ICS65.020.01CCSB0552IDB52/T1870—2025前言 12規(guī)范性引用文件 13術(shù)語和定義 14花粉制備 1 4DB52/T1870—2025本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由貴州省山地資源研究所、貴州省植物園提出。本文件由貴州省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳歸口。本文件起草單位：貴州省植物園、貴州省山地資源研究所、六盤水市農(nóng)業(yè)科學(xué)院、貴州富民果業(yè)科技有限公司、水城區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村局、貴州省果樹科學(xué)研究所、六盤水市水城區(qū)宏興綠色農(nóng)業(yè)投資有限公司。本文件主要起草人：李葦潔、蘇文文、吳佳偉、韓振誠、吳迪、王加國、任春光、李良良、李秀亞、王夢(mèng)柳、李玉瓊、龍幔、肖春、徐特、仲偉敏、孫林。DB52/T1870—20251獼猴桃花粉制備及授粉技術(shù)規(guī)程本文件規(guī)定了獼猴桃（Actinidia）花粉制備及授粉的術(shù)語與定義、花粉制備、花粉授粉等。本文件適用于獼猴桃花粉的制備與授粉。2規(guī)范性引用文件本文件沒有規(guī)范性引用文件。3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1獼猴桃花粉kiwifruitpollens獼猴桃雄株花朵的花藥經(jīng)過加工工藝生產(chǎn)的單倍體雄性細(xì)胞粉狀物質(zhì)。3.2花藥anther花絲頂端膨大的囊狀體。3.3花粉凈度pollenpurity凈花粉含量占被檢測(cè)花粉的比例。3.4花粉萌發(fā)率pollenviability已萌發(fā)的花粉占總檢測(cè)花粉的百分率。4花粉制備4.1.1授粉樹選擇選擇無潰瘍病和花腐病發(fā)生、長勢(shì)健壯的雄樹。4.1.2采集方法宜晴天9：00～16：00，單個(gè)雄花露白60%～80%時(shí)，手工采摘整朵大蕾期雄花，不應(yīng)采摘已開放花朵，花蕾裝載可用桶、布袋、筐等非金屬容器。2DB52/T1870—20254.1.3花藥脫離采摘的花蕾應(yīng)放置在陰涼處，脫藥時(shí)間宜≤3h。脫藥可采用以下方法：a)人工脫藥：在室內(nèi)將花蕾倒入細(xì)鐵絲篩中，用手輕輕揉搓，取出花藥；b)機(jī)械脫藥：花藥分離機(jī)篩孔0.3cm～0.5cm、轉(zhuǎn)速180轉(zhuǎn)/s～200轉(zhuǎn)/s，將花蕾倒入花藥分離機(jī)進(jìn)行脫藥。4.1.4花藥除雜脫藥后應(yīng)去除花絲、花瓣等雜質(zhì)。4.1.5花藥干燥花藥應(yīng)及時(shí)進(jìn)行干燥處理，方法如下：a)室內(nèi)陰干干燥法：花藥平鋪在光潔的紙盒內(nèi)，室內(nèi)溫度20℃~25℃,相對(duì)濕度60%～80%，自然晾干60h～72h；b)電熱毯干燥法：花藥平鋪在光潔的紙盒內(nèi)，放于電熱毯上保溫干燥，溫度25℃~28℃干燥c)恒溫箱干燥法：花藥平鋪在烘干托盤中，溫度25℃~28℃烘干10h～12h。4.1.6花粉提取4.2花粉保存4.2.1花粉包裝花粉應(yīng)在4h內(nèi)進(jìn)行包裝，包裝材料使用牛皮紙袋或塑料瓶，10g～20g為1單位，每10單位用無毒塑料袋密封，內(nèi)置干燥劑。4.2.2花粉貯藏花粉包裝后，立即進(jìn)行貯藏。