必刷24基因工程與細胞利用

高考題目

1.(2021?全國甲卷)PCR技術(shù)可用于臨床的病原菌檢測。為檢測病人是否感染了某種病原菌，醫(yī)生進行了相

關(guān)操作：①分析PCR擴增結(jié)果；②從病人組織樣本中提取DNA；③利用PCR擴增DNA片段；④采集病人組織

樣本?；卮鹣铝袉栴}：

(1)若要得到正確的檢測結(jié)果，正確的操作順序應(yīng)該是(用數(shù)字序號表示)。

(2)操作③中使用的酶是?PCR反應(yīng)中的每次循環(huán)可分為變性、復(fù)性、________三步，其中復(fù)

性的結(jié)果是o

(3)為了做出正確的診斷，PCR反應(yīng)所用的引物應(yīng)該能與特異性結(jié)合。

(4)PCR(多聚酶鏈式反應(yīng))技術(shù)是指o該技術(shù)目前被廣泛地應(yīng)用于疾病診斷等方面。

2.(2021?全國乙卷)用DNA重組技術(shù)可以賦予生物以新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人類需要的生物產(chǎn)品。

在此過程中需要使用多種工具酶，其中4種限制性核酸內(nèi)切酶的切割位點如圖所示。

IIII

GAATTCCCCGGGCTGCAGGATATC

CTTAAGGGGCCCGACGTCCTATAG

tttt

限制酶：EeoRISmalPstI及。RV

回答下列問題：

(1)常用的DNA連接酶有笈DNA連接酶和T,DNA連接酶。上圖中酶切割后的DNA片段可

以用E.coliDNA連接酶連接。上圖中酶切割后的DNA片段可以用T&DNA連接酶連接。

(2)DNA連接酶催化目的基因片段與質(zhì)粒載體片段之間形成的化學(xué)鍵是。

(3)DNA重組技術(shù)中所用的質(zhì)粒載體具有一些特征，如質(zhì)粒DNA分子上有復(fù)制原點，可以保證質(zhì)粒在受體

細胞中能;質(zhì)粒DNA分子上有,便于外源DNA插入；質(zhì)粒DNA分子上有標記基

因(如某種抗生素抗性基因)，利用抗生素可篩選出含質(zhì)粒載體的宿主細胞，方法是。

(4)表達載體含有啟動子，啟動子是指o

3.(2020?全國I,38)為研制抗病毒A的單克隆抗體，某同學(xué)以小鼠甲為實驗材料設(shè)計了以下實驗流程。

篩

選

選

一2

制備單細胞懸液

〔

雜能產(chǎn)生抗

(小鼠甲卜在淋巴細胞卜融交病毒A的

合瘤f

向單克隆抗

(骨髓瘤細胞卜細

胞胞體的雜交

〕瘤細胞

回答下列問題:

(1)上述實驗前必須給小鼠甲注射病毒A,該處理的目的是

（2）寫出以小鼠甲的脾臟為材料制備單細胞懸液的主要實驗步驟：。

（3）為了得到能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細胞，需要進行篩選。圖中篩選1所采用的培養(yǎng)基屬于

，使用該培養(yǎng)基進行細胞培養(yǎng)的結(jié)果是=

圖中篩選2含多次篩選，篩選所依據(jù)的基本原理是0

⑷若要使能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細胞大量增殖，可采用的方法有

________________________________________________________________（答出2點即可）。

4.（2019?全國卷I,38）基因工程中可以通過PCR技術(shù)擴增目的基因?；卮鹣铝袉栴}。

⑴基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀ê?/p>

（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時,

使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是o上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分

子中的o

（3）目前在PCR反應(yīng)中使用窗g酶而不使用大腸桿菌DNA聚合酶的主要原因是

5.（2019?全國H,38）植物組織培養(yǎng)技術(shù)在科學(xué)研究和生產(chǎn)實踐中得到了廣泛的應(yīng)用。回答下列問題：

⑴植物微型繁殖是植物繁殖的一種途徑。與常規(guī)的種子繁殖方法相比，這種微型繁殖技術(shù)的特點有

____________________________________________________________________（答出2點即可）。

（2）通過組織培養(yǎng)技術(shù)，可把植物組織細胞培養(yǎng)成胚狀體，再通過人工種皮（人工薄膜）包裝得到人工種子

（如圖所示），這種人工種子在適宜條件下可萌發(fā)生長。人工種皮具備透氣性的作用是

o人工胚乳能夠為胚狀體生長提供所需的物質(zhì)，因此應(yīng)含有植物激素、

和等幾類物質(zhì)。

人工種皮

（］j~:胚狀體

-人工胚乳

（3）用脫毒苗進行繁殖，可以減少作物感染病毒。為了獲得脫毒苗，可以選取植物的進行組織培養(yǎng)。

（4）植物組織培養(yǎng)技術(shù)可與基因工程技術(shù)相結(jié)合獲得轉(zhuǎn)基因植株。將含有目的基因的細胞培養(yǎng)成一個完整植

