ICS6502001

B16..

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T31800—2015

李痘病毒檢疫鑒定方法

DetectionandidentificationofPlumpoxvirus

2015-07-03發(fā)布2015-11-27實施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會

GB/T31800—2015

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會提出并歸口

(SAC/TC271)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中華人民共和國寧波出入境檢驗檢疫局中華人民共和國廣東出入境檢驗檢疫

:、

局中國檢驗檢疫科學(xué)研究院

、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人陳先鋒張慧麗陳定虎張吉紅徐瑛郭立新聞偉剛楊紅霞杜洪忠吳品珊

:、、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T31800—2015

李痘病毒檢疫鑒定方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了李痘病毒的免疫學(xué)和分子生物學(xué)檢疫鑒定方法

。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于植物材料包括無性繁殖材料組培苗種子花和果實中李痘病毒的檢疫鑒定

,、、、。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析試驗室用水規(guī)格和試驗方法

GB/T6682

植物病毒免疫電鏡檢測方法

SN/T1840

3儀器設(shè)備和主要試劑

31儀器設(shè)備

.

普通儀實時熒光儀酶標(biāo)儀電子天平電泳儀電泳槽凝膠成像系統(tǒng)水

PCR、PCR、、(1/1000g)、、、、

浴鍋臺式高速冷凍離心機超低溫冰箱超凈工作臺高壓滅菌鍋制冰機微波爐渦旋振蕩

、、-80℃、、、、、

器可調(diào)式微量移液器及相應(yīng)的無吸頭無

。(2μL、10μL、100μL、200μL、1000μL、5000μL)RNase、

離心管管和研缽等

RNase、PCR。

32主要試劑

.

除特別規(guī)定外所有實驗用試劑均為分析純實驗用水應(yīng)符合中相關(guān)規(guī)定

,,GB/T6682。

焦碳酸二乙酯液氮三氯甲烷異丙醇乙醇β巰基乙醇反轉(zhuǎn)錄酶

Trizol、(DEPC)、、、、、-、RNA、

Taq聚合酶相對分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)物溴化乙錠瓊脂糖溴酚藍(lán)等雙抗體酶

DNA、SYBRgreenI、DNA、、、。

聯(lián)免疫吸附測定方法檢測試劑配制方法見附錄中

(DAS-ELISA)BB.1。

4檢疫鑒定方法

41癥狀檢查

.

仔細(xì)檢查植株的葉片及花果實果核是否有褪色環(huán)斑畸形等可疑癥狀如果出現(xiàn)了典型癥狀參

、、、、,(

見附錄可采集表現(xiàn)癥狀的花葉片或果實進行后續(xù)檢測

A),、。

42雙抗體酶聯(lián)免疫吸附測定方法DAS-ELISA

.()

具體操作步驟見附錄

DAS-ELISAB。