圍絕經(jīng)期綜合征中醫(yī)肝郁分級與苔脫位細(xì)胞調(diào)控基因相關(guān)性研究

圍絕經(jīng)期綜合征是一種常見的臨床疾病，在中醫(yī)學(xué)中屬于“內(nèi)臟易怒”、“抑郁綜合征”和“更年期前后癥狀”范疇。肝郁是主要的疾病之一，舌診是中醫(yī)獨(dú)特的診斷方法之一，也是辯證治療的重要依據(jù)。這項(xiàng)研究從2008年7月到2009年11月，收集了2008年7月至2009年11月期間的患者和健康患者的臨床經(jīng)驗(yàn)。如下報告。1數(shù)據(jù)收集1.1亂3個月以上或經(jīng)3個月者參照《婦產(chǎn)科學(xué)》:①40～55歲婦女;②臨床表現(xiàn)為月經(jīng)紊亂3個月以上或閉經(jīng)3個月～12個月者;③出現(xiàn)不同程度的臨床癥狀,如潮熱出汗、易激動等,癥狀評分標(biāo)準(zhǔn)的制定采用改良Kupperman法,總積分>6分,診斷為圍絕經(jīng)期綜合征。1.2標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的包含符合圍絕經(jīng)期綜合征診斷標(biāo)準(zhǔn)者;未經(jīng)過雌、孕激素替代治療者;簽署知情同意書。1.3患者合并其它疾病者以合并豐富血管自原因不明的陰道不規(guī)則出血未治愈者;精神病患者;合并心腦血管、肝、腎、造血系統(tǒng)等嚴(yán)重疾病者;乳腺腫瘤、一側(cè)卵巢切除、卵巢器質(zhì)性病變、卵巢功能早衰者。1.4福建省立醫(yī)院健康體檢中心年齡分布收集2008年7月～2009年11月在福建省立醫(yī)院中醫(yī)科住院及門診的圍絕經(jīng)期綜合征患者(觀察組)150例,平均年齡(46.32±5.26)歲,平均病程(7.35±4.28)個月。另選福建省立醫(yī)院健康體檢中心的健康女性(對照組)50例,平均年齡(48.18±6.53)歲,月經(jīng)周期規(guī)律,改良Kupperman法總積分≤6分。兩組受試者年齡差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。2方法2.1神、病、診問卷問卷采用改良Kupperman法與證素辨證量表相結(jié)合,制定統(tǒng)一的科研調(diào)查問卷,問卷內(nèi)容包括望診(神、色、形、態(tài),舌質(zhì)、舌苔)、聞診(聽聲音、聞氣味)、問診(一般資料,刻下癥如潮熱、汗出、急躁易怒、失眠等,既往史)、切診(脈診、按診)。觀察對象由統(tǒng)一培訓(xùn)的專業(yè)人員收集資料,建立檔案。2.2肝郁證素積分肝郁分級:參照《證素辨證學(xué)》中“600種常見癥狀的辨證意義”,將觀察對象的臨床表現(xiàn)中屬于肝郁要素的貢獻(xiàn)度進(jìn)行累積相加,求出貢獻(xiàn)度之和,作為肝郁證素積分。積分<70,歸為0級,表明無肝郁病理改變;70≤積分<100,歸為1級,表明存在輕度肝郁病理改變;100≤積分<150,歸為2級,表明存在中度肝郁病理改變;積分≥150,歸為3級,表明存在重度肝郁病理改變。2.3膜調(diào)學(xué)檢測枯草芽孢桿菌葉片凋亡指數(shù)在進(jìn)行臨床四診資料收集后,刮取觀察對象的舌苔脫落細(xì)胞,分別采用巴氏染色觀察舌苔脫落細(xì)胞的成熟指數(shù)(MI)、成熟價值(MV)(南京建成生物有限公司),流式細(xì)胞儀檢測舌苔脫落細(xì)胞的凋亡指數(shù)(美國BectonDickinson公司),免疫組化檢測舌苔脫落細(xì)胞的凋亡基因Fas、Bax、Bcl-2的陽性率(武漢博士德生物工程有限公司)。2.4安全指數(shù)觀察前分別檢查血、尿、便常規(guī),肝、腎功能,心電圖,婦科及乳腺彩超。2.5因素相關(guān)性分析采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件,計量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(ˉx±s)表示,兩因素之間的相關(guān)性用等級相關(guān)(Spearman法)分析;計數(shù)資料的組間比較采用卡方檢驗(yàn)。3結(jié)果3.1已使用一定的程序,即營造良好的氛圍。p>0.0.0表1示,觀察組患者肝郁積分明顯高于對照組(P<0.01);觀察組患者肝郁分級分布情況以1、2、3級為主,對照組受試者均為0級,兩組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。3.2表面細(xì)胞數(shù)量和枯落細(xì)胞mv值的相關(guān)性分析,主要分為5.