TCS.65.020.30B41中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T18089—2000藍(lán)舌病微量血清中和試驗(yàn)及病毒分離和鑒定方法Micro-serumneutralizationtest.virusisolationandidentificationforbluetongue2000-04-26發(fā)布2000-10-01實(shí)施國家質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布

GB/T18089-2000前藝藍(lán)舌病(BLU)是一種綿羊、牛、山羊等反臺(tái)動(dòng)物的嚴(yán)重傳染病，可通過檢測血清中抗體的存在，確定動(dòng)物是否感染本病。按國際上通常的方法，瓊脂免疫擴(kuò)散試驗(yàn)和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)用于藍(lán)舌病的定性，血清中和試驗(yàn)用于藍(lán)舌病的定型。本標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)國際常用的方法和我國多年的實(shí)踐.采用雞胚靜脈接種是最為敏感、實(shí)用的病毒分離方法藍(lán)舌病病毒分離物可通過免疫熒光試驗(yàn)進(jìn)行定性鑒定;用病毒中和試驗(yàn)進(jìn)行定型鑒定。本標(biāo)準(zhǔn)是在參考美國、澳大利亞實(shí)驗(yàn)室的檢測規(guī)程和總結(jié)我國在這一領(lǐng)域多年研究和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上制定。本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A是標(biāo)準(zhǔn)的附錄本標(biāo)準(zhǔn)由農(nóng)業(yè)部提出。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：中華人民共和國昆明出入境檢驗(yàn)檢疫局。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：石世區(qū)、張曉丁、徐自忠、徐維加、周曉黎

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)藍(lán)舌病微量血清中和試驗(yàn)及病毒分離和鑒定方法GB/T18089--2000Micro-serumneutralizationtest,virusisolationandidentificationforbluetongue1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了藍(lán)舌病微量血清中和試驗(yàn)及病毒分離和鑒定方法.本標(biāo)準(zhǔn)適用于動(dòng)物感染藍(lán)舌病病毒后中和抗體的檢測及病毒分離和鑒定2引用標(biāo)準(zhǔn)下列標(biāo)準(zhǔn)所包含的條文·通過在本標(biāo)準(zhǔn)中引用而構(gòu)成為本標(biāo)準(zhǔn)的條文。本標(biāo)準(zhǔn)出版時(shí).所示版本均為有效。所有標(biāo)準(zhǔn)都會(huì)被修訂.使用本標(biāo)準(zhǔn)的各方應(yīng)探討使用下列標(biāo)準(zhǔn)最新版本的可能性GB/T6682—1992分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法(eqvISO3696:1987)略語3.1（CPE致細(xì)胞病變作用。3.22TCID.a半數(shù)組織培養(yǎng)感染量、3.3BLP乳糖蛋白陳緩沖肉湯、3.4SPF無特定病原體原理A1血清中和試驗(yàn)原理特異性的血清中和抗體與病毒結(jié)合后，能使病毒失去對敏感細(xì)胞的感染能力,從而阻止病毒的繁殖。這一反應(yīng)不但表現(xiàn)為一種病毒只能被相應(yīng)的免疫血清所中和·而且還表現(xiàn)在中和一定量的病毒·必須有一定效價(jià)的免疫血清。中和試驗(yàn)以測定病毒的感染力為基礎(chǔ),必須選用對病毒敏感的細(xì)胞、動(dòng)物或雞胚為實(shí)驗(yàn)材料,中和抗體滴度的判定以比較病毒受免疫血清中和后的殘存感染力為依據(jù)。藍(lán)舌病病毒感染動(dòng)物后,7天左右出現(xiàn)中和抗體，中和抗體具有高度的型特異性，因此，可通過中和試驗(yàn)對藍(lán)舌病病毒進(jìn)行定型鑒定4.2病毒分離及鑒定原理動(dòng)物感染藍(lán)舌病病毒后4天左右出現(xiàn)病毒血癥，羊的病毒血癥持續(xù)4周左右，牛的病毒血癥持續(xù)8周左右,病毒主要存在于動(dòng)物的紅細(xì)胞內(nèi).并能從精液排毒。在動(dòng)物病毒血癥期，可從其血液、精液和臟器分離到病毒。用特異性熒光抗體做直接免疫熒光試驗(yàn)可對分離毒進(jìn)行