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152024-07-15發(fā)布本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定本文件由內(nèi)蒙古自治區(qū)畜牧業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)（SAM/TC1I呼倫貝爾羊種質(zhì)資源冷凍保存技術(shù)規(guī)程DB15/T1769綿羊冷凍精液DB15/T3401奶綿羊胚胎冷凍解凍技術(shù)3.13.2BSA：牛血清白蛋白（BovineSerumAlbumiCOCs：卵丘卵母細(xì)胞復(fù)合體（Cumulus-OocyteCompleDMSO：二甲基亞砜（DimethylSulfoxidFBS：胎牛血清（FetalBovineSerOPS：開(kāi)放式拉長(zhǎng)細(xì)管（OpenPulled1PBS：磷酸鹽緩沖液（PhosphateBufferedSolutTS：玻璃化解凍液（ThawingSoluVS：玻璃化冷凍液（VitrifiedSolutio5.2標(biāo)記5.3精液要求5.6裝管在4℃條件下，將精液分裝到0.25mL細(xì)管中，另一5.7冷凍利用程序冷凍儀，在4℃~-35℃溫區(qū)，設(shè)置6℃/min的降溫速率；在-35℃~-100℃的溫區(qū)，將液氮倒入深度50cm以上的泡沫箱預(yù)冷10min，細(xì)管鋪放在支架后放入泡沫箱，支架平面5.8貯存5.9解凍取出凍精細(xì)管，室溫空氣浴5s，然后放置于4026.3試劑與溶液6.4冷凍將0.25mL細(xì)管加熱變軟后拉成為管壁內(nèi)徑為0.2mm，管壁厚0.02mm的OPS管，冷卻后用手術(shù)刀片將卵母細(xì)胞在VS1液中平衡30s，再移入VS2液中平衡不超過(guò)25s，將多枚卵母細(xì)胞及少量VS2吸入6.5解凍7.2胚胎選擇選擇1、2級(jí)桑葚胚至擴(kuò)張囊胚，胚胎質(zhì)量鑒定按照NY/T1674的規(guī)37.3溶液配置7,4標(biāo)記7.5胚胎回收7.6洗滌胚胎在胚胎保存液滴中洗4次，放入做好標(biāo)胚胎在S1和S2液中平衡5min，在1.5M乙二醇中平衡7.8冷凍7.9貯存7.10解凍4A.1精液冷凍保存溶液配方見(jiàn)表A.1。A.2卵母細(xì)胞冷凍保存溶液配方見(jiàn)表A.2。mPBS液含有
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