1、兒童病毒感染研究進展演示文稿第一頁，共三十三頁。優(yōu)選兒童病毒感染研究進展第二頁，共三十三頁。EB病毒分子生物學特征EB病毒屬于一種雙鏈DNA病毒，兩種形式：線狀DNA（可整合于宿主DNA）與環(huán)狀DNA（游離體）形態(tài)：呈球形，直徑：150180nm，最外層為脂蛋白包膜，包膜內是對稱的20面體核衣殼，由162個管狀粒組成，核衣殼內有直徑為45nm的致密體，內含病毒基因組基因結構：由DNA順序長區(qū)段（UL）構成（可分為5段），其中摻雜一短區(qū)段（US）的重復，兩端有末端重復序列（TR）第三頁，共三十三頁。EB病毒抗原基因組為172000bp，編碼五種病毒蛋白:殼抗原（Viral capsid anti

2、gen, VCA)膜抗原（Membrane antigen, MA)早期抗原（early antigen, EA)補體結合抗原（即可溶抗原S）病毒相關核抗原（ EBV associated nuclear antigen, EBNA):第四頁，共三十三頁。流行病學史EBV感染世界各地均有發(fā)生傳染源：隱性感染者和患者傳播途徑：通過口咽分泌物經密切接觸傳染易感染人群：普遍易感，90%的成人在兒童時期曾有無癥狀感染根據血清學調查，我國35 歲兒童的EBV VCA-IgG 抗體陽性率達90%以上第五頁，共三十三頁。EB病毒感染易感細胞：B細胞部位：呼吸道粘膜感染途徑：病毒外膜糖蛋白gp350/ 220

3、與CD21結合（補體分子C3d受體），通過受體介導的細胞內吞作用進入被感染細胞 第六頁，共三十三頁。第七頁，共三十三頁。EB病毒感染形式EB病毒感染ABD隱性感染溶細胞性感染轉化細胞C缺陷性感染第八頁，共三十三頁。隱性感染I 型隱性感染：出現在BL 的惡變細胞中,病毒產物有EBNA1 和EBER; II 型隱性感染：涉及鼻咽癌和何杰金氏病(HD) ,病毒產物有EBNA1、LMP1、LMP 2、EBER 和BamHI A 片段的轉錄產物等III 型隱性感染：見于免疫抑制患者的漿細胞淋巴瘤細胞,病毒隱性感染期的6 種EBNA、3 種LMP和兩種EBER 均可以被檢測到 I V 型隱性感染：僅發(fā)生在

4、健康的病毒攜帶者B 淋巴細胞中,這些細胞中含有EBNA1、LMP2以及EBER1 RNA。第九頁，共三十三頁。溶細胞性感染環(huán)狀DNA解鏈成線狀DNA表達病毒復制蛋白如早期蛋白、晚期蛋白細胞溶解，釋放子代病毒第十頁，共三十三頁。缺損性感染 不完整的病毒基因組缺損性感染能夠利用細胞間的傳遞方式進行擴散多見于免疫部分缺陷者第十一頁，共三十三頁。細胞轉化B細胞轉化：靜止B淋巴細胞，當感染EB病毒后，10%左右可轉化為淋巴母細胞樣細胞系（LCL）；NK細胞轉化T細胞轉化第十二頁，共三十三頁。EB病毒感染ABD淋巴細胞增生性疾病非淋巴細胞的惡性腫瘤自身免疫 性疾病EB病毒感染所致疾病C原發(fā)感染第十三頁，共

5、三十三頁。傳染性單核細胞增多癥（Infectious mononucleosis , IM ）由EBV感染引起的淋巴細胞良性增生性疾病典型表現：發(fā)熱、咽峽炎、淋巴結腫大、肝脾腫大、皮膚黏膜皮疹、外周血淋巴細胞增多并出現異型淋巴細胞（為EBNA陽性的B細胞）嬰幼兒期不典型（不能對EB病毒產生充分的免疫反應）本病可侵犯全身多個臟器，臨床呈多樣化，易誤診、臨床類型：咽炎型、腺熱型、淋巴結腫大型、肺炎型、肝炎型、胃腸型、腎炎型、皮疹型、腦炎型、心臟型及生殖腺型等；并發(fā)癥：咽部繼發(fā)性感染、脾破裂、胃腸道出血、自身免疫溶血性貧血、再障、粒細胞缺乏癥及血小板減少癥等第十四頁，共三十三頁。第十五頁，共三十三頁

