TEM制樣-磷鎢酸負(fù)染_第1頁(yè)
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TEM制樣-磷鎢酸負(fù)染_第3頁(yè)
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資料收集于網(wǎng)絡(luò)，如有侵權(quán) 請(qǐng)聯(lián)系網(wǎng)站刪除只供學(xué)習(xí)與交流磷鎢酸用水或磷酸緩沖液配制成1％左右的溶液，用滴管一滴染色液在制好樣品的銅網(wǎng)上，1～2分鐘后，用剪成尖角的濾紙吸去染色液。再滴一滴純水在銅網(wǎng)上，用濾紙吸去，反復(fù)兩三次，這樣是為了洗去多余的磷鎢酸，然后靜置干燥。然后就可以用電鏡觀察了。磷鎢酸中的重原子相對(duì)于有機(jī)分子中的碳?xì)溲醯容p原子來說， 更能阻擋（散射）電子。所以，有磷鎢酸吸附（或沉積）的地方在 TEM照片中看起來更黑，而有機(jī)物占據(jù)的地方看起來更亮。之所以叫“負(fù)染色”，就是因?yàn)楸蝗尽昂凇钡氖潜尘昂屯廨喞?，真正感興趣的樣品部分是“白”的。也就是說，典型的經(jīng)過負(fù)染色的樣品是表現(xiàn)為黑背景中的白區(qū)。一般有機(jī)物并不與磷鎢酸發(fā)生反應(yīng)，磷鎢酸只是沉積在有機(jī)物周圍形成“背景”或“輪廓”。但是不是所有的磷鎢酸染色都是負(fù)染色。有一些羥基和酰胺類會(huì)與磷鎢酸作用，出現(xiàn)正染色的效果，即有些含有這些基團(tuán)的有機(jī)物在TEM下看起來被染“黑”，最典型的是尼龍。另外，有時(shí)候不成功的負(fù)染色，看到的結(jié)果也是“白底黑點(diǎn)”，其實(shí)雖然是做了染色的操作，但可能由于方法不對(duì)，或者樣品本身的性質(zhì)不適用負(fù)染色，結(jié)果跟沒染是一樣的。如果有機(jī)顆粒足夠大，不染色時(shí)就能看到“白底黑點(diǎn)”。另一方面，如果染色很弱，一般只是給有機(jī)顆粒鑲上一個(gè)輪廓，如果染色劑量很大，則會(huì)出現(xiàn)很黑的“背景”。因此，對(duì)于很小的有機(jī)顆粒，如果染色很弱，只是一個(gè)輪廓圈，電鏡放大倍數(shù)不夠的時(shí)候，看起來就是一個(gè)小黑點(diǎn)了。就好像一個(gè)紙上畫一個(gè)空心圈，站遠(yuǎn)了看也可能只供學(xué)習(xí)與交流資料收集于

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