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微生物實驗室管理制度修訂

號

起草人王曉梅審核人批準(zhǔn)人

靜日期審核日期批準(zhǔn)日期

頒發(fā)部門分發(fā)編號生效日期

目的：規(guī)范微生物室管理規(guī)范，以保證微生物實驗的順利進(jìn)行。

范圍：合用于微生物實驗室

依據(jù)：GB/T19489-《實驗室生物安全通用規(guī)定》；

執(zhí)行部門：化驗室微生物檢查室

..責(zé)：1.微生物檢查員負(fù)責(zé)微生物實驗室的管理……

.?…2.實驗室主管負(fù)責(zé)對微生物實驗室管理狀況進(jìn)行檢查。

內(nèi)容：

本中心'微生物實驗室管理制度涉及微生物實驗室人員管理制度、微生物室出入

管理制度、微生物室環(huán)境管理制度、微生物室的使用管理制度。

微生物實瞼室藥物管理制度。

L微生物實驗室的人員管理

1.1微生物實驗室由微生物檢查員管理及使用，其她人員須經(jīng)主管人員批準(zhǔn)后方可進(jìn)入

和使用。

1.2微生物實驗室日勺人員需通過有關(guān)B勺培訓(xùn)。

2.微生物實驗室出入管.

2.1人員出入管理：

2.1.1人員進(jìn)入微生物實驗室干凈區(qū)前,需要洗手消毒；在一級緩沖室換實驗服、戴帽

子、換鞋后,進(jìn)入風(fēng)淋室，風(fēng)淋后,進(jìn)入二級緩沖室準(zhǔn)備實驗。

2.1.2實驗操作前須帶上無菌手套和口罩。

2.2物料出入管理：

2.2.1物料進(jìn)入微生物實瞼室此前,脫去外包裝或者用酒精棉球擦拭后,放置于傳遞窗

中。

2.2.2物料放置于傳遞窗后,啟動紫外0.5小時，同步將微生物實驗室內(nèi)的凈化系統(tǒng)、紫

外燈打開。

2.2.3紫外啟動0.5小時后來,關(guān)閉紫外,并將物品轉(zhuǎn)移于實驗操作臺上。

2.2.4實驗完畢后,微生物實驗室物品經(jīng)傳遞窗傳出后，經(jīng)高溫滅菌后廢液、廢物倒入

廢液桶解決。

3彳散生物實驗室的環(huán)境管理

3.1微生物實驗室日勺清潔管理

微生物實驗室的清潔分為一般清潔及徹底清潔,其具體的清潔部位、方式措施、頻

率見下表所示：

清潔方式清潔部位清潔方法清潔周期

1.每次使用前用消毒液由上往下、

每次試驗

一般清潔實驗設(shè)備、操作臺面由內(nèi)而外的擦拭兩遍

前

2.開啟;爭化系統(tǒng)及紫外燈0.5小時

頂棚、墻面

1.用純化水由上往下、由內(nèi)而外的

生物安全柜

擦拭兩道后,再用消毒液按上述

實驗設(shè)備、操作臺面

徹底清潔順序擦拭一遍。每周

日光燈

2.開啟凈化系統(tǒng)及紫外燈0.5小時

地面

紫外燈用濕布擦拭一次，去除積塵。

3.2微生物實驗室常用消毒劑及其配制

消毒液名稱用途配制方法使用期限

擦拭設(shè)備表面量取95%濃度的醫(yī)用酒精，用純化水稀釋

75蛤酉精七天

至75%濃度（用酒精比重計測量），混勻。

0.1%擦拭墻面、地面及月量管量取5%新潔爾滅100mL用純化

一個月

新潔爾滅臺面水稀釋至2500ml,混勻,

擦拭墻面、地面及按所用84消卷液瓶身標(biāo)簽的稀釋方法1：

84消毒液—個月

臺面55配制所需量.混勻。

名微生物實驗室的使用管理

4.1微生物實驗室使用之前,應(yīng)先啟動微生物實驗室自凈系統(tǒng)30分鐘。每次使用前應(yīng)

用消毒液擦拭超凈工作臺及其她一切也許引起污染的死角,

然后開紫外燈滅菌30分鐘，同步啟動超凈工作臺。操作完畢后,用消毒液擦拭臺面,做

好衛(wèi)生,開紫外燈30分鐘,并記錄紫外燈照射時間。

注：當(dāng)紫外燈使用1000小時應(yīng)更換。

4.2微生物實驗室使用時,應(yīng)同步進(jìn)行沉降菌監(jiān)測,將具有營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)皿在各

