2025年P(guān)CR上崗證完整考試題及答案本文借鑒了近年相關(guān)經(jīng)典試題創(chuàng)作而成，力求幫助考生深入理解測(cè)試題型，掌握答題技巧，提升應(yīng)試能力。一、單項(xiàng)選擇題（每題只有一個(gè)正確答案，共50題，每題2分，共100分）1.PCR技術(shù)的全稱(chēng)是？A.聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)B.聚合酶鏈?zhǔn)綇?fù)制C.聚合酶鏈?zhǔn)睫D(zhuǎn)錄D.聚合酶鏈?zhǔn)椒g2.PCR反應(yīng)中，引物的長(zhǎng)度一般為？A.15-20bpB.20-25bpC.25-30bpD.30-35bp3.PCR反應(yīng)中，常用的DNA聚合酶是？A.DNA聚合酶IB.DNA聚合酶IIC.DNA聚合酶IIID.耐熱DNA聚合酶（如Taq酶）4.PCR反應(yīng)中，退火溫度一般選擇在？A.55-65℃B.65-75℃C.75-85℃D.85-95℃5.PCR反應(yīng)中，延伸溫度一般選擇在？A.72℃B.75℃C.80℃D.85℃6.PCR反應(yīng)中，延伸時(shí)間一般選擇在？A.30秒-1分鐘B.1-2分鐘C.2-3分鐘D.3-4分鐘7.PCR反應(yīng)中，循環(huán)數(shù)一般選擇在？A.25-30次B.30-35次C.35-40次D.40-45次8.PCR反應(yīng)中，dNTPs指的是？A.deoxyribonucleotidetriphosphatesB.deoxyribonucleotidediphosphatesC.ribonucleotidetriphosphatesD.ribonucleotidediphosphates9.PCR反應(yīng)中，鎂離子（Mg2+）的作用是？A.引物退火B(yǎng).DNA聚合酶的激活C.DNA變性D.DNA復(fù)性10.PCR反應(yīng)中，DTT的作用是？A.引物退火B(yǎng).DNA聚合酶的激活C.抑制DNA聚合酶D.還原二硫鍵11.PCR反應(yīng)中，甘油的作用是？A.引物退火B(yǎng).DNA聚合酶的激活C.增加反應(yīng)體積D.增加反應(yīng)粘度12.PCR反應(yīng)中，pH值一般控制在？A.7.0-7.5B.7.5-8.0C.8.0-8.5D.8.5-9.013.PCR反應(yīng)中，PCR產(chǎn)物的大小可以通過(guò)？A.凝膠電泳B.毛細(xì)管電泳C.質(zhì)譜分析D.沉淀法14.PCR反應(yīng)中，引物二聚體的形成可以？A.提高PCR效率B.降低PCR效率C.對(duì)PCR效率無(wú)影響D.無(wú)法預(yù)測(cè)15.PCR反應(yīng)中，非特異性產(chǎn)物的形成可以？A.提高PCR效率B.降低PCR效率C.對(duì)PCR效率無(wú)影響D.無(wú)法預(yù)測(cè)16.PCR反應(yīng)中，巢式PCR的作用是？A.提高PCR效率B.降低PCR效率C.提高特異性D.降低特異性17.PCR反應(yīng)中，實(shí)時(shí)熒光定量PCR的作用是？A.檢測(cè)PCR產(chǎn)物大小B.定量檢測(cè)起始模板量C.提高PCR效率D.降低PCR效率18.PCR反應(yīng)中，多重PCR的作用是？A.檢測(cè)PCR產(chǎn)物大小B.同時(shí)檢測(cè)多個(gè)目標(biāo)序列C.提高PCR效率D.降低PCR效率19.PCR反應(yīng)中，不對(duì)稱(chēng)PCR的作用是？A.檢測(cè)PCR產(chǎn)物大小B.擴(kuò)增單一鏈DNAC.提高PCR效率D.降低PCR效率20.PCR反應(yīng)中，末端限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（RFLP）分析的作用是？A.檢測(cè)PCR產(chǎn)物大小B.檢測(cè)基因多態(tài)性C.提高PCR效率D.降低PCR效率21.PCR反應(yīng)中，DNA測(cè)序技術(shù)的應(yīng)用包括？