株的基本程序是______________________________________________________

（用流程圖表示）。

6.（2019?全國III,38）培養(yǎng)胡蘿卜根組織可獲得試管苗，獲得試管苗的過程如圖所示。

切取潔凈的胡蘿卜根段一對根段進行消毒一切取1cm，左右?guī)в行纬蓪拥慕M織塊一

①

接種組織塊I一|誘導(dǎo)組織塊形成愈傷組織|一|誘導(dǎo)愈傷組織形成試管苗

④⑤⑥

回答下列問題：

(1)利用胡蘿卜根段進行組織培養(yǎng)可以形成試管苗。用分化的植物細胞可以培養(yǎng)成完整的植株，這是因為植

物細胞具有O

(2)步驟③切取的組織塊中要帶有形成層，原因是

(3)從步驟⑤到步驟⑥需要更換新的培養(yǎng)基，其原因是

________________________________________________________________________________O

在新的培養(yǎng)基上愈傷組織通過細胞的過程，最終可形成試管苗。

(4)步驟⑥要進行照光培養(yǎng)，其作用是_________________________________________________

_________________________________________________________________________________O

(5)經(jīng)組織培養(yǎng)得到的植株，一般可保持原品種的,這種繁殖方式屬于繁殖。

7.(2018?全國m,38)2018年《細胞》期刊報道，中國科學(xué)家率先成功地應(yīng)用體細胞對非人靈長類動物進

行克隆，獲得兩只克隆猴一一“中中"和''華華"。回答下列問題：

(1)“中中”和“華華”的獲得涉及核移植過程，核移植是指o通過核移植方

法獲得的克隆猴，與核供體相比，克隆猴體細胞的染色體數(shù)目(填“減半”“加倍”或“不變”)。

⑵哺乳動物的核移植可以分為胚胎細胞核移植和體細胞核移植，胚胎細胞核移植獲得克隆動物的難度

(填“大于”或“小于”)體細胞核移植，其原因是O

(3)在哺乳動物核移植的過程中，若分別以雌性個體和雄性個體的體細胞作為核供體，通常，所得到的兩個

克隆動物體細胞的常染色體數(shù)目(填“相同”或“不同”)，性染色體組合(填“相同”或

“不同”)。

必刷點一基因工程和操作工具

8.(2022?天津一中高三月考)為使水稻獲得抗除草劑性狀，科研人員將除草劑草甘瞬抗性基因轉(zhuǎn)入水稻植

株，獲得抗草甘瞬轉(zhuǎn)基因水稻?；卮鹣铝袉栴}：

GUS基因

潮霉素陽達載引

性基因事;J

草甘瞬抗性基因(w)

卜秀常

(愈片組織評閡

*選2

注：GUS基因表達產(chǎn)物經(jīng)染色能從無色變成藍色。

(1)將草甘瞬抗性基因作為,

與Ti質(zhì)粒構(gòu)建基因表達載體。

⑵用處理農(nóng)桿菌后獲得感受態(tài)細胞，將其與基因表達載體混合完成

后，在添加潮霉素的培養(yǎng)基中，經(jīng)篩選1得到含基因表達載體的農(nóng)桿菌。

⑶取某品種水稻的幼胚，先進行處理，然后接種到培養(yǎng)基中，水稻幼胚細胞發(fā)生

形成愈傷組織。用含基因表達載體的農(nóng)桿菌侵染該愈傷組織。

(4)利用PCR技術(shù)，可以鑒定被侵染的愈傷組織中是否含有草甘瞬抗性基因。草甘瞬抗性基因的部分序列如

下：

5'—ATGGCT...AGGAAC—3,

3'-TACCGA...TCCTTG-5'

根據(jù)上述序列應(yīng)選擇引物(填字母)進行PCRO

A.引物：5,一TACCGA—3'B.引物：5'—GTTCCT—

C.引物：5'—AUGGCU—3'D.引物：5'一ATGGCT-3'

