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關(guān)于肺部感染的病原體檢查第1頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六實(shí)驗(yàn)前質(zhì)量控制一份不合格的標(biāo)本可能造成所有的努力功虧一簣測(cè)量越準(zhǔn)確,結(jié)果越錯(cuò)誤www.第2頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六分析前誤差占總誤差的比例www.第3頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六標(biāo)本的質(zhì)量是
影響微生物室檢驗(yàn)結(jié)果
最重要的因素“Garbagein,Garbageout.”黃文貴前臺(tái)灣醫(yī)事檢驗(yàn)學(xué)會(huì)理監(jiān)事制作第4頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六送檢標(biāo)本種類與臨床意義臨床意義低的標(biāo)本痰、咽拭子(HI,SP除外)糞便、肛拭子(ADCD除外)臨床意義中等的標(biāo)本尿膿、傷口分泌物臨床有意義的標(biāo)本血、腦脊液、胸腹水、無(wú)菌體液第5頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六痰標(biāo)本的病原學(xué)檢查第6頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六20.11.20227痰液痰液由氣管、支氣管和肺泡所分泌正常情況下分泌物甚少,呼吸道粘膜受刺激時(shí),分泌物增多,但多為清晰、水樣,無(wú)臨床意義。病理情況下痰量增多,呈不透明并有性狀改變。第7頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六20.11.20228標(biāo)本采集方法自然咳痰法支氣管鏡采集法防污染毛刷采集法環(huán)甲膜穿刺經(jīng)氣管吸引法經(jīng)胸壁針穿刺吸引法支氣管肺泡灌洗法第8頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六痰標(biāo)本的正確采集痰液標(biāo)本的采集以清晨為好,因此時(shí)痰量多,含菌量大。在醫(yī)生或護(hù)士指導(dǎo)下取樣。囑病人漱口三遍以除去淺表固有定植菌。指導(dǎo)病人深咳以取得下呼吸道標(biāo)本(而不是唾液及鼻咽部的分泌物
)置于一無(wú)菌容器。注意:咳痰不能做厭氧培養(yǎng)!!!第9頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六20.11.202210標(biāo)本的運(yùn)送痰以深咳排出后,應(yīng)裝于有密封瓶蓋的無(wú)菌塑料容器中,以免感染自己或他人標(biāo)本應(yīng)及時(shí)送檢,室溫≤3h若不能及時(shí)處理,可選擇運(yùn)送培養(yǎng)基運(yùn)送和保存標(biāo)本,但不應(yīng)≥48h第10頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六20.11.202211痰標(biāo)本要求白細(xì)胞(WBC)≥25/LPF鱗狀上皮細(xì)胞(SEC)<10/LPF如不符合上述指標(biāo),應(yīng)重新采樣第11頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六痰涂片革蘭染色,報(bào)告?第12頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六PUMCH:痰涂片染色鏡檢www.第13頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六有意義:①合格痰標(biāo)本培養(yǎng)優(yōu)勢(shì)菌中度以上生長(zhǎng)(》+++);②合格痰標(biāo)本少量生長(zhǎng),但與涂片鏡檢結(jié)果一致(肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、卡他莫拉菌);③多次培養(yǎng)到相同細(xì)菌;第14頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六無(wú)意義:①痰培養(yǎng)有上呼吸道正常菌群的細(xì)菌(如草綠色鏈球菌、表皮葡萄球菌、非致病奈瑟菌、類白喉?xiàng)U菌等);②痰培養(yǎng)為多種病原菌少量(<+++)生長(zhǎng)。第15頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六對(duì)呼吸道標(biāo)本臨床意義的判斷感染?定植(寄植)?污染?鮑曼不動(dòng)桿菌感染與定植比例為1:3.5-12
