ICS11.020.20CCSC0545IDB45/T2829—2023前言 12規(guī)范性引用文件 13術(shù)語和定義 14縮略語 25地中海貧血篩查技術(shù) 2 6地中海貧血基因診斷技術(shù) 5 7實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制 8信息管理 A A A 3地中海貧血育齡夫婦篩查流程14附錄B血細(xì)胞分析和血紅蛋白組分分析自制質(zhì)控品質(zhì)量評(píng)價(jià) （資料性）血紅蛋白組分分析報(bào)告單16 附錄I（資料性）血紅蛋白組分分析室內(nèi)質(zhì)量控制程序 I.2均值的建立 DB45/T2829—2023 4質(zhì)量控制結(jié)果的記錄和質(zhì)量控制圖的繪制26 參考文獻(xiàn) DB45/T2829—2023本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由廣西壯族自治區(qū)衛(wèi)生健康委員會(huì)提出并宣貫。本文件由廣西衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口。本文件起草單位：廣西壯族自治區(qū)人民醫(yī)院。本文件主要起草人：黎君君、覃婷、李友瓊、周向陽(yáng)、劉曉春、袁育林、田矛、梁旭霞、張繼紅、藍(lán)梅、溫志紅、代艷、李含、梁亮、李夏珀、銀聯(lián)立、鄭麗紅、林中原、陽(yáng)文輝、張鵬、張秀群、莫偉英、龍喜貴、伍欣、李穎、白金平。DB45/T2829—2023廣西是中國(guó)地中海貧血高發(fā)地區(qū)。2010年廣西在國(guó)內(nèi)率先啟動(dòng)地中海貧血防治計(jì)劃，建立了地中海貧血防治體系，全區(qū)地中海貧血篩查設(shè)施設(shè)備和技術(shù)方法大幅度改善和提高，群眾知識(shí)普及程度、接受度和檢測(cè)依從性等均有了長(zhǎng)足進(jìn)步。目前，我國(guó)尚無地中海貧血篩查及基因診斷技術(shù)的國(guó)家、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，地中海貧血篩查與診斷具體技術(shù)操作過程中諸如標(biāo)本處理、檢測(cè)方法、結(jié)果報(bào)告、結(jié)果解讀、質(zhì)量控制、信息管理等方面的規(guī)范急需制定。鑒于此，遵循《母嬰保健法》和《產(chǎn)前診斷技術(shù)管理辦法》等相關(guān)法律法規(guī)和規(guī)范，在充分參考國(guó)際地中海貧血協(xié)會(huì)推薦方案、國(guó)家衛(wèi)計(jì)委《地中海貧血防控試點(diǎn)項(xiàng)目技術(shù)服務(wù)規(guī)范（試行）》2014年版等文獻(xiàn)資料，并與國(guó)內(nèi)多家開展地中海貧血檢測(cè)的產(chǎn)前診斷機(jī)構(gòu)或?qū)嶒?yàn)室共同明確數(shù)據(jù)的前提下，結(jié)合我區(qū)多年開展地中海貧血篩查及診斷技術(shù)的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，制定本技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)。以期達(dá)到規(guī)范全區(qū)地中海貧血篩查與診斷技術(shù)的目的。DB45/T2829—20231地中海貧血篩查與診斷技術(shù)規(guī)范本文件界定了地中海貧血篩查與診斷的相關(guān)術(shù)語和定義，規(guī)定了地中海貧血篩查技術(shù)、診斷技術(shù)、實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制、信息管理等要求。本文件適用于廣西壯族自治區(qū)行政區(qū)域內(nèi)醫(yī)療機(jī)構(gòu)及檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)對(duì)地中海貧血的篩查與診斷。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB19489實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求GB39707醫(yī)療廢物處理處置污染控制標(biāo)準(zhǔn)WS/T405血細(xì)胞分析參考區(qū)間WS/T779兒童血細(xì)胞分析參考區(qū)間WS/T406臨床血液學(xué)檢驗(yàn)常規(guī)項(xiàng)目分析質(zhì)量要求WS/T641臨床檢驗(yàn)定量測(cè)定室內(nèi)質(zhì)量控制WS/T644臨床檢驗(yàn)室間質(zhì)量評(píng)價(jià)3術(shù)語和定義WS/T641、WS/T644界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1非輸血依賴型地貧non-transfusiondependentthalassemia一組不需要定期輸血就能維持生命或者僅在感染、手術(shù)、妊娠、生長(zhǎng)發(fā)育遲緩等特殊情況下需要輸血的地中海貧血類型。3.2輸血依賴型地貧transfusiondependentthalassemia需要定期輸血才能存活，或沒有足夠的輸血支持，將出現(xiàn)數(shù)種并發(fā)癥并導(dǎo)致生活質(zhì)量下降或生存時(shí)間縮短的地中海貧血類型。3.3血紅蛋白H病hemoglobinHdisease由2-3個(gè)α-珠蛋白等位基因缺失或功能缺陷所造成，患者僅能合成少量α-肽鏈，多余的β-肽鏈聚合為β四聚體（HbH）。3.4產(chǎn)前診斷prenataldiagnosis對(duì)可疑出生缺陷的胎兒在出生前應(yīng)用各種檢測(cè)手段，產(chǎn)前診斷又稱宮內(nèi)診斷或出生前診斷。DB45/T2829—202324縮略語下列縮略語適用于本文件。