監(jiān)測點正向放置，打開蓋子,暴露30分鐘,然后蓋上，

將營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基放入30~35。＜：培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時,觀測成果,每皿菌落數(shù)應(yīng)W1個，

否則應(yīng)加強(qiáng)清潔消毒工作，必要時驗證生物安全柜的性能。

5.微生物實驗室藥物及培養(yǎng)基管理制度

藥物及培養(yǎng)基是微生物實驗的基本,直接影響微生物實驗成果。合適的培養(yǎng)基制備措

施、貯藏條件和質(zhì)量控制實瞼是提供優(yōu)質(zhì)培養(yǎng)基的保證。

5.1藥物及培養(yǎng)基的采購及接受

微生物實驗室所用的藥物及培養(yǎng)基必須是符合國家有關(guān)資質(zhì)B勺公司所出產(chǎn)的。實驗室

根據(jù)檢直需要申購所需的培養(yǎng)基并做好相應(yīng)的接受記錄。

5.1培養(yǎng)基的接受

微生物檢查室應(yīng)指定專人負(fù)責(zé)培養(yǎng)基的管理,在接受培養(yǎng)基時,應(yīng)核對培養(yǎng)基的品名、

來源、批號、生產(chǎn)日期、有效期、數(shù)量,脫水培養(yǎng)基應(yīng)附有處方和使用闡明，并做好接

受記錄。

5.2培養(yǎng)基的制備

培養(yǎng)基可按處方配制,也可使用按處方生產(chǎn)的符合規(guī)定的脫水培養(yǎng)基。

在制備培養(yǎng)基時,應(yīng)選擇質(zhì)量符合規(guī)定的脫水培養(yǎng)基或單獨配方組分進(jìn)行配

制。脫水培養(yǎng)基應(yīng)附有處方和使用闡明，配制時應(yīng)按使用闡明上的規(guī)定操作以保證培

養(yǎng)基的質(zhì)量符合規(guī)定,不得使用結(jié)塊或顏色發(fā)生變化的脫水培養(yǎng)基。脫水培養(yǎng)基或單獨

配方組分應(yīng)在合適的條件下貯藏,如低溫、干燥和避光,所有的容器應(yīng)密封,特別是盛

放脫水培養(yǎng)基的容器。商品化的成品培養(yǎng)基除了應(yīng)附有處方和使用闡明外,還應(yīng)注明有

效期、貯藏條件、合用性檢查實驗的質(zhì)控菌和用途。

為保證培養(yǎng)基質(zhì)量的穩(wěn)定可靠,各脫水培養(yǎng)基或各配方組分應(yīng)精確稱量,并規(guī)定芍一

定的精確度。配制培養(yǎng)基最常用的溶劑是純化水,特殊狀況下,也許需要用去離子Z矯口

蒸儲水。應(yīng)記錄各稱量物的重量和水的使用量。

配制培養(yǎng)基所用容器和配套器具應(yīng)干凈,可用純化水沖洗玻璃器皿以消除清潔劑和

外來物質(zhì)的殘留，對熱敏感的培養(yǎng)基如糖發(fā)酵培養(yǎng)基其分裝容器一般應(yīng)預(yù)先進(jìn)行滅菌，

以保證培養(yǎng)基的無菌性。

脫水培養(yǎng)基應(yīng)完全溶解于水中，再行分裝與滅菌。配制時若需要加熱助溶,應(yīng)注意不

要過度加熱,以避免培養(yǎng)基顏色變深。如需要添加其她組分時,加入后應(yīng)充足混勻。應(yīng)

