2 31.范圍 42.規(guī)范性引用文件 43.定義和術語 43.1細胞外囊泡（Extracellularvesicles） 43.2小/中試純化儀器（Pilot-ScalePreparation/PurificationEquipment） 43.3審計追蹤（AuditTrail） 3.4電子簽名（ElectronicSignature） 3.5權限管理（Permissionmanagement） 3.6P&ID圖（PipingandInstrumentDiagram） 53.7一次性使用系統(tǒng)SUS（Single-usesystems） 54.要求 54.1外觀 54.2性能 64.3功能 74.4安全要求 4.5電磁兼容性要求 5.試驗方法 85.1外觀 85.2性能 85.3功能 95.4安全要求 95.5電磁兼容性 6.使用信息 106.1基本要求 6.2標志 106.3說明書 107.包裝、運輸和貯存 7.1包裝 107.2運輸 107.3貯存 102本文按照GB/T1.1-2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起本文件由深圳匯芯生物醫(yī)療科技有限公司提出。本文件由深圳市生物醫(yī)藥促進會歸口。本文件起草單位：深圳匯芯生物醫(yī)療科技有限公司、深圳市藥品檢驗研究院（深圳市醫(yī)療器械檢測中心）、香港中文大學（深圳）、深圳市北科生物科技有限公司、優(yōu)銳生命科技（江蘇）有限公司、深圳市寶舜泰生物醫(yī)藥股份有限公司、貴州星博元生物醫(yī)學科技有限公司、杭州星源未來科技有限公司、株式會社日本生命科學服務、西湖艾凱利元（杭州）生物科技有限公司、北京漢氏聯(lián)合生物技術股份有限公司、Cellese,Inc.、深圳恒通瑞安生物科技有限公司、喀什地區(qū)第一人民醫(yī)院、喀什廣東科學技術研究院、河北禾沐春生物科技有限公司、中國人民解放軍總醫(yī)院、深圳市人民醫(yī)院、南方科技大學、清華大學國際研究生院、福建醫(yī)科大學附屬協(xié)和醫(yī)院、湖北泰木各科技有限公司、國家高性能醫(yī)療器械創(chuàng)新中心、鄭州大學第一附屬醫(yī)院心血管內科醫(yī)學部、廣東醫(yī)科大學、廣州表觀生物科技有限公司、南開大學、廣州實驗室、廣西壯族自治區(qū)人民醫(yī)院、四川大學。本人主要起草人：楊一杰、向愿、馮智丹、李思妍、紀元、陸培、李晨鐘、蔣成、蔡車國、廖延、王勇、朱海影、祁振強、唐芳、趙星、郭毅、孟一然、王涵、劉冠宏、劉曉東、胡博文、馮春敬、別鵬飛、Dr.RobertKnight、Dr.ChiZhang、王瑞寧、許愛敏、何川疆、謝紹建、石動力、張翠萍、李富榮、譚英、陳小松、范麗娜、潘騰、鄭峰、唐俊楠、郭嘉城、路陽、胡柯、呂炎、彭新生、周艷芳、楊學敏、陳永順、王悅冰、楊令延、ChanYunshen、黃奔、王啟光、樊渝江、王書崎。本文件首次制定。隨著生物醫(yī)學研究的深入，細胞外囊泡的研究日益受到關注，并被認為是一種具有廣闊應用前景的細胞外產物，在未來醫(yī)學的診斷治療方面將會發(fā)揮其不可替代的重要作用。然而，由于細胞外囊泡的復雜性及其提取和純化技術的多樣性，目前缺乏統(tǒng)一的產業(yè)化相關標準。雖然國內外有部分細胞外囊泡的團體標準，不過標準指標內容相對簡單，對細胞外囊泡下游應用的指引不夠，這在一定程度上阻礙了細胞外囊泡研究的深入和規(guī)模化產業(yè)應用。本標準將從人間充質基質細胞來源細胞外囊泡小中試純化儀器通用要求進行定義。