考點35微生物的培養(yǎng)技術及應用

（精講+精練）

錄

一、知識點精準記憶

二.典型例題剖析

1、微生物的培養(yǎng)技術及應用

2、微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)

三、易混易錯辨析

2022高考真題感悟

五、高頻考點精練

第一部分：知識點精準記憶

一、微生物的培養(yǎng)技術及應用

1.培養(yǎng)基的配制

(1)概念：人們按照微生物對營養(yǎng)物質的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質。

(2)用途：用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物。

(3)類型：按物理狀態(tài)分類

液體培養(yǎng)基：①特點：不含凝固劑，呈液體狀態(tài)②用途：工業(yè)生產

固體培養(yǎng)基：①特點：含凝固齊女如瓊脂)，呈固體狀態(tài)②用途：微生物的分離、鑒定，活菌

計數(shù)，菌種保藏

(4)成分

碳源：①特點：提供碳元素的物質②作用：構成生物體的細胞的物質和一些代謝產物，有些

也是異養(yǎng)生物的能源物質③來源：無機碳源：CO2、NaHCO3等；有機碳源：糖類、牛肉膏等

氮源：①特點：提供氮元素的物質②作用：合成蛋白質、核酸等物質③來源：無機氮源：

N2、NH3、鏤鹽、硝酸鹽等；有機氮源：蛋白族等

無機鹽：①特點：為微生物提供除碳、氮之外的各種重要元素，包括大量元素和微量元素②

作用：為微生物提供無機營養(yǎng)，調節(jié)培養(yǎng)基的pH等③來源：無機化合物：KH2PCU、K2HPO4、

NaCl等

水：①特點：生物體含量最高的無機化合物②作用：良好的溶劑，參與化學反應等③來源：

培養(yǎng)基、代謝產物

(5)提醒：除了上述主要營養(yǎng)物質外，還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質以及氧

氣的需求。例如，在培養(yǎng)乳酸桿菌時，需要在培養(yǎng)基中添加維生素；在培養(yǎng)霉菌時，一般需

要將培養(yǎng)基調至酸性；在培養(yǎng)細菌時，一般需要將培養(yǎng)基調至中性或弱堿性；在培養(yǎng)厭氧微

生物時，需要提供無氧的條件。

2.無菌技術

(1)目的：獲得純凈的培養(yǎng)物。

(2)關鍵：防止雜菌污染。

(3)區(qū)別：消毒與滅菌的比較

比較項目條件結果常用方法應用范圍

煮沸消毒法日常用品

巴氏消毒法不耐高溫的液體

較為溫和的物僅殺死物體表面

操作空間、操作

消毒理、化學或生物或內部一部分微化學藥物消毒法

者的衣物和手等

等方法生物

接種室、接種箱

紫外線消毒法

或超凈工作臺

滅菌強烈的理化方法殺死物體內外所濕熱滅菌法培養(yǎng)基、容器等

有的微生物，包玻璃器皿、

干熱滅菌法

括芽抱和抱子金屬用具等

灼燒滅菌法接種工具等

(4)提醒：選擇無菌技術的原則：一要考慮無菌技術的效果，滅菌的效果比消毒要好；二

要考慮操作對象的承受能力，活體生物材料、操作者的手等只能采用消毒，而不能用滅菌

(5)其他操作

①做好消毒和滅菌工作后，要注意避免已經滅菌處理的材料用具與周圍的物品接觸。

②為了避免周圍環(huán)境中微生物的污染，接下來的許多操作都應在超凈工作臺上并在酒精燈火

焰附近進行。

3.微生物的純培養(yǎng)

(1)概念辨析

培養(yǎng)物：接種于培養(yǎng)基內，在適合條件下形成特定種類的微生物的群體

純培養(yǎng)物：由單一個體繁殖所獲得的微生物群體

菌落：分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內部繁殖形成的肉眼可見的、有一定形態(tài)結

構的子細胞群體

純培養(yǎng)：獲得純培養(yǎng)物的過程

(2)酵母菌純培養(yǎng)的操作步驟

配制培養(yǎng)基——目的明確、營養(yǎng)協(xié)調、

pH適宜

制備

菌廠①培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌法滅菌

培養(yǎng)

I'②培養(yǎng)皿用干熱滅菌法滅菌

基

倒平板一培養(yǎng)基冷卻至50年左右時倒

平板

■通過平板劃線法操作純化、分離微生物

為有菌落，斛說明培養(yǎng)基被未南污榮

對照組：未接種平板倒置培養(yǎng)工.

