基因工程

1、（2023?山東荷澤?山東省鄴城縣第一中學(xué)?？既＃〤RISPR/Cas9是一種基因編輯技術(shù),

Cas9蛋白能與人工設(shè)計(jì)的sgRNA形成復(fù)合體（如圖）.利用該技術(shù)可以對(duì)DNA進(jìn)行一系

列的定向改造。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

修復(fù)》

WIIHIIlillHIITTTTT

A.Cas9蛋白屬于限制酶，能切割目的基因

B.sgRNA具有能與目的基因發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)的結(jié)構(gòu)

C.基因編輯技術(shù)能夠定點(diǎn)插入、刪除或替換部分堿基對(duì)

D.通過基因編輯技術(shù)引起的變異屬于基因重組

【答案】D

【解析】AB、Cas9蛋白能與人工設(shè)計(jì)的sgRNA形成復(fù)合體，復(fù)合體中的sgRNA與目的基因

按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則特異性結(jié)合，Cas9蛋白相當(dāng)于限制酶，Cas9蛋白結(jié)合到相應(yīng)位置并

剪切DNA,最終實(shí)現(xiàn)對(duì)靶基因序列的編輯，AB正確；

C、復(fù)合體在sgRNA引導(dǎo)下結(jié)合目的基因，Cas9蛋白切割目的基因造成雙鏈斷裂，細(xì)胞在修

復(fù)斷裂的DNA時(shí)會(huì)隨機(jī)插入、刪除或替換部分堿基對(duì)，C正確；

D、通過基因編輯技術(shù)引起的變異屬于基因突變，D錯(cuò)誤。

故選Do

2、（2023?山東濰坊?濰坊一中統(tǒng)考模擬預(yù)測(cè)）某遺傳病由一對(duì)等位基因控制，致病基因有兩

種類型突變，每種突變基因所編碼的蛋白質(zhì)分子量不同，其系譜圖及相關(guān)蛋白質(zhì)電泳結(jié)果如

圖。下列說(shuō)法正確的是（）

□O正常男女

■?患病男女

電

泳

方

向

A.該病為常染色體或伴X染色體隱性遺傳病

B.111-1、III-2相應(yīng)蛋白質(zhì)的電泳條帶相同

C.III-3攜帶的致病基因來(lái)自1-2的可能性為1/2

D.顯性基因的堿基數(shù)目大于隱性基因的堿基數(shù)目

【答案】C

【解析】A、由圖中n-i、n-2正常，而后代III-I患病，可知該病為隱性遺傳病。又由II-3

患病母親，生出正常兒子可知該病為常染色體隱性遺傳病，A錯(cuò)誤；

B.ni-i的致病基因來(lái)自n-i、ii-2,ii-2的致病基因來(lái)自i-i,in-2的致病基因來(lái)自n

-3>II-4,II-3的致病基因來(lái)自IT和I-2,由電泳結(jié)果可知IT和I-2的致病基因不同，

n-i和n-4的致病基因不同，因此III-I、iii-2相應(yīng)蛋白質(zhì)的電泳條帶可能不相同，B錯(cuò)誤;

C>III-3只有一個(gè)致病基因來(lái)自II-3,而H-3的致病基因來(lái)自IT和I-2,因此11-2攜帶

的致病基因來(lái)自「2的可能性為1/2,C正確；

D、圖是蛋白質(zhì)電泳結(jié)果，不能判斷基因的長(zhǎng)度，D錯(cuò)誤。

故選Co

3、（2023?山東?泰安一中?？寄M預(yù)測(cè)）白細(xì)胞介素-2（IL-2）參與移植排斥反應(yīng)，是免疫

調(diào)節(jié)因子，對(duì)機(jī)體的免疫應(yīng)答和抗病毒感染等有重要作用?？蒲腥藛T將含IL-2基因的DNA

片段和質(zhì)粒pPIC9K（部分結(jié)構(gòu)如圖所示）構(gòu)建成重組質(zhì)粒，并導(dǎo)入酵母菌GSH5（組氨酸

缺陷菌株）中，篩選到了能分泌IL-2的工程菌株。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

His4（組氨酸合成基因）

A.組氨酸合成基因可作為標(biāo)記基因篩選導(dǎo)入重組質(zhì)粒的酵母菌細(xì)胞

B.構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)可選用Avril和NotI切割目的基因和pPIC9K質(zhì)粒

