎn)。2.**B正確**：PAS反應(yīng)多糖和糖蛋白，基底膜的IV型膠原、真菌細(xì)胞壁及胃腸黏液均陽性。3.**C錯(cuò)誤**：Masson染色膠原呈藍(lán)色或綠色（依配方不同），肌纖維呈紅色。4.**D正確**：Gomori銀染中網(wǎng)狀纖維吸附銀離子，經(jīng)還原顯黑色。5.**E正確**：蘇丹Ⅲ為脂溶性染料，冷凍切片中脂滴呈橙紅色。13.免疫組化技術(shù)中，抗原修復(fù)的正確方法包括：【選項(xiàng)】A.熱修復(fù)（HIER）常用pH6.0枸櫞酸鹽緩沖液B.胰酶消化適用于部分胞膜抗原的暴露C.高壓修復(fù)可顯著提高Ki-67、p53等核抗原檢出率D.EDTA修復(fù)液（pH8.0-9.0）對(duì)多數(shù)跨膜蛋白更有效E.微波修復(fù)時(shí)需避免組織切片干燥【參考答案】A、B、C、D、E【解析】1.**A正確**：pH6.0枸櫞酸鹽緩沖液是HIER最常用的修復(fù)液。2.**B正確**：胰酶水解蛋白交聯(lián)，尤其對(duì)EGFR等膜抗原有效。3.**C正確**：高壓高溫能徹底解開核抗原表位的甲醛交聯(lián)。4.**D正確**：高pHEDTA對(duì)ER、PR等核抗原及部分膜蛋白修復(fù)效果更佳。5.**E正確**：微波修復(fù)時(shí)切片干燥會(huì)導(dǎo)致抗原結(jié)構(gòu)不可逆破壞。14.分子病理技術(shù)中，以下敘述正確的有：【選項(xiàng)】A.FISH技術(shù)可用于HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)B.RT-PCR需先將RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA再進(jìn)行擴(kuò)增C.甲基化特異性PCR（MSP）可鑒別DNA甲基化狀態(tài)D.NGS測(cè)序前需對(duì)DNA進(jìn)行片段化處理E.PCR-SSCP分析依賴DNA單鏈構(gòu)象的凝膠遷移率差異【參考答案】A、B、C、D、E【解析】1.**A正確**：FISH通過熒光探針直接檢測(cè)HER2基因拷貝數(shù)，是乳腺癌分型依據(jù)。2.**B正確**：RT-PCR需逆轉(zhuǎn)錄酶生成cDNA，再以Taq酶擴(kuò)增靶序列。3.**C正確**：MSP利用亞硫酸鹽處理區(qū)分甲基化（未轉(zhuǎn)化）與非甲基化胞嘧啶。4.**D正確**：NGS建庫需將DNA打斷成200-500bp片段并加接頭。5.**E正確**：SSCP中單鏈DNA因堿基突變導(dǎo)致折疊構(gòu)象改變，電泳遷移率不同。15.組織脫水透明過程中的注意事項(xiàng)包括：【選項(xiàng)】A.梯度乙醇脫水可減少組織收縮變形B.二甲苯透明時(shí)間過長(zhǎng)易致組織硬化脆裂C.正丁醇可替代二甲苯作為脫水透明劑D.脂肪組織需延長(zhǎng)脫水時(shí)間以防止透明不徹底E.丙酮脫水速度快，適用于快速石蠟包埋【參考答案】A、B、C、D、E【解析】1.**A正確**：70%-95%-100%梯度乙醇逐步脫水可減少組織收縮。2.**B正確**：二甲苯過度透明溶解脂質(zhì)，導(dǎo)致組織變脆，建議≤2小時(shí)。3.**C正確**：正丁醇能與乙醇和石蠟混溶，對(duì)組織收縮影響小，但毒性較高。4.