人工授精技術(shù)

1）人工授精設(shè)備。顯微鏡，主要用以檢查家兔精液的質(zhì)量，即精子的密度和活力情況。采精器由外殼、內(nèi)胎、集精杯組裝而成。輸精器由注射器、膠管、輸精管組成。

2）采精方法。先用發(fā)情母兔與被采精公兔進(jìn)行采精爬跨訓(xùn)練，反復(fù)推開公兔，不使其陰莖插入母兔陰道，以提高其性欲，然后便可在公兔籠內(nèi)或采精臺采精。采精時左手抓住母兔雙耳和頸皮（頭朝人的方向）讓公兔爬跨，右手握采精器伸向母兔后腿之間，使假陰道口緊貼母兔陰門下部，輕托母兔臀部，隨時調(diào)整方向讓公兔陰莖插入假陰道射精。一般1只公兔1周采精2-3次。

3）輸精方法。當(dāng)通過顯微鏡對采集的精子進(jìn)行檢查后，便可對發(fā)情母兔輸精。助手保定母兔呈伏臥狀，輸精者左手掀起尾巴，右手將輸精器插入母兔陰道7-8厘米，注入精液0.5亳升。輸精時人坐在高低適中的矮凳上，將兔頭朝下夾在兩腿中間，左手掀開尾巴，右手持輸精器按上述方法輸精。還有倒提法、仰臥法，可靈活使用。人工授精是一種比較先進(jìn)的配種技術(shù)，雖然在牛、羊配種上已經(jīng)廣泛采用，但在兔的生產(chǎn)應(yīng)用上還是近幾年的事情。采用人工授精技術(shù)，一是可以充分發(fā)揮良種公兔的作用，減少公兔飼養(yǎng)量。一次采取公兔的精液可給10只以上母兔輸精，全年一只公兔可負(fù)擔(dān)100~200只母兔的配種任務(wù)。二是能提高母兔的受胎率和產(chǎn)仔數(shù)。三是能減少因交配或接觸而傳播的疾病。實行人工授精時要注意以下幾個問題：

1.消毒：凡可能與精液接觸的器械、用具和母兔外陰部都必須清洗干凈，并嚴(yán)格消毒。耐高溫器皿如集精管、玻璃輸精器等應(yīng)放在160℃干燥箱內(nèi)干燥消毒15分鐘。若用70%的酒精消毒，必須用滅菌生理鹽水沖去殘留酒精，因為酒精對精子具有很強的殺傷力，輸完一只兔后，輸精器應(yīng)消毒后再用，或更換使用另一支消毒過的輸精器（管）。母兔外陰道應(yīng)用浸過生理鹽水或６％葡萄糖沖洗液的紗布或脫脂棉花擦拭干凈。

2.精液稀釋：根據(jù)原精液的活力、密度決定稀釋倍數(shù)。通常情況下，家兔精液多以3~5倍稀釋為宜，保證每毫升精液中有0.2億活力旺盛的精子即可。稀釋方法：用注射器或乳頭膠管吸取溫度在25~30℃的稀釋液，防止精子發(fā)生“休克”。稀釋速度不宜太快。

3.輸精量：一般情況下，母兔一次輸精量為0.3~0.5毫升，輸入的活精子數(shù)理論上要有1000~3000萬個。

4.輸精方法：助手將母兔頭夾于兩膝之間，提起后肢并分開，用生理鹽水棉球擦凈母兔外陰，撥開陰唇。輸精者將事先用沖洗液沖洗過2~3次、已吸取了一定量精液的輸精器沿背側(cè)緩緩插入陰道6~8厘米處（即陰道底部、子宮頸口附近），然后將精液緩緩注入。抽出輸精器后，助手隨即用手掌輕拍母兔臀部，防止精液倒流。

5.排卵刺激：家兔屬刺激性排卵動物，輸精前后，必須對其進(jìn)行排卵刺激處理。目前有兩種方法：

①激素促排。用絨毛膜促性腺激素（HCG）或促黃體素（LH），每晚靜注50單位，在注射后6小時內(nèi)輸精。用促排卵素２號作靜脈注射后立即輸精，可取得50~55%的受胎率。也可用促排卵素3號（LHRA-A3），輸精前肌注0.5微克即可。

采精方法采精是對家兔人工授精的首要一環(huán)。下面就手握假陰道采精和授精方法介紹如下:

1.1假陰道的制作:用直徑5cm左右，長度8cm左右的硬塑料管一支，把兩端銼光，內(nèi)裝與塑管內(nèi)徑相仿的軟海綿一塊，將海綿沿直軸方向打一小孔，孔徑為0.5cm，孔口呈傘形。集精裝可用大號避孕套代替。

