TCACM1326.29-2019羯布羅香種子超低溫保存技術(shù)規(guī)程_第1頁
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文檔簡介

ICSC T/CACM1326.29—TechnicalcodeofpracticeforcryopreservationofDipterocarpusturbinatusGaertn.f. 中華中醫(yī)藥學(xué)會T/CACMT/CACM1326.29—目前 范 附錄A（規(guī)范性附錄）TTC/磷酸鹽緩沖液的配制和保存方 前——T/CACM ——T/CACM ——T/CACM ——T/CACM ——T/CACM ——T/CACM ——T/CACM ——T/CACM ——T/CACM ——T/CACM GB/T1.1—20091部分：標準的結(jié)構(gòu)和編寫》給出的規(guī)則起草。T/CACMT/CACM1326.29—GB/T3543.6GB/T3543.7羯布羅香12cm～15cm3cm1種子超低溫保存seedof月下旬～6月上旬，花萼變?yōu)樽厣珪r即可采收，成熟期較短，于一周內(nèi)采收完，去除果翅，取挑選發(fā)育飽滿、均勻、健康的種子，置于10℃冰箱中保存?zhèn)溆茫ù娣艜r間不超過15d）。切羯布羅香種子活力以種子生活力為判別標準。按照GB/T3543.7中的2，3，5-三苯基氯化四氮唑(TTC)法檢測種子生活力。隨機抽取30粒種子，剝?nèi)ネ鈱臃N皮，沿種脊小心將種子分成2爿后放培養(yǎng)皿內(nèi)，內(nèi)側(cè)面向下，滴入TTC溶液浸沒種子，室溫（25℃)避光放置4h后觀察染色結(jié)果。TTCA90

??

×100%?????????????????（1）12h～26h50%～60%

??1?

×100%……….30015mL管（每管2粒種子）中，迅速投入液氮中保存。24h10402min取出5管解凍后的種子，按照5.1活力檢測方法進行超低溫保存后的初始生活力檢測。當種子生活力≥60％時視為保存成功。將剩下5管解凍后的羯布羅香種胚，播種到MS固體培養(yǎng)基中，溫度28℃～30℃，濕度70%～85%條件下培養(yǎng)。羯布羅香種胚出芽周期大概10d～20d。附錄TTC1.00g100mL1TTCpH6.5～7.54溶液I：9.08g磷酸二氫鉀溶于1L無菌水中；II：35.81g1LI﹕II2﹕350(2)[MLiHsi-wen,LiJie,PeterS.Ashton.Dipterocarpaceae[M]//FloraOfChinaBeijing:SciencePress/St.Louis:MissouriBotanicalGardenPress.2007.13:48.國家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會.中華本草（第三冊）[M].上

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