C.重組質(zhì)粒導(dǎo)入酵母菌GS115前，需要先用Ca2+處理酵母菌GS115細(xì)胞

D.抑制IL-2基因的表達(dá)可在一定程度上減輕機(jī)體器官移植后的免疫排斥反應(yīng)

【答案】B

【解析】A、酵母菌GS115是組氨酸缺陷菌株，不能合成組氨酸，可以用不含組氨酸的培養(yǎng)

基篩選導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的酵母菌GSH5,A正確；

B、據(jù)圖可知，為保證目的基因（Avril會(huì)破壞目的基因）和啟動(dòng)子（SacI會(huì)破壞啟動(dòng)子）

的完整性，可用EcoRI和NotI分別切割含有IL-2基因的DNA片段和pPIC9K質(zhì)粒，B錯(cuò)誤;

C、導(dǎo)入重組質(zhì)粒前，需要先用Ca2+處理酵母菌GS115細(xì)胞，使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)

境中DNA分子的生理狀態(tài)，C正確；

D、IL-2參與移植排斥反應(yīng)，抑制IL-2基因的表達(dá)可在一定程度上減輕器官移植后機(jī)體的

免疫排斥反應(yīng)，D正確。

故選Bo

4、（2023?山東泰安?統(tǒng)考模擬預(yù)測(cè)）通過設(shè)計(jì)引物，運(yùn)用PCR技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)目的基因的定

點(diǎn)誘變。下圖為基因工程中獲取突變基因的過程，其中引物1序列中含有一個(gè)堿基T不能

與目的基因片段配對(duì)，但不影響引物與模板鏈的整體配對(duì)，反應(yīng)體系中引物1和引物2的夕

端分別設(shè)計(jì)增加限制酶a和限制酶b的識(shí)別位點(diǎn)。下列有關(guān)敘述正確的是（）

酶aT

引物

-丁引物

京2

第1輪PCR

酶a1

引物i_L[----------L-/①

-T-----------------引物2

C

第2輪PCR酶b

酶aT

引物1-LJ——./②

彳引物2

.....T-1

A1

酶b

A.在PCR反應(yīng)體系中還需要加入4種游離核甘酸、解旋酶、Qq酶等

B.第3輪PCR結(jié)束后，含突變堿基對(duì)且兩條鏈等長(zhǎng)的DNA占1/2

C.引物中設(shè)計(jì)兩種限制酶識(shí)別位點(diǎn)有利于目的基因定向插入運(yùn)載體

D.第2輪PCR,引物1能與圖中②結(jié)合并且形成兩條鏈等長(zhǎng)的突變基因

【答案】C

【解析】A、PCR反應(yīng)體系通過高溫使DNA解旋（變性），不需要加入解旋酶，A錯(cuò)誤；

B、第3輪PCR結(jié)束后，含突變堿基對(duì)且兩條鏈等長(zhǎng)的DNA有2個(gè)，而總DNA分子有8個(gè)，

所以占1/4,B錯(cuò)誤；

C、引物中設(shè)計(jì)兩種限制醯識(shí)別位點(diǎn)，可以使目的基因定向插入限制酶切割后的運(yùn)載體，C

正確；

D、第2輪PCR,引物1能與圖中①結(jié)合并且形成兩條鏈不等長(zhǎng)的突變基因，其中②較長(zhǎng)，D

錯(cuò)誤。

故選Co

5、（2023?山東泰安?統(tǒng)考模擬預(yù)測(cè)）環(huán)境DNA（eDNA）是“在環(huán)境樣品中所有被發(fā)現(xiàn)的不

