衡水市人民醫(yī)院電鏡標本制備考核一、單選題（每題2分，共20題）1.在制備電鏡樣品時，用于固定細胞的化學試劑通常是？A.乙醇B.戊二醛C.甲醛D.丙酮2.電鏡樣品厚度一般要求在多少范圍內(nèi)才能獲得清晰的圖像？A.0.1-0.5μmB.1-5μmC.10-20μmD.50-100μm3.脫水過程中，常用的脫水劑不包括以下哪一種？A.乙醇B.丙酮C.乙醚D.甲醇4.負染法常用于哪種樣品的觀察？A.厚樣品B.細胞表面結構C.液體樣品D.組織切片5.電鏡樣品載網(wǎng)孔徑通常為多少？A.3mmB.10mmC.3.05cmD.3.05μm6.在樣品制備過程中，超薄切片最常用的厚度是多少？A.10μmB.50μmC.70-80μmD.100μm7.用于固定細胞的最佳pH值范圍是？A.3-5B.6-8C.10-12D.13-148.透射電鏡樣品制備過程中，包埋劑的作用是？A.固定細胞B.提供導電性C.保護樣品免受腐蝕D.促進脫水9.負染顆粒常用的負染劑是？A.鉛鹽B.鈾鹽C.硫酸銅D.碘液10.電鏡樣品的干燥過程應避免？A.緩慢干燥B.快速干燥C.均勻干燥D.無需干燥二、多選題（每題3分，共10題）1.電鏡樣品制備的常用步驟包括？A.固定B.脫水C.脫脂D.包埋E.超薄切片2.負染法的優(yōu)點包括？A.操作簡單B.適用于不透水樣品C.成本低D.圖像對比度高E.可觀察細胞內(nèi)部結構3.電鏡樣品包埋劑的要求包括？A.高滲透性B.良好的電絕緣性C.適當?shù)挠捕群痛嘈訢.化學穩(wěn)定性E.易于切割4.超薄切片機的主要部件包括？A.切割刀B.冷凍臺C.真空系統(tǒng)D.顯微鏡觀察系統(tǒng)E.樣品臺5.電鏡樣品干燥方法包括？A.自然干燥B.臨界點干燥C.乙醇梯度脫水D.真空干燥E.離心干燥6.負染法常用的載網(wǎng)材質(zhì)包括？A.銅網(wǎng)B.鉻網(wǎng)C.銀網(wǎng)D.碳網(wǎng)E.鉑網(wǎng)7.電鏡樣品制備中，固定液常用的成分包括？A.戊二醛B.甲醛C.聚乙二醇D.蔗糖E.丙酮8.電鏡樣品制備的常見問題包括？A.樣品收縮B.樣品變形C.脫水不均D.包埋不完全E.切片斷裂9.超薄切片的制備要點包括？A.樣品固定要牢固B.脫水要徹底C.包埋要均勻D.切片厚度要一致E.切片臺溫度要適宜10.電鏡樣品保存方法包括？A.真空保存B.冷凍保存C.干燥保存D.避光保存E.常溫保存三、判斷題（每題1分，共20題）1.電鏡樣品制備過程中，固定是為了殺死細胞。（×）2.透射電鏡樣品厚度一般不超過100μm。（×）3.負染法適用于觀察細胞內(nèi)部超微結構。（×）4.電鏡樣品包埋劑應具有良好的導電性。（×）5.超薄切片機通常使用金剛石刀片。（√）6.電鏡樣品干燥過程中，乙醇濃度應逐漸升高。（√）7.負染法常用的負染劑是磷鎢酸。（×）8.電鏡樣品制備過程中，脫脂是為了去除脂質(zhì)成分。（√）9.電鏡樣品包埋后，可以直接進行切片。（×）10.超薄切片的厚度通常為50-70μm。（×）11.電鏡樣品干燥過程中，臨界點干燥可以避免樣品收縮。（√）12.負染法適用于觀察病毒結構。（√）13.電鏡樣品固定后，應立即進行脫水。（×）14.超薄切片機的工作環(huán)境應保持干燥。（√）15.電鏡樣品保存時應避免光照。（√）16.負染法常用的載網(wǎng)孔徑為3.05μm。（√）17.電鏡樣品包埋劑應具有良好的化學穩(wěn)定性。（√）18.超薄切片的制備過程中，切片臺溫度應控制在0℃左右。（×）19.電鏡樣品干燥過程中，自然干燥速度較慢。