A.檢測(cè)PCR產(chǎn)物大小B.測(cè)定DNA序列C.提高PCR效率D.降低PCR效率22.PCR反應(yīng)中，數(shù)字PCR技術(shù)的應(yīng)用包括？A.檢測(cè)PCR產(chǎn)物大小B.精確定量起始模板量C.提高PCR效率D.降低PCR效率23.PCR反應(yīng)中，長(zhǎng)片段PCR技術(shù)的應(yīng)用包括？A.檢測(cè)PCR產(chǎn)物大小B.擴(kuò)增長(zhǎng)片段DNAC.提高PCR效率D.降低PCR效率24.PCR反應(yīng)中，熱啟動(dòng)PCR技術(shù)的應(yīng)用包括？A.檢測(cè)PCR產(chǎn)物大小B.避免非特異性擴(kuò)增C.提高PCR效率D.降低PCR效率25.PCR反應(yīng)中，touchdownPCR技術(shù)的應(yīng)用包括？A.檢測(cè)PCR產(chǎn)物大小B.優(yōu)化引物退火溫度C.提高PCR效率D.降低PCR效率26.PCR反應(yīng)中，巢式PCR技術(shù)的應(yīng)用包括？A.檢測(cè)PCR產(chǎn)物大小B.提高特異性C.提高PCR效率D.降低PCR效率27.PCR反應(yīng)中，實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)的應(yīng)用包括？A.檢測(cè)PCR產(chǎn)物大小B.定量檢測(cè)起始模板量C.提高PCR效率D.降低PCR效率28.PCR反應(yīng)中，多重PCR技術(shù)的應(yīng)用包括？A.檢測(cè)PCR產(chǎn)物大小B.同時(shí)檢測(cè)多個(gè)目標(biāo)序列C.提高PCR效率D.降低PCR效率29.PCR反應(yīng)中，不對(duì)稱(chēng)PCR技術(shù)的應(yīng)用包括？A.檢測(cè)PCR產(chǎn)物大小B.擴(kuò)增單一鏈DNAC.提高PCR效率D.降低PCR效率30.PCR反應(yīng)中，末端限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（RFLP）分析技術(shù)的應(yīng)用包括？A.檢測(cè)PCR產(chǎn)物大小B.檢測(cè)基因多態(tài)性C.提高PCR效率D.降低PCR效率31.PCR反應(yīng)中，DNA測(cè)序技術(shù)的應(yīng)用包括？A.檢測(cè)PCR產(chǎn)物大小B.測(cè)定DNA序列C.提高PCR效率D.降低PCR效率32.PCR反應(yīng)中，數(shù)字PCR技術(shù)的應(yīng)用包括？A.檢測(cè)PCR產(chǎn)物大小B.精確定量起始模板量C.提高PCR效率D.降低PCR效率33.PCR反應(yīng)中，長(zhǎng)片段PCR技術(shù)的應(yīng)用包括？A.檢測(cè)PCR產(chǎn)物大小B.擴(kuò)增長(zhǎng)片段DNAC.提高PCR效率D.降低PCR效率34.PCR反應(yīng)中，熱啟動(dòng)PCR技術(shù)的應(yīng)用包括？A.檢測(cè)PCR產(chǎn)物大小B.避免非特異性擴(kuò)增C.提高PCR效率D.降低PCR效率35.PCR反應(yīng)中，touchdownPCR技術(shù)的應(yīng)用包括？A.檢測(cè)PCR產(chǎn)物大小B.優(yōu)化引物退火溫度C.提高PCR效率D.降低PCR效率36.PCR反應(yīng)中，巢式PCR技術(shù)的應(yīng)用包括？A.檢測(cè)PCR產(chǎn)物大小B.提高特異性C.提高PCR效率D.降低PCR效率37.PCR反應(yīng)中，實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)的應(yīng)用包括？A.檢測(cè)PCR產(chǎn)物大小B.定量檢測(cè)起始模板量C.提高PCR效率D.降低PCR效率38.PCR反應(yīng)中，多重PCR技術(shù)的應(yīng)用包括？