同生物的基因組DNA的混合”，它涵蓋的范圍非常廣泛，無(wú)論是土壤、空氣、液體，甚至

是排泄物，都可以從中找到可作為樣品的eDNA。對(duì)所得的樣品，可使用普通的聚合酶鏈?zhǔn)?/p>

反應(yīng)（PCR）或直接霰彈槍法（shotgunstrategy）測(cè)序，能夠方便獲得多個(gè)DNA序列。2018年4

月12日，美國(guó)華盛頓州立大學(xué)助理教授CarenGoldberg通過檢測(cè)環(huán)境DNA（eDNA）,確證

了全球第四只斑鱉的存在。下列有關(guān)說(shuō)法不正確的是（）

A.可分析環(huán)境樣品中的eDNA分別是屬于哪些物種，這與傳統(tǒng)的動(dòng)植物分類調(diào)查其實(shí)是一

致的

B.eDNA技術(shù)可尋找環(huán)境中是否有單一物種的DNA,用于研究和追蹤珍稀物種的分布

C.使用PCR測(cè)序，能夠方便獲得DNA序列

D.每個(gè)eDNA中都有一個(gè)游離的磷酸基團(tuán)

【答案】D

【解析】A、由于DNA分子具有特異性，所以可分析環(huán)境樣品中的eDNA分別是屬于哪些物種,

這與傳統(tǒng)的動(dòng)植物分類調(diào)查其實(shí)是一致的，A正確；

B、環(huán)境DNA（eDNA）技術(shù)是一種新型生物資源調(diào)查手段，是指從環(huán)境中提取DNA片段，根

據(jù)DNA分子的特異性，結(jié)合PCR和DNA測(cè)序等分子生物學(xué)技術(shù)來(lái)定性或定量檢測(cè)目標(biāo)生物,

從而確定其分布狀況等，B正確；

C、PCR是一項(xiàng)體外擴(kuò)增DNA的技術(shù)，其原理是DNA的復(fù)制，故擴(kuò)增微量的樣品eDNA,可獲

得大量的DNA序列，C正確；

D、DNA分子是雙螺旋結(jié)構(gòu)，有兩條脫氧核甘酸鏈，若是鏈狀DNA分子，則每個(gè)eDNA中都有

兩個(gè)游離的磷酸基團(tuán)，若是環(huán)狀DNA分子，則沒有游離的磷酸基團(tuán)，D錯(cuò)誤。

故選D。

6、（2023?山東聊城?統(tǒng)考三模）Cre-loxP系統(tǒng)能實(shí)現(xiàn)特定基因的敲除（如圖1）。把幾種熒光

蛋白基因和Cre酶能識(shí)別并切割的序列（loxPl和loxP2）串在一起，構(gòu)建表達(dá)載體T（如圖2）。

部分熒光蛋白基因會(huì)被Cre酶隨機(jī)“剪掉”，且兩個(gè)loxPl之間或兩個(gè)loxP2之間的基因，最多

會(huì)被Cre酶敲除一次，剩下的部分得以表達(dá)，隨機(jī)呈現(xiàn)不同的顏色。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

腦組織特異性〉loxPlA】oxP2

表達(dá)的啟動(dòng)子下、’,

DNA

—―RFP處YFP——

紅色熒光黃色熒光藍(lán)色熒光

蛋白基因蛋白基因蛋白基因

注：僅表達(dá)與啟動(dòng)子相鄰的熒光蛋白基因。

圖1圖2

A.構(gòu)建表達(dá)載體T時(shí)用到的工具包括限制酶、DNA連接酶

B.若小鼠細(xì)胞含一個(gè)表達(dá)載體T（不含Cre酶），其肌肉組織細(xì)胞呈無(wú)色

C.若小鼠細(xì)胞含一個(gè)表達(dá)載體T（含Cre酶），其腦組織細(xì)胞只能呈紅色或黃色

D.若小鼠細(xì)胞含兩個(gè)表達(dá)載體T（含Cre酶），其腦組織細(xì)胞可能出現(xiàn)兩種顏色

【答案】C

【解析】A、基因表達(dá)載體構(gòu)建過程中需要限制酶和DNA連接酶兩種工具酶處理，A正確；

B、據(jù)圖可知，小鼠有編碼紅、黃、藍(lán)熒光蛋白的基因，前端有腦組織特異性表達(dá)的啟動(dòng)子,

肌肉細(xì)胞不會(huì)表達(dá)顏色基因，故若小鼠細(xì)胞含一個(gè)表達(dá)載體T（不含Cre酶），其肌肉組織細(xì)