以提高外泌體研究的質量，促進人間充質基質細胞來源細胞外囊泡行業(yè)的規(guī)范化，加速人間充質基質細胞來源細胞外囊泡在藥物研發(fā)和再生醫(yī)學等領域的應用。在制定細胞外囊泡標準時，也會注重與國際指南文件（Minimalinformationforstudiesofextracellularvesicles(MISEV2023):Frombasictoadvancedapproaches）的接軌，以期制定出更全面、規(guī)范、實用的團體標準。4人間充質基質細胞外囊泡小中試純化儀器通用要求1.范圍本標準規(guī)定了小中試制備人間充質基質細胞來源細胞外囊泡的純化儀器的通用要求、試驗方法、標簽、標識和使用說明、包裝、運輸和貯存。本文適用于人間充質基質細胞來源細胞外囊泡進行小中試純化相關的儀器。2.規(guī)范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T191包裝儲運圖示標志GB4793.1測量、控制和實驗室用電氣儀器的安全要求第1部分：通用要求GB/T18268.1測量、控制和實驗室用的電儀器電磁兼容性要求第1部分：通用要求《中國藥典》2025版四部通則：1101無菌檢查法《中國藥典》2025版四部通則：1143細菌內毒素檢查法《中國藥典》2025版四部通則:4415藥包材急性全身毒性試驗《中國藥典》2025版四部通則:4411藥包材細胞毒性檢查法《中國藥典》2025版四部通則:4206藥包材不溶性微粒測定法《中國藥典》2025版四部通則:4412藥包皮膚致敏試驗方法TCRHA001—2021人間充質干細胞來源的小細胞外囊泡T_FDSA0049-2024人源間充質干細胞外泌體制備與檢驗規(guī)范《藥品生產質量管理規(guī)范及附錄（cGMP）》附錄10計算機化系統(tǒng)DB31/T1400-—2023藥品生產全過程數字化追溯體系建設和運行規(guī)范T/SHPPA009—2021生物工藝中一次性使用系統(tǒng)生產技術規(guī)范3.定義和術語下列術語和定義適用于本標準。3.1細胞外囊泡（Extracellularvesicles）細胞外囊泡（ExtracellularVesicles,EVs）是由細胞分泌到細胞外環(huán)境中的微小膜結構。這些囊泡含有細胞內的多種物質，如蛋白質、脂質、RNA（如miRNA、mRNA）等，能夠在細胞間進行信息傳遞。3.2小/中試純化儀器（Pilot-ScalePreparation/PurificationEquipment）注：儀器所標示的能力僅代表設備制造商在設計上的技術空間，并不直接等同于實際生產工藝的適用范圍。制造商應根據藥企完成的動物實驗、IIT研究或IND研究3.3審計追蹤（AuditTrail）一系列有關計算機操作系統(tǒng)、應用程序及用戶操作等事件的記錄，用以幫助從原始數據追蹤到有關的記錄、報告或事件，或從記錄、報告、事件追溯到原始數據3.4電子簽名（ElectronicSignature）容的數據。3.5權限管理（Permissionmanagement）計算機系統(tǒng)應具備只有經許可的人員才能進入和使用系統(tǒng)，進入和使用系統(tǒng)應具備授權、取消及授權變更的操作規(guī)程。3.6P&ID圖（PipingandInstrumentDiagram）管道儀表流程圖3.7一次性使用系統(tǒng)SUS（Single-usesystems）用于單次或一個階段性生物工藝或制藥生產活動。4.要求4.1外觀使用時應滿足以下要求：b)分析系統(tǒng)運動部件運行平穩(wěn)，無卡住突跳；64.2性能4.2.1純化性能4.2.1.1顆粒蛋白比外泌體顆粒數與蛋白量比值不低于1×10^8particles/μg。