ICS67.040C53中華人民共和國國家標準GB/T5009.89—2003代替GB/T12395-—1990食品中煙酸的測定Determinationofniacininfoods2003-08-11發(fā)布2004-01-01實施中華人民共和國衛(wèi)生部發(fā)布中國國家標準化管理委員會

中華人民共和國國國家標準食品中煙酸的測定GB/T5009.89-2003中中國標準出版社出版發(fā)行北京西城區(qū)復興門外三里河北街16號郵郵政編碼：100045電話：63787337、637874472004年8月第一版2004年11月電子版制作書號：155066·1-21493版權(quán)專有侵權(quán)必究舉報電話：（010)68533533

GB/T5009.89—2003本標準對應于AOAC43.167～43.174(食物中煙酸的微生物測定法》1984年版)。本標準與AOAC43.167～43.174的一致性程度為非等效本標準代替GB/T12395—1990《食物中煙酸的測定方法》。本標準與GB/T12395—1990相比主要修改如下：-修改了標準的中文名稱，標準中文名稱改為《食品中煙酸的測定》按GB/T20001.4—2001《標準編寫規(guī)則第4部分:化學分析方法》對原標準的結(jié)構(gòu)進行了修改。本標準由中華人民共和國衛(wèi)生部提出并歸口。本標準起草單位：中國預防醫(yī)學科學院營養(yǎng)與食品衛(wèi)生研究所本標準主要起草人：王光亞、李小林、沈湘、石磊、楊曉莉。原標準于1990年首次發(fā)布，本次為第一次修訂。

GB/T5009.89—2003食品中煙酸的測定范圍本標準規(guī)定了用微生物方法測定食品中的煙酸含量本標準適用于各類食品中煙酸的測定。本方法檢出限為10ng.線性范圍為0.05g～0.3g。原理某一種微生物的生長，必需某種維生素，例如L.arabiuoss17-5之生長需要煙酸，培養(yǎng)基中若缺乏這種維生素該細菌便不能生長。在一定條件下，該細菌生長的情況，以及它的代謝物乳酸的濃度是與培養(yǎng)基中該維生素含量成正比的，因此可以用酸度或渾濁度的測定法來測定試樣中煙酸的含量武劑3.13.23mol/L鹽酸溶液。3.32.4mol/L鹽酸溶液3.40.5mol/L硫酸溶液。于2000mL的燒杯中先注入700mL水，將28mL硫酸沿燒杯壁慢慢倒入水中,用水稀釋至1000ml。3.50.02mol/L冰乙酸溶液3.610mol/L氫氧化鈉溶液。溶200g氫氧化鈉于水中.稀釋至500mL.3.7_0.1mol/L氫氧化鈉溶液。溶4g氫氧化鈉于水中，稀釋至1000mL.3.825%（體積分數(shù))乙醇溶液3.9酪蛋白：不含維生素。3.9.1不含維生素酪蛋白的制備。乙醇處理法;稱取100g酪蛋白細粉于燒瓶中.加人300mL95%乙醇.在水浴中加熱回流1h.減壓抽濾.棄去濾液，再加入乙醇回流，如此反復3次～4次·至濾液呈微黃色或無色.取出在烘箱內(nèi)70℃~80℃干燥即可。酸洗法：稱取250g酪蛋白·置于5L容器中，慢慢加入3.6L水以防成塊·加入濃鹽酸2.77mL,攪拌浸泡3min。用虹吸管除去上層清液。加入3.6L水.再加入濃硫酸2.77mL.如此反復8次后，再加水3.6L.加入55.5mL12mol/L氨水.放置過夜，使酪蛋白溶解成漿狀。用布過濾.于濾液中慢慢加入約50ml.3mol/L鹽酸,調(diào)至pH4.5,使酪蛋白全部沉淀,過濾。棄去濾液.用50C～60℃熱水沖洗數(shù)次.擠壓去水·放入烤箱內(nèi)于100℃烤干即可。3.10酸解酪蛋白：稱取50g不含維生素的酪蛋白于500mL燒杯中，加200mL.3mol/L鹽酸，于壓力蒸汽消毒器內(nèi)10.3×10"Pa壓力下水解6h。將水解物轉(zhuǎn)移至蒸發(fā)血內(nèi)，在沸水浴上蒸發(fā)至膏狀。加200mL水使之溶解后再蒸發(fā)至膏狀，如此反復3次，以除去鹽酸。注意每次蒸發(fā)時不可蒸干或使之焦湖。用10mol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值至3.5.以溴酚藍作外指示劑。加20g活性炭·振搖，過濾。如果濾液不呈淡黃色或無色，可用活性炭重復處理。濾液加水稀釋至500mL.加少許甲苯于冰箱中保存。3.11生理鹽水;取9g氯化鈉溶于1000mL的水中。每次使用時分別倒入6支～8支10mL試管中,每支約加1