**D正確**：脂肪組織含水低、脂質(zhì)高，需延長(zhǎng)脫水透明時(shí)間（如100%乙醇×3次）。5.**E正確**：丙酮脫水性強(qiáng)于乙醇，但收縮更明顯，常用于快速活檢。16.下列染色組合與對(duì)應(yīng)疾病診斷匹配正確的是：【選項(xiàng)】A.抗酸染色+結(jié)核桿菌→結(jié)核病B.六胺銀染色+肺孢子菌→肺孢子菌肺炎C.普魯士藍(lán)染色+含鐵血黃素→血色病D.剛果紅染色+黏液池→膠樣癌E.甲基綠派洛寧染色+漿細(xì)胞→多發(fā)性骨髓瘤【參考答案】A、B、C、E【解析】1.**A正確**：抗酸染色中結(jié)核桿菌呈紅色細(xì)桿狀，背景藍(lán)色。2.**B正確**：六胺銀將肺孢子菌囊壁染成棕黑色，圓形或半月形。3.**C正確**：普魯士藍(lán)使含鐵血黃素中的三價(jià)鐵顯藍(lán)色，診斷鐵過載疾病。4.**D錯(cuò)誤**：膠樣癌的黏液用黏液卡紅或阿爾辛藍(lán)染色，剛果紅針對(duì)淀粉樣物。5.**E正確**：甲基綠派洛寧染色中漿細(xì)胞RNA呈紅色，輔助骨髓瘤診斷。17.病理切片制作中，易導(dǎo)致染色不良的操作失誤有：【選項(xiàng)】A.組織固定不及時(shí)引起自溶B.脫水不徹底致石蠟滲透不足C.切片厚度＞6μm影響顯微鏡觀察D.蘇木精染色后未充分流水返藍(lán)E.封片時(shí)樹膠量過多產(chǎn)生氣泡【參考答案】A、B、D【解析】1.**A正確**：自溶導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)模糊，染色對(duì)比度下降。2.**B正確**：脫水不全使石蠟無法充分滲透，切片易碎裂或脫片。3.**C錯(cuò)誤**：常規(guī)切片厚度4-5μm，過厚僅影響清晰度，非直接染色問題。4.**D正確**：未返藍(lán)則蘇木精呈紅色非藍(lán)色，核染色異常。5.**E錯(cuò)誤**：樹膠過量主要影響封片美觀，與染色質(zhì)量無關(guān)。18.免疫組化假陽性的常見原因包括：【選項(xiàng)】A.內(nèi)源性生物素未被阻斷B.一抗?jié)舛冗^高導(dǎo)致非特異性結(jié)合C.組織邊緣干燥引起的邊緣效應(yīng)D.抗原修復(fù)過度致表位結(jié)構(gòu)破壞E.顯色劑孵育時(shí)間過長(zhǎng)【參考答案】A、B、C、E【解析】1.**A正確**：肝、腎等富含生物素的組織需用蛋清或阻斷劑預(yù)處理。2.**B正確**：高濃度一抗與結(jié)構(gòu)相似蛋白交叉反應(yīng)，應(yīng)滴定最佳濃度。3.**C正確**：切片邊緣干燥使抗體非特異吸附，表現(xiàn)為周邊強(qiáng)著色。4.**D錯(cuò)誤**：修復(fù)不足易致假陰性，過度修復(fù)一般不影響特異性。5.**E正確**：DAB顯色超時(shí)可使背景加深，掩蓋真實(shí)信號(hào)。19.與HE染色質(zhì)量直接相關(guān)的因素是：【選項(xiàng)】A.蘇木精染液的氧化成熟程度B.伊紅染色后的梯度酒精脫水C.切片脫蠟至水化的完整性D.中性樹膠封片的折射率匹配E.組織前處理中的固定時(shí)間【參考答案】A、B、C、E【解析】1.**A正確**：過度氧化蘇木精染色力差，未成熟則著色淺。2.**B正確**：脫水充分可防止伊紅褪色，70%-95%乙醇梯度脫水是關(guān)鍵。3.