4.2.1.2產物生物學效能要求純化后的間充質基質細胞外囊泡，應能抑制健康人外周血單個核細胞的增殖。4.2.2耗材性能要求4.2.2.1急性全身毒性試驗如果觀察期內供試品組小鼠的毒性反應不顯著大于對照組小鼠，則判定供試品合格。格。4.2.2.2皮膚致敏試驗致敏。4.2.2.3細胞毒性試驗4.2.2.4不溶性微粒試驗4.2.2.5無菌檢查若供試品管均澄清，或雖顯渾濁但經確證無菌生長，判供試品符合規(guī)定。4.2.2.6細菌內毒素檢查量應小于0.5EU。4.2.2.7完整性一定壓力條件下，保持特定壓力，在一定時間內壓力衰減。各規(guī)格產品最大允許最小測試壓力（kPa）測試時間[0,3]10030s1(3,1000)315min10注：建議儀器廠商和藥企在動物實驗和IIT驗證使用一次性使用系統(tǒng)SUS。4.3功能至少應具備以下功能，企業(yè)應根據自身產品特點確定其他功能：a)電子簽名/權限管理：使用授權檢查，以確保只有授權人員可以使用系統(tǒng)、對記錄進行電子簽名、訪問操作或計算機系統(tǒng)的輸入或輸出儀器、更改記錄或執(zhí)行相關操作；門檢查、審核及復制。；c)P&ID圖：該圖應具備儀器的標志同時雜質也會濃縮放大，建議在30倍左右，因此建議30-100倍范圍。g)溫度控制：細胞外囊泡回收位具備溫控功能，溫度范圍24.4安全要求應符合GB4793.1中適用條款的要求。4.5電磁兼容性要求應符合GB/T18268.1中適用實驗室或具備受控電磁環(huán)境的試驗和測量區(qū)域中使用的設備的條款的要求。85.試驗方法5.1外觀在自然光或光照度在300-600LX的近似自然光環(huán)境下,檢查者位于被檢查表面的正前方，視線與被檢表面之間呈45-90°進行檢驗。要求檢驗者的校正視力不低于1.2，檢查結果應符合4.1要求。5.2性能5.2.1純化性能5.2.1.1顆粒蛋白比按照外泌體顆粒數濃度（particles/mL）與蛋白含量(μg/mL）的比值進行計算。備注：計算結果高度依賴于檢測方法（如因此制造商和藥企雙方認可的檢測方法和驗證樣本進行確認。5.2.1.2抑制淋巴細胞增殖參考TCRHA001—2021人間充質干細胞來源的小細胞外囊泡中的章5.8.1.抑制淋巴細胞增殖驗證方法進行試驗。5.2.2耗材性能要求5.2.2.1急性全身毒性試驗5.2.2.2皮膚致敏試驗5.2.2.3細胞毒性試驗5.2.2.4不溶性微粒試驗按照《中國藥典》2025版四部通則:4206的試驗方法執(zhí)行。5.2.2.5無菌檢查5.2.2.6細菌內毒素檢查5.2.2.7完整性力衰減值。95.3功能5.3.1電子簽名/權限管理a)登錄計算機系統(tǒng)時，查看是否具備只有經許可的人員才能進入和使用系統(tǒng)；b)查看授權及修改情況：進入和使用系統(tǒng)應具備授權、取消及授權變更的操作規(guī)程5.3.2審計追蹤日志等。5.3.3P&ID圖反饋器部件（泵、閥）等的工作狀態(tài)。5.3.4故障提示、耗材識別、批次記錄5.3.5濃縮比收體積，濃縮比=原液體積/回收體積。5.3.6溫控功能測定一次溫度值，測定時間為10min。應符5.4安全要求按照GB4793.1中規(guī)定的方法進行試驗，試驗應滿足4.6要求。5.5電磁兼容性按照GB/T18268.1中規(guī)定的方法進行試驗，試驗應滿足4.7要求。6.使用信息6.1基本要求6.2標志標志應以產品標牌、旋轉方向標牌和警示標志等的形式給出，標志應在明顯的部位用中文書寫并標識，標志所采用的術語應符合GB/T4774的規(guī)定。標志的文字及圖案應清晰，符合GB/