⑸除了鑒定愈傷組織中是否含有目的基因以外，還可以利用儂基因表達產(chǎn)物的鑒定進行圖中的篩選2,

以確定目的基因是否。兩次篩選后得到的轉(zhuǎn)基因愈傷組織經(jīng)過細胞的過程，獲得轉(zhuǎn)

基因水稻。

9.大腸桿菌的質(zhì)粒上含有l(wèi)acL基因，其編碼的產(chǎn)物B半乳糖首酶在X-gal和IPTG同時存在時，可以產(chǎn)

生藍色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍色，否則菌落呈現(xiàn)白色。如圖為利用該質(zhì)粒進行的轉(zhuǎn)基因過程，回答下列問題：

./EcoRIECORISmaI含目的基

卜一/Ll_因的DNA

SmaI、EcoRI酶切

培養(yǎng)基中加入|培養(yǎng)基中加入|培養(yǎng)基中加入

X-gakIPTG|X-gal.IPTGIX-gal.IPTG

菌落①菌落②菌落③

⑴在基因工程中，大腸桿菌質(zhì)粒通常作為,除此以外，基因工程操作還需要

和兩種工具酶。

(2)基因工程的核心操作步驟是0

(3)本題中將目的基因?qū)胧荏w細胞的方法是,目的基因在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過

程，稱為。

(4)加入了X-gal和IPTG培養(yǎng)基被稱為培養(yǎng)基，能夠篩選出含目的基因的菌落是(填“①”

“②”或“③”),顏色是O

10.人的T細胞可以產(chǎn)生某種具有臨床價值的蛋白質(zhì)(Y),該蛋白質(zhì)由一條多肽鏈組成。目前可以利用現(xiàn)代

生物技術(shù)生產(chǎn)Y?；卮鹣铝袉栴}。

(1)若要獲得Y的基因，可從人的T細胞中提取作為模板，在________催化下合成cDNA,再利用

技術(shù)在體外擴增獲得大量Y的基因。

(2)將目的基因?qū)胫参锛毎Ｓ玫姆椒ㄊ寝r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。若將上述所得Y的基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的

中，得到含目的基因的重組Ti質(zhì)粒，則可用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將該基因?qū)肽撤N植物的葉肉細胞中。

若該葉肉細胞經(jīng)培養(yǎng)、篩選等得到了能穩(wěn)定表達Y的愈傷組織，則說明Y的基因已經(jīng)o

(3)天然的Y通常需要在低溫條件下保存。假設(shè)將Y的第6位氨基酸甲改變?yōu)榘被嵋铱商岣咂錈岱€(wěn)定性，

若要根據(jù)蛋白質(zhì)工程的原理對Y進行改造以提高其熱穩(wěn)定性，具體思路是

11.某質(zhì)粒上有Sa/I、用力dill、艮就H三種限制酶切割位點，同時還含有抗四環(huán)素基因和抗氨葦青霉素基

因。利用此質(zhì)粒獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的過程，如下圖所示。請回答下列問題：

HindHIBamHIsalI

含抗鹽基

因的DNA「J

抗鹽基因

抗氨芳青

-BamHI

霉素基因

HindHI

愈傷組織煙草細胞

轉(zhuǎn)基因抗鹽

煙草幼苗

(1)將目的基因?qū)胫参锛毎捎米疃嗟姆椒ㄊ寝r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。其中用到的質(zhì)粒是

該質(zhì)粒含有一段特殊的DNA片段，稱為o該方法中農(nóng)桿菌的作用是

(2)在構(gòu)建重組質(zhì)粒時，和只用一種酶切割目的基因的兩端及質(zhì)粒相比，選用必力dill和SalI兩種酶的好處

是。

(3)含有目的基因的農(nóng)桿菌可根據(jù)標記基因進行篩選。若農(nóng)桿菌在含有氨革青霉素和四環(huán)素的培養(yǎng)基上都可

以生長繁殖，農(nóng)桿菌中是否已含有目的基因？(填“是”或“否”)。為什么？

(4)將已經(jīng)轉(zhuǎn)化的農(nóng)桿菌進行如下操作，篩選出符合要求的農(nóng)桿菌。先把轉(zhuǎn)化的農(nóng)桿菌接種到A培養(yǎng)基中培

