33012023-02-28發(fā)布I本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件主要起草人：李春楠、傅巧娟、張曉瑩、趙?？?、錢麗華、阮若昕、沈國1雜交蘭種苗組培快繁技術(shù)規(guī)程本文件適用于雜交蘭種苗組培擴(kuò)繁至馴化栽培的生GB/T8321（所有部分）農(nóng)藥合理NY/T496—2010肥料合理使用準(zhǔn)則通則NY/T1276—2007農(nóng)藥安蘭花外植體誘導(dǎo)培養(yǎng)時，莖尖生長點(diǎn)組織逐漸膨大形成的4組培苗培養(yǎng)4.1.1母株的預(yù)處理環(huán)境，溫度宜15℃~25℃,光照宜8000lux～12000lux。4.1.2外植體的選取24.1.3.1用潔凈的軟毛刷輕刷外植體表面，去除表面污垢，浸入洗潔精等清潔劑中震蕩清洗50min~4.1.3.2剝?nèi)?片~2片外苞葉，75%酒精浸泡消毒90s,無菌水清洗2次~3次。4.1.3.3再剝?nèi)?片~2片外苞葉，浸入10%NaCl0溶液，加入2滴～3滴吐溫20,處理10min,無菌水清洗3次~4次。4.1.3.4浸入0.1%HgCl?溶液，加入2滴～3滴吐溫20,根據(jù)芽的大小滅菌15min~17min,無菌水清洗5次~6次。4.1.3.5再剝?nèi)?片~2片外苞葉，將剝離的芽浸入0.05%HgCl?溶液中消毒60s,無菌水清洗5次~取消毒后的芽，剝離0.3cm~0.5cm的莖尖組織接種于初代培養(yǎng)基誘導(dǎo)類培養(yǎng)基配方宜為：1/2MS+1mg/L6-BA+1mg/LIBA+1g/L活性炭+30g/L蔗糖+5g/L瓊脂，pH值5.6~5.8。光照16h/d,光照強(qiáng)度500lux~1000lux,溫度(25±1)℃;暗培養(yǎng)時溫度為(20±1)℃。初代培養(yǎng)60d后，將誘導(dǎo)形成的類原球莖分割為體積約0.4cm×0.4cm×0.4cm的團(tuán)塊，接種于繼代培養(yǎng)基上，每隔60d~75d繼代一次，分割時去除類原球莖上分化的芽和根，繼代次數(shù)不宜超過12代。培養(yǎng)基配方宜為：Hyponex1(花寶1號)+0.5mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+50g/L香蕉泥+2g/L水解酪蛋白+1g/L活性炭+30g/L蔗糖+5g/L瓊脂，pH值5.6～5.8。光照16h/d,光照強(qiáng)度500lux~1000lux,溫度(25±1)℃;暗培養(yǎng)時溫度為(20±1)℃。將增殖的類原球莖分割為體積約0.4cm×0.4成芽，類原球莖之間的距離不宜少于1.5cm。3培養(yǎng)基配方宜為：1/2MS+0.5mg/L6-BA+0.1mg/LNAA+10%椰汁+0.2g/L活性炭+20g/L蔗糖+6g/L瓊脂，pH值5.6～5.8。光照16h/d,光照強(qiáng)度1200lux~2000lux,溫度(25±1)℃;暗培養(yǎng)時溫度為(20±1)℃。待芽長至3cm~5cm時，將其切下接種于生根培養(yǎng)基培養(yǎng)50d~70d。培養(yǎng)基配方宜為：Hyponex1(花寶1號)+0.1mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+100g/L香蕉泥+2g/L水解酪蛋白+1g/L活性炭+30g/L蔗糖+7g/L瓊脂，pH值5.6～5.8。光照16h/d,光照強(qiáng)度2000lux~2500lux,溫度(25±1)℃;暗培養(yǎng)時溫度為(20±1)℃。當(dāng)苗高長至8cm~12cm、根數(shù)達(dá)到3條~5條、根長3cm~5cm時，將瓶苗轉(zhuǎn)移至溫室馴化培養(yǎng)，覆蓋70%遮陽率的遮陽網(wǎng)5d~7d,而后揭去遮陽網(wǎng)繼續(xù)培養(yǎng)10d～20d,移栽前，打開瓶口放置2d~3d。光照強(qiáng)度宜4000lux~5000lux,白天溫度宜25℃~30℃,夜間溫度不宜低于20℃,取出幼苗，洗凈根部培養(yǎng)基，宜用50%多菌靈可濕性粉劑1000倍液等廣譜殺菌劑浸泡15min,晾栽后具體管理措施詳見附錄A。組培苗質(zhì)量等級見附錄B。4每箱應(yīng)貼上標(biāo)簽，標(biāo)明品種名稱、等級、數(shù)量、產(chǎn)地、出苗日期等，并在紙箱上做好“請勿倒置”運(yùn)輸時