Hb：血紅蛋白（Hemoglobin）HbA2：血紅蛋白A2（HemoglobinA2)HbA：血紅蛋白A(HemoglobinA)HbF：血紅蛋白F(HemoglobinF)DNA：脫氧核糖核酸（DeoxyribonucleicAcid)PCR：聚合酶鏈反應(yīng)（PolymeraseChainReaction）MCV：紅細(xì)胞平均體積（MeanCorpuscularVolume）MCH：紅細(xì)胞平均血紅蛋白量（MeanCorpuscularHemoglobin）SOP：標(biāo)準(zhǔn)操作程序（StandardOperationProcedure）NMPA：國(guó)家藥品監(jiān)督管理局(NationalMedicalMedicalProductsAdministration)EDTA：乙二胺四乙酸（EthyleneDiamineTetraaceticAcid）PT：能力驗(yàn)證(ProficiencyTesting)5地中海貧血篩查技術(shù)5.1篩查人群全人群均可篩查，重點(diǎn)篩查人群包括：婚前、孕前、產(chǎn)前的夫婦及新生兒、疾病查因人群等。5.2篩查流程地中海貧血篩查流程見附錄A。5.3篩查技術(shù)5.3.1血細(xì)胞分析5.3.1.1標(biāo)本處理用含EDTA抗凝劑的真空采血管，靜脈采血2ml，輕輕混勻，避免標(biāo)本溶血，采樣后及時(shí)送檢，4h5.3.1.2試劑和儀器使用經(jīng)國(guó)家注冊(cè)批準(zhǔn)、性能良好的試劑及儀器設(shè)備。5.3.1.3檢測(cè)方法使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀采用自動(dòng)檢測(cè)方法。MCV、MCH可通過間接計(jì)算或直接檢測(cè)得到，按公式（1）、公式（2）計(jì)算：MCV——紅細(xì)胞平均體積，單位為分升（fL）；DB45/T2829—20233A——每升血液中血細(xì)胞比容，單位為百分比（%）；B——每升血液中紅細(xì)胞數(shù)，單位為1012每升（1012/L)。MCH——紅細(xì)胞平均血紅蛋白量，單位為匹克（pg)；B——每升血液中紅細(xì)胞數(shù)，單位為1012每升（1012/L)；C——每升血液中紅細(xì)胞血紅蛋白量，單位為克每升（g/L)。5.3.1.4質(zhì)控物具體如下：——宜使用配套質(zhì)控物，若選擇非配套質(zhì)控物時(shí)應(yīng)評(píng)價(jià)其質(zhì)量和適用性；——應(yīng)有低值、中值、高值3個(gè)水平的質(zhì)控物。5.3.1.5參考區(qū)間28天～18歲兒童參考區(qū)間按WS/T779執(zhí)行，成年人參考區(qū)間按WS/T405執(zhí)行。5.3.2血紅蛋白分析5.3.2.1標(biāo)本處理5.3.2.1.1檢測(cè)樣本不受飲食和采血時(shí)間的影響。5.3.2.1.2按照適用于臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的常規(guī)方法采集靜脈血或臍帶血。5.3.2.1.3采用含有EDTA或檸檬酸鹽抗凝劑的采血管。5.3.2.1.4全血樣本采集后應(yīng)及時(shí)送檢，如未能及時(shí)檢測(cè)應(yīng)4℃儲(chǔ)存，宜1周內(nèi)完成檢測(cè)。5.3.2.1.5轉(zhuǎn)院運(yùn)送的樣本，可常溫運(yùn)送，當(dāng)室外溫度大于30℃時(shí)，宜采用冷藏溫度4℃~8℃運(yùn)送。5.3.2.2檢測(cè)方法學(xué)血紅蛋白組分分析有多種檢測(cè)方法，主要包括瓊脂糖凝膠電泳、高效液相色譜法、毛細(xì)管區(qū)帶電泳和毛細(xì)管等電聚焦電泳等。5.3.2.3檢測(cè)系統(tǒng)5.3.2.3.1應(yīng)選用有NMPA認(rèn)證的分析系統(tǒng)（儀器和試劑）。5.3.2.3.2不同分析系統(tǒng)干擾因素有差異，實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)知曉所選分析系統(tǒng)可能存在的干擾因素。5.3.2.3.3實(shí)驗(yàn)室啟用/更換一個(gè)新的分析系統(tǒng)檢測(cè)臨床樣本前，應(yīng)該對(duì)系統(tǒng)性能進(jìn)行驗(yàn)證。5.3.2.3.4試劑的性能驗(yàn)證方法宜參考CNAS-GL037進(jìn)行，儀器的驗(yàn)證方法宜參考CNAS-GL040。5.3.2.3.5儀器應(yīng)定期校準(zhǔn)，或者維修后應(yīng)進(jìn)行校準(zhǔn)。5.3.2.4質(zhì)控物5.3.2.4.1質(zhì)控物應(yīng)有良好的長(zhǎng)期穩(wěn)定性，宜選擇商品制品，或自制。5.3.2.4.2宜選用凍干粉或冰凍全血質(zhì)控物，質(zhì)控物復(fù)溶后，分管凍存。檢測(cè)時(shí)，取出平衡至室溫，混勻后進(jìn)行測(cè)定。質(zhì)控物不宜反復(fù)凍融。5.3.2.4.3實(shí)驗(yàn)室自制新鮮冰凍全血質(zhì)控物，原料為足量的混合新鮮全血，采用凍存管分裝，并對(duì)均勻性進(jìn)行考察評(píng)價(jià)，評(píng)價(jià)參見附錄B，存儲(chǔ)于-20℃或更低溫度，可以穩(wěn)定半年。5.3.2.4.4應(yīng)有2個(gè)水平的質(zhì)控物（正常值及病理值）。DB45/T2829—202345.3.2.5測(cè)定5.3.2.5.1所用試劑、耗材應(yīng)按說明書要求存放，在有效期內(nèi)使用完畢。5.3.2.5.2實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定標(biāo)準(zhǔn)操作程序，包含但不限于以下內(nèi)容：項(xiàng)目名稱、檢測(cè)原理、樣本采集及存儲(chǔ)、室內(nèi)質(zhì)量控制程序、室間質(zhì)量控制程序、測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)程序、儀器維護(hù)保養(yǎng)程序、參考區(qū)間、干擾影響因素、校準(zhǔn)程序（可由儀器廠家實(shí)施）、結(jié)果審核及報(bào)告。5.3.2.5.3血液樣本及質(zhì)控物實(shí)驗(yàn)完成后，處理樣本應(yīng)符合GB39707的規(guī)定。5.3.2.6報(bào)告5.3.2.6.1以百分比為單位，結(jié)果保留1位小數(shù)點(diǎn)。5.3.2.6.2報(bào)告單宜提供方法學(xué)，以利于臨床醫(yī)生判斷結(jié)果。5.3.2.6.3如條件允許，宜提供電泳圖譜/色譜圖。5.3.2.6.4異常血紅蛋白，宜以血紅蛋白組別歸屬進(jìn)行報(bào)告（如HbJ、HbE等）。5.3.2.6.5存在圖譜異?；驒z測(cè)結(jié)果異常，應(yīng)提供結(jié)果描述和檢測(cè)建議，以利于臨床醫(yī)生判斷結(jié)果。