2025年醫(yī)學檢驗微生物學技術技能提升試卷考試時間：______分鐘總分：______分姓名：______一、名詞解釋（每題3分，共15分）1.醫(yī)學檢驗質(zhì)量控制2.形成對照3.耐藥性4.非培養(yǎng)性檢驗5.常規(guī)培養(yǎng)二、選擇題（每題2分，共20分，請將正確選項的代表字母填寫在題號后括號內(nèi)）1.下列哪種微生物無細胞壁？A.真菌B.病毒C.支原體D.立克次體E.衣原體2.細菌的核質(zhì)是：A.染色體B.質(zhì)粒C.核糖體D.核膜E.細胞核3.下列哪種方法不屬于細菌的常規(guī)生化鑒定方法？A.靛基質(zhì)試驗B.溶血試驗C.MR-VP試驗D.糖發(fā)酵試驗E.氧化酶試驗4.從臨床標本中分離培養(yǎng)細菌時，選擇合適的培養(yǎng)基首要考慮的是：A.培養(yǎng)基的pH值B.培養(yǎng)基的成分C.臨床標本的類型D.培養(yǎng)基的價格E.培養(yǎng)基的保存條件5.下列哪種微生物檢驗方法靈敏度最高？A.細菌培養(yǎng)B.病毒PCR檢測C.細菌生化反應D.病毒血清學試驗E.真菌涂片鏡檢6.在微生物檢驗中，使用無菌操作技術的最主要目的是：A.加快培養(yǎng)速度B.提高培養(yǎng)基質(zhì)量C.防止標本污染D.便于觀察菌落特征E.節(jié)約實驗成本7.下列哪種情況屬于抑菌試驗？A.紅霉素對金黃色葡萄球菌的抑菌圈B.大腸桿菌在麥康凱培養(yǎng)基上形成菌落C.真菌在沙堡氏培養(yǎng)基上生長D.白色念珠菌在血平板上形成溶血環(huán)E.肺炎克雷伯菌在伊紅美藍平板上形成菌落8.關于抗生素敏感性試驗，以下說法錯誤的是：A.藥敏試驗結果有助于臨床合理用藥B.常用的藥敏試驗方法有KB法和MIC法C.藥敏試驗結果不受標本類型影響D.藥敏試驗結果可以幫助判斷病原體E.藥敏試驗結果應結合藥敏報告解釋9.以下哪項不屬于微生物實驗室生物安全的防護區(qū)域？A.實驗室清潔區(qū)B.實驗室潛在污染區(qū)C.實驗室污染區(qū)D.實驗室氣溶膠防護區(qū)E.實驗室緩沖間10.微生物檢驗報告發(fā)出前，最后審核環(huán)節(jié)通常由誰負責？A.檢驗科主任B.實驗室組長C.負責醫(yī)師D.檢驗技師E.醫(yī)生三、填空題（每空1分，共10分）1.細菌的基本結構包括細胞壁、細胞膜、細胞質(zhì)、______和核質(zhì)。2.細菌根據(jù)有無細胞壁可分為______和______兩大類。3.在微生物檢驗中，常用的顯微鏡檢查方法包括______和______。4.細菌的簡單染色法中最常用的染料是______。5.細菌的分離培養(yǎng)是指將______的微生物分散到適宜的培養(yǎng)基表面或內(nèi)部，使其生長形成______的過程。6.臨床微生物檢驗的目的是______、______和______。7.實驗室生物安全等級分為______、______、______和______四級。四、簡答題（每題5分，共20分）1.簡述細菌培養(yǎng)的基本條件。2.簡述革蘭氏染色的原理及其意義。3.簡述臨床微生物檢驗報告書寫的基本內(nèi)容。4.簡述實驗室生物安全防護的基本原則。