模塊檢測卷（四）

（時間：90分鐘分?jǐn)?shù)：100分）

1.（8分）（2021?山西長治六聯(lián)）乳頭瘤病毒（HPV）可導(dǎo)致人患宮頸癌，科研人員將

HPV某外殼蛋白A基因構(gòu)建成表達載體，經(jīng)包裝或直接注入體內(nèi)，表達出相應(yīng)

抗原，誘導(dǎo)機體產(chǎn)生免疫反應(yīng)。該方法獲得的疫苗稱為DNA疫苗。請回答下列

問題：

（1）獲取A基因的方法：

①方法一：提取HPV的DNA,利用PCR技術(shù)擴增A基因時，至少經(jīng)過________

次循環(huán)才能獲得該基因，此過程中利用的原料是。

②方法二：從宿主細胞中提取總RNA,以與________________________互補的

一段單鏈DNA作為引物，加入酶獲得cDNA,然后經(jīng)PCR技術(shù)擴增獲

得大量的A基因。

（2）構(gòu)建基因表達載體時，常用不同的限制酶切割質(zhì)粒與目的基因，其具備的優(yōu)

勢是=

（3）DNA疫苗是預(yù)防性生物制品，與傳統(tǒng)疫苗相比其具備的優(yōu)點有

（至少一點），而單克隆抗體作為治療性生物制品，具備的優(yōu)點

是,制備單克隆抗體需要以技術(shù)為基礎(chǔ)。

2.（8分）（2021.寧夏統(tǒng)考）基因工程又稱基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)，是以分子

遺傳學(xué)為理論基礎(chǔ)，以分子生物學(xué)和微生物學(xué)的現(xiàn)代方法為手段的技術(shù)。如圖是

基因工程示意圖，請據(jù)圖回答下列問題:

轉(zhuǎn)

V+■基

載體目的因

DNA生

（已切開）基因物

⑴從基因文庫中提取的目的基因通過PCR技術(shù)進行擴增時，所用的酶與細胞內(nèi)

同類酶的差異在于該酶。

（2）進行①過程時，需用酶切開載體以插入目的基因。若要使目的基因

在受體細胞中表達，需要通過表達載體而不能直接將目的基因?qū)胧荏w細胞，原

因是（答出兩點即可）。

⑶若圖中宿主細胞為大腸桿菌，一般情況下②過程不能直接用未處理的大腸桿

菌作為受體細胞，原因是;已轉(zhuǎn)化

的宿主細胞（大腸桿菌）指的是O

（4）真核生物基因（目的基因）在大腸桿菌細胞內(nèi)表達時，表達出的蛋白質(zhì)可能會被

降解。為防止蛋白質(zhì)被降解，在實驗中應(yīng)選用的大腸桿菌作為受體

細胞，在蛋白質(zhì)純化的過程中應(yīng)添加的抑制劑。

3.（8分）（2021.江西臨川一中模擬）為生產(chǎn)高效價疫苗和簡化計劃免疫程序，科學(xué)家

研制出基因工程乙肝一百白破（rHB—DTP）四聯(lián)疫苗，經(jīng)各項檢測均通過rHB-

DTP四聯(lián)疫苗制檢規(guī)程的標(biāo)準(zhǔn)。四聯(lián)疫苗的有效成分是乙肝病毒表面抗原、百

日咳桿菌、白喉桿菌和破傷風(fēng)桿菌的四種類毒素。請分析回答下列問題：

⑴為獲取百日咳桿菌類毒素的基因，可從百日咳桿菌的細胞中提取對應(yīng)

,在________酶的作用下合成雙鏈cDNA片段，獲得的cDNA片段與

百日咳桿菌中該基因堿基序列（填“相同”或“不同”）。

⑵由于乙肝病毒表面抗原的基因序列比較小，且序列已知，因此獲得目的基因

可采用方法合成，然后通過________大量擴增，此技術(shù)的前提是

_,以便合成引物。

⑶研究發(fā)現(xiàn)，如果利用蛋白質(zhì)工程將白喉桿菌類毒素第20位和第24位的氨基

酸改變?yōu)榘腚装彼?，免疫效果更好。此種技術(shù)的基本途徑：①從預(yù)期的蛋白質(zhì)功

能出發(fā)；②設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)；③;④找到相對

應(yīng)的脫氧核昔酸序列。

4.（8分）（2021.江蘇南京一模）徑柳匙葉草是一種泌鹽植物，科研工作者將徑柳匙葉

草液泡膜Na+/K+逆向轉(zhuǎn)運蛋白基因（TaNHX2基因）轉(zhuǎn)移到棉花細胞內(nèi)，獲得了轉(zhuǎn)