[W]|實驗組：接種平板倒置培養(yǎng)

(1)未接種培養(yǎng)基表面是否有菌落生長;

結果

分析(2)接種的培養(yǎng)基表面是否出現(xiàn)單菌落，

與評菌落大小、形狀、顏色是否一致，是否符

價合微生物特征

(3)若培養(yǎng)基表面出現(xiàn)了其他菌落，可能

由哪些原因引起

(3)平板劃線法操作步驟

①將接種環(huán)放在火焰②在火焰旁冷卻接種環(huán),

上灼燒，直到接種環(huán)同時，拔出裝有酵母菌

的金屬絲燒紅培養(yǎng)液的試管的棉塞

④在火焰附近用接

種環(huán)蘸取一環(huán)菌液

⑤將試管口通⑥在火焰附近將皿蓋打開

過火焰，并塞一條縫隙，用接種環(huán)在培

上棉塞養(yǎng)基表面迅速劃三至五條

平行線，蓋上皿蓋

⑦灼燒接種環(huán)，待其冷卻后，從第一

次劃線的末端開始作第二次劃線。重

復以上操作，作第三、四、五次劃線。

注意不要將最后一次的劃線與第一次

的劃線相連。

(1)實驗成功關鍵點

①第一次劃線及每次劃線之前都需灼燒接種環(huán)滅菌，劃線操作結束仍需灼燒接種環(huán)。

②灼燒接種環(huán)之后，要等其冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。

③在做第二次以及其后的劃線操作時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，這樣才能使細菌

的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終得到由單個細菌繁殖而來的菌落。

④劃線時最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連。

⑤劃線用力大小要適當，防止用力過大將培養(yǎng)基劃破。

(2)平板劃線操作中幾次灼燒接種環(huán)的目的

項目第一次操作每次劃線之前劃線結束

殺死上次劃線后接種環(huán)上殺死接種環(huán)上殘存的菌

殺死接種環(huán)上原有

目的殘留的菌種，使下次劃線種，避免微生物污染環(huán)境

的微生物

的菌種直接來源于上次劃和感染操作者

線的末端，使每次劃線菌

種數(shù)目減少

二、微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)

1.區(qū)分選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基

1).選擇培養(yǎng)基：①特點：允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生

長②用途：從眾多微生物中分離所需的微生物③舉例：加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌

2).鑒別培養(yǎng)基：①特點：根據微生物的代謝特點在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學藥品，

進而產生特定的顏色或其他變化②用途：鑒別不同種類的微生物③舉例：用伊紅一亞甲藍培

養(yǎng)基鑒別大腸桿菌

3).提醒常見選擇培養(yǎng)基舉例：①缺少氮源的培養(yǎng)基可以篩選能利用大氣中N2的微生物。

②含青霉素的培養(yǎng)基可淘汰細菌，篩選出真菌。③無有機碳源的培養(yǎng)基可篩選出自養(yǎng)微生物。

2.微生物的選擇培養(yǎng)和數(shù)量測定

(1)稀釋涂布平板法步驟

①系列稀釋操作：該操作常用在將細胞接種到培養(yǎng)基之前，通過液體稀釋的方法分散細胞，

隨著稀釋程度的增大，單位體積中的微生物細胞數(shù)量減少，細胞得以分散。

操作步驟：

9mL無菌水90mL

無菌水

②涂布平板操作步驟

涂布器

耳61g

取0.1mL菌液滴加到涂布器浸在盛有

培養(yǎng)基表面酒精的燒杯中

爸q步

將涂布器在火焰上用涂布器將菌液均勻地涂

灼燒，待酒精燃盡、布在培養(yǎng)基表面。涂布時

涂布器冷卻后，再可轉動培養(yǎng)皿，使涂布均勻

進行涂布

(2)微生物的數(shù)量測定方法

①顯微鏡直接計數(shù)法

原理：利用特定細胞計數(shù)板或血細胞計數(shù)板，在顯微鏡計數(shù)一定容積的樣品中微生物的數(shù)量

方法：用計數(shù)板計數(shù)

