消毒質量現(xiàn)場采樣及檢測方法提要潔凈區(qū)域（手術室、供應室、ICU、透析室、層流病房）生物安全柜醫(yī)護人員手物體表面使用中消毒劑滅菌器械（壓力蒸汽、等離子體、低溫甲醛熏蒸柜）紫外線輻照強度消毒器械（氧化還原電位水、熏蒸柜）現(xiàn)場指標—潔凈區(qū)域溫度濕度照度壓差潔凈度風速新風換氣次數(shù)潔凈區(qū)域技術參數(shù)---

特別潔凈手術室、特殊實驗室項目標準值最小靜壓差(Pa,對相鄰低級別潔凈室)+8換氣次數(shù)(次/h)--手術區(qū)手術臺(或局部100級工作區(qū))工作面高度截面平均風速(m/s)0.25～0.30自凈時間(min)≤15溫度(℃)22～25相對濕度(%)40～60最小新風量(m3/h·人--(次/h)60--6噪聲dB(A)≤52最低照度(lx)≥350潔凈區(qū)域技術參數(shù)---

標準潔凈手術室項目標準值最小靜壓差(Pa,對相鄰低級別潔凈室)+8換氣次數(shù)(次/h)30～36手術區(qū)手術臺(或局部100級工作區(qū))工作面高度截面平均風速(m/s)--自凈時間(min)≤25溫度(℃)22～25相對濕度(%)40～60最小新風量(m3/h·人--(次/h)60--6噪聲dB(A)≤50最低照度(lx)≥350潔凈區(qū)域技術參數(shù)---

一般潔凈手術室項目標準值最小靜壓差(Pa,對相鄰低級別潔凈室)+5換氣次數(shù)(次/h)18～22手術區(qū)手術臺(或局部100級工作區(qū))工作面高度截面平均風速(m/s)--自凈時間(min)≤30溫度(℃)22～25相對濕度(%)35～60最小新風量(m3/h·人--(次/h)60--4噪聲dB(A)≤50最低照度(lx)≥350潔凈區(qū)域技術參數(shù)---

準潔凈手術室項目標準值最小靜壓差(Pa,對相鄰低級別潔凈室)+5換氣次數(shù)(次/h)12～15手術區(qū)手術臺(或局部100級工作區(qū))工作面高度截面平均風速(m/s)--自凈時間(min)≤40溫度(℃)22～25相對濕度(%)35～60最小新風量(m3/h·人--(次/h)60--4噪聲dB(A)≤50最低照度(lx)≥350潔凈區(qū)域技術參數(shù)---

體外循環(huán)灌注專用準備室項目標準值最小靜壓差(Pa,對相鄰低級別潔凈室)+5換氣次數(shù)(次/h)17～20手術區(qū)手術臺(或局部100級工作區(qū))工作面高度截面平均風速(m/s)--自凈時間(min)--溫度(℃)21～27相對濕度(%)≤60最小新風量(m3/h·人--(次/h)---3噪聲dB(A)≤60最低照度(lx)≥150潔凈區(qū)域技術參數(shù)---

無菌敷料、器械、一次性物品室和精密儀器存放室項目標準值最小靜壓差(Pa,對相鄰低級別潔凈室)+5換氣次數(shù)(次/h)10～13手術區(qū)手術臺(或局部100級工作區(qū))工作面高度截面平均風速(m/s)--自凈時間(min)--溫度(℃)21～27相對濕度(%)≤60最小新風量(m3/h·人--(次/h)---3噪聲dB(A)≤60最低照度(lx)≥150潔凈區(qū)域技術參數(shù)---

護士站項目標準值最小靜壓差(Pa,對相鄰低級別潔凈室)+5換氣次數(shù)(次/h)10～13手術區(qū)手術臺(或局部100級工作區(qū))工作面高度截面平均風速(m/s)--自凈時間(min)--溫度(℃)21～27相對濕度(%)≤60最小新風量(m3/h·人--(次/h)---3噪聲dB(A)≤60最低照度(lx)≥150潔凈區(qū)域技術參數(shù)---