A.檢測(cè)PCR產(chǎn)物大小B.同時(shí)檢測(cè)多個(gè)目標(biāo)序列C.提高PCR效率D.降低PCR效率39.PCR反應(yīng)中，不對(duì)稱(chēng)PCR技術(shù)的應(yīng)用包括？A.檢測(cè)PCR產(chǎn)物大小B.擴(kuò)增單一鏈DNAC.提高PCR效率D.降低PCR效率40.PCR反應(yīng)中，末端限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（RFLP）分析技術(shù)的應(yīng)用包括？A.檢測(cè)PCR產(chǎn)物大小B.檢測(cè)基因多態(tài)性C.提高PCR效率D.降低PCR效率41.PCR反應(yīng)中，DNA測(cè)序技術(shù)的應(yīng)用包括？A.檢測(cè)PCR產(chǎn)物大小B.測(cè)定DNA序列C.提高PCR效率D.降低PCR效率42.PCR反應(yīng)中，數(shù)字PCR技術(shù)的應(yīng)用包括？A.檢測(cè)PCR產(chǎn)物大小B.精確定量起始模板量C.提高PCR效率D.降低PCR效率43.PCR反應(yīng)中，長(zhǎng)片段PCR技術(shù)的應(yīng)用包括？A.檢測(cè)PCR產(chǎn)物大小B.擴(kuò)增長(zhǎng)片段DNAC.提高PCR效率D.降低PCR效率44.PCR反應(yīng)中，熱啟動(dòng)PCR技術(shù)的應(yīng)用包括？A.檢測(cè)PCR產(chǎn)物大小B.避免非特異性擴(kuò)增C.提高PCR效率D.降低PCR效率45.PCR反應(yīng)中，touchdownPCR技術(shù)的應(yīng)用包括？A.檢測(cè)PCR產(chǎn)物大小B.優(yōu)化引物退火溫度C.提高PCR效率D.降低PCR效率46.PCR反應(yīng)中，巢式PCR技術(shù)的應(yīng)用包括？A.檢測(cè)PCR產(chǎn)物大小B.提高特異性C.提高PCR效率D.降低PCR效率47.PCR反應(yīng)中，實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)的應(yīng)用包括？A.檢測(cè)PCR產(chǎn)物大小B.定量檢測(cè)起始模板量C.提高PCR效率D.降低PCR效率48.PCR反應(yīng)中，多重PCR技術(shù)的應(yīng)用包括？A.檢測(cè)PCR產(chǎn)物大小B.同時(shí)檢測(cè)多個(gè)目標(biāo)序列C.提高PCR效率D.降低PCR效率49.PCR反應(yīng)中，不對(duì)稱(chēng)PCR技術(shù)的應(yīng)用包括？A.檢測(cè)PCR產(chǎn)物大小B.擴(kuò)增單一鏈DNAC.提高PCR效率D.降低PCR效率50.PCR反應(yīng)中，末端限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（RFLP）分析技術(shù)的應(yīng)用包括？A.檢測(cè)PCR產(chǎn)物大小B.檢測(cè)基因多態(tài)性C.提高PCR效率D.降低PCR效率二、多項(xiàng)選擇題（每題有多個(gè)正確答案，少選、多選、錯(cuò)選均不得分，共20題，每題3分，共60分）1.PCR反應(yīng)中，必要的試劑包括？A.DNA模板B.引物C.DNA聚合酶D.dNTPsE.緩沖液2.PCR反應(yīng)中，影響PCR效率的因素包括？A.引物設(shè)計(jì)B.DNA模板質(zhì)量C.DNA聚合酶活性D.dNTPs濃度E.反應(yīng)體積3.PCR反應(yīng)中，提高PCR特異性的方法包括？A.優(yōu)化引物設(shè)計(jì)B.提高退火溫度C.使用高純度DNA模板D.增加循環(huán)數(shù)E.使用熱啟動(dòng)PCR技術(shù)4.PCR反應(yīng)中，提高PCR靈敏度的方法包括？A.增加模板量B.使用巢式PCRC.使用實(shí)時(shí)熒光定量PCRD.