5.3.2.6.6血紅蛋白分析報(bào)告單參見附錄C。5.3.2.7參考區(qū)間5.3.2.7.1根據(jù)不同年齡設(shè)定參考區(qū)間。5.3.2.7.2產(chǎn)前樣本臍帶血，尚無參考區(qū)間。5.3.2.7.30天～6個(gè)月，尚無參考區(qū)間。新生兒期宜參考新生兒臍帶血參考區(qū)間；1～6月，宜參考6個(gè)月～2歲的參考區(qū)間。5.3.2.7.4血紅蛋白組分在小于2歲以內(nèi)的年齡段，其組分含量波動(dòng)較大，因此，這個(gè)年齡段的血紅蛋白組分參考區(qū)間制定較為困難，其可靠性低于年齡≥2歲組的參考區(qū)間。5.3.2.7.5宜根據(jù)檢測(cè)方法學(xué)設(shè)定不同年齡參考區(qū)間。表1不同年齡段參考區(qū)間12%≤HbA≤40%60%≤HbF≤90%0%≤HbA≤1.0%83%≤HbA≤95%0%≤HbF≤13%0.8%≤HbA≤3.0%91.5%≤HbA≤97.9%0%≤HbF≤5%2.4%≤HbA≤5.3.3陽(yáng)性結(jié)果不同年齡段參考區(qū)間5.3.3.1具有以下至少一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果可判斷為成人地中海貧血篩查陽(yáng)性：——MCV＜82fl；——MCH＜27pg；——HbA2≥3.5%；——HbA2＜2.4%；——HbF＞5%；——出現(xiàn)異常血紅蛋白。5.3.3.2具有以下至少一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果可判斷為新生兒、兒童地中海貧血篩查陽(yáng)性：——出現(xiàn)異常血紅蛋白；——MCV、MCH低于其年齡段參考范圍下限；DB45/T2829—20235——HbA2、HbA或HbF位于參考范圍外。6地中海貧血基因診斷技術(shù)6.1資質(zhì)要求6.1.1實(shí)驗(yàn)室資質(zhì)6.1.1.1臨床基因檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)符合GB19489的規(guī)定，地中海貧血基因檢測(cè)應(yīng)獲得廣西醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)技術(shù)準(zhǔn)入審核合格證書。6.1.1.2地中海貧血基因診斷（產(chǎn)前標(biāo)本）臨床基因檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具備產(chǎn)前診斷資質(zhì)。6.1.1.3地中海貧血基因（罕見型）診斷檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)獲得行業(yè)主管部門批準(zhǔn)。6.1.2人員資質(zhì)6.1.2.1實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員應(yīng)具有檢驗(yàn)資格證，且應(yīng)經(jīng)過國(guó)家級(jí)或省級(jí)臨床檢驗(yàn)中心培訓(xùn)并取得《臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室人員上崗證》。6.1.2.2實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員應(yīng)具有檢驗(yàn)資格證，且應(yīng)經(jīng)過國(guó)家級(jí)或省級(jí)臨床檢驗(yàn)中心培訓(xùn)并取得《臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室人員上崗證》。6.1.2.3地中海貧血基因診斷（靜脈血）結(jié)果報(bào)告審核人員應(yīng)具備中級(jí)及以上職稱。6.1.2.4地中海貧血基因診斷（產(chǎn)前標(biāo)本）結(jié)果報(bào)告審核人員應(yīng)具備副高職稱及以上的職稱。6.1.2.5地中海貧血篩查、基因診斷人員應(yīng)每3年參加主管行政部門或相關(guān)行業(yè)協(xié)會(huì)組織的地中海貧血知識(shí)和技術(shù)培訓(xùn)，并獲得培訓(xùn)合格證書/學(xué)分。6.2診斷技術(shù)6.2.1地中海貧血基因診斷（靜脈血）6.2.1.1適應(yīng)癥——地中海貧血篩查陽(yáng)性；——育齡夫婦雙方，陽(yáng)性一方為缺失型α0-地中海貧血（--/，如：--SEA/、--THAI/、--FIL/等）攜帶者，篩查陰性配偶一方行α-地中海貧血基因檢測(cè)；——育齡夫婦雙方，陽(yáng)性一方為α+-缺失型及α-非缺失型時(shí)，當(dāng)配偶一方篩查為陰性結(jié)果（包括血細(xì)胞分析和血紅蛋白組分分析由患者知情選擇進(jìn)行地貧基因檢測(cè)；——育齡夫婦雙方，其中一方為β-地中海貧血基因攜帶者，配偶一方進(jìn)行血紅蛋白組分分析，當(dāng)檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性時(shí)，進(jìn)行地中海貧血基因檢測(cè)；當(dāng)配偶一方血紅蛋白電泳篩查提示存在異常血紅蛋白時(shí)，由患者知情選擇進(jìn)行地貧基因檢測(cè)；——貧血查因的患者地中海貧血篩查陽(yáng)性時(shí)；——臍血血紅蛋白篩查陽(yáng)性時(shí)；——有生育中/重型地貧患兒家族史的人群。6.2.1.2知情同意開展地中海貧血基因檢測(cè)應(yīng)簽署知情同意書，同意書參見附錄D，應(yīng)包括以下內(nèi)容：——地中海貧血基本知識(shí)；——檢測(cè)的目的和內(nèi)容；DB45/T2829—20236——技術(shù)優(yōu)勢(shì)和局限性；——臨床適應(yīng)癥。6.2.1.3申請(qǐng)單檢測(cè)應(yīng)填寫申請(qǐng)單，申請(qǐng)單參見附錄E，宜包括但不限于以下內(nèi)容：申請(qǐng)單抬頭、受檢者姓名、年齡、民族、檢測(cè)項(xiàng)目、聯(lián)系電話、申請(qǐng)科室、申請(qǐng)醫(yī)生、申請(qǐng)日期、樣本類型、紅細(xì)胞參數(shù)、血紅蛋白電泳參數(shù)、篩查單位。6.2.1.4標(biāo)本處理6.2.1.4.1按照適用于臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的常規(guī)方法采集靜脈血。