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菌種保藏機(jī)構(gòu)的任務(wù):廣泛收集實(shí)驗(yàn)室和生產(chǎn)菌種、菌株(包括病毒株以及動(dòng)、植物細(xì)胞株和質(zhì)粒等)的基礎(chǔ)上,使之達(dá)到不死、不衰、不亂以及便于研究、交換和使用的目的。常用的菌種保藏機(jī)構(gòu):
中國(guó)微生物菌種保藏委員會(huì)(CCCCM)
美國(guó)的典型菌種保藏中心(ATCC)1、微生物菌種的保藏類(lèi)型傳代培養(yǎng)保藏:常用的有瓊脂斜面、半固體瓊脂柱及液體培養(yǎng)等冷凍保藏:采取速凍的方法,產(chǎn)生的冰晶小而減少對(duì)細(xì)胞的損傷干燥保藏法:沙土管保存和冷凍真空保藏冷凍真空保藏:干燥、缺氧及低溫,目前使用最普遍、最重要的微生物保藏方法幾種常用菌種保藏方法的比較方法名稱(chēng)主要措施適宜菌種保藏期評(píng)價(jià)冰箱保藏法(斜面)冰箱保藏法(半固體)石蠟油封藏法*沙土保藏法冷凍干燥法低溫低溫低溫、缺氧干燥、無(wú)營(yíng)養(yǎng)干燥、無(wú)氧、低溫、有保護(hù)劑各大類(lèi)細(xì)菌、酵母菌各大類(lèi)**產(chǎn)孢子微生物各大類(lèi)3~6月
6~12月1~2年
1~10年5~15年以上簡(jiǎn)便簡(jiǎn)便簡(jiǎn)便簡(jiǎn)便有效簡(jiǎn)便有效2、微生物的退化與復(fù)壯
衰退:在微生物的生長(zhǎng)過(guò)程中,由于變異的存在,使原有的優(yōu)良性狀發(fā)生負(fù)變,即菌種的衰退。
復(fù)壯:狹義的復(fù)壯是指在菌種已發(fā)生衰退的情況下,通過(guò)純種分離和生產(chǎn)性能測(cè)定等方法,從衰退的群體中找出未衰退的個(gè)體,以達(dá)到恢復(fù)該菌原有典型性狀的措施;廣義的復(fù)壯是指在菌種的生產(chǎn)性能未衰退前就有意識(shí)的經(jīng)常、進(jìn)行純種的分離和生產(chǎn)性能測(cè)定工作,以期菌種的生產(chǎn)性能逐步提高。實(shí)際上是利用自發(fā)突變(正變)不斷地從生產(chǎn)中選種。食品微生物菌種衰退現(xiàn)象和原因衰退現(xiàn)象菌落和細(xì)胞形態(tài)改變生長(zhǎng)速度緩慢,產(chǎn)孢子越來(lái)越少生產(chǎn)性能下降生長(zhǎng)環(huán)境適應(yīng)能力下降衰退原因自發(fā)突變環(huán)境條件雜菌污染防止菌種衰退的方法控制傳代的次數(shù)(一般在DNA的復(fù)制過(guò)程中,堿基的錯(cuò)配率是5x10-4,自發(fā)突變的頻率為10-8~10-9,采用良好的菌種保藏方法,可以減少移種和傳代的次數(shù))創(chuàng)造良好的培養(yǎng)條件利用不同類(lèi)型的細(xì)胞進(jìn)行接種傳代:對(duì)絲狀微生物而言,通常采用穩(wěn)定的單核孢子進(jìn)行接種。采用有效的菌種保藏方法菌種的復(fù)壯措施純種分離菌落純的分離方法(平板表面涂布法,平板劃線分離法,瓊脂培養(yǎng)基澆注法)細(xì)胞純的分離方法(分離小室進(jìn)行單細(xì)胞分離,顯微操縱器進(jìn)行單細(xì)胞分離,菌絲尖端切割法進(jìn)行單細(xì)胞分離)通過(guò)宿主體內(nèi)生
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