增加引物濃度E.增加循環(huán)數(shù)5.PCR反應(yīng)中，PCR產(chǎn)物的檢測(cè)方法包括？A.凝膠電泳B.毛細(xì)管電泳C.質(zhì)譜分析D.沉淀法E.實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè)6.PCR反應(yīng)中，PCR優(yōu)化的內(nèi)容包括？A.引物設(shè)計(jì)B.退火溫度C.DNA聚合酶選擇D.dNTPs濃度E.反應(yīng)體積7.PCR反應(yīng)中，PCR應(yīng)用的領(lǐng)域包括？A.疾病診斷B.基因測(cè)序C.基因表達(dá)分析D.基因克隆E.基因編輯8.PCR反應(yīng)中，PCR技術(shù)的局限性包括？A.對(duì)模板質(zhì)量要求高B.容易產(chǎn)生非特異性產(chǎn)物C.擴(kuò)增片段長(zhǎng)度有限D(zhuǎn).定量分析精度不高E.成本較高9.PCR反應(yīng)中，PCR技術(shù)的改進(jìn)方法包括？A.熱啟動(dòng)PCRB.touchdownPCRC.巢式PCRD.實(shí)時(shí)熒光定量PCRE.數(shù)字PCR10.PCR反應(yīng)中，PCR技術(shù)的未來(lái)發(fā)展方向包括？A.更高的特異性B.更高的靈敏度C.更長(zhǎng)的擴(kuò)增片段長(zhǎng)度D.更精確的定量分析E.更低的成本11.PCR反應(yīng)中，PCR技術(shù)的安全性問(wèn)題包括？A.潛在的基因突變風(fēng)險(xiǎn)B.潛在的病原體污染風(fēng)險(xiǎn)C.潛在的環(huán)境污染風(fēng)險(xiǎn)D.潛在的個(gè)人健康風(fēng)險(xiǎn)E.潛在的倫理風(fēng)險(xiǎn)12.PCR反應(yīng)中，PCR技術(shù)的倫理問(wèn)題包括？A.個(gè)人隱私保護(hù)B.知情同意C.生物安全D.生物倫理E.法律法規(guī)13.PCR反應(yīng)中，PCR技術(shù)的質(zhì)量控制方法包括？A.模板質(zhì)量檢測(cè)B.引物質(zhì)量檢測(cè)C.DNA聚合酶質(zhì)量檢測(cè)D.dNTPs質(zhì)量檢測(cè)E.反應(yīng)體系優(yōu)化14.PCR反應(yīng)中，PCR技術(shù)的標(biāo)準(zhǔn)化方法包括？A.引物設(shè)計(jì)標(biāo)準(zhǔn)化B.反應(yīng)條件標(biāo)準(zhǔn)化C.儀器設(shè)備標(biāo)準(zhǔn)化D.試劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化E.數(shù)據(jù)分析標(biāo)準(zhǔn)化15.PCR反應(yīng)中，PCR技術(shù)的驗(yàn)證方法包括？A.方法學(xué)驗(yàn)證B.儀器驗(yàn)證C.試劑驗(yàn)證D.數(shù)據(jù)驗(yàn)證E.人員驗(yàn)證16.PCR反應(yīng)中，PCR技術(shù)的臨床應(yīng)用包括？A.疾病診斷B.疾病監(jiān)測(cè)C.疾病預(yù)后D.疾病治療E.疾病預(yù)防17.PCR反應(yīng)中，PCR技術(shù)的科研應(yīng)用包括？A.基因功能研究B.基因表達(dá)分析C.基因變異檢測(cè)D.基因組測(cè)序E.基因編輯18.PCR反應(yīng)中，PCR技術(shù)的工業(yè)應(yīng)用包括？A.食品安全檢測(cè)B.環(huán)境監(jiān)測(cè)C.藥物研發(fā)D.生物制品生產(chǎn)E.醫(yī)療器械研發(fā)19.PCR反應(yīng)中，PCR技術(shù)的教學(xué)應(yīng)用包括？A.生物教學(xué)B.醫(yī)學(xué)教學(xué)C.實(shí)驗(yàn)技能培訓(xùn)D.科研方法培訓(xùn)E.倫理教育20.PCR反應(yīng)中，PCR技術(shù)的未來(lái)發(fā)展前景包括？A.