6.2.1.4.2檢測(cè)樣本不受飲食和采血時(shí)間的影響。6.2.1.4.3采用含有EDTA抗凝劑的采血管。6.2.1.4.4轉(zhuǎn)院運(yùn)送的樣本，可常溫運(yùn)送，當(dāng)室外溫度大于30℃時(shí)，宜采用冷藏溫度4℃~8℃運(yùn)送。6.2.1.4.5樣本如未能及時(shí)檢測(cè)，可先保存：——樣本在常溫條件下短期保存7天——樣本在4℃條件下冷藏保存（＜3個(gè)月）；——樣本在≤-20℃條件下可以長(zhǎng)期保存。6.2.1.5檢測(cè)設(shè)備應(yīng)具備生物安全柜、離心機(jī)、水浴箱或金屬浴、微量移液器等設(shè)備，宜具備核酸提取儀、渦旋振蕩器、熒光定量PCR儀等設(shè)備，宜根據(jù)檢驗(yàn)方法學(xué)選擇以下相應(yīng)設(shè)備：——普通PCR儀；——瓊脂糖水平電泳儀；——凝膠成像分析儀；——雜交儀；——熒光定量PCR儀；——二代測(cè)序基因分析儀；——核酸濃度測(cè)定儀；——遺傳分析儀。6.2.1.6檢測(cè)耗材無粉乳膠手套、口罩、鞋套或區(qū)域?qū)Ｓ眯⑽^、EP離心管、凍存盒、75％乙醇、有效氯消毒液。6.2.1.7檢測(cè)試劑應(yīng)選擇NMPA批準(zhǔn)應(yīng)用于臨床實(shí)驗(yàn)室的地貧基因檢測(cè)試劑盒。6.2.1.8實(shí)驗(yàn)操作6.2.1.8.1核酸提取步驟如下：a)樣本進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室唯一編號(hào)；DB45/T2829—20237b)手工方法提取核酸的，按照試劑盒提取說明書進(jìn)行；c)使用核酸提取儀的，按照儀器操作說明書進(jìn)行；d)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，按照實(shí)驗(yàn)室SOP文件進(jìn)行清理和消毒，包括桌面、安全柜、移液器等；e)記錄有關(guān)實(shí)驗(yàn)記錄、設(shè)備使用記錄。6.2.1.8.2DNA擴(kuò)增及分析步驟如下：a)按所用試劑盒說明書在儀器上設(shè)置擴(kuò)增參數(shù)，并保存供長(zhǎng)期使用；b)按照試劑盒說明書分裝、配制反應(yīng)液（如有需要）；c)加DNA模板前，擴(kuò)增板/管先進(jìn)行瞬時(shí)離心；d)加DNA模板后，擴(kuò)增板/管進(jìn)行瞬時(shí)離心；e)根據(jù)選擇的方法，按照實(shí)驗(yàn)室SOP文件進(jìn)行操作；f)記錄有關(guān)實(shí)驗(yàn)記錄、設(shè)備使用記錄。6.2.1.8.3結(jié)果判斷a)參照所使用試劑盒的判斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行結(jié)果判斷。b)可疑結(jié)果，宜使用另一種檢測(cè)方法的試劑盒進(jìn)行復(fù)核。c)基因檢測(cè)結(jié)果應(yīng)結(jié)合篩查結(jié)果、臨床信息進(jìn)行綜合判斷。6.2.1.8.4結(jié)果報(bào)告a)檢驗(yàn)報(bào)告單應(yīng)體現(xiàn)檢測(cè)方法、檢測(cè)范圍及標(biāo)本類型。b)檢驗(yàn)報(bào)告單應(yīng)體現(xiàn)檢測(cè)結(jié)果并書寫基因型，不應(yīng)下臨床診斷性報(bào)告。c)實(shí)驗(yàn)室結(jié)果有異常發(fā)現(xiàn)，應(yīng)進(jìn)行備注描述。d)可疑結(jié)果，應(yīng)進(jìn)行罕見型地中海貧血基因檢測(cè)的，應(yīng)由行業(yè)主管部門批準(zhǔn)的罕見型地中海貧血基因檢測(cè)機(jī)構(gòu)進(jìn)行檢測(cè)。e)報(bào)告單簽發(fā)應(yīng)雙人簽字，其中一名為中級(jí)及以上職稱。f)地中海貧血基因檢測(cè)報(bào)告單參見附錄H。6.2.2地中海貧血基因產(chǎn)前診斷6.2.2.1適應(yīng)癥——有生育輸血依賴型地中海貧血患兒風(fēng)險(xiǎn)的夫婦，孕婦應(yīng)進(jìn)行地中海貧血基因侵入性產(chǎn)前診斷；——有生育非輸血依賴型地中海貧血患兒風(fēng)險(xiǎn)的夫婦，進(jìn)行遺傳咨詢，宜知情選擇地中海貧血基因侵入性產(chǎn)前診斷。6.2.2.2知情同意開展地中海貧血基因產(chǎn)前診斷應(yīng)簽署知情同意書，同意書參見附錄F，應(yīng)包括以下內(nèi)容：——產(chǎn)前診斷指征；——檢測(cè)的目的和內(nèi)容；——技術(shù)風(fēng)險(xiǎn)和局限性。6.2.2.3申請(qǐng)單DB45/T2829—20238開展地中海貧血基因產(chǎn)前診斷應(yīng)填寫申請(qǐng)單，申請(qǐng)單參見附錄G，宜包括但不限于以下內(nèi)容：——基本信息：申請(qǐng)單抬頭、受檢者姓名、年齡、民族、檢測(cè)項(xiàng)目、聯(lián)系電話、申請(qǐng)科室、申請(qǐng)醫(yī)生、申請(qǐng)日期、樣本類型；——應(yīng)填寫夫婦雙方的篩查結(jié)果和基因型，檢測(cè)機(jī)構(gòu)。6.2.2.4產(chǎn)前診斷時(shí)機(jī)地中海貧血基因產(chǎn)前診斷為侵入性產(chǎn)前診斷，產(chǎn)前診斷時(shí)機(jī)及取材方式如下：——孕9～14周宜行絨毛活檢；——孕16周后宜行羊膜腔穿刺取羊水；——孕22周后宜行臍靜脈穿刺取臍帶血。6.2.2.5產(chǎn)前診斷前相關(guān)檢查——超聲檢查胎盤位置、胎數(shù)、孕周、胎兒情況；——檢測(cè)孕婦血細(xì)胞分析、凝血功能檢測(cè)、RH血型、乙肝、艾滋病、丙肝、梅毒結(jié)果，排除禁忌癥。6.2.2.6標(biāo)本采集6.2.2.6.1采集方法進(jìn)行產(chǎn)前診斷需要獲得足量的胎兒DNA樣本，目前在臨床上廣泛應(yīng)用的是傳統(tǒng)的侵入性取材方法，主要有三種：即絨毛穿刺取樣、羊膜腔穿刺和經(jīng)皮臍血穿刺取樣。6.2.2.6.2采集量臨床醫(yī)生應(yīng)按照相關(guān)規(guī)范進(jìn)行標(biāo)本采集，宜采集絨毛（10～20）mg，羊水（20～30）mL，臍血2mL。6.2.2.7標(biāo)本處理6.2.2.7.1侵入性產(chǎn)前診斷操作采集的絨毛、羊水、臍血，樣本采集后及時(shí)送檢。