五、論述題（每題10分，共20分）1.論述選擇微生物檢驗項目的依據(jù)。2.論述微生物實驗室質(zhì)量控制的重要意義及主要內(nèi)容。試卷答案一、名詞解釋1.醫(yī)學檢驗質(zhì)量控制：指在微生物檢驗過程中，為確保檢驗結果的正確性、一致性和可靠性而采取的一系列系統(tǒng)性的檢查、控制和改進措施。2.形成對照：在微生物檢驗中，為了排除干擾因素、驗證檢驗方法或結果的有效性，同時進行的具有特定含義的實驗操作，如設立陰性對照、陽性對照和空白對照等。3.耐藥性：指微生物（如細菌、真菌等）對曾經(jīng)對其有效的藥物（如抗生素、消毒劑等）產(chǎn)生抵抗能力的狀態(tài)。4.非培養(yǎng)性檢驗：指不依賴于微生物在體外培養(yǎng)基上生長繁殖，直接檢測病原體或其代謝產(chǎn)物的方法，如快速抗原檢測、核酸檢測（PCR）等。5.常規(guī)培養(yǎng)：指利用常規(guī)的固體或液體培養(yǎng)基，在適宜的溫度、濕度和氣體條件下，促進病原微生物生長繁殖，以便進行鑒定和檢測的基本方法。二、選擇題1.C*解析思路：支原體是一類缺乏細胞壁、形態(tài)多變的原核細胞型微生物。其他選項中，真菌有細胞壁，病毒無細胞結構（但有蛋白質(zhì)衣殼，有時有包膜），立克次體和衣原體有細胞壁。2.A*解析思路：細菌的遺傳物質(zhì)主要是一條環(huán)狀的DNA分子，稱為擬核或核區(qū)，因其結構類似真核細胞的細胞核而得名。質(zhì)粒是染色體以外的環(huán)狀DNA分子，核糖體是蛋白質(zhì)合成場所，核膜是真核細胞結構，衣原體和立克次體雖然含有DNA和RNA，但通常不稱為核質(zhì)。3.B*解析思路：溶血試驗主要用于觀察細菌是否產(chǎn)生溶血素及其溶血類型，屬于血清學試驗或特殊檢查，而非常規(guī)的生化鑒定方法。其他選項均為通過檢測細菌代謝產(chǎn)物或酶活性來鑒定細菌的常規(guī)生化反應。4.C*解析思路：選擇合適的培養(yǎng)基首要考慮的是標本的性質(zhì)和待檢病原體的生長要求。不同的標本（如血液、尿液、糞便、膿液等）污染的雜菌種類不同，所需的培養(yǎng)基成分和選擇性/指示劑也不同，以利于目標病原體的分離和生長，同時抑制雜菌。5.B*解析思路：病毒PCR檢測（聚合酶鏈式反應）是基于DNA擴增技術，可以檢測極微量的病毒核酸，靈敏度極高，遠超培養(yǎng)、涂片鏡檢等方法。培養(yǎng)法受培養(yǎng)條件限制，鏡檢法依賴顯微鏡和觀察者經(jīng)驗，生化反應主要用于細菌。6.C*解析思路：無菌操作技術的核心目的是防止環(huán)境中的微生物污染到標本、培養(yǎng)基或儀器設備，避免污染結果或造成交叉污染，確保檢驗結果的準確性和可靠性。7.A*解析思路：抑菌試驗是通過測定某種物質(zhì)（如抗生素、化學消毒劑）對微生物生長的抑制作用，觀察是否有抑菌圈形成及其大小。其他選項描述的是微生物在培養(yǎng)基上正常生長或產(chǎn)生特殊現(xiàn)象的結果，而非抑菌作用。8.C*解析思路：藥敏試驗結果受多種因素影響，包括標本類型（如血培養(yǎng)、尿培養(yǎng)）、是否合并用藥、患者的免疫狀態(tài)、菌株的變異等。