更廣泛的應(yīng)用領(lǐng)域B.更高的技術(shù)水平C.更完善的技術(shù)體系D.更強(qiáng)的創(chuàng)新能力E.更好的社會(huì)效益三、判斷題（每題只有一個(gè)正確答案，共30題，每題2分，共60分）1.PCR技術(shù)的全稱(chēng)是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。（正確）2.PCR反應(yīng)中，引物的長(zhǎng)度一般為15-20bp。（正確）3.PCR反應(yīng)中，常用的DNA聚合酶是DNA聚合酶III。（錯(cuò)誤，應(yīng)為耐熱DNA聚合酶）4.PCR反應(yīng)中，退火溫度一般選擇在55-65℃。（正確）5.PCR反應(yīng)中，延伸溫度一般選擇在72℃。（正確）6.PCR反應(yīng)中，延伸時(shí)間一般選擇在1-2分鐘。（正確）7.PCR反應(yīng)中，循環(huán)數(shù)一般選擇在25-35次。（正確）8.PCR反應(yīng)中，dNTPs指的是脫氧核糖核苷三磷酸。（正確）9.PCR反應(yīng)中，鎂離子（Mg2+）的作用是激活DNA聚合酶。（正確）10.PCR反應(yīng)中，DTT的作用是還原二硫鍵。（正確）11.PCR反應(yīng)中，甘油的作用是增加反應(yīng)粘度。（正確）12.PCR反應(yīng)中，pH值一般控制在7.5-8.0。（正確）13.PCR反應(yīng)中，PCR產(chǎn)物的大小可以通過(guò)凝膠電泳檢測(cè)。（正確）14.PCR反應(yīng)中，引物二聚體的形成會(huì)降低PCR效率。（正確）15.PCR反應(yīng)中，非特異性產(chǎn)物的形成會(huì)降低PCR效率。（正確）16.PCR反應(yīng)中，巢式PCR的作用是提高特異性。（正確）17.PCR反應(yīng)中，實(shí)時(shí)熒光定量PCR的作用是定量檢測(cè)起始模板量。（正確）18.PCR反應(yīng)中，多重PCR的作用是同時(shí)檢測(cè)多個(gè)目標(biāo)序列。（正確）19.PCR反應(yīng)中，不對(duì)稱(chēng)PCR的作用是擴(kuò)增單一鏈DNA。（正確）20.PCR反應(yīng)中，末端限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（RFLP）分析的作用是檢測(cè)基因多態(tài)性。（正確）21.PCR反應(yīng)中，DNA測(cè)序技術(shù)的應(yīng)用包括測(cè)定DNA序列。（正確）22.PCR反應(yīng)中，數(shù)字PCR技術(shù)的應(yīng)用包括精確定量起始模板量。（正確）23.PCR反應(yīng)中，長(zhǎng)片段PCR技術(shù)的應(yīng)用包括擴(kuò)增長(zhǎng)片段DNA。（正確）24.PCR反應(yīng)中，熱啟動(dòng)PCR技術(shù)的應(yīng)用包括避免非特異性擴(kuò)增。（正確）25.PCR反應(yīng)中，touchdownPCR技術(shù)的應(yīng)用包括優(yōu)化引物退火溫度。（正確）26.PCR反應(yīng)中，巢式PCR技術(shù)的應(yīng)用包括提高特異性。（正確）27.PCR反應(yīng)中，實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)的應(yīng)用包括定量檢測(cè)起始模板量。（正確）28.PCR反應(yīng)中，多重PCR技術(shù)的應(yīng)用包括同時(shí)檢測(cè)多個(gè)目標(biāo)序列。（正確）29.PCR反應(yīng)中，不對(duì)稱(chēng)PCR技術(shù)的應(yīng)用包括擴(kuò)增單一鏈DNA。（正確）30.PCR反應(yīng)中，末端限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（RFLP）分析技術(shù)的應(yīng)用包括檢測(cè)基因多態(tài)性。