基因耐鹽棉花新品種。圖1是獲取的含有目的基因的DNA片段，Sau3AI.EcoR

I、BamHI為三種限制酶，圖中箭頭所指為三種酶的酶切位點；圖2是三種限

制酶的識別序列與酶切位點示意圖；圖3是土壤農(nóng)桿菌中用于攜帶目的基因的

Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖。請分析回答問題：

匚T—GAATTC—

EcoRD—CTTAAG—

RuT—GGATCC—

BamHI—CCTAGG—

Sa“3AI一胃”一

——C1AG一

圖1圖2

抗生素抗性基因

圖3

(1)若圖1所示DNA片段是利用徑柳匙葉草的DNA直接獲得的，則該獲取目的

基因的方法為。

(2)不能在徑柳匙葉草根尖分生區(qū)細胞中獲得TaNHX2基因的mRNA,其原因

是。

⑶若用及MHI切割圖1所示的DNA片段，獲得目的基因，則需選用

切割圖3所示質(zhì)粒，以便構(gòu)建基因表達載體，該方案的缺陷是

.。故切割圖］所示DNA片段的最

佳方案是選用。

(4)用上述最佳方案構(gòu)建基因表達載體，所得重組質(zhì)粒(填“能”“不能”

或“不一定能”)被3劭汨I切割。

(5)圖3中，質(zhì)粒上的抗生素抗性基因的作用是。

(6)為了檢測技術(shù)成果，科研工作者將轉(zhuǎn)基因棉花種植在鹽堿地中，觀察其生長

狀況，這屬于水平的檢測。

5.(8分)(2021.廣東惠州調(diào)研)草莓芳香濃郁，營養(yǎng)豐富。請回答下列與草莓栽培有

關(guān)的問題。

⑴野生草莓往往是二倍體，而人工栽培的草莓往往是通過特殊技術(shù)培育成的多

倍體，這利用了多倍體植株的特點；但多倍體草莓的

繁殖往往是無性繁殖，即使外植體細胞經(jīng)歷與過程，成為試管

苗。該技術(shù)證明了已分化的植物細胞仍具有O

⑵草莓植株感染病毒后會出現(xiàn)結(jié)果減少，品質(zhì)變劣。若要恢復(fù)其品質(zhì)，可選取

植物的進行植物組織培養(yǎng)，獲得脫毒苗。止匕外，也可將抗病毒基因成功

導(dǎo)入受體細胞細胞核中并培養(yǎng)出轉(zhuǎn)基因抗病毒草莓植株。為了檢測抗病毒基因是

否存在于該轉(zhuǎn)基因植物的所有組織細胞中，需分別提取該轉(zhuǎn)基因植物的所有組織

細胞中的（填”蛋白質(zhì)”"總RNA"或"核DNA”）與基因探針雜交；

欲從個體生物學(xué)水平來鑒定抗病毒基因是否賦予該植物抗病特性的操作是

⑶在植物組織培養(yǎng)過程中，由于培養(yǎng)細胞一直處于狀態(tài),可以對植物

的愈傷組織進行誘變處理，促使其發(fā)生突變,再進一步培養(yǎng)篩選獲得草莓新品種。

（4）若想利用植物體細胞雜交技術(shù)培養(yǎng)出馬鈴薯一草莓雜種植物以提高土地的利

用率，（填“能”或“不能”）把兩物種細胞直接融合，理由是

6.（8分）（2020.廣西南寧二診）人乳頭狀瘤病毒（HPV）與宮頸癌的發(fā)生密切相關(guān)，抗

HPV的單克隆抗體可以準(zhǔn)確檢測出HPV,從而及時監(jiān)控宮頸癌的發(fā)生?；卮鹣?/p>

列問題：

小鼠骨髓瘤細胞

將特定的抗:.?（不能在HAT培

原注入小鼠J?養(yǎng)基上生長）

雜交瘤

混合并進<----：細胞分

彳了細胞融.