缺點：不能區(qū)分死菌與活菌而使計數(shù)結果偏大

②間接計數(shù)法一活菌計數(shù)法(即稀釋涂布平板法)

原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個單菌落，來源于樣品稀釋液中的一

個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。

計算公式：每克樣品中的菌株數(shù)=(C+V)xM

C代表某一稀釋V代表涂布平板

“代表稀

度下平板上生長時所用的稀釋液

釋倍數(shù)

的平均菌落數(shù)的體積(mL)

3.土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)的實驗操作

(1)實驗原理

分離原理：①土壤中的細菌之所以能分解尿素，是因為他們能合成胭酶②配制以尿素為唯一

氮源的培養(yǎng)基，能夠在該培養(yǎng)基中生長的細菌就是能分解尿素的細菌

(3)實驗流程

土壤取樣：從酸堿度接近中性的潮濕土壤中，鏟去表層土，取距地表3-5厘米的土壤層

樣品的稀釋：通常選取一定稀釋范圍的樣品液進行培養(yǎng)，以保證獲得的菌落數(shù)在30-300的

平板適于計數(shù)

微生物的培養(yǎng)與觀察：①接種：用稀釋涂布平板法接種②培養(yǎng)條件：30-37℃培養(yǎng)上2天③

觀察：根據菌落的特征區(qū)分微生物④計數(shù)：每隔24小時統(tǒng)計一次菌落數(shù)目，選取菌落數(shù)目

穩(wěn)定時的記錄作為結果

(3)實驗結果分析與評價

r對照的培養(yǎng)皿中

一未被雜菌污染

有無雜無菌落生長

菌污染

對照的培養(yǎng)皿中

的判斷I有菌落生長一被雜菌污染

培養(yǎng)基

"選擇培養(yǎng)基上的菌落數(shù)選擇培養(yǎng)

是否具

＜目遠少于牛肉膏蛋白陳?基具篩選

篩選作

.培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目作用

用

樣品稀，得到3個或3個以上菌落_操作

釋評價］1數(shù)目在30~300的平板一成功

重復組，比較各_^若選取同一種土樣，統(tǒng)

的結果1■重復組計結果應接近

第二部分：典型例題剖析

考向一、微生物的培養(yǎng)技術及應用

1.應用特定的測序技術發(fā)現(xiàn)某明代古沉船船體飽水木材樣品與沉積物中含有豐富的原核微

生物類群，與漆黑海底現(xiàn)場取的木材樣品與沉積物中的菌群種類相似，但是菌群含量存在明

顯的差異。下列敘述正確的是()

A.海底沉積物中的原核微生物結構簡單，以RNA為遺傳物質

B.在漆黑的海底現(xiàn)場獲取的木材樣品中含有大量能夠進行化能合成作用的硝化細菌菌群

C.海底沉積物為多種多樣的細菌菌群提供了生長、繁殖所需的全部的碳源和氮源

D.用血細胞計數(shù)板統(tǒng)計海底某細菌的種群數(shù)量時發(fā)現(xiàn)平均每小格中有3個細菌，可估算一

個計數(shù)室內有1200個細菌

考向二、微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)

2.下列是關于“檢測土壤中細菌總數(shù)”實驗操作的敘述，其中錯誤的是()

A.配制牛肉膏蛋白腺培養(yǎng)基；牛肉膏蛋白腺培養(yǎng)基也要滅菌

B.取10,105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各o.1ml,分別涂布于各組平板上

C.將實驗組和對照組平板倒置，37C恒溫培養(yǎng)24-48小時

D.確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)多的實驗組平板進行計數(shù)

