2025年微生物出科理論考試試題含答案一、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共40分）1.革蘭染色法中，95%乙醇的作用是A.初染劑B.媒染劑C.脫色劑D.復(fù)染劑答案：C解析：革蘭染色步驟為結(jié)晶紫初染→碘液媒染→95%乙醇脫色→稀釋復(fù)紅復(fù)染。乙醇通過(guò)破壞細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)使革蘭陰性菌脫色，陽(yáng)性菌因肽聚糖層厚保留紫色。2.能產(chǎn)生自溶酶的細(xì)菌是A.金黃色葡萄球菌B.肺炎鏈球菌C.大腸埃希菌D.銅綠假單胞菌答案：B解析：肺炎鏈球菌可產(chǎn)生自溶酶，培養(yǎng)48小時(shí)后菌落中心凹陷呈“臍狀”，膽汁溶菌試驗(yàn)陽(yáng)性即基于此原理。3.關(guān)于病毒復(fù)制周期，正確的順序是A.吸附→穿入→脫殼→生物合成→裝配與釋放B.吸附→脫殼→穿入→生物合成→裝配與釋放C.穿入→吸附→脫殼→生物合成→裝配與釋放D.吸附→穿入→生物合成→脫殼→裝配與釋放答案：A解析：病毒復(fù)制需依次完成吸附（特異性受體結(jié)合）、穿入（膜融合/胞吞）、脫殼（核酸釋放）、生物合成（核酸及蛋白質(zhì)合成）、裝配（核衣殼組裝）與釋放（出芽/細(xì)胞裂解）。4.以下哪種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基A.血瓊脂平板B.巧克力瓊脂平板C.SS瓊脂平板D.營(yíng)養(yǎng)肉湯答案：C解析：SS瓊脂含膽鹽、枸櫞酸鈉和煌綠，抑制革蘭陽(yáng)性菌和大腸埃希菌，選擇性促進(jìn)沙門菌、志賀菌生長(zhǎng)，屬于選擇培養(yǎng)基。血平板為營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基，巧克力平板含V/X因子用于嗜血桿菌，營(yíng)養(yǎng)肉湯為基礎(chǔ)培養(yǎng)基。5.結(jié)核分枝桿菌的染色特性是A.革蘭陽(yáng)性B.革蘭陰性C.抗酸染色陽(yáng)性D.墨汁負(fù)染色陽(yáng)性答案：C解析：結(jié)核分枝桿菌細(xì)胞壁含大量分枝菌酸，普通染色不易著色，需抗酸染色（5%石碳酸復(fù)紅加熱染色，3%鹽酸乙醇不脫色，亞甲藍(lán)復(fù)染后呈紅色）。6.導(dǎo)致新生兒鵝口瘡的病原體是A.白假絲酵母菌B.新生隱球菌C.皮膚癬菌D.曲霉菌答案：A解析：白假絲酵母菌為條件致病菌，當(dāng)新生兒免疫力低下時(shí)可引起口腔黏膜白色膜狀物（鵝口瘡），鏡檢可見芽生孢子及假菌絲。7.關(guān)于細(xì)菌L型，錯(cuò)誤的描述是A.細(xì)胞壁缺陷B.多形性C.對(duì)β-內(nèi)酰胺類抗生素敏感D.高滲培養(yǎng)基可培養(yǎng)答案：C解析：細(xì)菌L型因細(xì)胞壁缺失，對(duì)作用于細(xì)胞壁的β-內(nèi)酰胺類抗生素（如青霉素）耐藥，需在高滲（含5%NaCl）培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，形態(tài)呈多形性（球形、絲狀等）。8.