**C正確**：脫蠟不全會(huì)阻礙染料滲透，水化不充分影響染色均勻性。4.**D錯(cuò)誤**：樹膠折射率影響鏡檢清晰度，與染色本身無關(guān)。5.**E正確**：固定不足導(dǎo)致胞核腫脹，固定過度則抗原丟失均影響染色。20.診斷阿爾茨海默病的關(guān)鍵病理特征及染色方法是：【選項(xiàng)】A.神經(jīng)原纖維纏結(jié)→銀染色（Bielschowsky法）B.老年斑→剛果紅染色（偏振光觀察）C.淀粉樣血管病→β-淀粉樣蛋白免疫組化D.顆?？张葑冃浴鶫E染色即可識(shí)別E.Tau蛋白聚集→Gallyas銀染【參考答案】A、C、D、E【解析】1.**A正確**：Bielschowsky銀染顯示纏結(jié)的神經(jīng)原纖維呈黑色。2.**B錯(cuò)誤**：老年斑核心為β-淀粉樣蛋白，剛果紅染色陽性但非特異性，需免疫組化確認(rèn)。3.**C正確**：β-淀粉樣蛋白在血管壁沉積用免疫組化（如6F/3D抗體）診斷。4.**D正確**：HE切片中神經(jīng)元胞質(zhì)內(nèi)空泡為特征性改變。5.**E正確**：Gallyas銀染特異性標(biāo)記磷酸化Tau蛋白組成的神經(jīng)纖維纏結(jié)。21.下列哪些固定液適用于電鏡樣本制備？（）【選項(xiàng)】A.4%多聚甲醛B.2.5%戊二醛C.10%中性福爾馬林D.Bouin氏液E.Carnoy氏液【參考答案】AB【解析】1.**電鏡固定要求**：需快速穿透組織并保存超微結(jié)構(gòu)，首選戊二醛（2.5%-3%）聯(lián)合多聚甲醛（4%）雙重固定。2.**選項(xiàng)分析**：-A正確：4%多聚甲醛是電鏡常用預(yù)固定液。-B正確：戊二醛為電鏡常規(guī)固定劑，可穩(wěn)定蛋白質(zhì)和脂質(zhì)。-C錯(cuò)誤：10%中性福爾馬林主要用于光鏡樣本，滲透慢且破壞超微結(jié)構(gòu)。-D錯(cuò)誤：Bouin氏液含苦味酸，易導(dǎo)致組織收縮，不適用于電鏡。-E錯(cuò)誤：Carnoy氏液含乙醇和冰醋酸，易引起細(xì)胞形態(tài)改變。22.免疫組化染色中可導(dǎo)致假陽性結(jié)果的因素包括（）【選項(xiàng)】A.內(nèi)源性生物素干擾B.抗體濃度過高C.抗原修復(fù)過度D.非特異性抗體結(jié)合E.DAB顯色時(shí)間過長(zhǎng)【參考答案】ABCDE【解析】1.**假陽性機(jī)制**：-A正確：富含生物素的組織（如肝、腎）易產(chǎn)生非特異性結(jié)合。-B正確：高濃度抗體會(huì)增加背景染色。-C正確：過度抗原修復(fù)暴露非靶抗原表位。-D正確：抗體與結(jié)構(gòu)相似抗原交叉反應(yīng)。-E正確：DAB顯色超時(shí)加劇背景沉淀。23.下列哪項(xiàng)屬于Masson三色染色的診斷應(yīng)用？（）【選項(xiàng)】A.區(qū)分膠原纖維與肌纖維B.顯示淀粉樣物質(zhì)C.鑒別神經(jīng)纖維D.觀察肝硬化假小葉E.檢測(cè)基底膜完整性【參考答案】ADE【解析】1.**Masson染色原理**：膠原纖維呈藍(lán)色，肌纖維/紅細(xì)胞呈紅色。2.**選項(xiàng)應(yīng)用**：-A正確：膠原纖維（藍(lán)）與肌纖維（紅）對(duì)比鮮明。-B錯(cuò)誤：淀粉樣物質(zhì)需剛果紅染色。