1、EB的危害及其實驗室安全使用預(yù)防措施 在電泳實驗或其他核酸分離實驗中，常用EB（Ethidium bromide，EtBr）作非放射性的Marker，來識別和顯示核酸條帶。EB是一種深紅色不易揮發(fā)的晶體，微溶于水。當(dāng)被紫外線照射時能發(fā)出紅褐色的熒光。盡管EB是一種高效的顯色劑，但它的高危險性要求特殊的安全管理和回收流程。本所試劑、廢液等生物廢棄物處理負(fù)責(zé)人：周蒙老師，聯(lián)系電話21010。（包括EB廢棄物）人體危害 EB是一種強誘變劑（可能造成遺傳性危害），直接接觸有中等毒性。EB可以通過皮膚吸收，因此應(yīng)當(dāng)避免一切與EB的直接接觸。EB對皮膚，眼睛，口腔和上呼吸道系統(tǒng)有刺激性作用。應(yīng)將EB安全密

2、封，并密閉存放于干燥避光處。安全預(yù)防措施 良好的操作習(xí)慣可以降低危害接觸。在通風(fēng)廚使用粉狀或結(jié)晶EB時，或使用含EB的溶液或片劑時，為避免吸入EB，應(yīng)避免與EB的直接接觸。為避免皮膚接觸到溶液中的EB，應(yīng)戴手套、實驗服和防護鏡，并勤換手套。要告知使用者的危險性、正確使用及回收方法。此外，經(jīng)培訓(xùn)的才能通過實驗室化學(xué)衛(wèi)生管理計劃，獲得（the laboratorys Chemical Hygiene Plan）的證書。擁有該證書者才算是按標(biāo)準(zhǔn)操作使用。在使用含類材料前需制訂一份安全使用說明。進入工作區(qū)域需佩戴防護鏡并確認(rèn)有可使用的洗眼及淋浴設(shè)施。和其他化學(xué)藥品一樣，在的使用及放置房間內(nèi)不準(zhǔn)飲食。使

3、用后脫去手套及時洗手，徹底處理掉殘留的。在使用照射時，戴上紫外線防護鏡或用紫外屏蔽玻璃以屏蔽。緊急處理措施誤入眼睛措施：如果不慎落入眼睛，立即用大量的冷水沖洗至少分鐘。最好能用洗眼藥水進行擦洗。誤接觸措施：如果皮膚不慎接觸到，立即脫去被污染的衣物。再用肥皂清洗接觸到的皮膚后，大量的冷水沖洗至少分鐘。誤服措施：如果不慎誤服或吸入，將受害者移至通風(fēng)處，并及時送醫(yī)救治。泄漏污染處理：如果EB不慎灑落在水槽或者下水道，請立刻告知相關(guān)管理部門。如果大量EB灑落，應(yīng)立即通知在該工作域的所有人員，將人員疏散并開始清理被污染的區(qū)域。在未清理好現(xiàn)場的同時，應(yīng)豎牌警告他人勿入。并為有關(guān)部門提供資料及協(xié)作。若僅微量

4、排入下水道并被及時發(fā)現(xiàn)，在確保安全的情況下可由實驗室熟知EB危害的人員進行清理。當(dāng)然，清理EB的人員是必須經(jīng)過安全培訓(xùn)，并有防范意識和相應(yīng)的處理裝置。如果實驗室的人員未經(jīng)培訓(xùn)或沒有處理裝置，請聯(lián)系相關(guān)部門進行處理。凈化處理：在清理微量灑落的時，需全程穿著防護服（按上文所描述的“安全預(yù)防措施”）。用紫外燈照射確定污染的位置。的熒光是很容易看到的。如果灑落的EB是粉末狀，用濕紙巾擦拭后并按程序清理。如果灑落的是液體，用干紙巾吸干后再用UV光檢查殘余的，然后按程序清理。當(dāng)準(zhǔn)備或使用除污劑時配戴全面防護裝備（實驗服、手套和防護鏡）。在用B前，需預(yù)先準(zhǔn)備好除污劑：4.2克亞硝酸鈉（NaNO2, CAS

5、# 7362-00-0）和20毫升的次磷酸（50） （H3PO2, CAS # 6303-21-5），加入300毫升水。）用紙巾蘸取去污劑擦洗被污染的區(qū)域，再用紙巾加自來水清洗5次，每次實用的紙巾都必須是干凈未污染的。）用紫外光檢查已清洗的區(qū)域，以確保所有被清除。必要時可重復(fù)步驟。如果酸可能損害被污染的表面，可用適量自來水稀釋去污劑后再使用。）將所有使用過的紙巾用去污劑浸泡1小時，取出并將附著的去污劑擰干收回容器內(nèi)。被處理時使用的手套和其他物件可雙層包裹再扔棄。）在去污劑的容器上標(biāo)上EB去污劑，并注明成分。將去污使用過的物件打包，后續(xù)處理程序如下。1 Lunn, G. & Sansone, E

6、.B., Destruction of Hazardous Chemicals in the Laboratory, John Wiley & Sons, New York, 1990, p. 119-120.在下表中明確了各類含EB廢液的處理方法。從管道排放EB溶液前，先用紫外燈照射是否還有熒光。如果仍有熒光，那該溶液仍需處理后才能從管道中排放。1）過濾，用木炭顆粒過濾器或回收器。類似處理的裝置有Schleicher & Schuell 的EB回收系統(tǒng)，以及EMD Biosciences的EB吸附器，這兩樣可在VWR公司購買到?；蚩蛇m用Fluka的EB/SYBRGreen 清除劑，或Sigm

7、a的EB回收器，這兩個可在Sigma-Aldrich公司購買到。注意該產(chǎn)品的指示，不要超過回收器的能力。一旦超過它們的使用限度，過濾器或提取器必須經(jīng)生物安全處理后拋棄2）吸收，現(xiàn)已有專門去除EB的“茶包”式產(chǎn)品，專門設(shè)計用于去污，如Qbiogene的GreenBag EB廢棄處理套件和Amresco的脫色袋。按照產(chǎn)品指示，確保有足夠的茶包吸收溶液中大量的。一旦已經(jīng)用盡，“茶包”必須經(jīng)相應(yīng)部門安全處理后拋棄。拋棄處理 將實驗室處理廢棄EB的方法和程序記錄下來，并整合到實驗室的標(biāo)準(zhǔn)作業(yè)程序中。關(guān)于不同類型的EB物品的處理方法，請參閱下表。廢棄處理指南廢液描述廢棄處理方法緩沖液濃度較低（ 0.5mg

8、/L）在排入下水道之前，緩沖液請先用過濾器或“茶包”處理。確定緩沖液中在紫外燈下無熒光方可下排。儲備溶液，氯化銫溶液濃度較高（ 1-10mg/mL）濃度之高，使得處理EB的過濾和吸收方法都無法適用。將這些儲液交由相關(guān)部門專業(yè)人員處理。處理用過的過濾器和“茶包”在（過濾/吸收過程）污染將已用的過濾器和茶包明確標(biāo)記。用過的過濾器和茶包交由相關(guān)部門處理。凝膠濃度低（ 3-5mg/L）先將凝膠晾干，裝入指定的袋子中做好標(biāo)記后，再交由相關(guān)部門處理。污染的物件手套，清理灑落EB用過的材料，以及實驗室中污染的物品破碎的玻璃和銳器必須放入堅固的容器，其他材料可擺放整齊后裝入袋中做好標(biāo)記，交由相關(guān)部門處理。晶體及粉末含有較純或濃縮過的EB交由相關(guān)部門處理。有效處理后的廢液，再確保檢測不到