第三部分：易混易錯辨析

1.與微生物培養(yǎng)有關的6個易錯點

(1)固體培養(yǎng)基中的瓊脂僅作為凝固劑，不能為微生物生長提供能量和碳源。

(2)灼燒接種環(huán)，待其冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。

(3)劃線時最后一區(qū)不要與第一區(qū)相連。

(4)劃線時用力大小要適當，這是為了防止用力過大將培養(yǎng)基劃破。

(5)用稀釋涂布平板法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低，這是因為當兩個或多個細

胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。

(6)尿素分解菌和纖維素分解菌的分離都運用了選擇培養(yǎng)基，前者所用的培養(yǎng)基中尿素是

唯一的氮源，后者所用的培養(yǎng)基中纖維素是唯一的碳源。

2.教材結論性語句

（1）（選擇性必修3P18）當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，

統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目少。

（2）（選擇性必修3P18）同一稀釋度下，應至少對3個平板進行重復計數(shù)，然后求出平均

值。

<A

第四部分：高考真題感悟

1.（2022?海南?高考真題）為探究校內植物園土壤中的細菌種類，某興趣小組采集園內土

壤樣本并開展相關實驗。下列有關敘述錯誤的是（）

A.采樣時應隨機采集植物園中多個不同地點的土壤樣本

B.培養(yǎng)細菌時，可選用牛肉膏蛋白膝固體培養(yǎng)基

C.土壤溶液稀釋倍數(shù)越低，越容易得到單菌落

D.鑒定細菌種類時，除形態(tài)學鑒定外，還可借助生物化學的方法

2.（2022?湖北?高考真題）滅菌、消毒、無菌操作是生物學實驗中常見的操作。下列敘述

正確的是（）

A.動、植物細胞DNA的提取必須在無菌條件下進行

B.微生物、動物細胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染

C.為防止蛋白質變性，不能用濕熱滅菌法對牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基進行滅菌

D.可用濕熱滅菌法對實驗中所使用的微量離心管、細胞培養(yǎng)瓶等進行滅菌

3.（2022?湖北?高考真題）解脂菌能利用分泌的脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收

利用。脂肪酸會使醇溶青瓊脂平板變?yōu)樯钏{色。將不能直接吸收脂肪的甲，乙兩種菌分別等

量接種在醇溶青瓊脂平板上培養(yǎng)。甲菌菌落周圍呈現(xiàn)深藍色，乙菌菌落周圍不變色，下列說

法錯誤的是（）

A.甲菌屬于解脂菌

B.實驗中所用培養(yǎng)基以脂肪為唯一碳源

C.可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進行對比

D.該平板可用來比較解脂菌分泌脂肪酶的能力

4.（2021?天津?高考真題）1.下列操作能達到滅菌目的的是（）

A.用免洗酒精凝膠擦手B.制作泡菜前用開水燙洗容器

C.在火焰上灼燒接種環(huán)D.防疫期間用石炭酸噴灑教室

第五部分：高頻考點精練

\7

1.某樣液經濾膜過濾后，轉移到完全培養(yǎng)基上并適宜條件下培養(yǎng)，每隔12h統(tǒng)計一次菌落

數(shù)目，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的數(shù)據作為結果，統(tǒng)計某種菌菌落數(shù)為205個，如圖所示。下列

說法正確的是（）

廠過濾5L水

A.若用濾膜測定硝化細菌數(shù)量，則培養(yǎng)基中可不添加氮源

B.若計算出樣液中該種菌的密度為41個/L,該值比實際值偏大

C.為了提高準確度，需設平行重復實驗，但不用空白對照

D.菌落數(shù)目穩(wěn)定時，大小不同的菌落形成的起始時間一般不同

2.藥物敏感試驗簡稱藥敏試驗，旨在了解某病原微生物對各種抗生素的敏感程度，以指導

臨床合理選用抗生素。紙片擴散法是藥敏試驗中一種常用的方法，在紙片周圍會形成透明的

圖3

A.圖1所示操作需待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時進行，不需要在酒精燈旁操作

B.圖3中IV的抑菌圈中出現(xiàn)了部分菌落可能是該病原微生物發(fā)生了基因突變

C.進行藥敏試驗，需將平板上布滿測試菌，需使用的接種工具是接種環(huán)