準備室(消毒處理)項目標準值最小靜壓差(Pa,對相鄰低級別潔凈室)+5換氣次數(shù)(次/h)10～13手術區(qū)手術臺(或局部100級工作區(qū))工作面高度截面平均風速(m/s)--自凈時間(min)--溫度(℃)21～27相對濕度(%)≤60最小新風量(m3/h·人--(次/h)---3噪聲dB(A)≤60最低照度(lx)≥200潔凈區(qū)域技術參數(shù)---

預麻醉室項目標準值最小靜壓差(Pa,對相鄰低級別潔凈室)-8換氣次數(shù)(次/h)10～13手術區(qū)手術臺(或局部100級工作區(qū))工作面高度截面平均風速(m/s)--自凈時間(min)--溫度(℃)22～25相對濕度(%)30～60最小新風量(m3/h·人--(次/h)---4噪聲dB(A)≤55最低照度(lx)≥150潔凈區(qū)域技術參數(shù)---

刷手間項目標準值最小靜壓差(Pa,對相鄰低級別潔凈室)＞0換氣次數(shù)(次/h)10～13手術區(qū)手術臺(或局部100級工作區(qū))工作面高度截面平均風速(m/s)--自凈時間(min)--溫度(℃)21～27相對濕度(%)≤65最小新風量(m3/h·人--(次/h)---3噪聲dB(A)≤55最低照度(lx)≥150潔凈區(qū)域技術參數(shù)---

潔凈走廊項目標準值最小靜壓差(Pa,對相鄰低級別潔凈室)＞0換氣次數(shù)(次/h)10～13手術區(qū)手術臺(或局部100級工作區(qū))工作面高度截面平均風速(m/s)--自凈時間(min)--溫度(℃)21～27相對濕度(%)≤60最小新風量(m3/h·人--(次/h)---3噪聲dB(A)≤55最低照度(lx)≥150潔凈區(qū)域技術參數(shù)---

更衣室項目標準值最小靜壓差(Pa,對相鄰低級別潔凈室)-換氣次數(shù)(次/h)8～10手術區(qū)手術臺(或局部100級工作區(qū))工作面高度截面平均風速(m/s)--自凈時間(min)--溫度(℃)21～27相對濕度(%)≤65最小新風量(m3/h·人--(次/h)---3噪聲dB(A)≤60最低照度(lx)≥200潔凈區(qū)域技術參數(shù)---

恢復室項目標準值最小靜壓差(Pa,對相鄰低級別潔凈室)-換氣次數(shù)(次/h)8～10手術區(qū)手術臺(或局部100級工作區(qū))工作面高度截面平均風速(m/s)--自凈時間(min)--溫度(℃)22～25相對濕度(%)30～60最小新風量(m3/h·人--(次/h)---4噪聲dB(A)≤50最低照度(lx)≥200潔凈區(qū)域技術參數(shù)---

清潔走廊項目標準值最小靜壓差(Pa,對相鄰低級別潔凈室)-換氣次數(shù)(次/h)0～+5手術區(qū)手術臺(或局部100級工作區(qū))工作面高度截面平均風速(m/s)--自凈時間(min)--溫度(℃)21～27相對濕度(%)≤65最小新風量(m3/h·人--(次/h)---3噪聲dB(A)≤55最低照度(lx)≥150其他產(chǎn)科手術室為全新風感染手術室：負壓或可切換手術室潔凈手術室的監(jiān)測不得以空氣潔凈度級別或細菌濃度的單項指標代替綜合性能全面評定；不得以竣工驗收階段的調整測試結果代替綜合性能全面評定的檢驗結果。

溫度、濕度的檢測應符合下列要求夏季工況應在當?shù)孛磕曜顭嵩碌臈l件下檢測，冬季工況應在當?shù)孛磕曜罾湓碌臈l件下檢測室內溫濕度測定為距地面0.8m高的中心點，檢測儀器為可顯示小數(shù)后一位的數(shù)字式溫濕度測量儀