在ICU中院感控制的意義大于治療本身ICU環(huán)境“無(wú)處不在,無(wú)時(shí)不有”很少有單獨(dú)ABA在HAP感染的病例有統(tǒng)計(jì),ABA相關(guān)的HAP與其它病原感染死亡率并無(wú)顯著差異CLINICALMICROBIOLOGYREVIEWS,July2008,p.538–582第16頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六鮑曼不動(dòng)桿菌在人體的定植率高于感染發(fā)生率DijkshoornL等在Nature發(fā)表的一篇綜述中指出:鮑曼不動(dòng)桿菌在人體定植比感染更為常見(jiàn),在鮑曼不動(dòng)桿菌易感人群也如此NaturePublishingGroup.naturereviews.2007;5:939-951第17頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六PUMCH:痰涂片染色鏡檢www.第18頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六血液標(biāo)本的病原學(xué)檢查第19頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六20.11.202220血培養(yǎng)采血條件體溫過(guò)高(≥38℃)體溫過(guò)低(≤36℃)白細(xì)胞過(guò)多(≥10000/μl),并有核左移現(xiàn)象中性粒細(xì)胞過(guò)少(≤1000/μl)
上述4項(xiàng)中一項(xiàng)或同時(shí)發(fā)生時(shí),應(yīng)進(jìn)行血液培養(yǎng)。第20頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六20.11.202221采血時(shí)間一般在發(fā)熱初期和高峰期采集對(duì)間歇性寒戰(zhàn)或發(fā)熱應(yīng)在寒戰(zhàn)或體溫高峰到來(lái)之前0.5~1h采血最好在未應(yīng)用抗生素之前采血若已應(yīng)用抗生素,應(yīng)在下次應(yīng)用抗生素前采血第21頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六20.11.20222203060Time(min)Chills寒戰(zhàn)BloodCultures血培養(yǎng)BACTEREMIALEVEL菌血癥的水平Temp體溫第22頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六20.11.202223采血部位采血部位通常為肘靜脈對(duì)疑為細(xì)菌性骨髓炎或傷寒病人,在病灶或髂前(后)上棘處消毒后抽取骨髓培養(yǎng)。疑似細(xì)菌性心內(nèi)膜炎時(shí),以肘動(dòng)脈或股動(dòng)脈采血為宜。第23頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六20.11.202224血液采集收集血液作培養(yǎng)時(shí),須特別小心許多微生物,尤其是葡萄球菌屬。通常存在于皮膚表面或近表層處,易污染。應(yīng)作嚴(yán)格皮膚消毒后,采靜脈血70%酒精擦拭靜脈穿刺部位再以碘酊擦拭最后再以70%酒精脫碘第24頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六20.11.202225采血量自動(dòng)化儀器要求通常成人8~10ml/瓶,兒童1~5ml/瓶一份(一套)血培養(yǎng)為2瓶,即1個(gè)需氧瓶和1個(gè)厭氧瓶
采血套數(shù)及血量1套(20ml)2套(40ml)3套(60ml)檢出率65%80%96%Cockrill2004年報(bào)告:163位病人,血培養(yǎng)第25頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六每名患者應(yīng)至少采集2份血培養(yǎng),最好為3份(CLSI規(guī)定采集2~3份血培養(yǎng))在一名敗血癥患者初期診斷時(shí),絕不能只采集1份血培養(yǎng)(CLSI強(qiáng)調(diào)了此觀點(diǎn))注意:1“份”是指一次靜脈穿刺第26頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六每次采集血培養(yǎng)的間隔時(shí)間?每份血培養(yǎng)間隔應(yīng)不超過(guò)5分鐘,因?yàn)榫W(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)對(duì)于一過(guò)性菌血癥和間歇性菌血癥在15~30分鐘內(nèi)可清除(CLSI規(guī)定每份血培養(yǎng)應(yīng)同時(shí)獲得,或盡可能短的時(shí)間內(nèi))對(duì)懷疑亞急性感染性心內(nèi)膜炎,間隔1小時(shí),連續(xù)采集3份血培養(yǎng)第27頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六血培養(yǎng)排名前10位的臨床致病菌細(xì)菌名稱正確污染率不確定金葡大腸埃希菌99.30.00.7凝固酶陰性葡萄球菌12.481.95.8肺克100.00.00.0腸球菌69.916.114.0綠膿肺鏈100.00.00.0白念90.00.010.0草綠鏈38.049.312.7陰溝100.00.00.0第28頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六血液分離的70例凝固酶陰性葡萄球菌
