實(shí)驗(yàn)六

維生素C含量的測(cè)定

（2,6-D滴定法）一、目的意義人類營(yíng)養(yǎng)中最重要的維生素之一。缺乏時(shí)引起壞血病。果蔬品質(zhì)的重要指標(biāo)之一。不同栽培條件，不同成熟度都可以影響水果、蔬菜中維生素C的含量。水果、蔬菜保鮮貯藏必須測(cè)定維生素C含量，了解果蔬品質(zhì)量的高低。測(cè)定方法：滴定管活塞操作滴定操作2.6-二氯酚靛酚滴定法滴定操作2.6-二氯酚靛酚滴定法維生素C:強(qiáng)的還原性將染料2.6-D還原成無色的2.6-D2.6-二氯酚靛酚:強(qiáng)的氧化性中性/堿性:藍(lán)色酸性:紅色還原型抗壞血酸氧化型2.6-二氯酚靛酚

（紅色）還原型2.6-二氯酚靛酚（無色）氧化型2.6-二氯酚靛酚（藍(lán)色）

O=C|HO—C‖HO—C|H—C|HO—CH|CH2OHO

O=C|O=C|O=C|H—C|HO—CH|CH2OHO脫氫抗壞血酸=N——O-Cl|O=

|Cl=N——OHCl|O=

|ClN——OHCl|HO

|Cl

——

|HH+OH-三、操作步驟1.樣品提取5g新鮮蔬菜少量2%草酸石英砂充分研磨成勻漿用2%草酸洗入容量瓶,并定容至100mL干燥濾紙過濾快速勻漿？為什么？2.染料標(biāo)定及樣品中Vc測(cè)定試劑（ml）空白染料標(biāo)定1染料標(biāo)定2樣品測(cè)定1樣品測(cè)定22%草酸100000標(biāo)準(zhǔn)Vc0101000樣品提取液00010102,6-D滴定值y1Vy0

取5個(gè)50mL干燥潔凈的三角瓶，編號(hào),按下表操作:

y1---滴定空白所用染料ml數(shù)

y0---滴定樣品所用染料ml數(shù)A---1mL染料溶液相當(dāng)?shù)目箟难岬膍g數(shù)四、結(jié)果計(jì)算樣品重(g)×100×10010抗壞血酸含量（mg/100g鮮重）

=（y0-y1）×A從上述標(biāo)定求出五、注意事項(xiàng)1.Vc不穩(wěn)定，在空氣中易被氧化，研磨時(shí)，盡可能要快，以減少Vc的氧化。2.2%草酸可以有效抑制Vc氧化酶活性。若用樣品含有大量Fe2+，可用8%醋酸溶液提取，因在2%草酸中Fe2+

仍可以還原2,6-D,改用8%醋酸溶液提取，F(xiàn)e2+不會(huì)很快與染料起作用。3.維生素C提取時(shí)要避光、避免與銅鐵接觸，以免Vc氧化。4.樣品提取液定容時(shí)若泡沫太多，可加幾滴乙醚或辛酸、丁醇消除泡沫后再定容。5.當(dāng)樣品本身帶有顏色時(shí)，可以用白陶土脫色。6.

滴定時(shí)間一般不超過2分鐘，滴定終點(diǎn)以淡紅色存在30秒為準(zhǔn)。因?yàn)闃悠分心承╇s質(zhì)亦能還原2,6-D，但速度較Vc慢，假如滴定速度過慢，其它物質(zhì)也會(huì)還原2,6-D。六、思考