-C錯(cuò)誤：神經(jīng)纖維常用銀染或NF標(biāo)記。-D正確：肝硬化時(shí)膠原增生呈藍(lán)色團(tuán)塊。-E正確：腎小球基底膜連續(xù)性可通過染色評(píng)估。24.分子病理中PCR技術(shù)的主要質(zhì)量控措施包括（）【選項(xiàng)】A.設(shè)立陰性對(duì)照B.使用內(nèi)參基因C.DNA定量標(biāo)準(zhǔn)化D.避免氣溶膠污染E.擴(kuò)增產(chǎn)物電泳驗(yàn)證【參考答案】ABCDE【解析】1.**質(zhì)控要點(diǎn)**：-A正確：陰性對(duì)照排除污染。-B正確：內(nèi)參基因（如GAPDH）監(jiān)控反應(yīng)效率。-C正確：DNA濃度一致保障擴(kuò)增可比性。-D正確：實(shí)驗(yàn)室分區(qū)操作防止交叉污染。-E正確：電泳確認(rèn)產(chǎn)物大小是否符合預(yù)期。25.HE染色中細(xì)胞核嗜堿性增強(qiáng)的病理改變包括（）【選項(xiàng)】A.核染色質(zhì)濃縮B.DNA甲基化水平升高C.核異型性增大D.核碎裂E.核仁明顯增大【參考答案】ACD【解析】1.**嗜堿性機(jī)制**：蘇木素與DNA磷酸基結(jié)合，故核DNA密度增加時(shí)著色加深。2.**選項(xiàng)分析**：-A正確：染色質(zhì)濃縮（如凋亡）增加DNA密度。-B錯(cuò)誤：甲基化不改變DNA堿基結(jié)合能力。-C正確：異型性腫瘤細(xì)胞常伴核深染。-D正確：核碎裂釋放DNA片段致局部深染。-E錯(cuò)誤：核仁為蛋白質(zhì)成分，嗜酸性（伊紅染色）。26.冰凍切片技術(shù)注意事項(xiàng)中正確的有（）【選項(xiàng)】A.組織塊需預(yù)冷至-20℃B.避免反復(fù)凍融C.切片厚度通常為4-6μmD.適用于脂肪含量高的組織E.需快速固定防冰晶形成【參考答案】ABCE【解析】1.**操作要點(diǎn)**：-A正確：組織需在切片機(jī)冷臺(tái)中充分冷凍。-B正確：凍融會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)破壞。-C正確：4-6μm厚度保證形態(tài)清晰。-D錯(cuò)誤：脂肪組織不易凍結(jié)，切片易碎裂。-E正確：冰晶會(huì)撕裂細(xì)胞，需速凍（如液氮）。27.下列特殊染色與對(duì)應(yīng)應(yīng)用匹配正確的是（）【選項(xiàng)】A.PAS染色——糖原檢測(cè)B.剛果紅染色——網(wǎng)狀纖維C.抗酸染色——結(jié)核分枝桿菌D.油紅O染色——黏液物質(zhì)E.鍍銀染色——黑色素細(xì)胞【參考答案】AC【解析】1.**染色特異性**：-A正確：PAS染色糖原呈紫紅色。-B錯(cuò)誤：剛果紅染淀粉樣物質(zhì)（橙紅色），網(wǎng)狀纖維用銀染。-C正確：抗酸桿菌經(jīng)品紅染色呈紅色。-D錯(cuò)誤：油紅O染中性脂肪（紅色），黏液用阿爾辛藍(lán)。-E錯(cuò)誤：鍍銀染神經(jīng)纖維/網(wǎng)狀纖維，黑色素常用Fontana-Masson。28.免疫熒光技術(shù)中可能引起非特異性熒光的因素是（）【選項(xiàng)】A.自發(fā)熒光（如彈性纖維）B.二抗種屬選擇錯(cuò)誤C.標(biāo)本未充分洗滌D.封片劑含熒光淬滅劑E.抗體交叉反應(yīng)【參考答案】ABCE【解析】1.