養(yǎng)，長出菌落后，用無菌牙簽挑取A上的單個菌落，分別接種到B（含氨革青霉素）和C（含四環(huán)素和氨革青

霉素）兩個培養(yǎng)基的相同位置上，一段時間后，菌落的生長狀況如圖所示。含目的基因的菌落位于B或C上

的哪些菌落中？請在圖中相應(yīng)的位置上圈出來。

12.圖1是某基因工程中構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程示意圖，載體質(zhì)粒P0具有四環(huán)素抗性基因（力ef）和氨節(jié)青霉素

抗性基因（a/）o請回答下列問題：

圖1

-GATIATC-

（l）aoRV酶切位點為.，比oRV酶切出來的線性載體P1為末端。

—CTAfTAG—

（2）用全gDNA聚合酶進行PCR擴增獲得的目的基因片段，其兩端各自帶有一個腺喋吟脫氧核甘酸。載體P1

用酶處理，在兩端各添加了一個堿基為的脫氧核甘酸，形成P2；P2和目的基因片段在________酶

作用下，形成重組質(zhì)粒P3。

（3）為篩選出含有重組質(zhì)粒P3的菌落，采用含有不同抗生素的平板進行篩選，得到A、B、C三類菌落，其

生長情況如表（“+”代表生長，“一”代表不生長）。根據(jù)表中結(jié)果判斷，應(yīng)選擇的菌落是（填表

中字母）類，另外兩類菌落質(zhì)粒導(dǎo)入情況分別是、。

落類型

ABC

無抗生素+++

氨葦青霉素++一

四環(huán)素+一一

氨芳青霉素+四環(huán)素+一一

（4）為鑒定篩選出的菌落中是否含有正確插入目的基因的重組質(zhì)粒，擬設(shè)計引物進行PCR鑒定。圖2所示為

甲、乙、丙3條引物在正確重組質(zhì)粒中的相應(yīng)位置，PCR鑒定時應(yīng)選擇的一對引物是o某學(xué)生嘗試

用圖中另外一對引物，從某一菌落的質(zhì)粒中擴增出了400bp的片段，原因是。

ampr

13.（2022?濟南聯(lián)考）下圖是利用工程菌（大腸桿菌）生產(chǎn)人生長激素的實驗流程。所用的pBR322質(zhì)粒含有

限制酶戶s打、￡coRI和肥力dIII的切點各一個，且三種酶切割形成的末端各不相同，而否/表示氨革青霉

素抗性基因，表示四環(huán)素抗性基因。請回答以下相關(guān)問題：

因表達公

大腸

EcoRI桿菌

Pstk1Wzndin

無菌牙簽

切割后的質(zhì)粒O培養(yǎng)、純J

I④咻3H

人生長激

素基因含氨若青含四

霉素和四環(huán)素

環(huán)素

②人生長激素mRNA三人的某組織細胞

（1）目的基因主要是指編碼蛋白質(zhì)的基因，也可以是一些具有的因子。過程①所用到的組織細胞是

,③過程的目的是,⑤過程常用處理大腸桿菌。

⑵如果用限制酶Pstl、BcdRI和用力dill對圖中質(zhì)粒進行切割，形成的DNA片段種類有種，這些

種類的DNA片段中含有完整氨芳青霉素抗性基因的DNA片段和四環(huán)素抗性基因的DNA片段分別有種

和種O

（3）如果只用限制酶尸stI切割目的基因和質(zhì)粒，完成過程④、⑤后（受體大腸桿菌不含/磔1Te的,將三

角瓶內(nèi)的大腸桿菌先接種到甲培養(yǎng)基上，形成菌落后用無菌牙簽挑取甲培養(yǎng)基上的單個菌落，分別接種到

乙和丙兩個培養(yǎng)基的相同位置上，一段時間后，菌落的生長狀況如圖乙、丙所示。接種到甲培養(yǎng)基上的目

的是篩選的大腸桿菌；接種到乙培養(yǎng)基上的大腸桿菌菌落，能存活的大腸桿菌體內(nèi)

導(dǎo)入的是。含有目的基因的大腸桿菌在培養(yǎng)基乙和丙上的生存情況是

14.如圖是從酵母菌獲取某植物需要的某種酶基因的流程，結(jié)合所學(xué)知識及相關(guān)信息回答下列問題:

含目的目的

①分

基因的基因

酵菌株I

母

菌構(gòu)IcDNAc含目的

基因的

提取篩選

整株

分I離

目的基

因n

⑴圖中B過程是,cDNA文庫(填“大于”“等于”或者“小于”)基因組文庫。

(2)為在短時間內(nèi)大量獲得目的基因，可用擴增的方法，其原理是o

(3)目的基因獲取之后，需要進行,此步驟是基因工程的核心。完成此步驟后產(chǎn)生的結(jié)

構(gòu)必須含有以及目的基因等。

(4)將該目的基因?qū)肽畴p子葉植物細胞，常采用的方法是,其能否在此植物體內(nèi)穩(wěn)定遺

傳的關(guān)鍵是此植物的染色體DNA中是否插入了目的基因，可以用技術(shù)進行檢測。

(5)如果要想使該酶活性更強或具有更強的耐受性需要對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造，這要通過被稱為第二代基因

工程的。首先要設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，再推測應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對應(yīng)的

(6)除植物基因工程碩果累累之外。在動物基因工程、基因工程藥物和基因治療等方面也取得了顯著成果,

請列舉出至少兩方面的應(yīng)用：o

必刷點二結(jié)合RCR技術(shù)的應(yīng)用

15.如圖為轉(zhuǎn)基因抗病毒馬鈴薯培育過程圖，請據(jù)圖回答有關(guān)問題:

。靶DNA片段

3'--------------------------3'

引物A引物B引物C

引物D引物E引物F

3'-------------------------------------------5'

I重組質(zhì)粒I

I抗病毒植株冉I愈傷組織盧［回組細胞曙?

I受體細胞I

(1)PCR技術(shù)利用的基本原理是____________________________________________

利用該技術(shù)擴增目標DNA片段(子鏈的延伸方向從5,一T),應(yīng)選擇圖中的引物(填字母)與模板

DNA結(jié)合。

(2)PCR體系經(jīng)過n次循環(huán)可使DNA數(shù)量得到約2〃倍的擴增。若反應(yīng)體系加入0個靶DNA,經(jīng)3次循環(huán)后圖

中所示目標DNA片段所占的比例為0

(3)在構(gòu)建基因表達載體時，常用兩種不同的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，獲得不同的黏性末端，其主要目

的是

⑷重組細胞經(jīng)過G、H過程成功地培育出了轉(zhuǎn)基因抗病毒馬鈴薯植株，此過程涉及的細胞工程技術(shù)是

，該技術(shù)廣泛應(yīng)用于、等育種過

程。

(5)研究表明，轉(zhuǎn)基因植物可以通過花粉將外源基因擴散到其他植物，從而對生態(tài)環(huán)境造成潛在的危害。因

此，科學(xué)家設(shè)法將目的基因整合到受體細胞的(填“細胞核”或“葉綠體”)基因組中，以防止目

的基因通過花粉向其他植物擴散。

16.PCR是多聚酶鏈式反應(yīng)的縮寫，利用PCR技術(shù)可對目的基因進行擴增。請根據(jù)下面PCR反應(yīng)原理示意圖

回答有關(guān)問題：

咂引物而U甘dATP

7皿叫HndGTP

模板DNAdTTP

加熱至951c二

，DNA解鏈,.?

,...njow

T0TOW皿(3令

典而??麗

口而阿口―.

冷卻至55~60七加熱至70~75七

(l)PCR的原理是o

(2)PCR技術(shù)使DNA解鏈是通過實現(xiàn)的，DNA的這種解鏈現(xiàn)象在一定條件下是(填“可逆的”

或“不可逆的”)o

(3)DNA解鏈后冷卻的目的是o

⑷溫度加熱至70?75℃時，酶把單個脫氧核甘酸通過

鍵連接到引物上。如此逐漸延伸形成互補鏈，進而使目的基因加倍。

(5)通過重復(fù)循環(huán)過程，使目的基因以形式擴增。

必刷點三蛋白質(zhì)工程

17.基因工程已成為生物科學(xué)的核心技術(shù)，在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生等領(lǐng)域中有著廣泛的應(yīng)用。請回答下列問題:

(1)在基因工程操作過程中，E,coLDNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。

(2)應(yīng)用基因工程技術(shù)獲得抗蟲棉的過程：目的基因一受體細胞一轉(zhuǎn)基因抗蟲棉，為使抗蟲基因在抗蟲棉細

胞中高效表達，需要把目的基因片段插入基因表達載體的之間。抗蟲基因的遺傳特性能

在抗蟲棉株體內(nèi)維持和表達的關(guān)鍵是o通

過此過程產(chǎn)生的抗蟲棉還需要在_______水平上檢驗抗蟲效果。為防止抗蟲棉的抗蟲基因通過花粉轉(zhuǎn)移到

自然界中的其他植物中，科學(xué)家設(shè)法將抗蟲基因整合到受體細胞的中，其原因是

(3)干擾素是抗病毒的特效藥，由于干擾素在體外保存困難，可利用蛋白質(zhì)工程對干擾素進行改造，基本途

徑：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)一一推測應(yīng)有的氨基酸序列一找到相對應(yīng)的脫氧核甘酸序列(基因)。

18.科學(xué)家將人的生長激素基因與pBR322質(zhì)粒進行重組，得到的重組質(zhì)粒導(dǎo)入牛的受精卵，使其發(fā)育為轉(zhuǎn)

基因牛，再通過細胞工程培育出轉(zhuǎn)基因克隆牛。PBR322質(zhì)粒含有兩個抗生素抗性基因和5個限制酶切點(如

圖2)。將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌，并成功地在大腸桿菌中得以表達。請據(jù)圖回答問題：

mRNA--單鏈DNA-

圖1

(1)圖1中顯示的人的生長激素基因是人工合成的，圖中①過程需要的酶是o與②過程比較，①過

程所特有的堿基配對方式是(用字母和箭頭表示)O

(2)圖1中的mRNA是從人體的細胞中獲取的。

(3)重組質(zhì)粒形成與否需要鑒定和篩選，方法是將重組質(zhì)粒的DNA分子導(dǎo)入大腸桿菌，通過含抗生素的培養(yǎng)

基進行培養(yǎng)，觀察大腸桿菌的生長、繁殖情況并進行判斷，如圖3所示：

受體菌受體菌

含氨節(jié)青霉素的培養(yǎng)基含四環(huán)素的培養(yǎng)基

AB

圖3

①如果受體菌在培養(yǎng)基A上能生長、繁殖形成菌落，而不能在培養(yǎng)基B上生長、繁殖，則限制酶a的切點

是圖2中的-

②如果受體菌在培養(yǎng)基A上不能生長、繁殖形成菌落，而在培養(yǎng)基B上能生長、繁殖，則限制酶a的切點

是圖2中的-

③如果受體菌在培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B上都能生長、繁殖形成菌落，則限制酶a的切點是圖2中的o

(4)將目的基因?qū)氪竽c桿菌時，常利用CT+處理大腸桿菌細胞，使其成為,與溶有目的基因的緩

沖液混合，從而完成轉(zhuǎn)化過程。若重組大腸桿菌產(chǎn)生的中間代謝產(chǎn)物擴散到水體或土壤中，會引發(fā)

安全問題。

19.干擾素可以用于治療病毒感染和癌癥，但在體外保存相當困難。如果將其分子上的一個半胱氨酸變成絲

氨酸，那么，便能在一70℃條件下保存半年之久，這需要利用蛋白質(zhì)工程來完成。請回答下列問題：

(1)天然蛋白質(zhì)的合成過程是按照進行的，而蛋白質(zhì)工程與之相反。蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子

的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過,對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造，