胞呈無(wú)色，B正確；

C、loxPl、loxP2位置如圖2黑白三角符號(hào)所示，兩個(gè)loxPl和兩個(gè)loxP2之間的基因最

多會(huì)被Cre酶敲除一次，將含Cre酶的病毒注入小鼠體內(nèi)，Cre酶表達(dá)情況不同,識(shí)別的loxP

不同，則有可能未敲除熒光蛋白基因，此時(shí)為紅色（同不含Cre酶時(shí)），也有可能敲除兩個(gè)

loxPl之間的紅色熒光蛋白基因，此時(shí)為黃色，也有可能敲除兩個(gè)loxP2之間的紅色和黃色

熒光蛋白基因，此時(shí)為藍(lán)色，因而不同腦細(xì)胞會(huì)差異表達(dá)紅色、黃色或藍(lán)色熒光蛋白基因，

C錯(cuò)誤；

D、小鼠腦組織細(xì)胞內(nèi)有2個(gè)相同表達(dá)載體T（含Cre酶），Cre酶對(duì)每個(gè)DNA片段隨機(jī)剪切，

因而細(xì)胞的顏色由細(xì)胞內(nèi)兩種熒光蛋白的顏色疊加而成，故其腦組織細(xì)胞可能出現(xiàn)兩種顏

色，D正確。

故選Co

7、（2023.山東煙臺(tái).統(tǒng)考模擬預(yù)測(cè)）圖1是一個(gè)家庭中某單基因遺傳病的遺傳系譜圖。用特

定限制酶切割111-1、皿-2、III-3與該病相關(guān)的基因，產(chǎn)生了大小不同的幾種片段。已知被檢

測(cè)的基因?yàn)?42bp（bp表示堿基對(duì)），結(jié)果如圖2所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

特定酶切割.

1皿-1的基因50bp+42bp

n19□正常男性

1

11O正常女性特定酶切割,

皿-的基因

nO-HJUIO■患病男性2lOObp+42bp

上一qI?患病女性

jj+42bp+|~50bp~|

特定酶切割r

mi□d0m-3的基因

1234lOObp

圖1圖2

A.由圖1可推斷該病是由常染色體上的隱性基因控制的遺傳病

B.該遺傳病的致病基因比正常基因多1個(gè)如圖2所示的特定酶的酶切位點(diǎn)

C.該遺傳病形成的原因是正?；蛑邪l(fā)生了堿基對(duì)的缺失

D.圖1中III-2與一個(gè)該致病基因攜帶者婚配，子代患該病的概率為0

【答案】C

【解析】A、由圖①可知：11-1、II-2個(gè)體生出了患病的IIIT個(gè)體，可推斷該病是由常染色

體上的隱性基因控制的遺傳病，A正確；

B、根據(jù)題意分析，已知被檢測(cè)的IIIT的基因（aa）為142bp，限制酶切割后產(chǎn)生50bp和

42bp兩種長(zhǎng)度的片段，142-50--42=50bp,說(shuō)明50bp的片段有2個(gè)，即切割后產(chǎn)生了三

個(gè)片段，因此IIIT的每個(gè)基因中均具有2個(gè)該特定限制酶的酶切位點(diǎn)，而正常基因A可產(chǎn)

生lOObp和42bp兩種長(zhǎng)度的片段，有1個(gè)酶切位點(diǎn)，故致病基因比正?；蚨?個(gè)如圖2

所示的特定酶的酶切位點(diǎn)，B正確；

C、被檢測(cè)的基因都為142bp,說(shuō)明基因中發(fā)生了堿基對(duì)的替換，并沒有缺失，C錯(cuò)誤；

D、據(jù)圖2可知，III-2的基因型為AA,與一個(gè)該致病基因攜帶者Aa婚配，子代患該病的概

率為0,D正確。

故選Co

8、（2023?山東?山東師范大學(xué)附中?？寄M預(yù)測(cè)）下列關(guān)于基因工程及其應(yīng)用的敘述，錯(cuò)誤

的是（）

A.花粉管通道法可以用微量注射器將含有目的基因的DNA溶液直接注入子房中

B.只要從轉(zhuǎn)基因棉花中檢測(cè)到Bt抗蟲蛋白，就代表轉(zhuǎn)基因抗蟲棉培育成功

C.Bt抗蟲蛋白被分解為多肽后與害蟲腸上皮細(xì)胞的特異性受體結(jié)合，導(dǎo)致細(xì)胞膜穿孔

D.干擾素是一種糖蛋白，科學(xué)家用基因工程方法從大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)獲得了干擾素