6、。腭扁桃體淋巴組織增生慢性扁桃體炎部分病原是由EBV感染所致30 多例腭扁桃體淋巴組織增生組織的EB 病毒檢測，幾乎100% 的切片中可見個別或少數EBERs陽性B 淋巴細胞的存在呈EA-D 原位雜交陽性, 即呈EB 病毒溶解性感染巢式PCR 顯示, 所檢測到的EB 病毒可以是30 bp 缺失型LMP1 株第十六頁，共三十三頁。連鎖淋巴細胞增生綜合征(X-linked lymphoproliferative syndrome , XLP) XLP 是一種與EB病毒感染相關的以性連鎖免疫缺陷為特征的家族性遺傳病 XLP為SH2PIa基因突變所致，SH2PIa基因編碼T細胞及NK細胞信號傳導的蛋白

7、質，突變可致T細胞失控性增生主要臨床特征為EBV感染后出現骨髓危象、低丙種球蛋白血癥及淋巴細胞增生綜合征大約有75%在發(fā)病后幾周內死于致死性IM,包括失控的惡性淋巴瘤或B淋巴細胞惡性增生浸潤器官的衰竭第十七頁，共三十三頁。病毒相關的噬血細胞綜合征( Virus-associated Hemophagocytic syndrome , VAHS) 噬血細胞綜合征是以組織中組織細胞顯著增生及血細胞顯著的吞噬作用為共同特點、在組織學基礎上命名感染性噬血細胞綜合征目前認識到可有細菌、病毒、或霉菌感染所致，其中EBV最常見病理機制：感染導致NK細胞功能低下或缺如，導致抗原驅動T 細胞持久激活和巨噬活化因

8、子產生，分泌超量的細胞因子（細胞因子風暴）,使T 淋巴細胞及巨噬細胞本身處于失去控制的活化狀態(tài)第十八頁，共三十三頁。VAHS診斷標準 (1) 發(fā)熱超過1周,熱峰3815 ; (2) 脾臟腫大(肋下3 cm) ; (3) 全血細胞減少(非骨髓增生減低引起的2 或3 系細胞減少) ,血紅蛋白 90 g/ L ,血小板 100 109 / L ,中性粒細胞 1 109 / L ; (4)高甘油三酯( TG) 血征和(或) 低纖維蛋白原血征(空腹TG 210 mmol/ L 或大于同年齡正常值的3 個標準差,纖維蛋白原115 g/ L 或小于同年齡正常值的3 個標準差) ; (5) 組織病理學改變?yōu)槠?/p>

9、、淋巴結、骨髓組織細胞增生并見噬血細胞現象,無惡性腫瘤證據。（6）自然殺傷細胞(N K) 活性降低或缺乏（7）高鐵蛋白血征( 500g/ L) （8）可溶性CD25 升高( 2400 IU/ ml)第十九頁，共三十三頁。慢性活動性EB 病毒感染( chronic active EB virus infection) 定義：是一種EB 病毒感染后異?？笶BV 抗體增高和EBV-DNA 升高，可出現慢性或復發(fā)性傳染性單核細胞增多癥樣癥狀，同時易發(fā)展為淋巴瘤、病毒相關噬血細胞綜合征、間質性肺炎、中樞神經系統(tǒng)病變進而發(fā)展為多臟器衰竭的的淋巴組織增生性疾病。第二十頁，共三十三頁。CAEBV 的發(fā)病機制宿

10、主免疫調節(jié)紊亂 B淋巴細胞 T淋巴細胞 NK 細胞 穿孔素基因突變 病毒基因的調節(jié)紊亂 染色體畸變第二十一頁，共三十三頁。CAEBV 的臨床特征三大突出表現：持續(xù)或間斷發(fā)熱、肝脾腫大和淋巴結病其他常見的臨床癥狀和體征：定期或持續(xù)疲勞，咽喉痛疼，淋巴結觸痛、貧血、肌肉酸痛、關節(jié)痛、牛痘樣水皰及蚊蟲過敏第二十二頁，共三十三頁。CAEBV的合并癥血液系統(tǒng)：感染相關性噬血細胞綜合征、血小板減少性紫癜、彌散性血管內凝血病、白血病、T 細胞和NK 細胞淋巴瘤等；呼吸系統(tǒng)：間質性肺炎和胸腔積液；中樞神經系統(tǒng)：急性和慢性損害，急性損害包括腦炎、腦膜炎、腦膜腦炎和末梢神經炎等，慢性損害表現為感染后炎癥反應造成腦

11、組織脫髓鞘樣改變，臨床出現慢性、反復性中樞神經系統(tǒng)癥狀消化系統(tǒng)：消化道潰瘍、腹瀉、肝炎、肝硬化和肝功能衰竭眼睛：可致突眼癥，視網膜炎皮膚：除了牛痘樣水皰及蚊蟲過敏外，還可表現為各種皮損如干燥綜合征、不典型皮疹及口腔潰瘍等心血管：冠狀動脈瘤、心瓣膜病、心肌炎、心內膜炎、脈管炎，其中以冠狀動脈瘤、心瓣膜病最為常見其他：腎損傷、膿毒癥等第二十三頁，共三十三頁。CAEB分型根據CAEBV 病變細胞膜免疫分為二類型： T 細胞亞型：最常見，較重、進展較快。 臨床特征：高熱及高滴度EBV相關抗體，易發(fā)生肝腫大和淋巴結病，此型可能與EBV 裂解期感染有關。 病理機制：主要是T 細胞的激活及細胞因子如IFN-