測出室內的溫濕度之后，應同時測出室外溫濕度。

工作區(qū)截面風速的測試要求對Ⅰ級潔凈手術室達到100級潔凈度的手術區(qū)和有局部100級的Ⅰ級潔凈輔助用房中達到100級潔凈度的區(qū)域應先測其工作區(qū)截面平均風速，綜合性能檢測結果不應小于0.27m/s，并不應超過規(guī)定的風速上限1.2倍測點范圍為送風口正投影區(qū)邊界0.12m內的面積，均勻布點測點高度距地0.8m，無手術臺或工作面阻隔，測點間距不應大于0.3m，當有不能移動的阻隔時，測點可抬高至阻隔面之上0.25m檢測儀器為微風速儀

換氣次數(shù)檢測要求對Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ級潔凈手術室和潔凈輔助用房應通過檢測送風口風量換算得出換氣次數(shù)，綜合性能檢測結果不應小于規(guī)定范圍的均值，并不應超過此范圍上限的1.2倍或根據(jù)需要的設計值的1.2倍對于分散布置的送風口，對每個風口用套管法檢測對于集中布置的送風口，應測出送風支管內的送風速度或送風面平均送風速度，換算出房間的換氣次數(shù)潔凈度級別的檢測要求Ⅰ級潔凈手術室和潔凈輔助用房檢測前，系統(tǒng)應已運行15min，其他潔凈房間應已運行40min在確認風速、換氣次數(shù)和靜壓差的檢測無明顯問題之后，再檢測含塵濃度對≥0.5μm和≥5μm的微粒，檢測結果均應同時滿足下列條件：各測點平均含塵濃度

最大值max不大于規(guī)定的級別上限濃度的80%如果雖未超過級別上限但已大于該上限的80%，則應加大風量重測潔凈度測試布點要求區(qū)域最少測點數(shù)Ⅰ級潔凈手術室手術區(qū)和潔凈輔助用房局部100級區(qū)5點(雙對角線布點)Ⅰ級周邊區(qū)8點(每邊內2點)Ⅱ～Ⅲ級潔凈手術室手術區(qū)3點(單對角線布點)Ⅱ級周邊區(qū)6點(長邊內2點，短邊內1點)Ⅲ級周邊區(qū)4點(每邊內1點)Ⅳ級潔凈手術室及分散布置送風口的潔凈室面積＞30m24點(避開送風口正下方)面積≤30m22點(避開送風口正下方)潔凈度測試要求每次采樣的最小采樣量：100級區(qū)域為5.66L，以下各級區(qū)域為2.83L

測點布置在距地面0.8m高的平面上，在手術區(qū)檢測時應無手術臺，當手術臺已固定時，測點高度在臺面之上0.25m在100級區(qū)域檢測時，采樣口應對著氣流方向；在其他級別區(qū)域檢測時，采樣口均向上

當檢測含塵濃度時，檢測人員不得多于2人，都應穿潔凈工作服，處于測點下風向的位置，盡量少動作

當檢測含塵濃度時，手術室照明燈應全部打開

檢測儀器應為流量不小于2.83L/min的光散射式粒子計數(shù)器噪聲的檢測要求噪聲檢測宜在外界干擾較小的晚間進行，以A聲級為準不足15m2的房間在室中心1.1m高處測一點，超過15m2的在室中心和四角共測5點檢測儀器宜用帶倍頻程分析儀的聲級計全部噪聲測定之后，應關閉凈化空調系統(tǒng)測定背景噪聲，當背景噪聲與室內噪聲之差小于10dB時，室內噪聲應按常規(guī)予以修正照度的檢測要求照度檢測應在光源輸出趨于穩(wěn)定(新日光燈和新白熾燈必須已使用超過10h，舊日光燈已點燃15min，舊白熾燈已點燃5min)，不開無影燈，無自然采光條件下進行