中層細(xì)胞數(shù)量呈正相關(guān)(R=0.622,P=0.000),與舌苔脫落細(xì)胞MI的表層細(xì)胞數(shù)量呈負(fù)相關(guān)(R=-0.610,P=0.000),與舌苔脫落細(xì)胞MV呈負(fù)相關(guān)(R=-0.556,P=0.000)。3.3凋亡指數(shù)與枯草芽孢桿菌g0/3g、g2/m期、s期現(xiàn)象的關(guān)系表3、圖2示,肝郁分級與舌苔脫落細(xì)胞凋亡指數(shù)呈正相關(guān)(R=0.674,P=0.000),與舌苔脫落細(xì)胞G0/G1期、G2/M期、S期無明顯相關(guān)性。3.4bax、bcl-2的陽性率與充填質(zhì)中bax、bcl-2的陽性率相關(guān)性分析表4、圖3示,肝郁分級與舌苔脫落細(xì)胞中Fas的陽性率呈正相關(guān)(R=0.539,P=0.000),與舌苔脫落細(xì)胞中Bax的陽性率呈正相關(guān)(R=0.492,P=0.000),與舌苔脫落細(xì)胞中Bcl-2的陽性率呈負(fù)相關(guān)(R=-0.456,P=0.000)。4圍絕經(jīng)期綜合征患者的證候分析圍絕經(jīng)期綜合征是機(jī)體內(nèi)多臟功能紊亂的綜合體現(xiàn),虛實(shí)夾雜,病情復(fù)雜,傳統(tǒng)的辨證難以兼顧各種兼夾證,而證素辨證則以臨床癥狀為基礎(chǔ),其各種證名均由各證素互相組合而成,抓住各證素的臨床表現(xiàn)、證候?qū)傩?并根據(jù)癥狀積分及貢獻(xiàn)度,可以依次計算病位和病性的積分,能全面把握病理變化,為臨床的診療提供科學(xué)的依據(jù)。圍絕經(jīng)期女性情緒波動,五志過極,終致肝陰不足。肝主疏泄,喜條達(dá),惡抑郁,肝體失于柔養(yǎng),疏泄失常,肝失條達(dá),產(chǎn)生肝氣郁結(jié)或升泄太過的病理表現(xiàn),肝郁則氣盛,氣盛則化火,火性趨于炎上,肝氣上逆,而致煩躁易怒、頭痛、目眩;肝體陰而用陽,陰血充足則能柔潤養(yǎng)肝,肝陰不足,肝陽上亢,而致失眠、眩暈、頭痛;肝腎同源,腎水虧少,肝陰虛損,而致腰膝酸軟、煩熱、失眠多夢,則情志抑郁、煩躁易怒,故肝郁是圍絕經(jīng)期綜合征患者中醫(yī)證候的主要體現(xiàn)之一。本研究采用證素積分方法,從肝郁病理角度深入分析圍絕經(jīng)期綜合征的中醫(yī)病理特點(diǎn),結(jié)果顯示圍絕經(jīng)期綜合征患者肝郁證素積分均大于70分,明顯高于對照組,提示肝郁是引發(fā)圍絕經(jīng)期臨床表現(xiàn)的重要病理環(huán)節(jié),肝郁可致機(jī)體的陰陽失衡、氣血失調(diào),引發(fā)臟腑功能的紊亂,從而出現(xiàn)一系列臨床癥狀和體征。肝主疏泄,調(diào)理一身的氣機(jī),也包括了脾胃之氣的升降。肝在中醫(yī)里五行屬木,脾在中醫(yī)里五行屬土,木乘土,影響脾胃的運(yùn)化功能,從而引起舌苔變化。舌苔是一層分布均勻苔狀物,平鋪于舌體表面,由脾胃之氣上蒸、胃津上潮、凝聚于舌面而成。舌象的形成是機(jī)體整體功能的局部體現(xiàn),并受機(jī)體內(nèi)生理、病理反應(yīng)的影響,而脫落細(xì)胞學(xué)檢查作為探討舌象形成機(jī)制和舌診現(xiàn)代研究的主要方法之一。舌苔脫落細(xì)胞MI、MV檢查可作為辨別不同舌象的輔助診斷依據(jù)之一,MI、MV變化也可作為中醫(yī)舌診的組成部分,為辨證及探討舌象形成的機(jī)制提供理論依據(jù)。舌苔脫落細(xì)胞MI、MV的改變與舌質(zhì)、舌苔的變化嚴(yán)重程度存在一定的內(nèi)在聯(lián)系,不同舌質(zhì)與舌苔中舌苔脫落細(xì)胞MI、MV有明顯差別,并且隨著病情的加重,舌象改變越明顯,舌苔脫落細(xì)胞MI、MV的差別就越明顯。本研究結(jié)果顯示,肝郁分級與舌苔脫落細(xì)胞MI的中層細(xì)胞數(shù)量呈正相關(guān),與舌苔脫落細(xì)胞MI的表層細(xì)胞數(shù)量呈負(fù)相關(guān),與舌苔脫落細(xì)胞MV呈負(fù)相關(guān),表明舌苔脫落細(xì)胞MI、MV變化與肝郁病理變化密切相關(guān)。肝郁則氣盛,氣盛則化火,火性炎上,上蒸于舌面,引起舌黏膜上皮細(xì)胞的新陳代謝加快,凋亡增加,導(dǎo)致舌苔變化。舌上皮細(xì)胞的增殖與分化、凋亡處于相對平衡狀態(tài),舌苔表現(xiàn)為薄苔;當(dāng)舌上皮細(xì)胞的凋亡占優(yōu)勢,細(xì)胞分化相對占劣勢時,舌苔變厚,反之為剝苔。舌苔上皮細(xì)胞的凋亡受內(nèi)外環(huán)境多種因素調(diào)控,其中Fas、Bax、Bcl-2在舌苔上皮細(xì)胞的凋亡過程中發(fā)揮重要作用。Fas啟動舌苔脫落細(xì)胞的凋亡程序,Bcl-2抑制凋亡,Bax促進(jìn)凋亡,二者之