D.接種后的平板在培養(yǎng)時的放置應如圖2中②所示，可以防止污染

3.某興趣小組為研究“使用公筷對餐后菜品細菌數(shù)量的影響”，將每道菜分為3盤，一盤取

樣冷藏，一盤使用公筷，一盤不用公筷，實驗過程如下圖。下列敘述正確的是（）

不食用組餐前取樣冷藏＞-n

研磨J的母接種、固體培培養(yǎng)、冷藏

、/每道菜.

使用公筷組「加1000mL?取怦》養(yǎng)基X，計數(shù)

、?/分3組

餐后取樣冷藏無菌水稀釋

菜品

-不使用公筷組-

A.在固體培養(yǎng)基X上用稀釋涂布平板法進行接種

B.固體培養(yǎng)基X對菜品中的細菌有選擇作用

C.根據菌落的特征可以準確判斷細菌的種類

D.理論上，不食用組的培養(yǎng)基上不會有菌落出現(xiàn)

4.為了觀察手掌上附著的微生物，某小組成員將自己的手掌在配制的牛肉膏蛋白陳固體培

養(yǎng)基上輕輕按壓后，蓋上培養(yǎng)皿蓋，將平板倒置放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h,結果如圖所示。

下列說法錯誤的是（）

A.配制的培養(yǎng)基經高壓蒸汽滅菌后，還要調節(jié)pH才能用于接種

B.待高溫滅菌后的培養(yǎng)基冷卻至50°C左右后，再進行倒平板

C.在超凈工作臺上和酒精燈火焰旁進行操作，是為了防止雜菌污染

D.手掌上的某些微生物在該培養(yǎng)基上并沒有生長繁殖形成菌落

5.野生型大腸桿菌菌株能在未添加某種維生素的基本培養(yǎng)基上生長，氨基酸營養(yǎng)缺陷型突

變株無法合成某種氨基酸，只能在添加了多種維生素的完全培養(yǎng)基上生長，下圖為純化某氨

基酸營養(yǎng)缺陷型突變株的部分流程圖，①②③④代表培養(yǎng)基，A、B、C表示操作步驟，D、

E為菌落。下列敘述錯誤的是（）

無菌落

A.圖中①②④為基本培養(yǎng)基，③為完全培養(yǎng)基

B.紫外線的目的是提高突變率，增加突變株的數(shù)量

C.B的正確操作是用涂布器把菌液均勻地涂布在②表面

D.經C過程原位影印及培養(yǎng)后，可從④中挑取D進行純化培養(yǎng)

6.AM真菌能促進根瘤菌（Rh）刺激根的局部膨大形成根瘤。為研究AM真菌促進Rh形

成根瘤的機制，研究人員分別取經AM-+Rh\AM++RK和AM++Rh+處理的大豆根系分泌物

（+代表有，-代表無），滅菌后裝滿毛細管，將毛細管束放入含有根瘤菌菌液的試管中，實

驗裝置如圖1（此培養(yǎng)條件下根瘤菌能生存但并不增殖）。每隔兩天取出毛細管，用無菌水

沖洗其外壁，打碎研磨沖洗定容后進行活菌計數(shù)，結果如圖2。下列有關上述實驗操作及分

析敘述正確的是（）

A.根瘤菌與AM真菌都具有生物膜系統(tǒng)，二者本質區(qū)別是有無核膜包被的細胞核

B.實驗中可采用高壓蒸汽滅菌鍋對大豆根系分泌物和根瘤菌菌液進行滅菌處理

C.可取一定量的毛細管研磨液劃線接種在增殖平板培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)計數(shù)