貯藏花粉環(huán)境應(yīng)清潔、避光，不得與有腐蝕性和有污染性的物品混貯，貯藏溫度≤-20℃。4.2.3花粉運(yùn)輸運(yùn)輸工具應(yīng)清潔干燥，運(yùn)輸過程中無雨淋、受潮、暴曬，不與有腐蝕性和有污染性的物品混運(yùn)，包裝袋外界溫度應(yīng)＜5℃,運(yùn)輸時(shí)間≤5d。4.2.4包裝標(biāo)簽標(biāo)簽內(nèi)容應(yīng)包括產(chǎn)地、名稱、凈度、商標(biāo)、生產(chǎn)日期、批號(hào)、凈重、貯存期限、貯存條件等。4.3質(zhì)量檢測(cè)4.3.1花粉質(zhì)量花粉外觀呈淡黃色，色澤均勻一致，無雜質(zhì)。貯藏后花粉萌發(fā)率≥30%，花粉凈度≥70%，花粉含水量8%～10%。DB52/T1870—202534.3.2檢測(cè)方法4.3.2.1外觀4.3.2.2花粉萌發(fā)率測(cè)定4.3.2.2.1培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基按瓊脂0.5%、蔗糖12%、硼酸0.01%比例配制。4.3.2.2.2制片將培養(yǎng)基加熱溶解，取2ml～3ml均勻涂于載玻片。4.3.2.2.3花粉培養(yǎng)用小刷子或毛筆刷取花粉，輕彈刷頭，使花粉均勻落在載玻片上，放在墊有潤濕濾紙或紙巾的培養(yǎng)皿中，置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，溫度25℃~28℃,培養(yǎng)時(shí)間4h～6h。4.3.2.2.4測(cè)定步驟用10×20顯微鏡下觀察計(jì)數(shù)，至少6個(gè)以上視野計(jì)數(shù)，每個(gè)視野中花粉總量≥80粒，記錄萌發(fā)數(shù)量，取平均值代表花粉萌發(fā)率。按公式（1）計(jì)算花粉萌發(fā)率?！街校篍——花粉萌發(fā)率，單位為百分?jǐn)?shù)（%）；Ni——單個(gè)視野內(nèi)萌發(fā)花粉數(shù)量，單位為個(gè)；si——單個(gè)視野花粉總數(shù)，單位為個(gè)；n——視野數(shù)量。4.3.2.3花粉凈度測(cè)定用接種針取少量花粉于載玻片上，蓋上蓋玻片。在10×10顯微鏡下觀察花粉樣品，至少觀察9個(gè)視野，分別記錄每個(gè)視野的花粉和非花粉物質(zhì)比例。按公式（2）計(jì)算花粉凈度。C——花粉凈度，單位為百分?jǐn)?shù)（%）；Ai——視野中的花粉數(shù)量，單位為個(gè)；Bi——視野中非花粉總數(shù)，單位為個(gè)。4.3.2.4花粉含水量測(cè)定取≥5g花粉，放入90℃~105℃烘箱中烘至恒重后稱重，按公式(3)計(jì)算花粉含水量?！?）R——花粉含水量，單位為百分?jǐn)?shù)（%）；DB52/T1870—202541——烘前花粉重量，單位為克（g2——烘至恒重時(shí)花粉重量，單位為克（g）。5授粉按照雌雄比6：1配置授粉樹，借助風(fēng)媒、蟲媒授粉。5.2人工輔助授粉5.2.1授粉時(shí)間授粉時(shí)間為雌花開花48h內(nèi)，開放3h～4h后均可授粉，宜晴天或陰天9：00～16：00、溫度15℃~5.2.2授粉次數(shù)雌花開放＞25%開始授粉，整個(gè)花期授粉2～3次。5.2.3授粉方法授粉采用以下方法：a)固體授粉：花粉與石松子粉按照1：5混合，使用授粉工具將花粉授于雌花柱頭，混合的花粉宜當(dāng)天用完；b)液體授粉：按純花粉0.1%、蔗糖10%、硼酸0