DB15Thetechnicalspecificationforthedeterminationofdietarymetablizablelipogenous2020-06-10發(fā)布內(nèi)蒙古自治區(qū)市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布本標(biāo)準(zhǔn)由內(nèi)蒙古自治區(qū)畜牧業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)（SAM/TC1本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：杜瑞平、盧德勛、高民、凌樹(shù)禮、馬燕芬、胡紅蓮、王麗芳、羿I綿羊日糧可代謝生脂物質(zhì)（MLS）指標(biāo)的測(cè)定技術(shù)規(guī)程本標(biāo)準(zhǔn)適用于綿羊日糧可代謝生脂物質(zhì)（MLS）指HJ957水質(zhì)鈷的測(cè)定火焰原子吸收分光光度法揮發(fā)性脂肪酸volatilefattyac飼料或日糧經(jīng)動(dòng)物消化吸收后，可以給動(dòng)物本身提供的﹑可利用的生脂物質(zhì)（折合成乙酸總量1乙酸、丙酸、丁酸、乙酸鈷、乙二胺四乙酸、氫氧要求體況良好、年齡、體重相近的6只以上安試驗(yàn)日糧可對(duì)應(yīng)相應(yīng)生理階段參照中國(guó)或NRC綿羊飼養(yǎng)期10～14天，預(yù)飼期內(nèi)試驗(yàn)羊自由飲水，灌注期停止供水，用灌注液滿(mǎn)足水Co-EDTA的制備根據(jù)Uden等(198氫氧化鈉放入一個(gè)2L燒杯中，加入200mL蒸餾水，加熱至80℃進(jìn)行溶解，冷卻后再加入20mL30%用85%(V/V)乙醇溶液沖洗數(shù)遍。最后收集濾紙實(shí)測(cè)該Co－EDTA標(biāo)記物Co含量為142經(jīng)采樣管通過(guò)瘤胃瘺管灌入綿羊瘤胃內(nèi)不同位點(diǎn)，灌注完畢再抽取瘤胃液反復(fù)沖洗采樣管3次，并將沖洗瘤胃液回灌瘤胃內(nèi)。此后2h、4h、6h、9h、12h、18h和24h分別抽取瘤胃液20mL，用以測(cè)定上述Co-EDTA投放后繼續(xù)連續(xù)飼喂一周，第八天晨飼前開(kāi)始啟動(dòng)灌注，將100mL啟動(dòng)灌注液通過(guò)注連續(xù)灌注結(jié)束后，緊接著灌注水溶液，灌注速率不變，灌水中間每小時(shí)采瘤胃液一次，共采集3次，采3MLS=0.72*k1*Ac+1.8*k2*Bu+1.14*k3*Fat.....................（1）MLS——日糧可代謝生脂物質(zhì)，單位為g/d；Fat——過(guò)瘤胃脂肪數(shù)量（以總脂肪酸數(shù)量表示)，單位為mmol/注：由于本標(biāo)準(zhǔn)驗(yàn)證試驗(yàn)采用的日糧為常規(guī)設(shè)計(jì)，不添加任何脂肪物質(zhì)，因此所用日糧脂肪含量?jī)H為2%左右，過(guò)瘤胃脂肪極少，因此公式中的第三部分在常規(guī)日糧條件下可忽略不計(jì)P——瘤胃乙酸基本產(chǎn)生速率，單位為mmol/h；I——乙酸連續(xù)灌注恒定速率，60.00mmol/h；C——灌注前瘤胃乙酸濃度，單位為mmoV——灌注前瘤胃液相體積，單位為L(zhǎng)。V＝一次投放的Co量/Co(0) （4）V——灌注前瘤胃液相體積，單位為L(zhǎng)；Co(0)——投放時(shí)間點(diǎn)瘤胃液相Co濃度，單位 （6）4Co(t)——t時(shí)間點(diǎn)瘤胃液相Co濃度，單位為mgCo(0)——投放時(shí)間點(diǎn)瘤胃液相Co濃度，單位K——灌注前瘤胃液相小時(shí)稀釋速率，單位為/K'——灌注后瘤胃液相小時(shí)稀釋速率，單位為/注：一次性投Co-EDTA后，各時(shí)間點(diǎn)測(cè)得的瘤胃液相Co濃度的變化作指數(shù)方程模擬Co（t）=Co（0）*e-Kt，可以得知瘤胃液相小時(shí)稀釋速率K及投放時(shí)間點(diǎn)的Co濃度。停止灌注乙酸、丁酸溶液改為灌注水后，試驗(yàn)羊瘤胃內(nèi)Co濃度的變化作指數(shù)方程模擬Co（t）=Co（0）*e-K’t,可得瘤胃液相小時(shí)稀釋 F'＝Co連續(xù)灌注速率/連續(xù)灌注后瘤胃液相 （8）F——灌注前瘤胃液相流通速率，單位為L(zhǎng)/V——灌注前瘤胃液相體積，單位為L(zhǎng)；K——灌注前瘤胃液相小時(shí)稀釋速率，單位為/ （9）AFR'＝C'*F’ AFR——灌注前瘤胃乙酸流通速率，單位為mmol/h；C——灌注前瘤胃乙酸濃度，單位為mmoF——灌注前瘤胃液相流通速率，單位為L(zhǎng)/AFR'——灌注后瘤胃乙酸流通速率，單位為mmol/h；AAR=P-AFR..................................（11）AAR’=P’-AFR’........AAR——灌注前瘤胃乙酸吸收速率，單位為mmol/h；P——瘤胃乙酸基本產(chǎn)生速率，單位為mmol/h；AFR——灌注前瘤胃乙酸流通速率，單位為mmol/h；AFR'——灌注后瘤胃乙酸流通速率，單位為mmol/h。5A＝AAR/P （13） （14）A——灌注前瘤胃乙酸吸收率，單位為%；AAR——灌注前瘤胃乙酸吸收速率，單位為mmol/h；P——瘤胃乙酸基本產(chǎn)生速率，單位為mmol/h；6NaHCO3（g/L）NaHCO3（g/L）NaCl（g/L）7NaC