或制造新的蛋白質(zhì)，以滿足人類生產(chǎn)和生活的需求。

(2)若將干擾素的一個半胱氨酸變成絲氨酸，推測相應(yīng)的脫氧核甘酸序列(填“是”或“不是”)唯

一的?？衫肞CR技術(shù)擴增目的基因，該技術(shù)的前提是要有一段,以

便根據(jù)這一序列合成引物。

⑶科學(xué)家在基因工程和蛋白質(zhì)工程中常用大腸桿菌作為受體細胞，原因是其

_______（答出兩點即可）。大腸桿菌常用的轉(zhuǎn)化

方法是首先用處理后成為細胞，再與重組表達載體溶于緩沖溶液中完成轉(zhuǎn)化。

（4）可用（填物質(zhì)名稱）檢測干擾素基因是否翻譯出蛋白質(zhì)。

20.鐮刀型細胞貧血癥是一種單基因遺傳病,患者的血紅蛋白分子B肽鏈第6位氨基酸谷氨酸被緘氨酸代替,

導(dǎo)致功能異常?；卮鹣铝袉栴}：

（1）異常血紅蛋白的氨基酸序列改變的根本原因是編碼血紅蛋白基因的序列發(fā)生改變。

（2）將正常的血紅蛋白基因?qū)牖颊叩墓撬柙煅杉毎?，可以合成正常的血紅蛋白達到治療的目的。此操

作（填“屬于”或“不屬于"）蛋白質(zhì)工程，理由是該操作

⑶用基因工程方法制備血紅蛋白時，可先提取早期紅細胞中的，以其作為模板，在

酶的作用下反（逆）轉(zhuǎn)錄合成cDNA,cDNA與載體需在限制酶和酶的作用下，構(gòu)建基因表達載

體，導(dǎo)入受體菌后進行表達。

⑷檢測受體菌是否已合成血紅蛋白，可從受體菌中提取,用相應(yīng)的抗體進行

雜交，若出現(xiàn)雜交帶，則表明該受體菌已合成血紅蛋白。

必刷點四植物細胞工程

21.植物組織培養(yǎng)技術(shù)可以用來繁殖名品花卉，某同學(xué)利用藍色月季花來進行培育，培育過程如圖所示，據(jù)

此回答下列問題：

仍為

愈傷自愈傷

組織/e組織

對照細胞分細胞分細胞分細胞分

裂素多,裂素少,裂素和,裂素的

生長素生長素生長素量中等,

少多比例合生長素

適少

乙

（1）植物組織培養(yǎng)是在________________條件下，將離體的植物器官、組織、細胞培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基

上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其經(jīng)過A形成愈傷組織后再經(jīng)過B,最終形成完整的植株。

⑵為了防止其品質(zhì)退化，該同學(xué)選用植株部位進行組織培養(yǎng)，選擇該位置的原因是

(3)在培養(yǎng)過程中，該同學(xué)想要了解細胞分裂素與生長素對促進植物生根還是生芽的影響設(shè)計了如圖乙的實

驗，由圖可知當細胞分裂素濃度大于生長素濃度時，誘導(dǎo)的生長，當細胞分裂素濃度小于生長素

濃度時，誘導(dǎo)的生長。

22..(2022?青島高三期中)青蒿素是被譽為“世界上唯一有效的瘧疾治療藥物”，幾乎不溶于水，且對熱

不穩(wěn)定，所以提取工藝一直難以突破。中國科學(xué)家屠呦呦因在抗瘧疾藥物青蒿素的提取方面做出了突出貢

獻而獲2015年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎。下圖為組織培養(yǎng)獲得含青蒿素較高的黃花蒿的基本流程。試回答下

列問題：

②移入青蒿切片組織

①浸人.培養(yǎng)基，③加抗生素

10min轉(zhuǎn)化3天'繼續(xù)培養(yǎng)

青蒿葉片發(fā)根農(nóng)桿培養(yǎng)基不加激素

切成小塊菌菌液

青蒿根愈傷組織

培養(yǎng)基加激素培養(yǎng)基加激素

(1)建立無菌體系時，需要用到的酒精溶液，幼嫩的材料易在酒精溶液中失綠，所以浸泡時

間要短，而且酒精處理后馬上要用沖洗。獲得愈傷組織屬于植物組織培養(yǎng)技術(shù)過程中的

階段。

(2)題中④培養(yǎng)基與③培養(yǎng)基是否一致，并請說明理由：。

(3)組織培養(yǎng)過程中外植體通常選取黃花蒿的分生區(qū)組織的原因是

愈傷組織中提取不到青蒿素的原因是0步驟③青蒿葉

片組織加入抗生素的作用是____________________________________________

(4)某小組對生根的青蒿繼續(xù)組織培養(yǎng)得到了黃花蒿幼苗，但是幼苗葉片顏色為黃色，可能的原因是培養(yǎng)基

中沒有添加元素,也可能是______________________________________

23.科學(xué)家用植物體細胞雜交的方法，將番茄的原生質(zhì)體和馬鈴薯的原生質(zhì)體融合，成功地培育出了“番茄

一馬鈴薯”雜種植株，如圖1所示，其中①?⑤表示過程，a?f表示細胞、組織或植株。育種工作者還利

用番茄進行了如圖2所示的三組實驗。據(jù)圖回答下列問題：

番茄細胞

馬鈴薯細胞

圖1

番茄韌皮部細胞花粉花粉花粉

j培組Y培

組馬鈴

織怦

織養(yǎng)1番茄1234薯堿基對

幼苗A幼苗B⑥細胞A1500

細胞I細胞秋|仙組|培二._二1300

分裂|分化水|素織|養(yǎng)1(XX)