**干擾來源**：-A正確：彈性纖維自發(fā)綠色熒光。-B正確：二抗與內(nèi)源性免疫球蛋白結(jié)合致假信號(hào)。-C正確：未洗凈抗體殘留增加背景。-D錯(cuò)誤：淬滅劑（如DABCO）可減少熒光衰減。-E正確：抗體與非靶抗原結(jié)合產(chǎn)生假陽性。29.影響石蠟切片質(zhì)量的關(guān)鍵環(huán)節(jié)包括（）【選項(xiàng)】A.脫水不徹底導(dǎo)致透明失敗B.浸蠟溫度高于65℃C.切片刀角度調(diào)節(jié)不當(dāng)D.組織未充分固定E.染色分化時(shí)間不足【參考答案】ABCD【解析】1.**質(zhì)量關(guān)聯(lián)點(diǎn)**：-A正確：水殘留阻礙石蠟滲透致切片碎裂。-B正確：高溫蠟致組織脆硬，切片易皺褶。-C正確：刀角過大（＞30°）易產(chǎn)生刀痕。-D正確：固定不良致細(xì)胞自溶，影響形態(tài)。-E錯(cuò)誤：分化屬染色步驟，與切片制備無關(guān)。30.原位雜交技術(shù)中探針設(shè)計(jì)需考慮的因素有（）【選項(xiàng)】A.靶序列特異性B.GC含量在40%-60%C.探針長(zhǎng)度宜為50-300bpD.避免重復(fù)序列E.標(biāo)記物穩(wěn)定性【參考答案】ABCDE【解析】1.**探針優(yōu)化原則**：-A正確：特異性序列避免交叉反應(yīng)。-B正確：GC含量影響雜交效率及Tm值。-C正確：過短易脫靶，過長(zhǎng)穿透性差。-D正確：重復(fù)序列導(dǎo)致非特異性結(jié)合。-E正確：標(biāo)記物（如地高辛）需耐受雜交條件。31.關(guān)于組織固定液的選擇原則，以下說法正確的是？【選項(xiàng)】A.常用中性緩沖福爾馬林固定常規(guī)病理組織B.Bouin液適用于骨髓及富含脂肪組織的固定C.Zenker液可較好保存細(xì)胞核細(xì)節(jié)，但需避光保存D.95%乙醇是糖原染色的首選固定液E.丙酮固定速度快，常用于快速冰凍切片的預(yù)處理【參考答案】ACDE【解析】A正確：中性緩沖福爾馬林是最常用固定液，能保存組織形態(tài)和抗原性。B錯(cuò)誤：Bouin液多用于睪丸、胃腸等組織，骨髓推薦使用Zenker液或B5固定液。C正確：Zenker液含汞成分，能清晰顯示細(xì)胞核結(jié)構(gòu)，但需避光防止沉淀物形成。D正確：糖原易溶于水，乙醇固定可減少其流失，95%乙醇是常用選擇。E正確：丙酮滲透快，可快速固定細(xì)胞蛋白，常用于冰凍切片前的組織處理。32.下列哪些特殊染色方法與其應(yīng)用目標(biāo)匹配正確？【選項(xiàng)】A.PAS染色——顯示基底膜和真菌B.剛果紅染色——淀粉樣物質(zhì)檢測(cè)C.維多利亞藍(lán)染色——網(wǎng)狀纖維D.Masson三色染色——膠原纖維E.普魯士藍(lán)染色——黑色素顆粒【參考答案】ABD【解析】A正確：PAS染色對(duì)糖原、黏蛋白、基底膜和真菌均顯陽性。B正確：剛果紅與淀粉樣物質(zhì)結(jié)合后呈蘋果綠色雙折光。C錯(cuò)誤：維多利亞藍(lán)用于彈力纖維，網(wǎng)狀纖維常用Gomori銀染。D正確：Masson三色染色中膠原纖維呈藍(lán)色或綠色（根據(jù)配方不同）。E錯(cuò)誤：普魯士藍(lán)染色針對(duì)含鐵血黃素，黑色素常用Fontana-Masson染色。