（正確）四、簡(jiǎn)答題（每題5分，共10分）1.簡(jiǎn)述PCR技術(shù)的原理。2.簡(jiǎn)述PCR反應(yīng)中影響PCR效率的因素。五、論述題（每題10分，共20分）1.論述PCR技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域。2.論述PCR技術(shù)的未來(lái)發(fā)展方向。答案及解析一、單項(xiàng)選擇題1.A2.B3.D4.A5.A6.B7.A8.A9.B10.D11.C12.B13.A14.B15.B16.C17.B18.B19.B20.B21.B22.B23.B24.B25.B26.B27.B28.B29.B30.B31.B32.B33.B34.B35.B36.B37.B38.B39.B40.B41.B42.B43.B44.B45.B46.B47.B48.B49.B50.B二、多項(xiàng)選擇題1.ABCDE2.ABCD3.ABCE4.ABCD5.ABCE6.ABCDE7.ABCDE8.ABCD9.ABCDE10.ABCDE11.ABCD12.ABCDE13.ABCDE14.ABCDE15.ABCDE16.ABCDE17.ABCDE18.ABCDE19.ABCDE20.ABCDE三、判斷題1.正確2.正確3.錯(cuò)誤4.正確5.正確6.正確7.正確8.正確9.正確10.正確11.正確12.正確13.正確14.正確15.正確16.正確17.正確18.正確19.正確20.正確21.正確22.正確23.正確24.正確25.正確26.正確27.正確28.正確29.正確30.正確四、簡(jiǎn)答題1.PCR技術(shù)的原理是利用DNA聚合酶在體外模擬DNA復(fù)制過(guò)程，通過(guò)變性、退火、延伸三個(gè)步驟，使特定DNA片段在短時(shí)間內(nèi)呈指數(shù)級(jí)擴(kuò)增。2.PCR反應(yīng)中影響PCR效率的因素包括：引物設(shè)計(jì)、DNA模板質(zhì)量、DNA聚合酶活性、dNTPs濃度、反應(yīng)體積等。五、論述題1.PCR技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域非常廣泛，包括疾病診斷、基因測(cè)序、基因表達(dá)分析、基因克隆、基因編輯、食品安全檢測(cè)、環(huán)境監(jiān)測(cè)、藥物研發(fā)、生物制品生產(chǎn)、醫(yī)療器械研發(fā)等。2.PCR技術(shù)的未來(lái)發(fā)展方向包括：更高的特異性、更高的靈敏度、更長(zhǎng)的擴(kuò)增片段長(zhǎng)度、更精確的定量分析、更低的成本、更廣泛的應(yīng)用領(lǐng)域、更高的技術(shù)水平、更完善的技術(shù)體系、更強(qiáng)的創(chuàng)新能力、更好的社會(huì)效益等。解析一、單項(xiàng)選擇題1.PCR技術(shù)的全稱(chēng)是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，故選A。2.PCR反應(yīng)中，引物的長(zhǎng)度一般為20-25bp，故選B。3.PCR反應(yīng)中，常用的DNA聚合酶是耐熱DNA聚合酶（如Taq酶），故選D。4.PCR反應(yīng)中，退火溫度一般選擇在55-65℃，故選A。5.PCR反應(yīng)中，延伸溫度一般選擇在72℃，故選A。6.PCR反應(yīng)中，延伸時(shí)間一般選擇在1-2分鐘，故選B。7.PCR反應(yīng)中，循環(huán)數(shù)一般選擇在25-35次，故選A。8.PCR反應(yīng)中，dNTPs指的是脫氧核糖核苷三磷酸，故選A。9.PCR反應(yīng)中，鎂離子（Mg2+）的作用是激活DNA聚合酶，故選B。10.PCR反應(yīng)中，DTT的作用是還原二硫鍵，故選D。11.PCR反應(yīng)中，甘油的作用是增加反應(yīng)粘度，故選C。12.PCR反應(yīng)中，pH值一般控制在7.5-8.0，故選B。13.PCR反應(yīng)中，PCR產(chǎn)物的大小可以通過(guò)凝膠電泳檢測(cè)，故選A。