“開培養(yǎng)/CC

入轉(zhuǎn)至U雜交瘤

某種淋巴細胞；AT培養(yǎng)

選育出產(chǎn)生

（產(chǎn)生特異抗體）基上培養(yǎng)細胞生長

特異性強的

抗體的細胞

⑴制備抗HPV的單克隆抗體時，給小鼠注入的抗原是

,然后從小鼠體內(nèi)獲得能產(chǎn)生相應(yīng)抗體的細胞，這種

細胞內(nèi)參與抗體合成和分泌的細胞器有。

⑵制備單克隆抗體過程中用到了小鼠的骨髓瘤細胞，這是因為該細胞具有

的特點。B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合時，常用的誘導(dǎo)因素有

_________________等。

⑶在HAT培養(yǎng)基上能夠連續(xù)增殖的細胞是,該細胞所產(chǎn)生的抗體

（填“一定”或“不一定”）能抗HPV。對抗HPV抗體檢測呈陽性的雜

交瘤細胞進行克隆化培養(yǎng)時，先將培養(yǎng)液中的細胞濃度稀釋到3?10個/mL,

然后在多孔細胞培養(yǎng)板的每個孔中只能加入01mL細胞稀釋液，絕對不能多加,

原因是O

7.（8分）（2020.陜西榆林三模）某基因研究院培育出了轉(zhuǎn)基因克隆綿羊，該綿羊能合

成深海魚體內(nèi)富含的不飽和脂肪酸omega—3。

⑴在培育轉(zhuǎn)基因克隆綿羊過程中，應(yīng)用到的細胞工程技術(shù)有和核

移植。核移植后的受體細胞利用物理或化學(xué)方法被激活后，應(yīng)移入

中繼續(xù)培養(yǎng)，以檢查其發(fā)育能力。

（2）科研人員將omega—3合成酶的基因片段導(dǎo)入受體細胞常采用技術(shù),

使目的基因進入受體細胞，并且在受體細胞內(nèi)的過程，稱為轉(zhuǎn)

化。

⑶若要鑒別XY型性別決定的動物胚胎的性別可以獲取該種動物囊胚的

細胞，并提取其DNA,用Y染色體上特異性DNA作探針檢測，這種

技術(shù)稱為O

（4）目前，人們主要通過食用深海魚肉攝取omega—3,由于人們過度捕殺深海魚，

同時環(huán)境污染等問題也嚴(yán)重破壞了海洋生態(tài)系統(tǒng)，使生態(tài)系統(tǒng)的能力下

降。為了改善海洋環(huán)境，實現(xiàn)海洋漁業(yè)可持續(xù)發(fā)展，建造海底人工魚礁，不僅需

要對破壞的生態(tài)環(huán)境進行恢復(fù)，還要考慮當(dāng)?shù)厝说慕?jīng)濟發(fā)展和生活需要，這主要

遵循了生態(tài)工程的原理。

8.（8分）（2021.江蘇揚州中學(xué)模擬）生態(tài)浮床技術(shù)是一個綜合了物理、化學(xué)、生物方

法的水環(huán)境原位生態(tài)修復(fù)過程，它利用水生植物及根系微生物吸收N、P元素,

同時可降解有機物和重金屬，并以收獲植物體的形式將其搬離水體，保護了水體

生態(tài)環(huán)境，實現(xiàn)了景觀效益和生態(tài)功能的雙贏。下圖為某湖泊應(yīng)用生態(tài)浮床技術(shù)

的示意圖，請回答相關(guān)問題：

a,定期收割或不收

生態(tài)浮床新福/割形成自然浮床

遮蔽陽死，抑緘\

制藻類生長〃腳4I

根系吸收或吸附'