如未能及時(shí)檢測(cè)宜4℃暫存。6.2.2.7.2肉眼可見明顯血色的羊水樣本，應(yīng)同時(shí)進(jìn)行培養(yǎng)前樣本、培養(yǎng)后樣本檢測(cè)。6.2.2.7.3產(chǎn)前樣本均應(yīng)雙份雙盲檢測(cè)。6.2.2.7.4產(chǎn)前樣本應(yīng)行母源污染鑒別，出現(xiàn)影響檢測(cè)結(jié)果判斷的母源污染，應(yīng)重新采集樣本。6.2.2.8檢測(cè)的設(shè)備、耗材、試劑6.2.2.8.1檢測(cè)設(shè)備：見6.2.1.5。6.2.2.8.2檢測(cè)耗材：見6.2.1.6。6.2.2.8.3檢測(cè)試劑：見6.2.1.7，并增加地貧基因產(chǎn)前診斷宜使用雙份雙盲試劑盒。6.2.2.9實(shí)驗(yàn)操作6.2.2.9.1核酸提取見6.2.1.8.1，并增加產(chǎn)前診斷樣本應(yīng)行DNA模板濃度測(cè)定，濃度應(yīng)達(dá)到使用試劑說明書的濃度要求。6.2.2.9.2母源污染鑒定DB45/T2829—20239步驟如下：a)選用適合的STR分析檢測(cè)試劑盒；b)按照說明書進(jìn)行檢測(cè)和結(jié)果判斷；c)記錄有關(guān)實(shí)驗(yàn)記錄、設(shè)備使用記錄。6.2.2.9.3DNA擴(kuò)增及分析見6.2.1.8.2。6.2.2.9.4結(jié)果判斷見6.2.1.8.3，并增加產(chǎn)前樣本檢測(cè)先判斷是否存在母源污染，當(dāng)母源污染影響結(jié)果判斷時(shí)，應(yīng)重新采樣，或者采用培養(yǎng)前或培養(yǎng)后無母源污染的樣本檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行報(bào)告；結(jié)合父母雙親的地貧基因進(jìn)行結(jié)果判斷。6.2.2.10結(jié)果報(bào)告見6.2.1.8.4，并增加修改報(bào)告單簽發(fā)要求，即：應(yīng)雙人簽字，其中一名為副高及以上職稱。6.2.2.11產(chǎn)前診斷結(jié)果遺傳咨詢綜合家系分析產(chǎn)前診斷結(jié)果并給出咨詢意見：a)重型α-地貧胎兒，宜終止妊娠；b)輸血依賴型地貧胎兒，宜知情選擇終止妊娠；c)非輸血依賴型地貧胎兒，宜知情選擇終止妊娠。6.2.2.12追蹤隨訪6.2.2.12.1侵入性產(chǎn)前診斷取材后7天隨訪妊娠情況。6.2.2.12.2胎兒分娩后1個(gè)月隨訪。6.2.3地中海貧血基因診斷（罕見型）6.2.3.1標(biāo)本處理6.2.3.1.1靜脈血樣本：見6.2.1.4。6.2.3.1.2產(chǎn)前樣本：見6.2.1.4。6.2.3.2檢測(cè)的設(shè)備、耗材、試劑6.2.3.2.1檢測(cè)設(shè)備：見6.2.1.5，并增加三代測(cè)序基因分析儀（視方法學(xué)而選擇）。6.2.3.2.2檢測(cè)耗材：見6.2.1.6。6.2.3.2.3檢測(cè)試劑：地中海貧血基因診斷（罕見型）檢測(cè)商品試劑盒或自配試劑。6.2.3.3方法宜根據(jù)突變情況選擇合適的檢測(cè)技術(shù)，包括但不限于：——多重連接探針擴(kuò)增技術(shù)（MLPA）；——Sanger測(cè)序技術(shù)；——二代測(cè)序技術(shù)（NGS）；——第三代測(cè)序技術(shù)（TGS）DB45/T2829—2023——數(shù)字PCR技術(shù)等。6.2.3.4實(shí)驗(yàn)操作6.2.3.4.1核酸提取靜脈血樣本提取步驟見6.2.1.8.1，產(chǎn)前樣本核酸提取步驟見6.2.2.11.1。6.2.3.4.2DNA擴(kuò)增及分析步驟如下：a)按所用試劑盒說明書在儀器上設(shè)置擴(kuò)增參數(shù)，并保存，供長(zhǎng)期使用；b)按照試劑盒說明書分裝、配制反應(yīng)液；c)根據(jù)選擇的方法，按照說明書進(jìn)行操作；d)記錄有關(guān)實(shí)驗(yàn)記錄、設(shè)備使用記錄。6.2.3.5結(jié)果判斷6.2.3.5.1參照所使用檢測(cè)方法的判斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行結(jié)果判斷。6.2.3.5.2基因檢測(cè)結(jié)果應(yīng)結(jié)合家系、篩查結(jié)果、臨床信息進(jìn)行綜合判斷。6.2.3.5.3檢測(cè)結(jié)果為未知突變的，宜采集家系進(jìn)行驗(yàn)證。6.2.3.6結(jié)果報(bào)告6.2.3.6.1檢驗(yàn)報(bào)告單應(yīng)體現(xiàn)檢測(cè)方法、檢測(cè)范圍。6.2.3.6.2檢驗(yàn)報(bào)告單應(yīng)體現(xiàn)檢測(cè)結(jié)果并書寫基因型，不應(yīng)下臨床診斷性報(bào)告。6.2.3.6.3實(shí)驗(yàn)室結(jié)果如有異常發(fā)現(xiàn)，宜進(jìn)行備注描述。6.2.3.6.4本檢測(cè)為實(shí)驗(yàn)室自配試劑，僅供臨床醫(yī)生參考，不應(yīng)作為排除性檢測(cè)結(jié)果，宜結(jié)合臨床癥狀及其他檢查綜合判斷。7實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制7.1室內(nèi)質(zhì)量控制7.1.1地貧篩查實(shí)驗(yàn)7.1.1.1血細(xì)胞分析室內(nèi)質(zhì)量控制采用高值、中值和低值3個(gè)水平配套質(zhì)控品，每臺(tái)儀器在累計(jì)200個(gè)測(cè)試后或開機(jī)間隔6h必須進(jìn)行第二次3個(gè)水平質(zhì)控品的檢測(cè)，室內(nèi)控制應(yīng)符合WS/T641要求。7.1.1.2血紅蛋白組分分析7.1.1.2.1在每批進(jìn)行樣本測(cè)試前，應(yīng)先進(jìn)行質(zhì)控物分析，以確定分析系統(tǒng)狀態(tài)良好，測(cè)定結(jié)果可靠后，再進(jìn)行樣本分析。7.1.1.2.2當(dāng)出現(xiàn)失控現(xiàn)象，應(yīng)進(jìn)行失控分析，并采取相應(yīng)的措施。質(zhì)量控制限的設(shè)定及失控判斷規(guī)則應(yīng)符合WS/T641要求，參見附錄I。7.1.2地貧基因診斷實(shí)驗(yàn)7.1.2.1地中海貧血基因診斷DB45/T2829—20237.1.2.1.1運(yùn)行每批次樣本，應(yīng)同時(shí)進(jìn)行陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品。