14.PCR反應(yīng)中，引物二聚體的形成會(huì)降低PCR效率，故選B。15.PCR反應(yīng)中，非特異性產(chǎn)物的形成會(huì)降低PCR效率，故選B。16.PCR反應(yīng)中，巢式PCR的作用是提高特異性，故選C。17.PCR反應(yīng)中，實(shí)時(shí)熒光定量PCR的作用是定量檢測(cè)起始模板量，故選B。18.PCR反應(yīng)中，多重PCR的作用是同時(shí)檢測(cè)多個(gè)目標(biāo)序列，故選B。19.PCR反應(yīng)中，不對(duì)稱(chēng)PCR的作用是擴(kuò)增單一鏈DNA，故選B。20.PCR反應(yīng)中，末端限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（RFLP）分析的作用是檢測(cè)基因多態(tài)性，故選B。21.PCR反應(yīng)中，DNA測(cè)序技術(shù)的應(yīng)用包括測(cè)定DNA序列，故選B。22.PCR反應(yīng)中，數(shù)字PCR技術(shù)的應(yīng)用包括精確定量起始模板量，故選B。23.PCR反應(yīng)中，長(zhǎng)片段PCR技術(shù)的應(yīng)用包括擴(kuò)增長(zhǎng)片段DNA，故選B。24.PCR反應(yīng)中，熱啟動(dòng)PCR技術(shù)的應(yīng)用包括避免非特異性擴(kuò)增，故選B。25.PCR反應(yīng)中，touchdownPCR技術(shù)的應(yīng)用包括優(yōu)化引物退火溫度，故選B。26.PCR反應(yīng)中，巢式PCR技術(shù)的應(yīng)用包括提高特異性，故選C。27.PCR反應(yīng)中，實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)的應(yīng)用包括定量檢測(cè)起始模板量，故選B。28.PCR反應(yīng)中，多重PCR技術(shù)的應(yīng)用包括同時(shí)檢測(cè)多個(gè)目標(biāo)序列，故選B。29.PCR反應(yīng)中，不對(duì)稱(chēng)PCR技術(shù)的應(yīng)用包括擴(kuò)增單一鏈DNA，故選B。30.PCR反應(yīng)中，末端限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（RFLP）分析技術(shù)的應(yīng)用包括檢測(cè)基因多態(tài)性，故選B。31.PCR反應(yīng)中，DNA測(cè)序技術(shù)的應(yīng)用包括測(cè)定DNA序列，故選B。32.PCR反應(yīng)中，數(shù)字PCR技術(shù)的應(yīng)用包括精確定量起始模板量，故選B。33.PCR反應(yīng)中，長(zhǎng)片段PCR技術(shù)的應(yīng)用包括擴(kuò)增長(zhǎng)片段DNA，故選B。34.PCR反應(yīng)中，熱啟動(dòng)PCR技術(shù)的應(yīng)用包括避免非特異性擴(kuò)增，故選B。35.PCR反應(yīng)中，touchdownPCR技術(shù)的應(yīng)用包括優(yōu)化引物退火溫度，故選B。36.PCR反應(yīng)中，巢式PCR技術(shù)的應(yīng)用包括提高特異性，故選C。37.PCR反應(yīng)中，實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)的應(yīng)用包括定量檢測(cè)起始模板量，故選B。38.PCR反應(yīng)中，多重PCR技術(shù)的應(yīng)用包括同時(shí)檢測(cè)多個(gè)目標(biāo)序列，故選B。39.PCR反應(yīng)中，不對(duì)稱(chēng)PCR技術(shù)的應(yīng)用包括擴(kuò)增單一鏈DNA，故選B。40.PCR反應(yīng)中，末端限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（RFLP）分析技術(shù)的應(yīng)用包括檢測(cè)基因多態(tài)性，故選B。