/7

草食性魚類f/

（1）生態(tài)浮床上的植物可供鳥類筑巢，下部根系為魚類和水生昆蟲提供了棲息場

所，這體現(xiàn)了群落的結(jié)構(gòu)。

（2）浮床下方水體中藻類植物的數(shù)量低于無浮床的水域，這主要是受（環(huán)境因

素）的影響，因此，浮床在一定程度上能夠抑制藻類的生長繁殖，防止水華發(fā)生。

⑶夏季，湖泊中“聽取蛙聲一片”，這體現(xiàn)了生態(tài)系統(tǒng)的信息傳遞具有

__________________________作用。

（4）生態(tài)浮床既能凈化水質(zhì)、防治水華，又能美化環(huán)境，這體現(xiàn)了生物多樣性的

、價值。

9.（12分）（2021?廣東三校聯(lián)考）生態(tài)農(nóng)業(yè)是按照生態(tài)學(xué)原理和生態(tài)經(jīng)濟規(guī)律，因地

制宜地設(shè)計、組裝、調(diào)整和管理農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和農(nóng)村經(jīng)濟的系統(tǒng)工程體系。如圖為某

地區(qū)建立的生態(tài)農(nóng)業(yè)模式示意圖?；卮鹣铝袉栴}：

⑴生態(tài)農(nóng)業(yè)的建設(shè)要遵循自然界的規(guī)律，不但要重視對的保

護，更要注重與經(jīng)濟、社會效益的結(jié)合。

⑵該生態(tài)農(nóng)業(yè)模式的建立不但要考慮到自然生態(tài)系統(tǒng)的規(guī)律，還要考慮到經(jīng)濟

與社會等系統(tǒng)的影響力，這體現(xiàn)了生態(tài)工程的原理。這種生產(chǎn)模式對環(huán)

境的污染小，因為生產(chǎn)一種產(chǎn)品時產(chǎn)生的有機廢物變成了。

⑶人和動物的糞便進入沼氣池后，通過沼氣池中微生物的作用可以產(chǎn)

生沼氣。“低碳”指較低的溫室氣體（二氧化碳等）排放，請指出圖中體現(xiàn)“低碳”

的一個做法：O

10.（12分）（2021?廣東惠州調(diào)研）人體移植器官短缺是一個世界性難題。但隨著生物

技術(shù)的發(fā)展，人們逐漸有了新的解決思路：

I.尋求可替代器官

剔除豬的某些基因，用豬的器官作為供體。目前科學(xué)家借助CRISPR/Cas9基因

編輯技術(shù)能夠剔除豬的某些相關(guān)基因，如圖為Cas9蛋白依據(jù)sgRNA片段切割

DNA的示意圖（不同的sgRNA可以識別不同的DNA序列），請回答下列問題：

。小非靶核酸分子.

Cas9蛋白、自發(fā)組裝正"復(fù)合體自發(fā)尋找結(jié)一.川沙.

7一羨9-sgRN?制靶核酸"靶核酸分子.

(l)DNA重組技術(shù)主要用到的工具酶包括DNA連接酶和,圖

中充當(dāng)該酶的物質(zhì)是。

(2)Cas9-sgRNA復(fù)合體能夠精準(zhǔn)識別某核甘酸序列的原因可能是。

n.自體器官培養(yǎng)

大體思路是：將病人的體細胞核放入去核的卵母細胞中，讓重組細胞發(fā)育為早期

胚胎，利用胚胎干細胞誘導(dǎo)分化為特定的器官。

(3)重組細胞體外培養(yǎng)需要一定的02和C02,C02的主要作用是

胚胎干細胞的功能特點為。

(4)該過程的核心技術(shù)是o這種方法獲得的器官移植時不會發(fā)生免疫排

斥反應(yīng)，這是因為.O

11.(12分)(2021?云南昆明診斷)科學(xué)家利用CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)成功改造

了狒猴基因組中與某病癥(Z癥)相關(guān)的SHANK3基因，制備出Z癥非人靈長類動

物模型，為該病的研究和治療奠定了重要基礎(chǔ)。操作過程如圖：

將精子注入將CR1SPR/Cas9注入代孕林猴Z癥琳猴

⑴進行甲過程前，采集的卵母細胞需在體外培養(yǎng)到期才能與

獲能的精子受精。

⑵將CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)注入受精卵后，Cas9蛋白能在特定部位切割

SHANK3基因(下圖虛線所示)，使該基因特定部位的兩個核甘酸之間的

斷開，經(jīng)其切割后產(chǎn)生具有末端的DNA片段。

TGGCCTCATjTGTTGTGCA........