12、、TNF-的釋放導致了嚴重的炎癥反應及發(fā)熱 NK 細胞亞型：較輕、進展慢。 臨床特征：以蚊蟲過敏及相應的皮膚損害、骨髓或外周血中大顆粒樣異常淋巴細胞增多及IgE 增高為其特征。 病理機制：外周血中IL-13 明顯增高，IL-13 為TH2 細胞分泌因子，能促進B 淋巴細胞分化，從而分泌抗體并轉化為IgE 抑制巨噬細胞和單核細胞的細胞毒性功能第二十四頁，共三十三頁。CAEBV實驗室檢查外周血像：各類血細胞減少，外周血一系或多系減少，其中以是血紅蛋白和血小板減少多見，少部分患者白細胞和血小板會升高。肝功能：血清轉氨酶升高，可占90%以上。其他較常見的有高膽紅素血癥（主要是間膽升高為主）、白蛋白降低

13、、高甘油三酯血癥。凝血功能：有凝血功能障礙時表現為凝血酶原時間（PT）延長、部分凝血活酶時間（APTT）延長、纖維蛋白原（FIB）下降、D二聚體升高骨髓檢查：骨髓像提示多數病例為正常骨髓像，一些病例表現為血細胞減少。如并發(fā)噬血細胞綜合征，活動期可發(fā)現骨髓中有明顯組織細胞增多伴噬血現象，但無惡變證據影像學檢查：針對受累器官進行影像學檢查第二十五頁，共三十三頁。CAEBV診斷標準 I. EBV 感染開始癥狀一直持續(xù)6 個月以上，EBV 抗體滴度異常（包括抗VCA-IgG 15120，抗EA 抗體1640 或EBNA 抗體12II. 主要臟器受損的組織學標志包括如間質性肺炎、骨髓某成分的增生不良、視

14、網膜炎、淋巴結炎、腦膜腦炎、遷延性肝炎、脾腫大；III. 證實受損組織中EBV 數量增加：受損組織中EB病毒 DNA、EB病毒 RNA或蛋白增多 或外周血中EB病毒 DNA水平增高 診斷CAEBV需滿足上述每一項中的至少一條;并排除任何已知的免疫功能低下包括HIV感染第二十六頁，共三十三頁。SCAEBV診斷標準臨床表現： 間歇性發(fā)熱，淋巴結病，肝脾腫大血液系統(tǒng)損害：貧血，血小板減少，淋巴細胞減少或增多， 中性粒細胞減少，多克隆丙種球蛋白病病毒學方面：下列抗體滴度增高和陽性 （1）VCA-IgG 5120，VCA-IgA 陽性， EAD-IgG640，EAD-IgA 陽性，EAD 和EAR Ig

15、G 均 640 （2）受損組織中檢測出EBV 基因其他： 無法用其他疾病解釋的慢性病程（6 個月）注：診斷SCAEBV 需滿足上述每項中的至少1 條；SCAEBV 患者隨后有可能發(fā)展為B 或T細胞淋巴異常增殖性疾病第二十七頁，共三十三頁。EBV感染的實驗室診斷抗體檢查：抗原檢查：基因診斷技術第二十八頁，共三十三頁。 第二十九頁，共三十三頁。抗體的臨床意義VCA - IgM抗體在感染早期出現, 可持續(xù)數周到3個月 VCA - IgG在病程進入恢復期后滴度下降, 以低水平維持終身VCA - IgA在急性期以及有病毒點力時出現, 陽性率低于IgMEA是病毒增殖的標志, EA抗體在原發(fā)感染恢復期和潛伏

16、感染再活化期出現, 其出現略遲于VCA - IgM, 持續(xù)數月至1年EBNA - 1 IgG：病毒基因組處于潛伏狀態(tài), 此時細胞只合成EBV 核抗原EBV感染四種組合抗體檢查：VCA - IgM、VCA - IgG、EA -IgG、 EBNA - 1 - IgG)第三十頁，共三十三頁。EBV viral load in whole blood reflects clinical status in patients with infectious mononucleosis, allogeneic transplant, and nasopharyngeal carcinoma第三十一頁，共三十三頁。EBV感染的治療無特效治療方法抗病毒治療：阿昔洛韋、更昔洛韋抑制DNA 聚合酶及病毒在裂解感染時的復制?？墒共《据d量下降，但作用短暫，停藥后病毒載量復又上升。而且通常對臨床癥狀和體征無明顯改善抗B 淋巴細胞（抗CD21 和CD24）抗體被表明對EBV 相關性B 細胞淋巴組織增生的移植