D.AM真菌與根瘤菌共同存在時，根系分泌物對根瘤菌的吸引作用更強

7.為了從反芻動物的瘤胃中分離出能分解尿素的微生物，某興趣小組設計了如下實驗流程。

下列敘述錯誤的是（）

的拄超絡取稀釋液接種土美初步篩選出進一步

取樣一稀釋一至固體培養(yǎng)基一培養(yǎng)一目的菌菌落一純化

A.為創(chuàng)造無氧環(huán)境，可采用穿刺接種法

B.該實驗使用的固體培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基

C.細菌能分解尿素，是因為它們能合成）R酶

D.服酶將尿素分解為氨和C02,會使培養(yǎng)基pH降低

8.剛果紅是一種染料，可與纖維素反應形成紅色復合物，但不會與纖維素水解產物發(fā)生反

應。研究人員利用該原理從土壤中分離纖維素分解菌并計數(shù)，培養(yǎng)結果如下圖所示。下列敘

述錯誤的是（）

剛果紅培養(yǎng)基上的部分菌落

A.剛果紅培養(yǎng)基以纖維素為唯一碳源

B.將菌液分散在培養(yǎng)基表面用平板劃線法

C.圖中菌落丁分解纖維素的能力最強

D.用顯微鏡直接計數(shù)統(tǒng)計的結果往往比活菌實際數(shù)目多

9.利用纖維素酶降解秸稈生產燃料乙醇，對緩解全球能源危機有重大意義。科研人員開展

篩選、誘變及選育高產纖維素酶菌株的相關研究，過程如圖。下列敘述正確的是（）

A.采集的黑土壤需經過高壓蒸汽滅菌進行富集培養(yǎng)

B.需用牛肉膏、纖維素、瓊脂等配制CMC平板

C.誘變處理使每個細菌的產纖維素酶能力提高

D.人工篩選可以使產纖維素菌株發(fā)生定向進化

10.肉制品在發(fā)酵過程中會產生一類具有生物活性的含氮低分子化合物一生物胺。適量生物

胺可促進人體的正常生理活動，但含量較高時有一定的毒性?？蒲腥藛T擬采用水解圈（微生

物水解生物胺產生的透明圈）的方法，從魚露發(fā)酵液中篩選高效生物胺降解菌，其操作思路

如下：①從距發(fā)酵缸上表面8-12cm處吸取1mL發(fā)酵液7②一③取100uL均勻涂布在培養(yǎng)

基x上一④挑取目標菌落分離純化一⑤測定菌株的生物胺降解活性。下列相關分析中錯誤的

是（）

A.操作②是指用適量的蒸儲水稀釋魚露發(fā)酵液

B.操作③采用的接種方法也可用于微生物計數(shù)

C.配置培養(yǎng)基X時，應以生物胺作為唯一氮源

D.選擇目標菌落時，應挑取水解圈較大的菌落

11.尿素容易保存，是目前使用量較大的一種化學氮肥，尿素分子并不能直接被農作物吸收,

只有被尿素分解菌分解成氨之后，才能被植物利用。如圖是從土壤中分離、計數(shù)尿素分解菌

的過程，有關分析不正確的是（）

A.若②過程稀釋了10倍，則乙錐形瓶里盛有18mL無菌水

B.③的接種方法可用稀釋涂布平板法

C.a、b、c培養(yǎng)基可以用牛肉膏蛋白族培養(yǎng)基

D.若①②過程稀釋了10倍，a、b、c培養(yǎng)基上的菌落數(shù)依次為57、58、56個，則10g土

樣中的尿素分解菌數(shù)量為5.7x108個

12.為了研究抗生素X對四種不同細菌（1、2、3、4）的作用效果，有人做了如圖的抗菌

實驗，四天后菌落形態(tài)如圖所示，則下列分析正確的是（）

虛線表示接種細黑色區(qū)域表示菌

菌位置分布位置

A.抗生素X對細菌3的抑制效果最好

B.抗生素X對細菌4的抑制效果最差

C.抗生素X對細菌2的抑制比對細菌3的抑制效果好

D.可以用抗生素X去治療由細菌1引起的疾病

13.為宣傳正確佩戴口罩可降低呼吸道傳染疾病的風險，某同學進行了相關實驗。實驗中將

牛肉膏蛋白膝培養(yǎng)基置于距正確佩戴口罩的實驗者口部前方50cm處，然后對著培養(yǎng)基講話

Imin或咳嗽2次，再進行微生物培養(yǎng)和觀察。下列敘述錯誤的是（）

A.實驗中培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基并需要進行嚴格的滅菌

B.實驗者對培養(yǎng)基進行處理后，放入10℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1-2天