ACCGGAGTAjACAACACGT........

i

TGGCCTCATTGTTGTGCA........

ACCGGAGTAACAACACGT........

(3)乙過程應(yīng)將受精卵移入中繼續(xù)培養(yǎng),該過程通常需要維持一定的CO2

濃度，CO2的作用是。丙表示的過程是o

(4)由以上技術(shù)獲得的Z癥狒猴，可通過體細胞核移植技術(shù)得到克隆Z癥舜猴，

請寫出基本程序(用流程圖表示)。

參考答案

1.（1）①3四種游離的脫氧核昔酸（dNTP）②A基因的mRNA（或A基因轉(zhuǎn)錄出

的mRNA）逆轉(zhuǎn)錄（或反轉(zhuǎn)錄）

（2）可避免目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化和隨意連接（3）作用時間長、更安全、結(jié)

構(gòu)簡單、更容易保存特異性強、靈敏度高，可大量制備動物細胞培養(yǎng)和動物

細胞融合

解析（1）①方法一：根據(jù)PCR技術(shù)的特點，至少需要3次循環(huán)才能獲得目的基

因；PCR技術(shù)的實質(zhì)是DNA體外復(fù)制過程，因此需要四種游離的脫氧核甘酸為

原料；②方法二：利用逆轉(zhuǎn)錄方法獲得目的基因，應(yīng)以RNA為模板，以與目的

基因的mRNA堿基互補的一段單鏈DNA為引物，在逆轉(zhuǎn)錄酶（或反轉(zhuǎn)錄酶）的作

用下獲得cDNA,再在Taq酶的作用下進行擴增。（2）同種限制酶切割的黏性末端

相同，易發(fā)生目的基因與質(zhì)粒間的任意連接及目的基因與質(zhì)粒的自身環(huán)化現(xiàn)象，

用不同限制酶可防止以上現(xiàn)象的發(fā)生。（3）DNA疫苗具有作用時間長、更安全、

結(jié)構(gòu)簡單、更容易保存等特點；單克隆抗體具有特異性強、靈敏度高，可大量制

備等特點；一般情況下制備單克隆抗體需以動物細胞培養(yǎng)和動物細胞融合技術(shù)為

基礎(chǔ)。

2.（1）耐高溫（或具有熱穩(wěn)定性）

（2）限制（或限制性核酸內(nèi)切）目的基因無復(fù)制原點、目的基因無表達所需的啟動

子、目的基因無表達所需的終止子

（3）未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒（外源DNA）的能力弱已導(dǎo)入目的基因并且目的

基因能穩(wěn)定遺傳和表達的細胞

（4）蛋白酶缺陷型蛋白酶

解析（1）利用PCR技術(shù)擴增目的基因需要特殊的耐高溫的DNA聚合酶。（2）在

構(gòu)建基因表達載體時，需用限制酶將載體切開，以便目的基因的插入；無復(fù)制原

點、無表達所需啟動子和終止子的目的基因直接導(dǎo)入受體細胞是無法表達的，只

有構(gòu)建成基因表達載體才能在受體細胞中表達。（3）經(jīng)鈣離子處理成為感受態(tài)細

胞的大腸桿菌，吸收外源DNA的能力強；已轉(zhuǎn)化的宿主細胞（大腸桿菌）指的是

已導(dǎo)入目的基因并且目的基因能穩(wěn)定遺傳和表達的細胞。（4）真核生物基因（目的

基因）在大腸桿菌細胞內(nèi)表達時，表達的蛋白質(zhì)可能會被降解，為防止蛋白質(zhì)被

降解，可以選用不能產(chǎn)生該蛋白酶的缺陷細菌以及使用能夠抑制該蛋白酶活性的

藥物，因此在實驗中應(yīng)選用蛋白酶缺陷型的大腸桿菌作為受體細胞，在蛋白質(zhì)純

化的過程中應(yīng)添加蛋白酶的抑制劑。

3.（l）mRNA逆轉(zhuǎn)錄不同⑵化學(xué)PCR技術(shù)要有一段已知目的基因的核

昔酸序列（3）推測應(yīng)有的氨基酸序列

解析（1）為獲取百日咳桿菌類毒素的基因，可從百日咳桿菌的細胞中提取對應(yīng)

mRNA,在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下合成雙鏈cDNA片段，獲得的cDNA片段只包含