能引起流行性出血熱的病毒是A.漢坦病毒B.登革病毒C.乙腦病毒D.狂犬病病毒答案：A解析：漢坦病毒通過(guò)嚙齒類動(dòng)物傳播，引起腎綜合征出血熱（流行性出血熱），典型表現(xiàn)為發(fā)熱、出血、腎損害。9.鑒定金黃色葡萄球菌的關(guān)鍵試驗(yàn)是A.氧化酶試驗(yàn)B.觸酶試驗(yàn)C.凝固酶試驗(yàn)D.靛基質(zhì)試驗(yàn)答案：C解析：凝固酶試驗(yàn)是鑒別葡萄球菌致病性的關(guān)鍵（金黃色葡萄球菌凝固酶陽(yáng)性，表皮/腐生葡萄球菌陰性）。觸酶試驗(yàn)用于區(qū)分葡萄球菌（陽(yáng)性）與鏈球菌（陰性）。10.下列哪種病毒通過(guò)糞-口途徑傳播A.乙型肝炎病毒B.脊髓灰質(zhì)炎病毒C.流感病毒D.人類免疫缺陷病毒答案：B解析：脊髓灰質(zhì)炎病毒屬小RNA病毒科，主要經(jīng)糞-口傳播，引起小兒麻痹癥。乙肝（血液/母嬰）、流感（飛沫）、HIV（血液/性接觸）均非糞口傳播。11.關(guān)于支原體，正確的描述是A.有細(xì)胞壁B.能在無(wú)生命培養(yǎng)基中生長(zhǎng)C.是最小的原核細(xì)胞型微生物D.引起大葉性肺炎答案：B解析：支原體無(wú)細(xì)胞壁，可在含血清的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)（如PPLO培養(yǎng)基），是能獨(dú)立生活的最小微生物（比細(xì)菌小，比病毒大）。引起非典型肺炎（間質(zhì)性），而非大葉性肺炎（肺炎鏈球菌）。12.肥達(dá)試驗(yàn)用于診斷A.傷寒B.結(jié)核C.霍亂D.百日咳答案：A解析：肥達(dá)試驗(yàn)檢測(cè)患者血清中傷寒沙門菌O、H抗體及副傷寒甲/乙/丙H抗體，輔助診斷腸熱癥（傷寒、副傷寒）。13.新型隱球菌的典型形態(tài)特征是A.假菌絲B.厚膜孢子C.芽生孢子+寬厚莢膜D.關(guān)節(jié)孢子答案：C解析：新型隱球菌為酵母型真菌，墨汁負(fù)染色可見圓形菌體周圍有寬厚透明莢膜（診斷依據(jù)），芽生孢子但無(wú)假菌絲。14.流感病毒分型的依據(jù)是A.核蛋白（NP）和基質(zhì)蛋白（M蛋白）抗原B.血凝素（HA）抗原C.神經(jīng)氨酸酶（NA）抗原D.包膜糖蛋白抗原答案：A解析：流感病毒分甲、乙、丙三型，依據(jù)NP和M蛋白抗原性；亞型劃分依據(jù)HA和NA（如H1N1）。15.關(guān)于衣原體，錯(cuò)誤的是A.嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生B.有獨(dú)特發(fā)育周期（原體→網(wǎng)狀體）C.可引起非淋菌性尿道炎D.對(duì)青霉素敏感答案：D解析：衣原體為原核細(xì)胞型微生物，有細(xì)胞壁但不含肽聚糖（青霉素作用靶點(diǎn)），故對(duì)青霉素不敏感，對(duì)四環(huán)素、紅霉素敏感。16.血培養(yǎng)瓶中添加抗凝劑的主要目的是A.防止血液凝固B.中和血清中的補(bǔ)體C.抑制吞噬細(xì)胞活性D.