測點距地面0.8m，離墻面0.5m，按間距不超過2m均勻布點，不刻意在燈下或避開燈下選點各點中最小的照度值應符合規(guī)定，對大型以上(含大型)手術室，應校核照度均勻度新風量的檢測要求新風量的檢測應在室外無風或微風條件下進行

通過測定新風口風速或新風管中的風速，換算成新風量，結果應在室內靜壓達到標準的前提下，不低于規(guī)定不得超過

新風的要求新風口進風速度應不大于3m/s新風口應設置在高于地面5m、水平方向距排氣口3m以上并在排氣口上風側的無污染源干擾的清凈區(qū)域

靜壓差的檢測要求在潔凈區(qū)所有門都關閉的條件下，從平面上最里面的房間依次向外或從空氣潔凈度級別最高的房間依次向低級別的房間，測出有孔洞相通的相鄰兩間潔凈用房的靜壓差測定高度距地面0.8m，測孔截面平行于氣流方向，測點選在無渦流無回風口的位置檢測儀器為讀值分辨率可達到1Pa的斜管微壓計或其他有同樣分辨率的儀表

細菌濃度的檢測要求細菌濃度宜在其他項目檢測完畢，對全室表面進行常規(guī)消毒之后進行表面染菌密度為監(jiān)測項目，按《醫(yī)院消毒衛(wèi)生標準》GB15982的方法檢測

當送風口集中布置時，應對手術區(qū)和周邊區(qū)分別檢測當送風口分散布置時，全室統(tǒng)一檢測細菌采樣布點原則參照潔凈度布點原則浮游菌采樣原則細菌濃度測點數(shù)應和被測區(qū)域的含塵濃度測點數(shù)相同，且宜在同一位置上每次采樣應滿足規(guī)定的最小采樣量的要求每次采樣時間不應超過30min。浮游菌最小采樣量被測區(qū)域潔凈度級別最小采樣量m3(L)100級0.6(600)1000級0.06(60)10000級0.03(30)100000級0.006(6)300000級0.006(6)沉降菌采樣原則細菌濃度測點數(shù)既要不少于被測區(qū)域含塵濃度測點數(shù)又應滿足規(guī)定的最少培養(yǎng)皿(不含對照皿)數(shù)的要求。沉降菌采樣最少布點數(shù)被測區(qū)域潔凈度級別最少培養(yǎng)皿數(shù)(φ90，以沉降30min計)100級131000級510000級3100000級2300000級2潔凈手術室沉降菌布點及標準值

(空態(tài)或靜態(tài))

區(qū)域等級潔凈度布點數(shù)標準（cfu/皿）特別潔凈手術室手術區(qū)百級≥13點≤0.2周邊區(qū)千級≥5點≤0.4標準潔凈手術室手術區(qū)千級≥5點≤0.75周邊區(qū)萬級≥2點≤1.5一般潔凈手術室手術區(qū)萬級≥2點≤2周邊區(qū)十萬級≥2點≤4潔凈輔助用房的等級標準

(空態(tài)或靜態(tài))

等級浮游法細菌最大平均濃度(個/m3)空氣潔凈度級別Ⅰ

5其他區(qū)域10局部100級其他區(qū)域1000級Ⅱ5010000級Ⅲ150100000級Ⅳ175300000級空氣菌落—浮游菌相關標準： GB50333-2002潔凈手術室，空態(tài)或靜態(tài)