基因的編碼區(qū)，沒有非編碼區(qū)，因此與百日咳桿菌中該基因堿基序列不同。（2）

如果基因比較小，核甘酸序列又已知，可以通過DNA合成儀用化學(xué)方法人工合

成；然后通過PCR技術(shù)大量擴增，PCR技術(shù)的前提是要有一段已知目的基因的

核甘酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物。（3）蛋白質(zhì)工程的基本途徑：從預(yù)期

的蛋白質(zhì)功能出發(fā)一設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)一推測應(yīng)有的氨基酸序列一找到相

對應(yīng)的脫氧核甘酸序列。

4.（1）從基因文庫中獲?。?）基因的選擇性表達（或徑柳匙葉草根尖分生區(qū)細胞中

的TaNHX2基因不能表達）（3）Sau3AI會出現(xiàn)目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化、

目的基因在質(zhì)粒上的連接方向不確定EcoRI和及wiHI（4）不一定能（5）

篩選出含有目的基因的受體細胞（6）個體

解析（1）目的基因的獲取方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工

合成。利用徑柳匙葉草的DNA直接獲得目的基因的方法為從基因文庫中獲取。

（2）徑柳匙葉草根尖分生區(qū)細胞中TaNHX2基因不能表達，故不能在徑柳匙葉草

根尖分生區(qū)細胞中獲得TaNHX2基因的mRNA0（3）由圖2分析可知，用Sau3AI

與BamHI酶切后產(chǎn)生的黏性末端相同，故若用BamHI切割圖1所示的DNA

片段獲得目的基因，則需選用RM3AI切割圖3所示質(zhì)粒，以便構(gòu)建基因表達

載體，該方案由于酶切后的目的基因和質(zhì)粒兩端的黏性末端相同，故容易出現(xiàn)目

的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化、目的基因在質(zhì)粒上的連接方向不確定的缺陷。為了防

止目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化以及目的基因反接，可選用EcoRI和BamHI同

時切割圖1所示的DNA片段。（4）用EcoRI和BamHI酶切圖1所示DNA片

段，用Saz/3AI、EcoRI酶切圖3所示質(zhì)粒，然后再用DNA連接酶連接在一起

形成的序列不一定還是I的識別序列，故所得重組質(zhì)粒不一定能被3amH

I切割。（5）圖3中質(zhì)粒上的抗生素抗性基因?qū)儆跇?biāo)記基因，其作用是篩選出含

有目的基因的受體細胞。（6）將轉(zhuǎn)基因棉花種植在鹽堿地中，觀察其生長狀況，

屬于個體水平的檢測。

5.（1）果實比較大、營養(yǎng)物質(zhì)含量增加脫分化再分化（一定的）全能性（或形成

完整植株所需的全部基因）（2）分生區(qū)（如莖尖）部位核DNA進行抗病毒的接

種實驗（3）分生（或分裂）（4）不能植物細胞外面有一層細胞壁，阻礙細胞間的

雜交（融合）

解析（1）野生草莓往往是二倍體，而人工栽培的草莓往往是通過特殊技術(shù)培育

成的多倍體，這利用了多倍體植株的果實比較大、營養(yǎng)物質(zhì)含量增加的特點；但

多倍體草莓的繁殖往往是無性繁殖，即使外植體細胞經(jīng)歷脫分化與再分化過程成

為試管苗。該技術(shù)證明了已分化的植物細胞仍具有（一定的）全能性。（2）草莓植株

感染病毒后會出現(xiàn)結(jié)果減少，品質(zhì)變劣。若要恢復(fù)其品質(zhì)，可選取植物的分生區(qū)

（如莖尖）部位進行植物組織培養(yǎng)，獲得脫毒苗。此外，也可將抗病毒基因成功導(dǎo)