【答案】B

【解析】A、我國(guó)科學(xué)家用獨(dú)創(chuàng)的花粉管通道法將Bt基因?qū)朊藁?xì)胞，如可以用微量注射

器將含有目的基因的DNA溶液直接注入子房中，A正確；

B、從轉(zhuǎn)基因棉花中檢測(cè)到Bt抗蟲蛋白，還需要進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)鑒定才能說(shuō)明轉(zhuǎn)基因抗蟲棉

是否培育成功，B錯(cuò)誤；

C、Bt抗蟲蛋白被分解成多肽后，多肽與某類昆蟲腸上皮細(xì)胞的特異性受體結(jié)合，導(dǎo)致細(xì)胞

膜穿孔，因而能破壞鱗翅目昆蟲的消化系統(tǒng)來(lái)殺死棉鈴蟲，C正確；

D、干擾素是一種糖蛋白，科學(xué)家利用大腸桿菌代謝旺盛的特點(diǎn)，用基因工程方法從大腸桿

菌細(xì)胞內(nèi)獲得了干擾素，D正確。

故選Bo

9、（2023?山東濟(jì)南?濟(jì)南市歷城第二中學(xué)?？家荒＃ǘ噙x題）DNA瓊脂糖凝膠電泳的分

子篩效應(yīng)是指作為支持介質(zhì)的瓊脂糖,具有網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，使大分子物質(zhì)在通過時(shí)受到較大阻力，

借此分離不同大小的DNA片段。下列說(shuō)法正確的是（）

A.瓊脂糖凝膠電泳可用于分離、鑒定DNA分子的混合物

B.雙鏈DNA分子片段長(zhǎng)度越大，在瓊脂糖中的移動(dòng)速率越大

C.凝膠制備中加入的核酸染料能與DNA分子結(jié)合，用于分離后DNA的檢測(cè)

D.凝膠中的DNA分子通過染色，可在波長(zhǎng)為300nm的紫外燈下被檢測(cè)出來(lái)

【答案】ACD

【解析】A、瓊脂糖凝膠電泳可根據(jù)DNA分子大小、電荷等對(duì)DNA混合物進(jìn)行分離、鑒定，A

正確；

B、雙鏈DNA分子片段長(zhǎng)度越大，在瓊脂糖中的移動(dòng)速率越小，B錯(cuò)誤；

C、為了便于對(duì)分離后的DNA片段進(jìn)行檢測(cè)，在凝膠制備中加入核酸染料，該染料能夠與DNA

分子結(jié)合，C正確；

D、凝膠中的DNA分子經(jīng)染色后，對(duì)波長(zhǎng)為300nm的紫外光吸收性強(qiáng)，可在波長(zhǎng)為300nm的

紫外燈下被檢測(cè)出來(lái)，D正確。

故選ACD?

10、（2023?山東煙臺(tái)?統(tǒng)考模擬預(yù)測(cè)）（多選題）紅細(xì)胞生成素（EPO）是人體內(nèi)促進(jìn)紅細(xì)

胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病。由于天然EPO來(lái)源極為有限，某科

研團(tuán)隊(duì)采用基因工程培育轉(zhuǎn)基因羊作為乳腺生物反應(yīng)器，使其能合成EPO。下列有關(guān)敘述

正確的是（）

A.構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)需將EPO基因插入乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子的下游

B.一般情況下，該轉(zhuǎn)基因羊中的EPO基因只在羊的乳腺細(xì)胞中表達(dá)

C.用顯微注射技術(shù)將含EPO基因的表達(dá)載體導(dǎo)入羊的乳腺細(xì)胞中可合成并提取EPO

D.用PCR擴(kuò)增人EPO基因，需要一段已知的EPO基因核甘酸序列

【答案】ABD

【解析】A、啟動(dòng)子是一段特殊序列結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的上游，是RNA聚合酶識(shí)別

和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,故構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)需將EPO基因（目的