潔凈手術室浮游菌標準等級手術室名稱浮游法細菌最大平均濃度(個/m3)空氣潔凈度級別手術區(qū)周邊區(qū)手術區(qū)周邊區(qū)Ⅰ特別潔凈手術室510100級1000級Ⅱ標準潔凈手術室25501000級10000級Ⅲ一般潔凈手術室7515010000級100000級Ⅳ準潔凈手術室175300000級其他指標采樣及檢測原則采樣時間：消毒處理后，醫(yī)療活動前期間采樣后盡快檢測，送檢時間≤6小時，若樣品保存0～4℃，送檢時間≤24h空氣—沉降菌器材：9cm普通營養(yǎng)瓊脂平板方法：平板暴露法（沉降法）一般情況：按GB15982-1995醫(yī)院消毒衛(wèi)生標準：布點方法：室內面積≤30m2,設內、中、外對角線三點，內外布點距墻壁1m；室內面積＞30m2，設中央及四角5點，四點的布點位置距墻1m，暴露時間5min培養(yǎng)時間：48小時沉降菌計算計算公式：細菌總數(shù)（cfu/m3）=50000N/(A×T)A：平板面積（cm2）T：平板暴露時間N：平均菌落數(shù)檢測限與結果報告檢出限：按cfu/皿計，根據(jù)公式，計算結果為157，報＜157cfu/m3

對于潔凈度要求高的環(huán)境，該方法的最低檢出限與評價標準不一致采用GB50333的方法測試和報告物體表面-

采樣液

對于只清潔、未消毒的表面：無菌生理鹽水消毒后的物體表面：根據(jù)使用消毒劑選擇含相應中和劑的采用液物體表面-

采樣方法5cm×5cm標準規(guī)格板棉拭采樣≥100cm2；門把手等不規(guī)則物體表面：直接涂抹采樣液之中和劑的選擇消毒劑中和劑成分0.5%碘伏0.5%硫代硫酸鈉、0.5%吐溫80消毒劑2000mg/L有效氯0.5%硫代硫酸鈉、0.5%吐溫8075%乙醇0.5%卵磷脂、0.5%吐溫80季銨鹽0.5%卵磷脂、0.5%吐溫80洗必泰0.5%卵磷脂、0.5%吐溫802%戊二醛1%甘氨酸、0.5%吐溫80檢測細菌總數(shù)：取1ml接種平皿金黃色葡萄菌：1ml接種5mlSCDLP液體培養(yǎng)基，36±1℃培養(yǎng)24h，血平板分離乙型溶血性鏈球菌：樣品1ml接種1%葡萄糖肉湯沙門氏菌：按照GB4789.41ml加入增菌液中檢測-工作人員手采樣液無菌生理鹽水適合只清潔，未用消毒劑的情況含相應中和劑的采樣液適用于消毒后采樣工作人員手---采樣方法被檢人員五指并攏，用浸有含相應中和劑的無菌洗脫液的棉拭子，在雙手指屈面從指根到指端往返涂擦2次（一只手涂擦面積約30cm2）并隨之轉動采樣棉拭，剪去操作者手接觸部位，將棉拭投入采樣液采樣與檢測--使用中消毒液采樣時間：更換前，使用中的消毒液需要檢測微生物污染情況的：采樣液中含相應中和劑的營養(yǎng)肉湯，，取1.0ml消毒液加入9.0ml含中和劑的營養(yǎng)肉湯需要測定含量：另取干凈、干燥的采樣瓶直接取樣采樣量＞100ml要求采樣量滿足檢測需要內窺鏡采樣依據(jù)：<<內鏡清洗消毒技術規(guī)范>>方法:

檢測部位：內鏡的內腔面用無菌注射器抽取10ml含相應中和劑的緩沖液，從待檢內鏡活檢口注入，用15ml無菌試管從活檢出口收集，及時送檢，2小時內檢測內窺鏡采樣液檢測菌落計數(shù)：充分振蕩，取0.5ml接種2個平皿后傾注營養(yǎng)瓊脂，35℃培養(yǎng)48h后計數(shù)致病菌：0.2ml接種血平板