入受體細胞細胞核中并培養(yǎng)出轉(zhuǎn)基因抗病毒草莓植株。為了檢測抗病毒基因是否

存在于該轉(zhuǎn)基因植物的所有組織細胞中，需分別提取該轉(zhuǎn)基因植物的所有組織細

胞中的核DNA與基因探針雜交；欲從個體生物學(xué)水平來鑒定抗病毒基因是否賦

予該植物抗病特性的操作是進行抗病毒的接種實驗。（3）在植物組織培養(yǎng)過程中，

由于培養(yǎng)細胞一直處于分生（分裂）狀態(tài)，可以對植物的愈傷組織進行誘變處理，

促使其發(fā)生突變，再進一步培養(yǎng)篩選獲得草莓新品種。（4）若想利用植物體細胞

雜交技術(shù)培養(yǎng)出馬鈴薯一草莓雜種植物以提高土地的利用率，不能把兩物種細胞

直接融合，原因是植物細胞外面有一層細胞壁，阻礙細胞間的雜交（融合）。

6.（1）滅活的HPV或HPV的抗原蛋白核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、線粒體

（2）無限增殖PEG、滅活的病毒、電激

⑶雜交瘤細胞不一定使每個孔內(nèi)的細胞不多于一個，從而達到克隆化培養(yǎng)

的目的

解析（1）制備抗HPV的單克隆抗體時，給小鼠注入的抗原是滅活的HPV或HPV

的抗原蛋白。小鼠體內(nèi)能產(chǎn)生抗體的細胞是漿細胞，漿細胞中參與抗體合成和分

泌的細胞器有核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體和線粒體。（2）小鼠骨髓瘤細胞具有無

限增殖的特點。B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合時，常用的誘導(dǎo)因素有PEG、滅活

的病毒、電激等。（3）在HAT培養(yǎng)基上能夠連續(xù)增殖的細胞是雜交瘤細胞，該細

胞所產(chǎn)生的抗體不一定抗HPV,因為從小鼠體內(nèi)獲得的能產(chǎn)生抗體的漿細胞不

一定是專門針對HPV的，也有可能是其他抗原刺激后產(chǎn)生的，漿細胞產(chǎn)生的抗

體是否是抗HPV抗體，還需要進行檢測。單克隆抗體是由單一B細胞克隆產(chǎn)生

的、僅針對某一特定抗原的抗體，對抗HPV抗體檢測呈陽性的雜交瘤細胞進行

克隆化培養(yǎng)時，先將培養(yǎng)液中的細胞濃度稀釋到3?10個/mL,然后在多孔細胞

培養(yǎng)板的每個孔中只能加入0.1mL細胞稀釋液，不能多加，因為多于0.1mL的

細胞稀釋液中可能含2個或更多個細胞，這樣每個孔內(nèi)的細胞就不是一個，就達

不到克隆化培養(yǎng)的目的。

7.（1）動物細胞培養(yǎng)發(fā)育培養(yǎng)液（2）顯微注射維持穩(wěn)定和表達（3）滋養(yǎng)層

DNA分子雜交技術(shù)（4）自我調(diào)節(jié)整體性

解析（1）動物細胞培養(yǎng)是動物細胞工程的基礎(chǔ)，在培育轉(zhuǎn)基因克隆綿羊過程中，

應(yīng)用到的細胞工程技術(shù)有動物細胞培養(yǎng)和核移植。核移植后的受體細胞利用物理

或化學(xué)方法被激活后，應(yīng)移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)，以檢查其發(fā)育能力，為后

續(xù)的培養(yǎng)做準(zhǔn)備。（2）將目的基因?qū)雱游锛毎Ｓ玫姆椒ㄊ秋@微注射技術(shù)，使

目的基因進入受體細胞，并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程，稱為轉(zhuǎn)化。

（3）若要鑒別XY型性別決定的動物胚胎的性別，通常在該種動物囊胚期，提取

其滋養(yǎng)層細胞DNA,然后用Y染色體上特異性DNA作探針，與滋養(yǎng)層細胞DNA

混合進行檢測，以確定待檢的滋養(yǎng)層DNA中是否含有Y染色體上特異性的DNA,

該技術(shù)稱為DNA分子雜交技術(shù)。（4）人們?yōu)榱藬z取omega—3,過度捕殺深海魚，

同時環(huán)境污染等問題也嚴(yán)重破壞了海洋生態(tài)系統(tǒng)，導(dǎo)致海洋生態(tài)系統(tǒng)的自我調(diào)節(jié)