33.免疫組化假陽性的常見原因包括？【選項(xiàng)】A.內(nèi)源性生物素干擾B.抗原修復(fù)過度C.一抗?jié)舛冗^高D.組織自發(fā)熒光E.DAB顯色時(shí)間不足【參考答案】ABC【解析】A正確：肝、腎等富含生物素的組織需用生物素阻斷劑預(yù)處理。B正確：高壓修復(fù)時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致抗原表位破壞和非特異結(jié)合。C正確：一抗?jié)舛冗^高會(huì)增加非特異性背景著色。D錯(cuò)誤：自發(fā)熒光屬熒光法特有干擾，與常規(guī)DAB顯色無關(guān)。E錯(cuò)誤：DAB顯色不足會(huì)導(dǎo)致假陰性而非假陽性。34.下列哪種組合符合分子病理學(xué)技術(shù)應(yīng)用？【選項(xiàng)】A.PCR-基因突變檢測(cè)B.FISH-HER2基因擴(kuò)增分析C.測(cè)序技術(shù)-HPV分型D.免疫印跡-蛋白翻譯后修飾E.流式細(xì)胞術(shù)-細(xì)胞凋亡率測(cè)定【參考答案】ABCDE【解析】全選正確：A項(xiàng)PCR是基因突變檢測(cè)金標(biāo)準(zhǔn)；B項(xiàng)FISH用于HER2基因狀態(tài)評(píng)估；C項(xiàng)測(cè)序可精確鑒定HPV亞型；D項(xiàng)免疫印跡（WesternBlot）可檢測(cè)磷酸化等修飾；E項(xiàng)流式技術(shù)通過AnnexinV/PI雙染定量凋亡細(xì)胞。35.關(guān)于冷凍切片質(zhì)量控制，正確的措施是？【選項(xiàng)】A.肝組織切片厚度建議5-6μmB.脂肪組織需預(yù)冷至-25℃再切片C.速凍不當(dāng)易產(chǎn)生冰晶偽影D.蘇木精染色時(shí)間應(yīng)延長(zhǎng)至10分鐘E.立即固定可防止抗原降解【參考答案】ABC【解析】A正確：肝/腎等致密組織適用稍厚切片以保證完整性。B正確：脂肪組織需更低溫度（-25℃以下）以防止切片碎裂。C正確：速凍緩慢會(huì)導(dǎo)致水分子形成大冰晶破壞組織結(jié)構(gòu)。D錯(cuò)誤：冷凍切片蘇木精染色通常1-2分鐘足矣，時(shí)間過長(zhǎng)易過染。E錯(cuò)誤：冷凍切片通常直接染色，固定會(huì)降低抗原活性。三、判斷題（共30題）1.革蘭氏染色中，95%乙醇脫色時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致革蘭氏陽性菌被染成紅色?！具x項(xiàng)】正確/錯(cuò)誤【參考答案】錯(cuò)誤【解析】革蘭氏染色中脫色步驟是關(guān)鍵：若95%乙醇脫色時(shí)間過長(zhǎng)，革蘭氏陽性菌的細(xì)胞壁肽聚糖層因脫水而孔徑縮小，結(jié)晶紫-碘復(fù)合物不易滲出，仍保留紫色；而脫色不足則會(huì)導(dǎo)致革蘭氏陰性菌殘留紫色。因此題干描述錯(cuò)誤，脫色過長(zhǎng)的結(jié)果是菌體顏色異常加深，而非變?yōu)榧t色。2.HE染色中，蘇木素染色時(shí)間過長(zhǎng)可能導(dǎo)致細(xì)胞核過染，但可通過鹽酸乙醇分化步驟完全糾正。