7.1.2.1.2質(zhì)控品應(yīng)包括提取、擴(kuò)增、產(chǎn)物分析的全過程，實(shí)驗(yàn)結(jié)果陰性質(zhì)控品應(yīng)為陰性，陽(yáng)性質(zhì)控品應(yīng)為陽(yáng)性。7.1.2.1.3整個(gè)實(shí)驗(yàn)流程應(yīng)兩名實(shí)驗(yàn)技術(shù)員核對(duì)。7.1.2.1.4產(chǎn)前診斷樣本應(yīng)進(jìn)行雙盲雙線檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果應(yīng)與遺傳規(guī)律相符。當(dāng)不符合遺傳規(guī)律時(shí)，應(yīng)查找原因，進(jìn)行記錄并告知臨床醫(yī)生。7.1.2.2地中海貧血基因診斷（罕見型）7.1.2.2.1宜通過實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性、不同方法學(xué)、家系的檢測(cè)結(jié)果比對(duì)進(jìn)行質(zhì)量控制。7.1.2.2.2整個(gè)實(shí)驗(yàn)流程應(yīng)兩名實(shí)驗(yàn)室技術(shù)員核對(duì)。7.2室間質(zhì)量評(píng)價(jià)7.2.1項(xiàng)目每年應(yīng)至少參加省級(jí)臨床檢驗(yàn)中心或國(guó)家級(jí)臨床檢驗(yàn)中心室間質(zhì)量評(píng)價(jià)（能力驗(yàn)證，PT）計(jì)劃。7.2.2室間質(zhì)量評(píng)價(jià)樣品應(yīng)當(dāng)隨臨床樣本一起進(jìn)行檢測(cè)。7.2.3地貧篩查項(xiàng)目室間質(zhì)評(píng)PT成績(jī)應(yīng)≥80分，地貧基因診斷項(xiàng)目室間質(zhì)評(píng)PT成績(jī)應(yīng)為100分。8信息管理8.1樣本保存8.1.1地貧篩查樣本至少保留7天。8.1.2地貧基因外周血樣本至少保留3年、地貧基因產(chǎn)前診斷樣本至少保留5年。宜保留外周血、羊水、絨毛、臍血樣本，不宜保存DNA樣本。8.2資料保存8.2.1報(bào)告單有效期限為3年。8.2.2產(chǎn)前診斷相關(guān)資料保留至少15年。8.2.3地貧基因診斷知情同意書及申請(qǐng)單保存至少5年。DB45/T2829—2023地中海貧血篩查流程圖A.1地中海貧血攜帶者篩查流程見圖A.1。圖A.1攜帶者篩查流程圖A.2地中海貧血新生兒篩查流程見圖A.2。圖A.2新生兒篩查流程圖A.3地中海貧血育齡夫婦篩查流程見圖A.3。圖A.3育齡夫婦篩查流程圖DB45/T2829—2023血細(xì)胞分析和血紅蛋白組分分析自制質(zhì)控品質(zhì)量評(píng)價(jià)B.1以采用單因素方差分析血液中HbA2/HbF的均勻性為例。評(píng)價(jià)所采用的分析系統(tǒng)應(yīng)具有良好的精密度。B.2從樣品總體中隨機(jī)抽取21個(gè)(制備數(shù)量少于500個(gè)，可抽取10個(gè))樣品，每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)定3次（不少于2次重復(fù)測(cè)定的樣品應(yīng)分別單獨(dú)取樣，測(cè)定順序?yàn)椋旱?次：1-2-3…-19-20-21；第2次：21-20-19…-3-2-1；第3次：1-2-3…-19-20-21。測(cè)定結(jié)果樣表見表B.1。表B.1HbA2測(cè)定結(jié)果123456789B.3做單因素方差分析，顯著性水平大于0.05，樣本檢測(cè)結(jié)果被認(rèn)為是均勻的。B.4對(duì)測(cè)定中出現(xiàn)的異常值，在未查明原因之前，不應(yīng)隨意剔除。DB45/T2829—2023血紅蛋白組分分析報(bào)告單血紅蛋白組分分析報(bào)告單見圖C.1。XX醫(yī)院XX科檢驗(yàn)報(bào)告單姓名：XX性別：X年齡：XX標(biāo)本種類：靜脈血樣本編號(hào)：XX檢驗(yàn)項(xiàng)目：血紅蛋白組分分析NO項(xiàng)目名稱結(jié)果參考區(qū)間單位血紅蛋白H(HbH)%血紅蛋白Bart,s(HbBart,s)%血紅蛋白A(HbA)96.4-97.9%血紅蛋白F/Q(HbF/Q)0.70-5%血紅蛋白D/G(HbD/G)未檢出%血紅蛋白S(HbS)未檢出%血紅蛋白E(HbE)未檢出%2.4-3.5%血紅蛋白C(HbC)未檢出%血紅蛋白J(HbJ)未檢出%血紅蛋白CS(HbCS)未檢出%血紅蛋白快速帶未檢出%血紅蛋白慢速帶未檢出%備注：建議進(jìn)一步地貧基因檢測(cè)。采樣時(shí)間：XX接收時(shí)間：XX檢驗(yàn)者：XX審核者：XX報(bào)告時(shí)間：XX圖C.1血紅蛋白組分分析報(bào)告單DB45/T2829—2023地中海貧血基因診斷知情同意書地中海貧血基因診斷知情同意書見圖D.1。年齡送檢科室/單位：【情況介紹和治療建議】您因___________________，擬定進(jìn)行地中海貧血（簡(jiǎn)稱地貧）基因診斷，需采集靜脈血樣本送檢?！炯膊√攸c(diǎn)及其風(fēng)險(xiǎn)】地中海貧血是一種遺傳性溶血性疾病，因基因類型不同而臨床表型不一。(1)靜止型和輕型地貧，臨床表型多不貧血，但如雙親為同型地貧攜帶者，有生育重型或中間型地貧后代的風(fēng)險(xiǎn)。(2)中間型α-地中海貧血（血紅蛋白H病部分類型屬于輸血依賴型，面臨定期輸血、祛鐵治療等，生存質(zhì)量較差，預(yù)后不良。(3)重型α-地中海貧血胎兒主要表現(xiàn)為胎兒水腫、巨大胎盤、胎死宮內(nèi)及出生后無法存活，且母體易出現(xiàn)高血壓、子癇前期等并發(fā)癥。(4)重型和中間型β-地中海貧血孕期胎兒無明顯異常表現(xiàn)，出生到一定年紀(jì)后發(fā)病。目前公認(rèn)唯一治愈的方法是造血干細(xì)胞移植，但面臨無合適供體、排異反應(yīng)、移植失敗等風(fēng)險(xiǎn)，且治療費(fèi)用昂貴。大部分患者只能依賴性輸血和去鐵治療，長(zhǎng)期的治療費(fèi)用昂貴?！緮M定醫(yī)療方案的性質(zhì)、目的】【其他可選方法及其風(fēng)險(xiǎn)】（應(yīng)列出其他可及的地中海貧血基因檢測(cè)方法學(xué)及其局限性）【拒絕擬定醫(yī)療方案的風(fēng)險(xiǎn)】可能不會(huì)發(fā)生以下介紹的檢查風(fēng)險(xiǎn)，但可能生育嚴(yán)重類型地貧的患兒。