1、項(xiàng)目名稱: 蛋白質(zhì)糖基化修飾在胚胎著床及生殖醫(yī)學(xué)疾病中的作用與應(yīng)用一、提名意見(jiàn)提名意見(jiàn)：聚焦我國(guó)生殖健康領(lǐng)域，開(kāi)展以揭示影響人類生殖、生命早期發(fā)育、妊娠結(jié)局主要因素為目的的研究，建立有效 生殖健康疾病早期篩查、診治的防治平臺(tái)。 糖基化是蛋白質(zhì)翻譯后重要的修飾過(guò)程，賦予蛋白質(zhì)介導(dǎo)細(xì)胞識(shí)別、黏附功能。細(xì)胞表面70%蛋白被糖基化修飾 ，細(xì)胞表面受體均為糖蛋白。 孔英教授團(tuán)隊(duì)，20年來(lái)圍繞糖基化修飾蛋白表達(dá)、調(diào)控及在“侵入能力胚胎形成、容受性子宮內(nèi)膜建立、滋養(yǎng)層 細(xì)胞分化、胎盤血管生成及相關(guān)疾?。ㄗ影B前期、流產(chǎn)）中作用，形成“糖生殖生物學(xué)”研究特色。 研究揭示：胚胎及子宮內(nèi)膜表面糖基化修飾蛋白（LeY

2、 glycan、OPN）特異表達(dá)；糖基化修飾受糖基轉(zhuǎn)移酶調(diào)控 ；糖蛋白表達(dá)變化影響胚胎發(fā)育速度、質(zhì)量，作為信息分子調(diào)控“母、胎”識(shí)別、黏附；建立單胚胎培養(yǎng)液糖蛋 白分泌量檢測(cè)方法，檢測(cè)胚胎不同 LeY 糖分泌水平作為功能性指標(biāo)應(yīng)用于臨床 IVF移植前胚胎除形態(tài)學(xué)之外評(píng)價(jià) 指標(biāo)，在國(guó)家生殖醫(yī)學(xué)中心應(yīng)用。糖蛋白與滋養(yǎng)層細(xì)胞分化異常疾病相關(guān)。 “糖生殖生物學(xué)”連續(xù)獲批10項(xiàng)國(guó)自然基金資助（主持人5項(xiàng)），課題組培養(yǎng)博士、碩士研究生60余人，通訊作者 發(fā)表相關(guān) SCI 論文50余篇，參加學(xué)術(shù)交流10 次，成果納入國(guó)自然成果專著糖鏈與生殖。2017 年項(xiàng)目獲大連市 科技進(jìn)步一等獎(jiǎng)提名該項(xiàng)目為遼寧省科學(xué)技術(shù)

3、進(jìn)步獎(jiǎng) 二 等獎(jiǎng)。二、主要知識(shí)產(chǎn)權(quán)證明目錄（不超過(guò)10件）序號(hào)合作方式合作者合作時(shí)間合作成果證明材料備注1科技獎(jiǎng)勵(lì)孔英、隋琳琳、燕秋、樊建慧、徐躍飛、董明、謝云鵬、嚴(yán)濱2004-20172017大連市科技進(jìn)步一等獎(jiǎng)“蛋白質(zhì)糖基化修飾在胚胎發(fā)育及著床調(diào)控中的作用與應(yīng)用”見(jiàn)其他附件252論文合著孔英、謝云鵬、隋琳琳2011-2015Osteopontin Promotes Invasion, Migration and Epithelial-Mesenchymal Transition of Human Endometrial Carcinoma Cell HEC-1A Through AKT a

4、nd ERK1/2 Signaling, CELLULAR PHYSIOLOGY AND BIOCHEMISTRY. 37(4): 1503-1512，2015見(jiàn)其他附件173共同知識(shí)產(chǎn)權(quán)孔英 燕秋2007糖鏈與生殖科學(xué)出版社出版，國(guó)家自然科學(xué)基金成果專著見(jiàn)核心附件-2專著4論文合著孔英、謝云鵬、隋琳琳、徐躍飛、嚴(yán)濱（共同通訊）2008-至今Regulation and expression of FOXO1 and FOXO3 in endometrial tissue during the menstrual cycle of human and mouse.International J

5、ournal of Clinical and Experimental Medicine，2016.，9（2）：13221329 ; SCI見(jiàn)其他附件195論文合著孔英、隋琳琳、謝云鵬2008-至今Expression of AQP3 in the mice endometrium during estrous cycle and early pregnancy.International Journal of Clinical and Experimental Pathology，2016.1.1，9（8）：80378046 ; SCI見(jiàn)其他附件106論文合著孔英、謝云鵬、董明、徐躍飛、隋琳

6、琳2008-至今Wnt/beta-catenin Signaling Pathway Regulates beta1, 4-galactosyltransferase I Expression on the Endometrium to Affect the Embryo Implantation. Int J Clin Exp Patho.，2017. 10（2）：17561764 ; SCI見(jiàn)其他附件157論文合著孔英、謝云鵬、徐躍飛、隋琳琳2008-至今Induction of forkhead box M1 (FoxM1) by EGF through ERK signaling pa