C.實驗中還應設置不戴口罩直接講話或咳嗽進行實驗對照

D.培養(yǎng)結束后可根據菌落的形狀、大小、顏色等特征確定微生物的種類

14.做“微生物的分離與培養(yǎng)”實驗時，下列敘述正確的是（）

A.高壓滅菌加熱結束時，打開放氣閥使壓力表指針回到零后，開啟鍋蓋

B.倒平板時，應將打開的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上

C.為了防止污染，接種環(huán)經火焰滅菌后應立即去挑取菌落

D.用記號筆標記培養(yǎng)皿中菌落時，應標記在皿底上

15.微生物需要從外界吸收營養(yǎng)物質來維持正常的生長和繁殖。下列關于微生物營養(yǎng)的敘述,

正確的是（）

A,尿素分解菌和纖維素分解菌的培養(yǎng)基中可能含有相同的無機鹽

B.篩選硝化細菌（自養(yǎng)型）的培養(yǎng)基中需加入適宜濃度的有機碳源

C.只含有水和無機鹽兩類成分的培養(yǎng)基中不可能形成生物群落

D.乳酸菌需要的特殊營養(yǎng)物質是指其自身不能合成的某些無機物

16.培養(yǎng)基是指供給微生物、植物或動物細胞（或組織）生長繁殖的，由不同物質組合配制

而成的營養(yǎng)基質。針對下表中的三組培養(yǎng)基，下列敘述錯誤的是（）

組別培養(yǎng)基成分

a蛋白陳、酵母提取物、甘露醇、水

b葡萄糖、尿素、NaCl、K2HpO4、酚紅、瓊脂糖

c礦質元素、蔗糖、維生素、甘氨酸、水、瓊脂

A.a組培養(yǎng)基可用于醋化醋桿菌的擴大培養(yǎng)，該培養(yǎng)過程需用到磁力攪拌器和搖床

B.b組培養(yǎng)基可用于分離含版酶的微生物，該實驗中需用全營養(yǎng)LB固體培養(yǎng)基作對照

C.c組培養(yǎng)基可用于誘導植物愈傷組織再分化，添加的植物生長調節(jié)劑需事先過濾滅菌

D.上述培養(yǎng)基不僅要為相應的細胞提供營養(yǎng)物質還要為其生存和繁殖提供適宜的環(huán)境

17.結核桿菌是對抗生素極易產生耐藥性的細菌。為探究不同結核桿菌耐藥性的大小，研究

人員提取患者體內的病原菌進行培養(yǎng)（如圖甲），過程I接種純化的結果如圖乙。下列說法

正確的是（）

A.在病原菌的培養(yǎng)過程中只采用一種滅菌方法即可

B.對單一菌落進行液體培養(yǎng)的目的是獲得更多的結核桿菌

C.培養(yǎng)中各培養(yǎng)基均需加入抗生素的目的是抑制雜菌生長

D.過程I接種時劃線的順序是①一②一③，該方法無法完成對菌落的計數(shù)

18.下列有關無菌技術的說法，正確的是（）

①可以通過化學藥劑消毒法處理水源；

②培養(yǎng)基需經高壓蒸汽滅菌后方可調節(jié)pH；

③配制培養(yǎng)基和接種時，均必需在酒精燈火焰旁操作；

④接種室、接種箱或超凈工作臺在使用前，可用紫外線照射30min進行消毒；

⑤高壓蒸汽滅菌是在壓力為201kPa,溫度為121℃的條件下維持15-30min來滅菌的;