【檢查潛在風(fēng)險(xiǎn)和對(duì)策】圖D.1地中海貧血基因診斷知情同意書DB45/T2829—2023醫(yī)生告知我如下地中海貧血基因診斷可能發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)，有些不常見的風(fēng)險(xiǎn)可能沒有在此列出，醫(yī)生告訴我可與我的醫(yī)生討論有關(guān)我檢查的具體內(nèi)容，如果我有特殊的問題可與我的醫(yī)生討論。1．我理解此檢查可能發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)及醫(yī)生采取的可能對(duì)策：1)本檢測(cè)范圍有局限性，尚未包含所有的突變位點(diǎn)；罕見型地貧基因檢測(cè)存在檢測(cè)失敗的可能性；2)檢測(cè)結(jié)果未見異常，不能排除存在地貧的可能性，需要結(jié)合篩查結(jié)果綜合判斷；未提供篩查結(jié)果的，則不能保證基因檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性；3)由于檢測(cè)異常、DNA含量低等因素，影響檢測(cè)結(jié)果的判斷，應(yīng)重新采樣，否則將終止該項(xiàng)檢測(cè)；4)其他無法預(yù)測(cè)的外部因素可能導(dǎo)致檢測(cè)無法正常進(jìn)行，將終止該項(xiàng)檢測(cè)；5)受檢者為兒童時(shí)，需要父母雙方提供篩查和基因診斷結(jié)果，否則不能保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性；6)檢測(cè)結(jié)果為新發(fā)突變時(shí)，需要父母雙方采樣進(jìn)行家系驗(yàn)證，否則無法解釋新發(fā)突變的致病性。2.鑒于當(dāng)今醫(yī)學(xué)技術(shù)水平的限制、個(gè)體差異、或無法預(yù)知的原因，即使在醫(yī)務(wù)人員已認(rèn)真履行了工作職責(zé)和嚴(yán)格執(zhí)行操作規(guī)程的情況下，該項(xiàng)檢查仍有局限性，存在漏診和誤診的風(fēng)險(xiǎn)。盡管存在風(fēng)險(xiǎn)，但仍有必要進(jìn)行此項(xiàng)檢查。受檢方需要提供真實(shí)有效的病史資料，并理解醫(yī)務(wù)人員將嚴(yán)格按照醫(yī)療技術(shù)規(guī)范進(jìn)行操作，盡最大努力減少上述風(fēng)險(xiǎn)的發(fā)生。我理解根據(jù)我個(gè)人的情況，除上述風(fēng)險(xiǎn)以外，還可能出現(xiàn)其他特殊并發(fā)癥或風(fēng)險(xiǎn)。圖D.1地中海貧血基因診斷知情同意書（續(xù)）DB45/T2829—2023【孕婦知情選擇】l我的醫(yī)生已經(jīng)告知我將要進(jìn)行的檢測(cè)項(xiàng)目的內(nèi)涵、此次檢查可能存在的局限性和風(fēng)險(xiǎn)、以及相關(guān)檢查的必要性。我已如實(shí)向醫(yī)生告知我所有涉及疾病的情況，如有隱瞞，一切后果自負(fù)。l我同意□不同意□我的醫(yī)生為我進(jìn)行地中海貧血基因診斷。l我理解我的檢查項(xiàng)目，我并未得到檢測(cè)百分之百成功的許諾。l我授權(quán)醫(yī)生對(duì)檢測(cè)涉及的樣本進(jìn)行處置，包括進(jìn)一步的送檢多種檢測(cè)方法、科學(xué)研究等，以幫助醫(yī)師進(jìn)一步多平臺(tái)進(jìn)行診斷。受檢者簽名：地址：____________________________________________________電話：_______________________如果受檢者無法簽署知情同意書，請(qǐng)其授權(quán)的親屬或法定監(jiān)護(hù)人在此簽名：受檢者授權(quán)親屬或法定監(jiān)護(hù)人簽名：與受檢者關(guān)系：日期：年月日地址：___________________________________________________電話：______________________【醫(yī)生陳述】我已經(jīng)告知受檢者（授權(quán)親屬或法定監(jiān)護(hù)人）將要進(jìn)行的檢查方式、此次檢查中及檢查后可能發(fā)生的并發(fā)癥和風(fēng)險(xiǎn)、可能存在的其他檢查方法并且解答了受檢方關(guān)于此次檢查的相關(guān)問題。圖D.1地中海貧血基因診斷知情同意書（續(xù)）DB45/T2829—2023地中海貧血基因診斷申請(qǐng)單地中海貧血基因診斷（靜脈血）申請(qǐng)單見圖E.1。篩查結(jié)果：Hbg/LMCVfLMCHpgHbA2%HbF%其它：基因診斷結(jié)果：檢測(cè)機(jī)構(gòu)：檢測(cè)日期：身份證號(hào)碼：聯(lián)系電話：聯(lián)系地址：姓名：年齡歲民族族就診卡ID：篩查結(jié)果：Hbg/LMCVfLMCHpgHbA2%HbF%其它：基因診斷結(jié)果：檢測(cè)機(jī)構(gòu)：檢測(cè)日期：身份證號(hào)碼：聯(lián)系電話：聯(lián)系地址：三聯(lián)單編號(hào)NO檢驗(yàn)費(fèi)用：元補(bǔ)助金額：元送檢醫(yī)師：送檢科室：送檢機(jī)構(gòu)：送檢日期：20年月日其他說明：填表說明：如果是男性，就在男方信息欄填寫；若為女性，在女方信息欄填寫；若為夫妻，則分別填寫；若為小孩，則在其他說明行填寫其父母的基因診斷結(jié)果，若為補(bǔ)助對(duì)象，按照指示填寫。按照規(guī)定，務(wù)必提供患者的篩查結(jié)果，若沒有，請(qǐng)補(bǔ)充相關(guān)檢測(cè)。申請(qǐng)的檢測(cè)項(xiàng)目，只需要在所選擇做的項(xiàng)目前打“√”。圖E.1地中海貧血基因診斷申請(qǐng)單DB45/T2829—2023地中海貧血基因產(chǎn)前診斷知情同意書地中海貧血基因產(chǎn)前診斷知情同意書見圖F.1。地中海貧血基因產(chǎn)前診斷知情同意書【情況介紹和治療建議】您因，擬定進(jìn)行地中海貧血（簡(jiǎn)稱地貧）基因產(chǎn)前診斷，需采集：絨毛□,羊水□,臍血□樣本送檢。