【選項(xiàng)】正確/錯(cuò)誤【參考答案】正確【解析】蘇木素染色時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)使細(xì)胞核染色過深，甚至胞質(zhì)也被著色。鹽酸乙醇分化液可選擇性移除結(jié)合不牢固的蘇木素染料，使細(xì)胞核與胞質(zhì)對(duì)比度恢復(fù)正常。因此此表述正確，分化步驟是HE染色中調(diào)節(jié)染色深淺的核心環(huán)節(jié)。3.免疫組化技術(shù)中，內(nèi)源性過氧化物酶的滅活應(yīng)在抗體孵育步驟之后進(jìn)行，以避免抗原修復(fù)失效?！具x項(xiàng)】正確/錯(cuò)誤【參考答案】錯(cuò)誤【解析】?jī)?nèi)源性過氧化物酶滅活（如3%H?O?處理）需在一抗孵育前完成，否則殘留的酶活性會(huì)催化后續(xù)DAB顯色導(dǎo)致假陽性?？乖迯?fù)通常在滅活后進(jìn)行，不影響其效果。題干順序錯(cuò)誤，滅活應(yīng)為預(yù)處理步驟。4.冰凍切片時(shí)，若組織溫度高于-20℃直接切片，易產(chǎn)生冰晶偽影影響診斷?！具x項(xiàng)】正確/錯(cuò)誤【參考答案】正確【解析】冰凍切片需將組織快速冷凍至-20℃以下。若溫度過高，組織內(nèi)水分緩慢結(jié)晶形成大冰晶，破壞細(xì)胞形態(tài)，導(dǎo)致切片中出現(xiàn)空泡狀偽影。因此需嚴(yán)格控溫，題干描述正確。5.Masson三色染色中，膠原纖維被染成藍(lán)色表明染色步驟操作正確?！具x項(xiàng)】正確/錯(cuò)誤【參考答案】錯(cuò)誤【解析】Masson染色中，膠原纖維應(yīng)被酸性復(fù)紅或麗春紅染成紅色，肌纖維呈藍(lán)色。若膠原纖維顯藍(lán)色，可能是染色液pH值異常或分化過度導(dǎo)致染料結(jié)合錯(cuò)誤。題干描述為典型的染色失敗表現(xiàn)，故錯(cuò)誤。6.PCR擴(kuò)增時(shí)，退火溫度低于引物Tm值5-10℃可提高特異性，減少非特異性條帶?！具x項(xiàng)】正確/錯(cuò)誤【參考答案】錯(cuò)誤【解析】退火溫度需接近引物Tm值（通常高出2-5℃）。若低于Tm值5℃以上，引物易與非靶序列結(jié)合，導(dǎo)致非特異性擴(kuò)增。題干描述的溫度設(shè)置會(huì)降低特異性，屬于操作錯(cuò)誤。7.原位雜交技術(shù)中，蛋白酶K消化時(shí)間不足會(huì)導(dǎo)致探針無法穿透細(xì)胞膜，降低信號(hào)強(qiáng)度?！具x項(xiàng)】正確/錯(cuò)誤【參考答案】正確【解析】蛋白酶K能消化細(xì)胞膜蛋白以增強(qiáng)探針滲透性。消化時(shí)間不足則細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)未被充分破壞，探針難以進(jìn)入胞內(nèi)與靶核酸結(jié)合，信號(hào)減弱。題干描述正確。8.電子顯微鏡制樣時(shí)，鋨酸固定后需用酒精梯度脫水，原因是鋨酸不溶于水?！具x項(xiàng)】正確/錯(cuò)誤【參考答案】錯(cuò)誤【解析】鋨酸為水溶性固定劑，脫水是因后續(xù)包埋樹脂（如環(huán)氧樹脂）為疏水性，需置換出組織水分。酒精梯度脫水與鋨酸溶解性無關(guān)，題干歸因錯(cuò)誤。9.流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期時(shí)，G2/M期細(xì)胞的DNA含量是G1期細(xì)胞的2倍。