提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)答案：A解析：血培養(yǎng)需采集靜脈血注入含抗凝劑（如多聚茴香磺酸鈉SPS）的培養(yǎng)瓶，防止血液凝固導(dǎo)致細(xì)菌被包裹，同時(shí)SPS可中和補(bǔ)體、抑制吞噬細(xì)胞及某些抗生素（如氨基糖苷類）。17.下列哪種細(xì)菌在麥康凱培養(yǎng)基上呈無(wú)色菌落A.大腸埃希菌B.肺炎克雷伯菌C.傷寒沙門菌D.陰溝腸桿菌答案：C解析：麥康凱培養(yǎng)基含乳糖和中性紅，能發(fā)酵乳糖的細(xì)菌（如大腸埃希菌、克雷伯菌）產(chǎn)酸使菌落呈紅色；不發(fā)酵乳糖的沙門菌、志賀菌呈無(wú)色。18.病毒中和試驗(yàn)的原理是A.病毒與抗體結(jié)合后失去感染性B.病毒與抗體結(jié)合后激活補(bǔ)體C.病毒與抗體結(jié)合后出現(xiàn)沉淀D.病毒與抗體結(jié)合后被吞噬細(xì)胞清除答案：A解析：中和試驗(yàn)利用特異性抗體與病毒結(jié)合，阻斷病毒吸附宿主細(xì)胞受體，使其失去感染性，通過(guò)觀察細(xì)胞病變（CPE）是否被抑制判斷結(jié)果。19.關(guān)于結(jié)核菌素試驗(yàn)（PPD試驗(yàn)），錯(cuò)誤的是A.陽(yáng)性表示曾感染結(jié)核分枝桿菌或接種過(guò)卡介苗B.強(qiáng)陽(yáng)性提示活動(dòng)性結(jié)核C.陰性可排除結(jié)核感染D.用于檢測(cè)Ⅳ型超敏反應(yīng)答案：C解析：PPD試驗(yàn)陰性可能因未感染、感染初期（4-8周內(nèi)）、嚴(yán)重免疫抑制（如HIV/AIDS、腫瘤）、技術(shù)誤差等，不能完全排除結(jié)核感染。20.產(chǎn)ESBLs（超廣譜β-內(nèi)酰胺酶）的大腸埃希菌對(duì)下列哪種抗生素敏感A.頭孢他啶B.亞胺培南C.氨芐西林D.頭孢噻肟答案：B解析：ESBLs可水解青霉素類、頭孢菌素類（除頭霉素類如頭孢西丁）及單環(huán)β-內(nèi)酰胺類（氨曲南），但對(duì)碳青霉烯類（亞胺培南）、頭霉素類敏感。二、填空題（每空1分，共20分）1.細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)包括（細(xì)胞壁）、（細(xì)胞膜）、（細(xì)胞質(zhì)）和（核質(zhì)）。2.病毒的基本結(jié)構(gòu)是（核心）和（衣殼），兩者組成（核衣殼）；部分病毒還有（包膜）。3.常用的細(xì)菌生化試驗(yàn)中，（觸酶）試驗(yàn)用于區(qū)分葡萄球菌與鏈球菌，（氧化酶）試驗(yàn)用于區(qū)分腸桿菌科與非發(fā)酵菌。4.真菌的無(wú)性孢子包括（分生孢子）、（孢子囊孢子）和（芽生孢子）；有性孢子包括（卵孢子）、（接合孢子）和（子囊孢子）。5.流感病毒的變異形式有（抗原漂移）（量變，引起局部流行）和（抗原轉(zhuǎn)換）（質(zhì)變，引起大流行）。6.結(jié)核分枝桿菌的致病物質(zhì)主要有（脂質(zhì)）（如索狀因子、蠟質(zhì)D）、（蛋白質(zhì)）（如結(jié)核菌素）和（多糖）。7.血培養(yǎng)的最佳采集時(shí)間是（發(fā)熱初期或寒戰(zhàn)期），成人每次采血量為（10-20ml），兒童為（1-5ml）。三、簡(jiǎn)答題（每題8分，共40分）1.