藥敏試驗需要在體外模擬體內(nèi)環(huán)境，并考慮這些因素來解讀結果，并非不受影響。9.D*解析思路：實驗室生物安全的防護區(qū)域通常根據(jù)生物安全等級劃分，包括一級（清潔區(qū)）、二級（潛在污染區(qū)和污染區(qū)）、三級（污染區(qū)）和四級（負壓獨立實驗室）。緩沖間是不同區(qū)域之間的過渡空間，本身不是防護區(qū)域，但屬于實驗室布局的一部分。10.C*解析思路：檢驗技師負責具體的檢驗操作和結果初步判斷，實驗室組長負責本組工作管理和質(zhì)量控制，檢驗科主任負責科室整體管理和最終決策。負責醫(yī)師（臨床醫(yī)生）是檢驗結果的臨床應用者。檢驗報告發(fā)出前，最終審核環(huán)節(jié)通常由能夠全面評估檢驗過程和結果的負責人醫(yī)師或經(jīng)驗豐富的資深技師/組長承擔，確保報告的準確性、完整性和臨床適用性。三、填空題1.核糖體2.真菌；細菌3.涂片鏡檢；培養(yǎng)鏡檢4.碳酸鋰結晶紫5.單個；獨立菌落6.確定病原體；指導臨床用藥；預防感染傳播7.一級；二級；三級；四級四、簡答題1.細菌培養(yǎng)的基本條件包括：*適宜的營養(yǎng)物質(zhì)：培養(yǎng)基需含有水、碳源、氮源、無機鹽、生長因子（如維生素、氨基酸）等，以滿足細菌生長繁殖的需要。*適宜的溫度：大多數(shù)細菌生長的最適溫度在37℃左右，但不同細菌要求不同，需根據(jù)待檢菌種類選擇。*適宜的pH：細菌生長的最適pH通常在7.2-7.6之間，不同細菌有特定要求。*必要的氣體環(huán)境：大多數(shù)細菌需要氧氣（需氧菌），部分細菌在有氧條件下受到抑制（兼性厭氧菌），厭氧菌則需要在無氧環(huán)境（如厭氧罐）中培養(yǎng)。*無抑制物質(zhì)：培養(yǎng)基中不應含有對目標細菌有抑制作用的物質(zhì)。*無菌操作：防止外界微生物污染，保證培養(yǎng)結果可靠。2.革蘭氏染色的原理是利用結晶紫初染后，用碘液媒染形成碘結晶紫復合物，使細胞壁帶色。由于革蘭氏陽性菌細胞壁厚、肽聚糖層致密，能牢固吸附并保留結晶紫-碘復合物，經(jīng)脫色劑（乙醇-醋酸混合液）處理不易脫色，呈紫色。革蘭氏陰性菌細胞壁薄、肽聚糖層致密、外膜存在，結晶紫-碘復合物易被脫色劑洗脫，再經(jīng)復染劑（沙弗寧或堿性復紅）染色呈紅色或粉色。其意義在于將細菌分為革蘭氏陽性（G+）和革蘭氏陰性（G-）兩大類，這對后續(xù)的鑒別診斷、藥敏試驗選擇和臨床處理都有重要指導意義。3.臨床微生物檢驗報告書寫的基本內(nèi)容通常包括：*檢驗項目：明確檢測的標本類型和檢驗方法。*標本信息：標本編號、患者姓名、性別、年齡、住院號/門診號、送檢日期等。*檢驗結果：清晰、準確地報告檢驗發(fā)現(xiàn)，如病原體名稱（鑒定到種或更精確）、菌量（如CFU/mL）、陽性/陰性、抑菌環(huán)直徑（mm）或MIC值（μg/mL）、特殊現(xiàn)象（如溶血性、動力等）。*備注/解釋：對結果進行必要的說明或解釋，如“未發(fā)現(xiàn)可疑菌落”、“疑似XXX，需進一步確認”等。有時會包含對結果臨床意義的初步建議。*報告日期：檢驗報告發(fā)出的日期。*檢驗者/審核者簽名：確保報告的合法性。4.