免疫層析試紙條檢測通則國家市場監(jiān)督管理總局國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會IGB/T40369—2021本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由全國生化檢測標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(SAC/TC387)提出并歸口。1GB/T40369—2021免疫層析試紙條檢測通則本文件適用于免疫層析試紙條的檢測。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文GB19489實驗室生物安全通用要求3術(shù)語和定義3.43.5檢出限limitofdetection靈敏度sensitivity特異性specificity假陽性率falsepositiverate4一般要求試紙條產(chǎn)品應(yīng)附產(chǎn)品說明書或等同的指導(dǎo)性文件。實驗室的生物安全管理應(yīng)符合GB19489中的相應(yīng)要求。2GB/T40369—20214.3檢測指標(biāo)5檢測過程5.1檢測樣品的選擇及制備5.1.1陰性樣品與待分析樣品應(yīng)來源于同一物種，并具有相似的結(jié)構(gòu)特性，包括不含有或方法學(xué)未能檢出目標(biāo)分析物的樣品，以及含有或添加其他與目標(biāo)分析物結(jié)構(gòu)類似物質(zhì)(易產(chǎn)生交叉反應(yīng))的樣品，如需要進(jìn)行前處理，則按試紙條產(chǎn)品說明書的步驟進(jìn)行。5.1.2陽性樣品為通過在陰性樣品中添加目標(biāo)分析物所制備的樣品，若需要進(jìn)行前處理，則按試紙條產(chǎn)品說明書的步驟進(jìn)行。5.1.3陰性樣品和陽性樣品應(yīng)具有基質(zhì)符合性，以及與實際樣品所含除目標(biāo)分析物外其他成分的相似酸堿性等影響檢測的組分進(jìn)行區(qū)分選擇。5.1.4對于多種目標(biāo)分析物的檢測，盡可能對全部目標(biāo)分析物進(jìn)行檢測，若因客觀條件限制不能檢測全部目標(biāo)分析物，宜對所有目標(biāo)分析物進(jìn)行分類(如結(jié)構(gòu)類似程度、危害程度等),每一類至少選擇一種目標(biāo)分析物進(jìn)行檢測。5.1.5陽性樣品或陰性樣品宜采用國家有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、參考物質(zhì)或者質(zhì)量控制品等，選擇適宜的實驗室標(biāo)準(zhǔn)分析方法或經(jīng)典方法對樣品中的目標(biāo)分析物進(jìn)行儀器測定，確認(rèn)所有陰性樣品不能檢出目標(biāo)分析物，確認(rèn)所有陽性樣品中目標(biāo)分析物的濃度。測定完成后的各類樣品應(yīng)進(jìn)行隨機(jī)編號處理，形成盲5.2膜條寬度及液體移行速度隨機(jī)選擇3條試紙條，用游標(biāo)卡尺等符合測量精度要求的儀器測量，重復(fù)測量3次后計算其平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差。隨機(jī)選擇3條及以上試紙條檢測任一樣品，按說明書進(jìn)行操作，從試紙條接觸樣品液開始用秒表計時，至液體達(dá)到檢測區(qū)邊界線時停止計時，記錄所用的時間t,并用游標(biāo)卡尺等符合測量精度要求的儀器測量液體移行區(qū)域的長度，記為L,計算L/t,以其平均值和標(biāo)準(zhǔn)差來表征液體移行速度。5.3操作步驟和結(jié)果計算同一種試紙條產(chǎn)品對不同基質(zhì)中的目標(biāo)分析物的檢測能力不同，需要分別進(jìn)行檢測分析。選擇20個及以上的陰性樣品和20個及以上的陽性樣品進(jìn)行檢測。每個樣品檢測3次。陽性樣品中目標(biāo)分析物添加濃度應(yīng)在試紙條提供的臨界控制值或檢出限波動范圍內(nèi)。所有檢測均按試紙條操作說明書進(jìn)行，測得的結(jié)果如表1所示。GB/T40369—2021表1實際陰性樣品和陽性樣品及試紙條檢測結(jié)果統(tǒng)計表測試樣品實際狀態(tài)試紙條檢測結(jié)果合并陽性陰性陽性(個)ABA+Bb陰性(個)CD合計A+CB+DA+B+C+D注1:A表示陽性樣品經(jīng)試紙條檢測結(jié)果為陽性的個數(shù)。注2:B表示陽性樣品經(jīng)試紙條檢測結(jié)果為陰性的個數(shù)。注3:C表示陰性樣品經(jīng)試紙條檢測結(jié)果為陽性的個數(shù)。注4:D表示陰性樣品經(jīng)試紙條檢測結(jié)果為陰性的個數(shù)。注5:陰性樣品和陽性樣品數(shù)量根據(jù)不同試紙條產(chǎn)品的應(yīng)用進(jìn)行確認(rèn)?！敖?jīng)5.1.5確認(rèn)后的結(jié)果。hA和B合計大于或等于60。C和D合計大于或等于60。5.3.2靈敏度靈敏度以100A/(A+B)%5.3.3特異性特異性以100D/(C+D)%5.3.4假陰性率假陰性率以100B/(A+B)%5.3.5假陽性率假陽性率以100C/(C+D)%5.3.6與參考方法一致性表示。表示。表示。表示。分別采用免疫層析試紙條及目標(biāo)分析物分析參考方法(如國際標(biāo)準(zhǔn)、國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或其他經(jīng)過驗證的方法)進(jìn)行檢測分析，評價兩者所得到的陽性結(jié)果比率是否存在統(tǒng)計學(xué)差異?？刹捎每ǚ?X2)檢驗，按式(1)進(jìn)行計算。式中：C——樣品被免疫層析試紙條檢測為陽性而參考方法檢驗為陰性的數(shù)目；B——樣品被免疫層析試紙條檢測為陰性而參考方法檢驗為陽性的數(shù)目?？ǚ?X2)檢驗結(jié)果按以下方法進(jìn)行分析：小于3.84表示與參考方法的陽性確證比率在95%的置信區(qū)間內(nèi)沒有顯著性差異