0.2ml接種中國蘭平板

0.2ml接種SS平板涂布35℃培養(yǎng)48h

觀察有無致病菌生長污水檢測依據(jù)：GB18466-2005醫(yī)療機構水污染排放標準檢測項目余氯的檢測：現(xiàn)場用干凈空瓶采樣，直接用余氯測試盒檢測余氯糞大腸菌群沙門氏菌志賀氏菌的檢測：采樣：污水采樣加入含1g硫代硫酸鈉的滅菌瓶中，根據(jù)GB18466-2005檢測醫(yī)院污水檢測依據(jù):GB18466-2005《醫(yī)療機構水污染物排放標準》。檢測項目及頻率:總余氯每日監(jiān)測不得少于2次；糞大腸菌群每月不得少于1次；腸道致病菌主要監(jiān)測沙門菌和志賀菌，每季度不得少于1次。結果判定:接觸池出口總余氯一級標準為3～10mg/L，二級標準為2～8mg/L；糞大腸菌群數(shù)為<500MPN/L；腸道致病菌不得檢出。存在問題:管理、杜撰數(shù)據(jù)、篡改記錄、試劑過期失效、報告不規(guī)范（檢測限）、使用環(huán)境有害氣體超標、使用消毒藥械不符合要求。壓力蒸汽滅菌器壓力蒸汽滅菌器滅菌效果：嗜熱脂肪桿菌芽孢培養(yǎng)溫度：56±1℃檢測方法：下排氣式壓力蒸汽滅菌器、預真空和脈動真空滅菌器，生物指示劑置于標準包中心部位，標準包置于排氣口上方。手提壓力蒸汽滅菌器用通氣儲物盒代替標準包，盒內盛滿中試管，生物指示劑放于中心部位放于中心部位兩只滅菌試管內，儲物盒平放于手提壓力蒸汽滅菌器底部滅菌效果檢測依據(jù)