植物體A植物體B植物體C600

Inin300

圖2圖3

(1)與過程③密切相關(guān)的具有單層膜結(jié)構(gòu)的細胞器為。

(2)過程②后，在顯微鏡下觀察融合的活細胞中有供體的存在，這一特征可作為初步篩選雜種

細胞的標志。

⑶如果形成c的a、b原生質(zhì)體都來自番茄細胞，那么更簡單地得到番茄植株f的處理方法是

(4)若雜種植株在有絲分裂過程中，僅保留番茄的染色體而馬鈴薯的染色體會不斷丟失，采用特異性引物對

番茄和馬鈴薯基因組DNA進行PCR擴增，得到兩親本的差異性條帶，可用于雜種植株的鑒定。圖3是用該

引物對雙親及4棵再生植株1?4進行PCR擴增的結(jié)果。據(jù)圖判斷，再生植株1?4中一定是雜種植株的有

________(多選)。

⑸圖2中過程I培育植物體A主要應(yīng)用了技術(shù)。

⑹用紅果多室(Yymm)番茄植株的花粉進行H、III有關(guān)實驗，則過程II中，培育植物體B的方法(II)稱為

24.下圖中親本植株的基因型為Tt(體細胞染色體數(shù)為2A),A、B、C、D表示以親本植株為材料進行的四

種人工繁殖過程。請據(jù)圖回答下列問題：

4-^

親本植株離體

細胞原生質(zhì)體植株

(1)四種人工繁殖過程都用到的植物細胞工程技術(shù)是技術(shù)。圖中不同的方法都能獲得子代植

株，其根本原因是O

(2)經(jīng)過B過程獲得的子代植株的基因型為,子代再連續(xù)自交2代后，T的基因頻率和TT

的基因型頻率分別為、。

(3)圖中①需經(jīng)過的生理過程是。

(4)植物細胞獲得具有活力的原生質(zhì)體需要用處理，②過程表示將該植物的兩個

原生質(zhì)體進行融合，融合前需用化學(xué)試劑進行誘導(dǎo)；圖中A、B、C、D過程都能得到一種

高度液泡化的薄壁細胞組成的結(jié)構(gòu)一一，某同學(xué)取A過程的薄壁細胞制成臨時裝片進行觀

察，可觀察到中期細胞中染色體組數(shù)為組。

(5)通過D過程獲得子代植株用到的工程技術(shù)手段是技術(shù)，科學(xué)家已經(jīng)利用該技術(shù)

培育出了白菜一甘藍和胡蘿卜一羊角芹等，這說明該技術(shù)具有的優(yōu)點是

25.玉米(2〃=20)和水稻(2卬=24)均為二倍體植物，某實驗小組擬用體細胞雜交技術(shù)培育富含B胡蘿卜素的

“大米”植株，過程設(shè)計如圖所示。請回答下列問題：

玉米體

細胞-

厚生質(zhì)體A

水稻體BH?]-正在融合的雜種愈傷“黃金大米”

細胞原生質(zhì)體細胞組織植株

原生質(zhì)體B

(D①為原生質(zhì)體的制備過程，該過程需要的酶是,制備原生質(zhì)體的過程不能

在清水中進行，以防止_________________________O

(2)原生質(zhì)體融合過程體現(xiàn)了細胞膜的結(jié)構(gòu)特點。

(3)圖中融合的雜種細胞中含有_______個染色體組，該雜種細胞培育形成的植株的精原細胞在減數(shù)分裂過

程中能產(chǎn)生_______個四分體。

⑷③過程(填“需要”或“不需要”)在光下進行，④過程中愈傷組織分化的方向與培養(yǎng)基中

___________________________有關(guān)。

必刷點五動物細胞培養(yǎng)

26.回答下列有關(guān)動物細胞培養(yǎng)的問題：

(1)在動物細胞培養(yǎng)過程中，當貼壁細胞分裂生長到細胞表面_______時，細胞會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象

稱為細胞的o此時，瓶壁上形成的細胞是層。要使貼壁的細胞從瓶壁上分離下來，需要

用酶處理，用到的酶是o

(2)隨著細胞傳代次數(shù)的增多，絕大部分細胞分裂停止，進而出現(xiàn)現(xiàn)象；但極少數(shù)細胞可

以連續(xù)增殖，其中有些細胞會因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而獲得，該種細胞的黏著性,細胞膜

表面蛋白質(zhì)(糖蛋白)的量_______O

⑶現(xiàn)用某種大分子染料對細胞進行