41.PCR反應(yīng)中，DNA測(cè)序技術(shù)的應(yīng)用包括測(cè)定DNA序列，故選B。42.PCR反應(yīng)中，數(shù)字PCR技術(shù)的應(yīng)用包括精確定量起始模板量，故選B。43.PCR反應(yīng)中，長(zhǎng)片段PCR技術(shù)的應(yīng)用包括擴(kuò)增長(zhǎng)片段DNA，故選B。44.PCR反應(yīng)中，熱啟動(dòng)PCR技術(shù)的應(yīng)用包括避免非特異性擴(kuò)增，故選B。45.PCR反應(yīng)中，touchdownPCR技術(shù)的應(yīng)用包括優(yōu)化引物退火溫度，故選B。46.PCR反應(yīng)中，巢式PCR技術(shù)的應(yīng)用包括提高特異性，故選C。47.PCR反應(yīng)中，實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)的應(yīng)用包括定量檢測(cè)起始模板量，故選B。48.PCR反應(yīng)中，多重PCR技術(shù)的應(yīng)用包括同時(shí)檢測(cè)多個(gè)目標(biāo)序列，故選B。49.PCR反應(yīng)中，不對(duì)稱(chēng)PCR技術(shù)的應(yīng)用包括擴(kuò)增單一鏈DNA，故選B。50.PCR反應(yīng)中，末端限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（RFLP）分析技術(shù)的應(yīng)用包括檢測(cè)基因多態(tài)性，故選B。二、多項(xiàng)選擇題1.ABCDE2.ABCD3.ABCE4.ABCD5.ABCE6.ABCDE7.ABCDE8.ABCD9.ABCDE10.ABCDE11.ABCD12.ABCDE13.ABCDE14.ABCDE15.ABCDE16.ABCDE17.ABCDE18.ABCDE19.ABCDE20.ABCDE三、判斷題1.正確2.正確3.錯(cuò)誤4.正確5.正確6.正確7.正確8.正確9.正確10.正確11.正確12.正確13.正確14.正確15.正確16.正確17.正確18.正確19.正確20.正確21.正確22.正確23.正確24.正確25.正確26.正確27.正確28.正確29.正確30.正確四、簡(jiǎn)答題1.PCR技術(shù)的原理是利用DNA聚合酶在體外模擬DNA復(fù)制過(guò)程，通過(guò)變性、退火、延伸三個(gè)步驟，使特定DNA片段在短時(shí)間內(nèi)呈指數(shù)級(jí)擴(kuò)增。具體過(guò)程如下：變性，將雙鏈DNA加熱至變性溫度，使雙鏈DNA解旋成單鏈；退火，將溫度降低至退火溫度，使引物與單鏈DNA互補(bǔ)結(jié)合；延伸，將溫度升高至延伸溫度，DNA聚合酶以dNTP為原料，在引物3'-端延伸合成新的DNA鏈。通過(guò)重復(fù)變性、退火、延伸三個(gè)步驟，使特定DNA片段呈指數(shù)級(jí)擴(kuò)增。2.PCR反應(yīng)中影響PCR效率的因素包括：引物設(shè)計(jì)，引物設(shè)計(jì)不合理會(huì)導(dǎo)致非特異性擴(kuò)增或擴(kuò)增效率低；DNA模板質(zhì)量，DNA模板質(zhì)量差會(huì)影響PCR效率；DNA聚合酶活性，DNA聚合酶活性低會(huì)影響PCR效率；dNTPs濃度，dNTPs濃度過(guò)低會(huì)影響PCR效率；反應(yīng)體積，反應(yīng)體積過(guò)小或過(guò)大都會(huì)影響PCR效率。五、論述題1.PCR技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域非常廣泛，包括疾病診斷、基因測(cè)序、基因表達(dá)分析、基因克隆、基因編輯、食品安全檢測(cè)、環(huán)境監(jiān)測(cè)、藥物研發(fā)、生物制品生產(chǎn)、醫(yī)療器械研發(fā)等。在