及要求GB15981-1995《消毒與滅菌效果的評價方法與標準》《消毒技術規(guī)范》（衛(wèi)生部2002）ws310.3-2009醫(yī)院消毒供應中心第3部分:清洗消毒及滅菌效果監(jiān)測標準檢測方法：物理法每次滅菌應連續(xù)監(jiān)測并記錄滅菌時溫度、壓力和時間等滅菌參數(shù)。溫度波動范圍在十3℃以內，時間滿足最低滅菌的要求，同時應記錄所有臨界點的時間、溫度與壓力值，結果應符合滅菌的要求.化學法應進行包內、包外化學指示物監(jiān)測。生物法每周一次。壓力蒸汽滅菌效果監(jiān)測檢測方法：按照《消毒技術規(guī)范》的規(guī)定，將嗜熱脂肪桿菌芽胞菌片制成標準生物測試包或生物PCD，或使用一次性標準生物測試包，對滅菌器的滅菌質量進行生物監(jiān)測。標準生物監(jiān)測包置于滅菌器排氣口的上方或生產(chǎn)廠家建議的滅茵器內最難滅菌的部位，并設陽性對照和陰性對照。如果一天內進行多次生物監(jiān)測，且生物指示劑為同一批號，則只設一次陽性對照即可。具體監(jiān)測方法為將生物指示物置于標準試驗包的中心部位。標準試驗包由16條41cmX66cm的全棉手術巾制成。制作方法將每條手術巾的長邊先折成3層，短邊折成2層，然后疊放，制成23cmX23cmX15cm大小的測試包。經(jīng)一個滅菌周期后，在無菌條件下取出標準試驗包的指示菌片，投入澳甲盼紫葡萄糖蛋白陳水培養(yǎng)基中，經(jīng)56℃士1℃培養(yǎng)7d(自含式生物指示物按產(chǎn)品說明書執(zhí)行)，觀察培養(yǎng)結果。滅菌器環(huán)氧乙烷滅菌器滅菌：枯草桿菌黑色變種芽孢生物指示管均勻分布滅菌物品中。36±1℃培養(yǎng)干熱滅菌器：枯草桿菌黑色變種芽孢干熱滅菌效果監(jiān)測檢測方法與結果判定物理監(jiān)測法：每滅菌批次應進行物理監(jiān)測.監(jiān)測方法為將多點溫度檢測儀的多個探頭分別放于滅菌器各層內、中、外各點，關好柜門，引出導線，由記錄儀中觀察溫度上升與持續(xù)時間。溫度在設定時間內均達到預置溫度，則物理監(jiān)測合格。干熱滅菌效果監(jiān)測化學監(jiān)測法：每一滅菌包外應使用包外化學指示物，每一滅菌包內應使用包內化學指示物，并置于最難滅菌的部位。對于未打包的物品，應使用一個或者多個包內化學指示物，放在待滅菌物品附近進行監(jiān)測。經(jīng)過一個滅菌周期后取出，據(jù)其顏色的改變判斷是否達到滅菌要求。干熱滅菌效果監(jiān)測生物監(jiān)測法：應每周監(jiān)測一次：按照《消毒技術規(guī)范》的規(guī)定，采用枯草桿菌黑色變種芽泡菌片，制成標準生物測試包，置于滅菌器最難滅菌的部位，對滅菌器的滅菌質量進行生物監(jiān)測，并設陽性對照和陰性對照。具體監(jiān)測方法：將枯草桿菌芽抱菌片分別裝入無菌試管內(1片/管)。滅菌器與每層門把手對角線內、外角處放置2個含菌片的試管，試管帽置于試管旁，關好柜門，經(jīng)一個滅菌周期后，待溫度降至80℃時，加蓋試管帽后取出試管。在元菌條件下，加入普通營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基C5ml/管)，36℃土1℃培養(yǎng)48h，觀察初步結果，無菌生長管繼續(xù)培養(yǎng)至第7日。結果判定：陽性對照組培養(yǎng)陽性，陰性對照組培養(yǎng)陰性，若每個指示菌片接種的肉湯管均澄清，判為滅菌合格;若陽性對照組培養(yǎng)陽性，陰性對照組培養(yǎng)陰性，而指示菌片之一接種的肉湯管混濁，判為不合格，對難以判定的肉湯管，取0.1ml接種于營養(yǎng)瓊脂平板，用滅菌L棒或接種環(huán)涂勻，置36℃士l℃培養(yǎng)48h，觀察菌落形態(tài)，并做涂片染色鏡檢，判斷是否有指示菌生長，若有指示菌生長，判為滅菌不合格；若無指示菌生長，判為滅菌合格。低溫滅菌的監(jiān)測低溫滅菌方法包括環(huán)氧乙烷滅菌法、過氧化氫等離子滅菌法和低溫甲腔蒸汽滅菌法等。低溫滅菌的監(jiān)測通用要求新安裝、移位、大修、滅菌失敗、包裝材料或被滅菌物品改變，應對滅菌效果進行重新評價，包括采用物理監(jiān)測法、化學監(jiān)測法和生物監(jiān)測法進行監(jiān)測(重復三次)，監(jiān)測合格后，滅菌器方可使用。環(huán)氧乙燒滅菌的監(jiān)測物理監(jiān)測法：每次滅茵應連續(xù)監(jiān)測并記錄滅菌時的溫度、壓力和時間等滅菌參數(shù)。滅菌參數(shù)符合滅茵器的使用說明或操作手冊的要求?；瘜W監(jiān)測法:每個滅菌物品包外應使用包外化學指示物，作為滅菌過程的標志，每包內最難滅菌位置放置包內化學指示物，通過觀察其顏色變化，判定其是否達到滅菌合格要求。生物監(jiān)測法：每滅菌批次應進行生物監(jiān)測。環(huán)氧乙燒滅菌的監(jiān)測-生物監(jiān)測法用枯草桿菌黑色變種芽抱置于常規(guī)生物測試包內，對滅菌器的滅菌質量進行監(jiān)測。常規(guī)生物測試包放在滅菌器最難滅菌的部位(整個裝載滅菌包的中心部位)。滅菌周期完成后應立即將生物指示物從被滅菌物品中取出，36℃士1℃培養(yǎng)7d（自含式生物指示物應遵循產(chǎn)品說明)，觀察培養(yǎng)基顏色變化。同時設陽性對照和陰性對照。常規(guī)生物測試包的制備：