【疾病妊娠特點(diǎn)及其風(fēng)險(xiǎn)】重型α-地貧目前尚無有效的治療方法，在孕中晚期容易造成流產(chǎn)；重型β-地貧整個(gè)妊娠期無明顯異常臨床指征，出生發(fā)病后，則需要終身依賴輸血和去鐵等治療，給家庭及社會(huì)帶來沉重負(fù)擔(dān)?！緮M定醫(yī)療方案的性質(zhì)、目的】地貧是一種遺傳性溶血性的單基因病，因此有生育高風(fēng)險(xiǎn)地貧患兒的夫妻雙方攜帶者，需要對(duì)胎兒尚未包含所有突變位點(diǎn)。當(dāng)可疑存在檢測(cè)范圍之外的【可選方法及其風(fēng)險(xiǎn)】2.臍血血紅蛋白電泳測(cè)定：快速診斷重型α-地貧/β-地貧，發(fā)現(xiàn)可能的中間型α-地貧，但均不能確診基因型，無法對(duì)家庭生育計(jì)劃進(jìn)行精準(zhǔn)指導(dǎo)，而且需要等待到合適的采集孕周，不利于早期干預(yù)?！揪芙^擬定醫(yī)療方案的風(fēng)險(xiǎn)】可能不會(huì)發(fā)生以下介紹的檢查風(fēng)險(xiǎn)，但可能生育嚴(yán)重類型地貧的患兒?！緳z查潛在風(fēng)險(xiǎn)和對(duì)策】醫(yī)生告知我如下地中海貧血基因產(chǎn)前診斷可能發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)，有些不常見的風(fēng)險(xiǎn)可能沒有在此列出，圖F.1地中海貧血基因產(chǎn)前診斷知情同意書DB45/T2829—20231．我理解此檢查可能發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)及醫(yī)生采取的可能對(duì)策：1)樣本如果存在母源污染，可能對(duì)檢測(cè)結(jié)果判斷造成影響。因此，標(biāo)本（培養(yǎng)前/后）檢測(cè)前先進(jìn)行母源污染分析，如存在大于10%比例的母源污染，影響檢測(cè)結(jié)果的判斷，需重新采樣，否則將終止該項(xiàng)檢測(cè)。小于或等于10%比例的母源污染無法檢出，不排除影響檢測(cè)結(jié)果；2)本檢測(cè)范圍有局限性，尚未包含所有的突變位點(diǎn)；進(jìn)行罕見型地貧基因檢測(cè)，依然不能保證檢出所有突變類型或位點(diǎn)；3)如果雙盲平行試驗(yàn)結(jié)果不一致，應(yīng)重新采樣，否則將終止該項(xiàng)檢測(cè)；4)由于細(xì)胞培養(yǎng)在體外進(jìn)行，受孕婦年齡、孕周、標(biāo)本量、標(biāo)本本身的質(zhì)量及是否被污染等多種因素影響，細(xì)胞培養(yǎng)有失敗的可能；使用抗生素、流產(chǎn)藥物、抗腫瘤藥物及部分其他藥物會(huì)對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)生嚴(yán)重影響，故服藥后檢查需告知醫(yī)生及實(shí)驗(yàn)室，以確定是否適宜進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)；細(xì)胞培養(yǎng)失敗，應(yīng)重新采樣，否則將終止該項(xiàng)檢測(cè)；5)其他無法預(yù)測(cè)的外部因素可能導(dǎo)致檢測(cè)無法正常進(jìn)行，將終止該項(xiàng)檢測(cè)；2.鑒于當(dāng)今醫(yī)學(xué)技術(shù)水平的限制、個(gè)體差異、或無法預(yù)知的原因，即使在醫(yī)務(wù)人員已認(rèn)真履行了工作職責(zé)和嚴(yán)格執(zhí)行操作規(guī)程的情況下，該項(xiàng)檢查仍有局限性，存在漏診和誤診的風(fēng)險(xiǎn)。盡管存在風(fēng)險(xiǎn)，但仍有必要進(jìn)行此項(xiàng)檢查。受檢方需要提供真實(shí)有效的病史資料，并理解醫(yī)務(wù)人員將嚴(yán)格按照醫(yī)療技術(shù)規(guī)范進(jìn)行操作，盡最大努力減少上述風(fēng)險(xiǎn)的發(fā)生。我理解根據(jù)我個(gè)人的妊娠情況，除上述風(fēng)險(xiǎn)以外，還可能出現(xiàn)其他特殊并發(fā)癥或風(fēng)險(xiǎn)?！驹袐D知情選擇】l我的醫(yī)生已經(jīng)告知我將要進(jìn)行的檢測(cè)項(xiàng)目的內(nèi)涵、此次檢查可能存在的局限性和風(fēng)險(xiǎn)、以及相關(guān)檢查的必要性。我已如實(shí)向醫(yī)生告知我的所有妊娠情況，如有隱瞞，一切后果自負(fù)。l我同意□不同意□我的醫(yī)生為我進(jìn)行地中海貧血基因產(chǎn)前診斷。l我理解我的檢查項(xiàng)目，我并未得到檢測(cè)百分之百成功的許諾。l我授權(quán)醫(yī)生對(duì)檢測(cè)涉及的樣本進(jìn)行處置，包括進(jìn)一步的送檢多種檢測(cè)方法、科學(xué)研究等，以幫助醫(yī)師進(jìn)一步多平臺(tái)進(jìn)行診斷。如果孕婦無法簽署知情同意書，請(qǐng)其授權(quán)的親屬或法定監(jiān)護(hù)人在此簽名：孕婦授權(quán)親屬或法定監(jiān)護(hù)人簽名:與孕婦關(guān)系:日期:年月日?qǐng)DF.1地中海貧血基因產(chǎn)前診斷知情同意書（續(xù)）【醫(yī)生陳述】我已經(jīng)告知孕婦將要進(jìn)行的檢查方式、此次檢查中及檢查后可能發(fā)生的并發(fā)癥和風(fēng)險(xiǎn)、可能存在的其他檢查方法并且解答了孕婦關(guān)于此次檢查的相關(guān)問題。醫(yī)生簽名:圖F.1地中海貧血基因產(chǎn)前診斷知情同意書（續(xù)）DB45/T2829—2023地中海貧血產(chǎn)前基因診斷申請(qǐng)單地中海貧血產(chǎn)前基因診斷申請(qǐng)單見圖G.1。孕齡：周標(biāo)本類型：□羊水□絨毛□臍血羊水是否培養(yǎng)□是□否篩查結(jié)果：Hbg/LMCVfLMCHpgHbA2%HbF%其他：基因診斷結(jié)果：檢測(cè)機(jī)構(gòu)：檢測(cè)日期：身份證號(hào)碼：聯(lián)系電話：聯(lián)系地址：篩查結(jié)果：Hbg/LMCVfLMCHpgHbA2%HbF%其他：基因診斷結(jié)果：檢測(cè)機(jī)構(gòu)：檢測(cè)日期：身份證號(hào)碼：聯(lián)系電話：聯(lián)系地址：其他說明：補(bǔ)助對(duì)象：□是□否三聯(lián)單編號(hào)NO，補(bǔ)助金額：元送檢醫(yī)師：送檢科室：送檢機(jī)構(gòu)：送檢日期20年月日其他說明：