熒光定量PCR在臨床醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用課件整理-002_第1頁
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熒光定量PCR在臨床醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用內(nèi)容提要基因診斷技術(shù)簡介、乙型肝炎的病原檢測、丙型肝炎的病原檢測四、性病相關(guān)病原體的檢測基因診斷技術(shù)簡概念細(xì)胞核CONDN轉(zhuǎn)錄4基因診斷VmRN翻譯○000蛋質(zhì)3免疫學(xué)診斷2生化診斷1形態(tài)學(xué)診斷臨床診斷PCR與基因診斷技術(shù)基因診斷即通過核酸的分子生物學(xué)檢測直接檢測基因的存在狀態(tài)或缺陷對疾病作出診斷的方法●Polymerasechainreaction(PcR),聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),是一種DNA的快速擴(kuò)增技術(shù)。PCR技術(shù)通過兩個短的稱為引物的DNA小片段和一種耐熱酶的作用,可在3個小時內(nèi)把特定的DNA片段擴(kuò)增1000萬倍。九十年代中期PCR臨床應(yīng)用在國內(nèi)全面開展,1998年,熒光定量PCR技術(shù)開始在中國應(yīng)用于臨床檢測熒光定量PCR技術(shù)實時熒光定量PCR技術(shù),是指在反應(yīng)體系中加入熒光標(biāo)記,利用熒光信號積累實時檢測整個PCR過程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對PCR終產(chǎn)物的分析,最終實現(xiàn)對未知的起始模版進(jìn)行定量分析的一種技術(shù)是迄今對已知基因序列的核酸測定中最靈敏的方法熒光染料:SYBRGreenI、EVAGreen熒光探針:TaqMan、HybridizationProbes、MolecularBeaconRePorterPolymerizationStranddisplacementCleavagePolymerizationcompleted米FigureI5Minoantavr;Neme可ftareueymulograndchemitry可theTayonPCRDetecta5Gratemarst”cleeresPEAppliedBiosystems熒光定量PCR技術(shù)的優(yōu)點●特異性強(qiáng):直接擴(kuò)增病原體的特異DNA或異?；蚱巍耢`敏度高:可檢測到極少量的DNA,有效降低漏診率●高效省時:擴(kuò)增周期短,有利于快速診斷●取材范圍廣:血清、痰液、體液、毛發(fā)等多種樣本●全封閉反應(yīng):無需PCR后處理,降低污染●定量準(zhǔn)確:利用標(biāo)準(zhǔn)曲線法,采用對數(shù)期分析●自動化程度高:操作安全,避免人為判斷RocheLightcyclerm向dmoFtPoita廠ShoxFitFcitPNdadCaudate.Co.IStep2:N

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