瓶數(shù)PUMCHdata王輝等29第29頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六
微生物培養(yǎng)及藥敏解讀第30頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六
1、我們想用的藥物在藥敏試驗(yàn)中沒(méi)有做?可能是天然耐藥可能是藥物的敏感性被其他藥物所預(yù)報(bào)與臨床溝通中常見(jiàn)問(wèn)題第31頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六
2.為什么有的菌報(bào)告很多種藥物,有的僅報(bào)告幾種藥物?報(bào)告的藥物種類根據(jù)細(xì)菌種類的不同而有所不同,如銅綠假單胞菌報(bào)告的藥物較多,而嗜麥芽窄食單胞菌報(bào)告的藥敏較少與臨床溝通中常見(jiàn)問(wèn)題第32頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六
3、是否能將所用的藥都做藥敏試驗(yàn)?沒(méi)有必要:通過(guò)耐藥機(jī)制和標(biāo)志性藥物可以預(yù)測(cè)其他抗菌藥物的敏感性沒(méi)有可能:不是所用藥物都可以做藥敏試驗(yàn)(需要藥物在體外穩(wěn)定,需要有操作標(biāo)準(zhǔn)和解釋標(biāo)準(zhǔn))與臨床溝通中常見(jiàn)問(wèn)題第33頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六
4、在藥敏試驗(yàn)報(bào)告中MIC越小的抗菌藥物效果越好嗎?如何根據(jù)MIC聯(lián)合用藥?感染菌對(duì)同一種藥物的MIC越小,效果越好不同種抗菌藥物之間MIC無(wú)可比性目前很多儀器報(bào)告的是檢測(cè)折點(diǎn),而不是真正的MIC與臨床溝通中常見(jiàn)問(wèn)題第34頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六與臨床溝通中常見(jiàn)問(wèn)題5、培養(yǎng)陽(yáng)性的細(xì)菌都需要用抗菌藥物治療嗎?不是的培養(yǎng)陽(yáng)性感染,可能為污染(血培養(yǎng)),可能為定植(痰培養(yǎng))任何結(jié)果必須結(jié)合臨床情況進(jìn)行評(píng)價(jià)(很重要)感染部位的清創(chuàng)、引流、換藥比使用抗菌藥物更加重要改善患者全身情況:器官功能支持,糾正酸堿平衡,電解質(zhì)紊亂,低蛋白血癥,高血糖等第35頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六
6、選擇藥敏報(bào)告敏感的藥物,為什么臨床治療無(wú)效?
體外藥敏試驗(yàn)只能預(yù)測(cè)體內(nèi)治療效果,并不等同;一般來(lái)說(shuō),耐藥=治療無(wú)效;敏感≠治療有效??赡懿皇钦嬲闹虏【ㄎ廴净蚨ㄖ簿┘?xì)菌本身因素(如誘導(dǎo)耐藥,生物被膜)感染部位與藥代動(dòng)力學(xué)因素細(xì)菌的MIC,給藥劑量和用藥方式藥敏試驗(yàn)藥物中有些藥物單獨(dú)使用無(wú)效,但可以與其他藥物聯(lián)合用藥藥物劑型及生物利用度(純品、商品)與臨床溝通中常見(jiàn)問(wèn)題第36頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六7、涂片鏡檢結(jié)果與培養(yǎng)結(jié)果不吻合?涂片鏡檢是報(bào)告所有檢見(jiàn)的細(xì)菌,而培養(yǎng)的目的是檢出致病菌。一些苛氧菌需在特殊的環(huán)境或培養(yǎng)基上才能生長(zhǎng)。與臨床溝通中常見(jiàn)問(wèn)題第37頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六
8、取的明顯就是膿液標(biāo)本,為何鑒定報(bào)告為無(wú)菌生長(zhǎng)?我們做的是有氧培養(yǎng),膿液可能為厭氧菌感染??赡芗?xì)菌被大量的中性粒細(xì)胞吞噬。與臨床溝通中常見(jiàn)問(wèn)題第38頁(yè),共41頁(yè),2022年,5月20日,0點(diǎn)41分,星期六
9、鑒定結(jié)果明明寫(xiě)著四聯(lián)球菌、革蘭氏陽(yáng)性桿菌,為何沒(méi)有藥敏結(jié)果?四聯(lián)球菌為微球菌,一般不
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