能力下降。為了改善海洋環(huán)境，實現(xiàn)海洋漁業(yè)可持續(xù)發(fā)展，建造海底人工魚礁，

不僅需要對破壞的生態(tài)環(huán)境進行恢復(fù)，還要考慮當(dāng)?shù)厝说慕?jīng)濟發(fā)展和生活需要，

經(jīng)濟和生態(tài)治理兩不誤是生態(tài)工程的整體性原理的核心內(nèi)容。

8.（1）垂直（2）陽光（或光照強度）（3）影響種群繁衍（4）間接價值直接

解析（1）生態(tài)浮床上的植物可供鳥類筑巢，下部根系形成魚類和水生昆蟲的棲

息環(huán)境，表現(xiàn)為垂直分層現(xiàn)象，屬于群落的垂直結(jié)構(gòu)。（2）藻類植物的正常生長

要進行光合作用，浮床能遮擋陽光，下方陽光較弱從而抑制藻類繁殖，防止水華

發(fā)生。（3）夏季，湖泊中的蛙聲是求偶信息，體現(xiàn)了生態(tài)系統(tǒng)的信息傳遞具有影

響種群繁衍作用。（4）生物多樣性的間接價值也叫生態(tài)功能，生態(tài)浮床凈化水質(zhì)、

防治水華的作用屬于生物多樣性的間接價值；生物多樣性的直接價值指對人類有

食用、藥用和工業(yè)原料等實用意義的，以及有旅游觀賞、科學(xué)研究和文學(xué)藝術(shù)創(chuàng)

作等非實用意義的價值，生態(tài)浮床美化環(huán)境的價值屬于生物多樣性的直接價值。

9.（1）物質(zhì)循環(huán)生態(tài)環(huán)境（2）協(xié)調(diào)與平衡生產(chǎn)另一種產(chǎn)品的原料（或另一種產(chǎn)

品的投入）（3）分解秸稈不直接焚燒，而用于培育食用菌、生產(chǎn)沼氣（合理即可）

解析（1）生態(tài)農(nóng)業(yè)的建設(shè)是一種生態(tài)工程，生態(tài)工程建設(shè)的目的就是遵循自然

界物質(zhì)循環(huán)的規(guī)律，充分發(fā)揮資源的生產(chǎn)潛力，防止環(huán)境污染，達到經(jīng)濟效益和

生態(tài)效益的同步發(fā)展。（2）在進行生態(tài)工程建設(shè)時，要考慮環(huán)境承載力，處理好

生物與環(huán)境的協(xié)調(diào)與平衡，這體現(xiàn)了生態(tài)工程的協(xié)調(diào)與平衡原理。這種生產(chǎn)模式

對環(huán)境的污染小，因為生產(chǎn)一種產(chǎn)品時產(chǎn)生的有機廢物變成了生產(chǎn)另一種產(chǎn)品的

原料。（3）沼氣池中的微生物通過分解作用分解了糞便，從而產(chǎn)生沼氣。秸桿燃

燒能量利用效率低，而秸稈用于培育食用菌、生產(chǎn)沼氣可以提高能量利用效率，

從而使能量需求一定時二氧化碳釋放減少。

10.（1）限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）Cas9—sgRNA復(fù)合體

（2）sgRNA（是單鏈）可與特定（靶）核甘酸序列發(fā)生堿基互補配對（答出互補配對即

可，sgRNA是單鏈不作要求）

（3）維持培養(yǎng)液的pH具有（發(fā)育的）全能性（4）（動物體細胞）核移植技術(shù)該器

官的遺傳物質(zhì)與原機體基本相同，進入機體后，不會成為抗原，不會發(fā)生免疫排

斥（答出遺傳物質(zhì)與原機體基本相同即可）

解析（l）DNA