簡(jiǎn)述革蘭染色的步驟及結(jié)果判定原理。答案：步驟：①初染：結(jié)晶紫染色1分鐘，水洗；②媒染：碘液染色1分鐘，水洗；③脫色：95%乙醇脫色30秒，水洗；④復(fù)染：稀釋復(fù)紅染色30秒，水洗，干燥后鏡檢。原理：革蘭陽(yáng)性菌（G+）細(xì)胞壁肽聚糖層厚（15-50層），交聯(lián)緊密，乙醇脫色時(shí)細(xì)胞壁脫水，孔徑縮小，結(jié)晶紫-碘復(fù)合物保留，呈紫色；革蘭陰性菌（G-）細(xì)胞壁肽聚糖層?。?-2層），外膜含脂多糖，乙醇破壞外膜后，結(jié)晶紫-碘復(fù)合物被洗脫，復(fù)紅復(fù)染呈紅色。2.列舉5種常見的細(xì)菌耐藥機(jī)制，并各舉1例說(shuō)明。答案：①產(chǎn)生滅活酶：如β-內(nèi)酰胺酶水解青霉素類/頭孢菌素類（大腸埃希菌產(chǎn)ESBLs）；②靶位改變：如青霉素結(jié)合蛋白（PBP）變異導(dǎo)致MRSA對(duì)甲氧西林耐藥；③膜通透性降低：銅綠假單胞菌外膜孔蛋白OprD缺失，阻礙亞胺培南進(jìn)入；④主動(dòng)外排系統(tǒng)：金黃色葡萄球菌NorA泵將氟喹諾酮類藥物泵出胞外；⑤代謝途徑改變：腸球菌對(duì)磺胺類耐藥因自身合成大量對(duì)氨基苯甲酸（PABA），競(jìng)爭(zhēng)二氫葉酸合成酶。3.簡(jiǎn)述病毒分離培養(yǎng)的常用方法及其適用病毒。答案：①細(xì)胞培養(yǎng)（最常用）：原代細(xì)胞（猴腎細(xì)胞用于分離流感病毒）、二倍體細(xì)胞（人胚肺成纖維細(xì)胞用于分離皰疹病毒）、傳代細(xì)胞（Hep-2細(xì)胞用于分離呼吸道合胞病毒）；②雞胚培養(yǎng)：絨毛尿囊膜（痘病毒）、尿囊腔（流感病毒）、羊膜腔（流感病毒初次分離）、卵黃囊（立克次體）；③動(dòng)物接種（少用）：小鼠腦內(nèi)接種分離乙腦病毒，雪貂接種分離流感病毒。4.簡(jiǎn)述真菌實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的主要流程及關(guān)鍵方法。答案：①標(biāo)本采集：根據(jù)感染部位（如淺部取皮屑/甲屑，深部取血液/腦脊液）；②直接鏡檢：淺部真菌用10%KOH濕片法（觀察菌絲/孢子），隱球菌用墨汁負(fù)染色（觀察莢膜），白假絲酵母菌用革蘭染色（陽(yáng)性芽生孢子+假菌絲）；③分離培養(yǎng)：沙保弱培養(yǎng)基（25-28℃培養(yǎng)，真菌生長(zhǎng)緩慢，需觀察2-4周），深部真菌可加抗生素（抑制細(xì)菌）；④鑒定：形態(tài)學(xué)（菌落特征如白假絲酵母菌為奶油狀，曲霉菌為絨毛狀；顯微鏡下菌絲類型如分隔/非分隔，孢子形態(tài)如分生孢子梗）、生化試驗(yàn)（如白假絲酵母菌芽管試驗(yàn)陽(yáng)性）、分子生物學(xué)（ITS區(qū)測(cè)序）；⑤藥敏試驗(yàn)：M38-A方案（針對(duì)絲狀真菌）、M27-A3方案（針對(duì)酵母樣真菌）。5.簡(jiǎn)述痰標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)的質(zhì)量控制要點(diǎn)。