實驗室生物安全防護的基本原則包括：*標準預防：將所有患者的血液、體液、分泌物（除外汗液）、排泄物、非完整皮膚和黏膜均視為具有潛在傳染性，采取相應的防護措施。*核心原則：預防感染源暴露、預防傳播媒介傳播、預防環(huán)境表面污染。*安全設備使用：正確、安全地使用各種防護設備，如生物安全柜、離心機安全罩、防護服、手套、口罩/護目鏡等。*安全操作規(guī)程：嚴格遵守各項操作規(guī)程，如無菌操作、加熱培養(yǎng)、廢棄物的處理等。*消毒滅菌：對工作臺面、設備、器械、環(huán)境等進行定期消毒滅菌。*個人防護：根據(jù)風險評估，穿戴適當?shù)膫€人防護用品。*廢物處理：對具有潛在生物危險性的廢棄物進行規(guī)范處理。*培訓與意識：對實驗室人員進行生物安全知識和技能的培訓，提高生物安全意識。五、論述題1.選擇微生物檢驗項目的依據(jù)主要包括：*臨床診斷需求：根據(jù)患者的臨床癥狀、體征、病史和初步檢查結果，初步判斷可能感染的病原體類型，選擇針對性強的檢驗項目。例如，發(fā)熱伴寒戰(zhàn)患者優(yōu)先考慮血培養(yǎng)；腹瀉患者考慮糞便培養(yǎng)或輪狀病毒、諾如病毒檢測。*標本類型與來源：不同標本來源的微生物種類和污染情況不同。例如，呼吸道標本優(yōu)先考慮肺炎鏈球菌、流感病毒、結核分枝桿菌等；尿液標本優(yōu)先考慮尿路感染常見菌（大腸桿菌、克雷伯菌等）；腦脊液標本需高度警惕病毒性或細菌性腦膜炎。*病原體特性：考慮病原體的生長速度、對培養(yǎng)條件的依賴性、是否需要特殊染色或檢測方法。例如，真菌培養(yǎng)周期長，有時需特殊培養(yǎng)基；結核分枝桿菌培養(yǎng)要求高，周期也長；病毒通常需要細胞培養(yǎng)或分子檢測。*檢驗時效性要求：對于急癥或需要快速診斷的情況，優(yōu)先選擇快速檢測方法，如抗原檢測、分子診斷（PCR）。對于一般情況，可先進行常規(guī)培養(yǎng)和生化鑒定。*地區(qū)流行病學：考慮當?shù)爻Ｒ姷牟≡w譜和耐藥情況。例如，某些地區(qū)金黃色葡萄球菌對甲氧西林耐藥率很高，選擇藥敏試驗尤為重要。*鑒別診斷需要：當臨床診斷不明確時，選擇可以鑒別相似疾病或病原體的項目。*成本效益：在滿足診斷需求的前提下，考慮檢驗項目的經(jīng)濟成本。2.微生物實驗室質(zhì)量控制的重要意義及主要內(nèi)容：*重要意義：*確保結果準確可靠：質(zhì)量控制是保證檢驗結果準確、真實、可靠的基礎，直接影響臨床診斷和治療效果。*提高檢測水平：通過持續(xù)的質(zhì)量監(jiān)控，可以發(fā)現(xiàn)問題、改進工作，不斷提高實驗室的整體檢測水平。*滿足法規(guī)要求：符合國家、行業(yè)及ISO15189等質(zhì)量管理體系的要求。*建立實驗室信譽：可靠的檢驗結果能贏得臨床科室和患者的信任。*保障患者安全：準確的檢驗結果有助于醫(yī)生做出正確的診斷和治療決策，從而保障患者安全。*主要內(nèi)容：*室內(nèi)質(zhì)量控制（IQC）：*方法學質(zhì)量控制：定期評估和驗證檢驗方法的性能指標（線性范圍、精密度、準確度、特異性等）。*試劑和耗材質(zhì)量控制：檢查試劑的有效期、批號、儲存條件，確保耗材質(zhì)量合格。*