1.2采精前的器械準(zhǔn)備:將洗凈、消毒過的避孕套松開，裝入假陰道內(nèi)胎中，使開口的一端翻轉(zhuǎn)，固定在外殼邊緣，有囊的一端露出內(nèi)胎的另一端約1cm，注入50～60℃的溫水中，使海綿吸收，用溫度計蘸取生理鹽水或液石蠟，插入假陰道內(nèi)4cm處測溫。當(dāng)降至43℃左右時即可采精。測溫時要注意外界條件，如氣溫低、降溫快，內(nèi)胎溫度高些；反之可低些。對公兔采精每ld僅采一次，如果兩次，第二次的精子則不成熟。

1.3采精:采精的地點可在公兔籠內(nèi)，左手拿一只母兔誘情，待公兔爬背時，右手呈43°角持假陰道放在母兔后腿中間，待公兔射精后，立即將假陰道孔口朝上，以防精液流失。1.4假陰道泣度對采精效果有直接影響。公兔陰莖對溫度極為敏感，低于40℃不易引起射精；過高溫度采精會養(yǎng)成嗜高溫的壞習(xí)慣，對精液品質(zhì)也有影響。由于母兔的正常體溫在39～4O.5℃之間，因此，假陰道溫度以40～42℃之間為宜。

2精液的檢查與稀釋

2.1精液的檢查

2.1.1外觀檢查:正常公兔的精液呈淡乳白色，具有特殊的腥味，也有少數(shù)兔子的精液不正常，混入尿液的色黃有臭味;生殖器有炎癥出血的帶紅色;清水樣的為無精子。兔子的精量很少，一般在0.2～2mL之間，平均為0.8mL。在實際應(yīng)用中，一般以目測估計。

2.1.2顯微鏡檢查:主要是精子密度的檢查和活力的評定。精子密度是指單位容積內(nèi)所含有的精子數(shù)目。精子數(shù)的計算，直接關(guān)系到授精劑量中含有活精子數(shù)。在實踐中常用目測法。目測法是根據(jù)精子在視野中分布的概況，即精子與精子之間的距離評定為密、中、稀三種等級。這種方法雖是主觀評定，但簡便易行，實際工作中多采用此法。家兔的精子密度隨季節(jié)變化也十分明顯。

精子活力是指精液中直線前進(jìn)運動精子所占百分率。標(biāo)記0.90.80.7……，分別代表90%、80%、70%……的精子具有前進(jìn)運動力。這是一種主觀評定法，有經(jīng)驗的技術(shù)員估計的結(jié)果往往很接近實際數(shù)。兔子的精子活力應(yīng)在0.5級以上方可用于授精。如在0.5級以下則受精率很低。不同季節(jié)的精子活力差異也十分明顯，9至10月平均活力僅0.15級;12月至次年2月平均活力0.51級;3至5月平均活力0.61級。

2.2精液的稀釋精液稀釋的目的首先是為了擴大精液量，增加輸精母兔只數(shù)，同時也是為了延長精子存活時間。在配制稀釋保存液時應(yīng)當(dāng)考慮下列因素。

2.2.1營養(yǎng)成分:精子在代謝過程中主要是單方面的分解作用。成熟的精子不能通過同化作用將外界物質(zhì)變成本身的成分。因此為了補充精子的能量消耗，只有用最簡單的營養(yǎng)物質(zhì)，目前常用的是:果糖、山梨醇、甘油磷酸膽堿(GPC)和磷脂。

2.2.2保護(hù)成分。緩沖物質(zhì)――為了保持精液適當(dāng)?shù)膒H值，常用檸檬酸鈉、酒石酸鉀鈉、磷酸二氫鉀和磷酸氫二鈉等。防冷擊保護(hù)劑――常用的有卵磷脂、卵黃、蛋白陳、乳類。制菌物質(zhì)――常用青霉素(每lmL稀釋液加入500～1000單位)、鏈霉素(每lmL稀釋液加人500～1000μg)。

家兔精子的理想稀釋液廣泛應(yīng)用的是0.9%的氯化鈉或5%的葡萄糖溶液，稀釋倍數(shù)一般為9倍。稀釋時稀釋液的溫度應(yīng)與精液等溫。稀釋液注入集精瓶(袋)的速度不能過快。注入后再用玻璃棒輕輕攪動，使其均勻混合。稀釋后的精液應(yīng)