按照生產(chǎn)商提供或使用者驗證的參數(shù)進(jìn)行培養(yǎng)基的滅菌。商品化的成品培養(yǎng)基必須附

有所用滅菌措施的資料。培養(yǎng)基滅菌一般采用濕熱滅菌技術(shù),特殊培養(yǎng)基可采用薄膜過

濾除菌。

培養(yǎng)基若采用不合適的加熱和滅菌條件，有也許引起顏色變化、透明度減少、瓊脂

凝固力或pH的變化。因此,培養(yǎng)基應(yīng)采用驗證的滅菌程序滅菌，培養(yǎng)基滅菌措施和條

件,應(yīng)通過無菌性實驗和促生長實驗進(jìn)行驗證。此外,對高壓滅菌器的蒸汽循環(huán)系統(tǒng)也

要加以驗證,以保證在一定裝載方式下的正常熱分布。溫度緩慢上升的高壓滅菌器也許

導(dǎo)致培養(yǎng)基的過熱,過度滅菌也許會破壞絕大多數(shù)的細(xì)菌和真菌培養(yǎng)基促生長的質(zhì)量。

滅菌器中培養(yǎng)基的容積和裝載方式也將影響加熱的速度。因此,應(yīng)根據(jù)滅菌培養(yǎng)基均特

性,進(jìn)行全面的滅菌程序驗證。

應(yīng)擬定每批培養(yǎng)基滅菌后的pH值（冷卻至室溫25℃測定）。若培養(yǎng)基處方

中未列出pH值的范疇，除非經(jīng)驗證表白培養(yǎng)基的pH值允許的變化范疇很寬,否則，pH

值的范疇不能超過規(guī)定值士0.2。

制成平板或分裝于試管的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行下列檢杳：容器和蓋子不得破裂，裝量應(yīng)相

似,盡量避免形成氣泡,固體培養(yǎng)基表面不得產(chǎn)生裂縫或漣漪,在冷藏溫度下不得形成

結(jié)晶,不得污染微生物等。應(yīng)檢查和記錄批數(shù)量、有效期及培養(yǎng)基的無菌檢查。

5.3培養(yǎng)基的貯藏

自配日勺培養(yǎng)基應(yīng)標(biāo)記名稱、批號、配制日期等信息,并在已驗證的條件下貯藏。商

品化的成品培養(yǎng)基標(biāo)簽上應(yīng)標(biāo)有名稱、批號、生產(chǎn)日期、

失效期及培養(yǎng)基的有關(guān)特性,生產(chǎn)商和使用者應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)基使用闡明書上的規(guī)定進(jìn)行貯

藏，所采用的貯藏和運送條件應(yīng)使成品培養(yǎng)基最低限度的失去水分并提供機(jī)械保護(hù)，

培養(yǎng)基滅菌后若貯藏在高壓滅菌器中，質(zhì)量也許會受影響，一般不提倡這種寄存法。

瓊脂培養(yǎng)基不得在0℃或0℃如下寄存，由于冷凍也許破壞凝膠特性。

培養(yǎng)基應(yīng)避光保存,若要長期保存,應(yīng)置于密閉容器中以避免水分流失。瓊脂平板最佳

現(xiàn)配現(xiàn)用，如置冰箱保存,一般不超過1周,且應(yīng)密閉包裝,若延長保存期限，

保存期需經(jīng)驗證擬定。

固體培養(yǎng)基滅菌后時再融化只允許1次，以避免因過度受熱導(dǎo)致培養(yǎng)基質(zhì)量下降或

微生物污染。培養(yǎng)基的再融化一般采用水浴或流通蒸汽加熱。若使用微波爐,

應(yīng)避免培養(yǎng)基過度受熱及水分的蒸發(fā)，更要注意安全。融化日勺培養(yǎng)基應(yīng)置于45?50℃

口勺水浴中，不得超過8小時。傾注培養(yǎng)基時，應(yīng)擦干培養(yǎng)基容器外表面的水分,避免容

器外壁的水滴進(jìn)人培養(yǎng)基中導(dǎo)致污染。使用過時培養(yǎng)基（涉及失效的培養(yǎng)基）應(yīng)按照

國家污染廢物解決有關(guān)規(guī)定進(jìn)行。

5.4質(zhì)量控制實驗

實驗室應(yīng)對實驗用培養(yǎng)基建立質(zhì)量控制程序，以保證所用培養(yǎng)基質(zhì)量符合有關(guān)檢測

B勺需要。

實驗室配制或商品化的成品培養(yǎng)基的質(zhì)量依賴于其制備過程,采用不合適措施

制備的培養(yǎng)基將影響微生物的）生長或復(fù)蘇,從而影響實驗成果的可靠性。

所有配制好的培養(yǎng)基均應(yīng)進(jìn)行質(zhì)量控制實驗。實驗室配制B勺培養(yǎng)基的常規(guī)監(jiān)控

項目是pH、合用性檢查實驗,定期日勺穩(wěn)定性檢查以擬定有效期。

培養(yǎng)基在有效期內(nèi)應(yīng)根據(jù)合用性檢查實驗擬定培養(yǎng)基質(zhì)量與否符合規(guī)定。有效期的長

短將取決于在一定寄存條件下（涉及容器特性及密封性）的培養(yǎng)基其構(gòu)成成分的穩(wěn)定

性。

除藥典附錄另有規(guī)定外,在實驗室中，若采用已驗證B勺配制和滅菌程序制備培養(yǎng)基且

過程受控,那么同一批脫水培養(yǎng)基B勺合用性