（√）20.負染法可以觀察細胞表面結構。（√）四、簡答題（每題5分，共5題）1.簡述電鏡樣品制備過程中，固定和包埋的作用。2.負染法的操作步驟有哪些？3.電鏡樣品干燥過程中，為什么需要使用乙醇梯度脫水？4.超薄切片機的主要工作原理是什么？5.電鏡樣品保存時應注意哪些事項？五、論述題（每題10分，共2題）1.論述電鏡樣品制備過程中，樣品收縮和變形的原因及解決方法。2.論述電鏡樣品制備過程中，不同樣品類型（如細胞、組織、微生物）的制備要點及差異。答案及解析一、單選題1.B戊二醛是常用的細胞固定劑，能交聯(lián)蛋白質(zhì)，固定細胞結構。2.A電鏡樣品厚度通常在0.1-0.5μm，以保證電子穿透性。3.C乙醚易燃易爆，一般不用于電鏡樣品脫水。4.B負染法主要用于觀察細胞表面結構。5.D電鏡載網(wǎng)孔徑通常為3.05μm，以保證樣品固定和觀察。6.C超薄切片厚度一般為70-80μm。7.B細胞固定最佳pH值為6-8。8.C包埋劑的作用是保護樣品并便于切片。9.A負染法常用磷鎢酸或醋酸鈾作為負染劑。10.B快速干燥會導致樣品收縮和變形。二、多選題1.A,B,D,E電鏡樣品制備步驟包括固定、脫水、包埋、超薄切片。2.A,B,D負染法操作簡單、適用于不透水樣品、對比度高。3.A,B,C,D,E包埋劑需高滲透性、電絕緣性、硬度、化學穩(wěn)定性、易切割。4.A,B,C,D,E超薄切片機包括切割刀、冷凍臺、真空系統(tǒng)、顯微鏡觀察系統(tǒng)、樣品臺。5.A,B,C,D,E電鏡樣品干燥方法包括自然干燥、臨界點干燥、乙醇梯度脫水、真空干燥、離心干燥。6.A,B,D,E負染法常用銅網(wǎng)、碳網(wǎng)、鉑網(wǎng)。7.A,B,C常用戊二醛、甲醛、聚乙二醇作為固定液成分。8.A,B,C,D,E常見問題包括樣品收縮、變形、脫水不均、包埋不完全、切片斷裂。9.A,B,C,D,E超薄切片制備要點包括固定牢固、脫水徹底、包埋均勻、厚度一致、溫度適宜。10.A,B,C,D電鏡樣品保存方法包括真空保存、冷凍保存、干燥保存、避光保存。三、判斷題1.×固定是為了保持細胞結構，而非殺死。2.×透射電鏡樣品厚度通常不超過100nm。3.×負染法主要觀察細胞表面結構。4.×包埋劑應具有良好的絕緣性，而非導電性。5.√超薄切片機通常使用金剛石刀片。6.√乙醇濃度應逐漸升高，避免樣品收縮。7.×負染法常用磷鎢酸或醋酸鈾。8.√脫脂是為了去除脂質(zhì)成分。9.×包埋后需聚合，才能進行切片。10.×超薄切片厚度通常為70-80μm。11.√臨界點干燥可以避免樣品收縮。12.√負染法適用于觀察病毒結構。13.×固定后需緩慢脫水，避免結構破壞。14.√超薄切片機工作環(huán)境應干燥。15.√保存時應避免光照。16.√載網(wǎng)孔徑為3.05μm。17.√包埋劑需化學穩(wěn)定性好。18.×切片臺溫度通常為-20℃左右。19.√自然干燥速度較慢。20.√負染法可觀察細胞表面結構。四、簡答題1.固定作用：通過化學試劑交聯(lián)蛋白質(zhì)，固定細胞結構，防止自溶和變形。包埋作用：將樣品固定在樹脂中，便于超薄切片，保持結構完整性。2.負染法步驟：制備樣品、滴加負染劑、干燥、放置載網(wǎng)、觀察。3.乙醇梯度脫水：逐步提高乙醇濃度，避免樣品收縮和變形，提高脫水效果。4.超薄切片機工作原理：通過金剛石刀片在冷凍或常溫下切割樣品，得到厚度均勻的切片。5.樣品保存：真空保存、冷凍保存、避光保存，避免污染和結構破壞。五、論述題1.樣品收縮和變形原因及解決方法：-原因：脫水不均、固定不當、