基因）插入乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子的下游，A正確；

B、某科研團(tuán)隊(duì)采用基因工程培育轉(zhuǎn)基因羊作為乳腺生物反應(yīng)器，使其能合成EPO,所以一

般情況下，該轉(zhuǎn)基因羊中的EPO基因只在羊的乳腺細(xì)胞中表達(dá)，B正確；

C、用顯微注射技術(shù)將含EPO基因的表達(dá)載體導(dǎo)入羊的受精卵（將來(lái)發(fā)育成雌性個(gè)體）中，

待其發(fā)育到一定階段，方可合成EPO,C錯(cuò)誤；

D、用PCR擴(kuò)增人EPO基因，前提是需要一段已知的EPO基因核音酸序列，以便根據(jù)這一序

列合成引物，D正確。

故選ABD。

11、（2023?山東荷澤?山東省鄴城縣第一中學(xué)?？既＃ǘ噙x題）PCR擴(kuò)增時(shí)在加入一對(duì)

引物的同時(shí)加入一個(gè)特異性的熒光探針，該探針兩端分別標(biāo)記一個(gè)報(bào)告熒光基團(tuán)（Q蛋白質(zhì)）

和一個(gè)淬滅熒光基團(tuán)（R蛋白質(zhì)）。開始時(shí)，探針完整地結(jié)合在DNA任意一條單鏈上，報(bào)

告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收，檢測(cè)不到熒光信號(hào)；當(dāng)TaqDNA聚合酶催化子鏈

延伸至探針R處，會(huì)水解淬滅熒光基團(tuán)，熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)從而可接收到熒光信號(hào)，即每擴(kuò)增

一條DNA鏈，就有一個(gè)熒光分子形成，實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物形成的完全同

步。下列相關(guān)敘述正確的是（）

探針

5'-------------------3'

A.引物、探針和模板三者之間通過堿基互補(bǔ)配對(duì)相互結(jié)合

B.TaqDNA聚合酶催化DNA的合成方向總是從子鏈的5,端向3,端延伸

C.PCR產(chǎn)物的量與熒光信號(hào)的累積成正相關(guān)

D.報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)的組成單位是脫氧核甘酸

【答案】BCD

【解析】A、據(jù)圖可知，引物和探針都能與模板結(jié)合，但引物不能與探針結(jié)合，否則該P(yáng)CR

過程無(wú)法完成，A錯(cuò)誤；

B、引物與模板的3'端結(jié)合，此后TaqDNA聚合酶催化DNA的合成方向是從子鏈的5，端向T

端延伸，B正確；

C、PCR擴(kuò)增時(shí)，Taq酶的5'-3'核酸外切酶活性將探針酶切降解，使R和Q分離，R發(fā)射的

熒光不被淬滅，切割的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，熒光的強(qiáng)度能反映PCR產(chǎn)物的

數(shù)量，通過對(duì)熒光信號(hào)強(qiáng)弱的監(jiān)測(cè)就可實(shí)現(xiàn)對(duì)產(chǎn)物的檢測(cè)，C正確；

D、報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)都是DNA片段，其基本單位是脫氧核甘酸，D正確。

故選BCD。

12、(2023?山東青島?統(tǒng)考三模)炎癥性腸病(IBD)是一種易導(dǎo)致結(jié)腸癌的慢性疾病，患

者腸道內(nèi)會(huì)產(chǎn)生硫代硫酸鹽?？蒲腥藛T以小鼠為研究對(duì)象，建立了下圖所示的炎癥性腸病檢

測(cè)模型，GFP基因是綠色熒光蛋白基因。

硫代硫酸鹽

R蛋白O

注：

—?促進(jìn)

啟動(dòng)子AR基因終止子啟動(dòng)子BGFP基因終止子---1抑制

(1)據(jù)圖分析，可以通過檢測(cè)熒光強(qiáng)弱來(lái)判定小鼠腸道內(nèi)硫代硫酸鹽的濃度，其原因

是O

(2)研究者利用基因工程技術(shù)構(gòu)建含硫代硫酸鹽檢測(cè)傳感器的大腸桿菌工程菌，通過PCR擴(kuò)

增R基因時(shí)應(yīng)該選擇的引物是，在A、B兩端引物的5,端需添加的限制酶識(shí)別序列

為和O

限制酶識(shí)別序列和酶切位點(diǎn)如下表：

限制酶HindlllBamHIPastIEcoRIBgHI

識(shí)別序列(55)AJAGC