ICS65020

B16.

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T35342—2017

松材線蟲(chóng)分子檢測(cè)鑒定技術(shù)規(guī)程

TechnicalregulationformoleculardetectionofBursaphelenchusxylophilus

SteinerandBuhrerNickle

()

2017-12-29發(fā)布2018-07-01實(shí)施

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T35342—2017

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口

(SAC/TC271)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位南京林業(yè)大學(xué)中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院

:、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人葉建仁吳小芹陳鳳毛葛建軍黃麟孫波

:、、、、、。

Ⅰ

GB/T35342—2017

引言

本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)提請(qǐng)注意聲明符合本文件時(shí)可能涉及和中有關(guān)松材線蟲(chóng)分子檢

,,5.1.25.3.2

測(cè)引物的相關(guān)專利的使用

。

本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)對(duì)于該專利的真實(shí)性有效性和范圍無(wú)任何立場(chǎng)

、。

該專利持有人已向本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)保證他愿意同任何申請(qǐng)人在合理且無(wú)歧視的條款和條件下

,,

就專利授權(quán)許可進(jìn)行談判該專利持有人的聲明已在本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)備案相關(guān)信息可以通過(guò)以下

。。

聯(lián)系方式獲得

:

專利持有人姓名葉建仁

:

地址南京市龍?bào)绰诽?hào)南京林業(yè)大學(xué)

:159,(210037)

請(qǐng)注意除上述專利外本文件的某些內(nèi)容仍可能涉及專利本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別這些專

,。

利的責(zé)任

。

Ⅱ

GB/T35342—2017

松材線蟲(chóng)分子檢測(cè)鑒定技術(shù)規(guī)程

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了松材線蟲(chóng)分子檢測(cè)鑒定的技術(shù)規(guī)程

。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于進(jìn)出境植物檢疫國(guó)內(nèi)植物檢疫以及林業(yè)有害生物調(diào)查中松材線蟲(chóng)及其寄主植物和

、

制品攜帶松材線蟲(chóng)的分子檢測(cè)鑒定工作

。

2術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件

。

21

.

松材線蟲(chóng)pinewoodnematodeBursaphelenchusxylophilusSteineretBuhrerNickle

[()]

一種無(wú)脊椎動(dòng)物屬于線蟲(chóng)門(mén)側(cè)尾腺綱滑刃目滑刃

,(Nematoda)、(Secernentea)、(Aphelenchida)、

總科滑刃科傘滑刃亞科傘滑刃屬

(Aphelenchoidoidea)、(Aphelenchoididae)、(Bursaphelenchinae)、

Bursahelenchus的植物寄生線蟲(chóng)

(p)。

22

.

松材線蟲(chóng)病pinewiltdiseasecausedbypinewoodnematode

又名松樹(shù)萎蔫病是由松材線蟲(chóng)寄生在松樹(shù)體內(nèi)所引起的一種松樹(shù)毀滅性森林病害

,。

23

.

分子檢測(cè)moleculardetection

以功能基因核糖體等區(qū)域?yàn)榘袠?biāo)采用分子生物學(xué)的方法在基因水平上對(duì)物種進(jìn)行鑒定

、ITS,。

24

.

寄主植物及其制品pinewoodandwoodproducts

松材線蟲(chóng)寄主植物及其原木鋸材和用于承載包裝鋪墊支撐加固貨物的木質(zhì)材料如木板箱

、、、、、,、

木條箱木托盤(pán)木框木桶木軸木楔墊木枕木和襯木等經(jīng)人工合成或經(jīng)加熱加壓等深度加工的

、、、、、、、。、

包裝木質(zhì)材料如膠合板纖維板等除外

,、。

25

.

引物primer

一段短核苷酸序列其功能是作為核苷酸聚合作用的起始點(diǎn)在聚合反應(yīng)時(shí)引導(dǎo)合成一條與模板

。,,

互補(bǔ)的的序列

DNA。

26

.

TaqMan探針TaqManprobe

一段寡核苷酸序列兩端分別標(biāo)記一個(gè)報(bào)告熒光基團(tuán)和一個(gè)淬滅熒光基團(tuán)探針完整時(shí)報(bào)告基團(tuán)

,。,

發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收擴(kuò)增時(shí)酶的外切酶活性將探針酶切降解使報(bào)告熒光

;PCR,Taq5'-3',

基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào)即每擴(kuò)增一條鏈就有一個(gè)熒

,,DNA,

光分子形成熒光信號(hào)與擴(kuò)增的拷貝數(shù)具有一一對(duì)應(yīng)的關(guān)系

,。

27