答案：①標(biāo)本采集：晨痰最佳，清水漱口3次后深部咳嗽留取，避免唾液污染；②標(biāo)本運(yùn)送：2小時(shí)內(nèi)送檢，4℃保存不超過(guò)24小時(shí)；③質(zhì)量評(píng)估：鏡檢白細(xì)胞>25個(gè)/低倍視野，鱗狀上皮細(xì)胞<10個(gè)/低倍視野（合格標(biāo)本）；④涂片染色：革蘭染色觀察細(xì)菌形態(tài)及比例；⑤分離培養(yǎng)：血平板（需氧菌）、巧克力平板（嗜血桿菌）、麥康凱平板（革蘭陰性桿菌），35℃5%CO?培養(yǎng)18-24小時(shí)；⑥鑒定與藥敏：挑取優(yōu)勢(shì)菌（>10?CFU/ml）進(jìn)行生化鑒定（如API系統(tǒng)），按CLSI標(biāo)準(zhǔn)做藥敏試驗(yàn)（K-B法或自動(dòng)化系統(tǒng)）；⑦報(bào)告規(guī)范：注明標(biāo)本質(zhì)量（合格/不合格），培養(yǎng)結(jié)果結(jié)合臨床（如正常菌群需謹(jǐn)慎報(bào)告）。四、案例分析題（每題10分，共20分）案例1：患者男性，65歲，慢性阻塞性肺疾?。–OPD）急性加重，發(fā)熱（38.5℃）、咳嗽、咳黃膿痰。痰涂片革蘭染色見大量革蘭陰性桿菌，部分呈球桿狀；痰培養(yǎng)：麥康凱平板上生長(zhǎng)粉紅色黏液型菌落，氧化酶試驗(yàn)陰性，IMViC試驗(yàn)（-,-,+,+）。問(wèn)題：①可能的病原體是什么？②需進(jìn)一步做哪些鑒定試驗(yàn)？③該菌的主要耐藥機(jī)制是什么？答案：①可能為肺炎克雷伯菌。依據(jù)：COPD患者常見條件致病菌；革蘭陰性桿菌，麥康凱平板乳糖發(fā)酵（粉紅色菌落），氧化酶陰性（腸桿菌科特征），IMViC試驗(yàn)（吲哚-，甲基紅-，VP+，枸櫞酸鹽+）符合克雷伯菌屬（典型為++--，但部分菌株可變異）。②進(jìn)一步鑒定：尿素酶試驗(yàn)（陽(yáng)性）、動(dòng)力試驗(yàn)（無(wú)動(dòng)力）、血清學(xué)分型（K抗原）；檢測(cè)ESBLs（確證試驗(yàn)：頭孢噻肟/頭孢他啶單用與加克拉維酸的抑菌圈直徑差≥5mm）、碳青霉烯酶（如KPC酶，用美羅培南/亞胺培南加EDTA紙片法）。③主要耐藥機(jī)制：產(chǎn)ESBLs（水解三代頭孢）、產(chǎn)AmpC酶（高產(chǎn)時(shí)對(duì)頭孢西丁耐藥）、外膜孔蛋白缺失（對(duì)碳青霉烯類耐藥）、整合子介導(dǎo)的多重耐藥（攜帶多種耐藥基因）。案例2：患兒女性，3歲，發(fā)熱3天（39℃），伴流涕、流淚，口腔頰黏膜見白色小點(diǎn)（柯氏斑）。血常規(guī)：白細(xì)胞降低，淋巴細(xì)胞比例升高。問(wèn)題：①最可能的診斷是什么？②需進(jìn)行哪些實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)？③該病原體的傳播途徑及預(yù)防措施是什么？答案：①最可能為麻疹。依據(jù)：兒童發(fā)熱伴上呼吸道卡他癥狀，柯氏斑（麻疹典型體征），白細(xì)胞降低（病毒感染特征）。②實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)：①病毒分離：取發(fā)病初期