【選項(xiàng)】正確/錯(cuò)誤【參考答案】正確【解析】G1期細(xì)胞含二倍體DNA（2C），S期DNA合成，G2/M期完成復(fù)制后為四倍體（4C）。流式細(xì)胞術(shù)通過DNA染料熒光強(qiáng)度區(qū)分周期相位，題干描述符合標(biāo)準(zhǔn)模型。10.自動(dòng)染色機(jī)HE染色時(shí)，若蘇木素染液使用時(shí)間超過3個(gè)月需強(qiáng)制更換，否則染色強(qiáng)度必然下降。【選項(xiàng)】正確/錯(cuò)誤【參考答案】錯(cuò)誤【解析】染液壽命受使用頻率、氧化程度等影響，3個(gè)月僅為參考值?？赏ㄟ^定期過濾、添加新液維持性能，僅憑時(shí)間無法判斷染液失效。題干表述過于絕對(duì)，故錯(cuò)誤。11.10%中性福爾馬林固定液的配制是在甲醛溶液中加入碳酸鈉以調(diào)節(jié)pH值?！具x項(xiàng)】正確（）錯(cuò)誤（）【參考答案】錯(cuò)誤【解析】10%中性福爾馬林固定液的正確配制需使用甲醛溶液與磷酸鹽緩沖液（如磷酸二氫鈉/磷酸氫二鈉）混合，將pH穩(wěn)定在7.2-7.4。碳酸鈉常用于堿性福爾馬林固定液（pH>8），與"中性"要求不符，故題干表述錯(cuò)誤。12.HE染色中，細(xì)胞核被蘇木精染成紅色，細(xì)胞質(zhì)被伊紅染成藍(lán)色?！具x項(xiàng)】正確（）錯(cuò)誤（）【參考答案】錯(cuò)誤【解析】HE染色原理為：蘇木精為堿性染料，使細(xì)胞核內(nèi)的酸性物質(zhì)（如DNA）呈藍(lán)色；伊紅為酸性染料，使細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的堿性蛋白呈紅色。題干顏色對(duì)應(yīng)完全顛倒，表述錯(cuò)誤。13.組織脫水時(shí)應(yīng)遵循從低濃度到高濃度酒精梯度逐步進(jìn)行，避免組織收縮過度。【選項(xiàng)】正確（）錯(cuò)誤（）【參考答案】正確【解析】規(guī)范脫水步驟為：70%→80%→95%→100%酒精梯度過渡。若直接使用高濃度酒精，會(huì)導(dǎo)致組織細(xì)胞外液與脫水劑滲透壓差異過大，引發(fā)劇烈收縮甚至變形，故題干表述正確。14.免疫組化技術(shù)中，常用3%過氧化氫溶液封閉內(nèi)源性堿性磷酸酶以減少非特異性染色?！具x項(xiàng)】正確（）錯(cuò)誤（）【參考答案】錯(cuò)誤【解析】?jī)?nèi)源性過氧化物酶（如紅細(xì)胞、粒細(xì)胞所含）需用3%H?O?阻斷；而內(nèi)源性堿性磷酸酶封閉需用左旋咪唑或鹽酸胍。題干混淆兩種酶的阻斷劑，故錯(cuò)誤。15.冰凍切片制作完成后，若未及時(shí)染色，標(biāo)本可于-20℃長(zhǎng)期保存而不影響結(jié)果?！具x項(xiàng)】正確（）錯(cuò)誤（）【參考答案】錯(cuò)誤【解析】冰凍切片標(biāo)本需在-80℃超低溫冰箱中長(zhǎng)期保存，-20℃僅可短期存放（<1周）。因其冰晶易增大導(dǎo)致組織結(jié)構(gòu)破壞，且抗原易降解，故題干關(guān)于保存條件和時(shí)效的表述均錯(cuò)誤。16.阿爾新藍(lán)（Alcianblue）染色主要用于顯示組織中黏多