A.①③B.③⑤C.③④D.①④

19.經誘變處理后，某細菌群體中基因突變頻率增大，但突變體數(shù)量仍占極少數(shù)。梯度平板

法是篩選抗藥性突變型的一種簡單有效的方法，其操作要點是：先在培養(yǎng)皿中倒入不含抗生

素的培養(yǎng)基，立即傾斜培養(yǎng)皿到凝固為一個斜面，再將培養(yǎng)皿平放，繼續(xù)倒入含一定濃度抗

生素的培養(yǎng)基，直至形成平面，培養(yǎng)基內的抗生素濃度呈線性梯度，一端濃度高，另一端濃

度低，將誘變處理的濃菌液涂在梯度平板上進行培養(yǎng)及篩選。篩選出的抗藥性突變型再做抗

藥性的測定。下列推斷不合理的是()

A.抗藥性突變型個體的主要誘因是培養(yǎng)基中的抗生素

B.制作含有抗生素的平板時，藥物須與培養(yǎng)基混合均勻

C.培養(yǎng)后，在高濃度抗生素處出現(xiàn)的菌落為抗藥性突變型菌株且抗藥性強

D.含抗生素的梯度平板上會出現(xiàn)未經誘變處理的該細菌群體菌落

20.高中生物實驗中用到了不同體積分數(shù)的酒精，下列說法正確的是()

A.微生物的實驗室培養(yǎng)實驗中，用50%酒精給實驗者的雙手消毒

B.觀察花生細胞中的脂肪顆粒，需要用70%的酒精洗去浮色

C.DNA粗提取實驗中，用95%冷酒精進一步提純DNA,DNA溶解于95%冷酒精

D.綠葉中色素的提取和分離實驗中，可用無水乙醇作為提取液

21.采后的葡萄在運輸、貯藏等過程中，易受黑曲霉感染而腐爛引起“黑粉病”，食用價值下

降。為解決這一問題，研究人員從葡萄園土壤中分離、純化和篩選出對黑曲霉有較強抑制作

用的拮抗細菌，具體流程如圖。

(1)黑曲霉與拮抗細菌都具有的結構或物質是O

①質膜②核膜③核酸④核糖體⑤線粒體

(2)步驟I采用的接種方法是，采用固體平板培養(yǎng)細菌時進行倒置培養(yǎng)的原因是

(3)在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進行(填

“消

毒”或“滅菌”)處理；操作者的雙手需要進行清洗和；靜止空氣中的細菌可用紫外

線殺滅，其原因是紫外線能使其內蛋白質變性，還能損傷它的結構。

(4)下列關于步驟IV的說法正確的有o

A.桔抗細菌與黑曲霉競爭營養(yǎng)與生存空間

B.桔抗細菌可能產生了某種物質抑制黑曲霉的生長繁殖

C.黑曲霉可能產生了某種抗生素抑制描抗細菌的生長繁殖

D.桔抗細菌對黑曲霉抑制作用越大，則其周圍的透明圈越大

(5)為進一步研究抽抗細菌對葡萄中黑曲霉的抑制效果，研究人員進行了圖實驗，其中施加

的處理①是、②是

廿嶼e&33發(fā)生腐爛

酎嶼■鳥36未發(fā)生腐爛

22.從遠古到現(xiàn)代，從傳統(tǒng)發(fā)酵到分子生物學實驗，生物技術一直與我們的生活息息相關。

回答下列問題。

（1）微生物培養(yǎng)技術是最基本、最核心的生物技術。在實驗室培養(yǎng)微生物，一方面需要為培

養(yǎng)的微生物提供合適的（答出2點即可），另一方面需要確保無處不

在的其他微生物不會對實驗造成干擾。

（2）在生產上，人們使用果膠酶、纖維素酶等提高水果的出汁率和澄清度。

①由霉菌發(fā)酵生產的果膠酶是食品加工業(yè)中使用量最大的酶制劑之一，被廣泛地應用于果汁

加工業(yè)。培養(yǎng)霉菌可以用查氏培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基一般含有（答出2種

即可）、氮源和碳源，碳源進入細胞后，可