7、thway promotes trophoblast cell invasion .CELL AND TISSUE RESEARCH，362(2): 421-430，2015見(jiàn)其他附件108論文合著孔英、樊建慧、徐躍飛、謝云鵬2006-至今.Regulatory function of beta 1,4-galactosyltransferase I expression on Lewis-Y glycan and embryo implantation. GENE.3，220-225，2015見(jiàn)其他附件139論文合著孔英、樊建慧、徐躍飛、謝云鵬2006-至今HCG induces 1,4-G

8、alTexpression and promotes embryo implantation. Int J Clin Exp Pathol 8 ( 5): 4673 4683，2015見(jiàn)其他附件1010論文合著孔英、謝云鵬2009-至今1.OPN Induces FoxM1 Expression and Localization through ERK 1/2, AKT, and p38 Signaling Pathway in HEC-1A Cells.INTERNATIONAL JOURNAL OF MOLECULAR SCIENCES DEC 23345-23358，2014見(jiàn)其他附件1

9、0三、主要完成人情況表姓 名孔英排 名1行政職務(wù)副院長(zhǎng)技術(shù)職稱教授工作單位大連醫(yī)科大學(xué)完成單位大連醫(yī)科大學(xué)、大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院、大連市婦女兒童醫(yī)療中心對(duì)本項(xiàng)目技術(shù)創(chuàng)造性貢獻(xiàn)： 從事生殖糖生物學(xué)研究20年，負(fù)責(zé)研究總體設(shè)計(jì)，基金申報(bào)、項(xiàng)目實(shí)施、研究生培養(yǎng)、數(shù)據(jù)分析、論文發(fā)表。制備妊娠、假孕、激素調(diào)控去卵巢動(dòng)物模型，收集不同發(fā)育階段胚胎及不同狀態(tài)子宮內(nèi)膜，利用糖特異單抗或凝集素，分析、確定特異糖基轉(zhuǎn)移酶表達(dá)、調(diào)控、糖蛋白合成分析，觀察蛋白質(zhì)糖基化修飾對(duì)胚胎發(fā)育速度、孵化率、黏附、擴(kuò)展及植入率等影響，本項(xiàng)目引用論文的責(zé)任作者。 以通訊作者發(fā)表SCI論文20篇，主持本項(xiàng)目2017年獲大連市科技進(jìn)

10、步獎(jiǎng)一等1.首次明確“侵入能力胚泡”及“接受狀態(tài)子宮內(nèi)膜”表面特異巖藻寡糖蛋白(LeY)持續(xù)高表達(dá)，調(diào)控胚胎著床：LeY 在小鼠胚胎16細(xì)胞出現(xiàn)，著床期持續(xù)高表達(dá)，提示參與胚胎著床；利用體內(nèi)外著床模型（早孕模型、假孕模型），封閉胚胎表面LeY聚糖可阻斷母、胎間識(shí)別、降低著床率；封閉LeY影響胚胎及子宮內(nèi)膜MMPs、EGF、LIF等著床因子表達(dá)，提示LeY作為信息分子調(diào)控胚胎著床。2.LeY 表達(dá)高低影響胚胎發(fā)育速度：糖蛋白在胚泡及子宮內(nèi)膜表達(dá)呈現(xiàn)規(guī)律性變化；調(diào)控特異糖基轉(zhuǎn)移酶FUT、1、4可影響胚泡及子宮內(nèi)膜糖蛋白LeY 合成；并進(jìn)一步影響胚胎發(fā)育、增殖、分化及著床潛力；3.首次建立單胚胎培養(yǎng)

11、液檢測(cè)蛋白分泌量方法：胚胎體外培養(yǎng)，著床相關(guān)因子分泌，免疫化學(xué)發(fā)光印記可檢測(cè)到發(fā)育時(shí)期、狀態(tài)相同的A級(jí)單個(gè)胚胎有不同的LeY聚糖、MMPs等著床因子的分泌水平；高表達(dá)LeY 糖蛋白胚泡具有較強(qiáng)著床潛能；4.臨床IVF移植的胚胎LeY糖蛋白分泌水平較高：研究顯示移植前體外培養(yǎng)的不同發(fā)育階段胚胎培養(yǎng)液，同為A級(jí)胚胎具有不同LeY分泌水平；選擇移植的胚胎LeY糖蛋白分泌水平較高； 5.單胚胎培養(yǎng)液特異糖蛋白表達(dá)應(yīng)用于IVF的相關(guān)臨床醫(yī)院作為輔助優(yōu)質(zhì)胚胎選擇的新指標(biāo)。主要完成人情況表姓 名隋琳琳排 名2行政職務(wù) 技術(shù)職稱副教授工作單位大連醫(yī)科大學(xué)完成單位大連醫(yī)科大學(xué)、大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院、大連市婦

12、女兒童醫(yī)療中心對(duì)本項(xiàng)目技術(shù)創(chuàng)造性貢獻(xiàn)： 構(gòu)建糖基轉(zhuǎn)移酶基因調(diào)控質(zhì)粒，利用子宮內(nèi)膜癌RL952/HEC-1A 細(xì)胞模擬高/低接受態(tài)子宮內(nèi)膜，以人絨毛膜癌細(xì)胞(JAR)-模擬著床前胚胎，建立著床模型，明確糖基轉(zhuǎn)移酶表達(dá)、調(diào)控與侵入性胚胎、接受性建立的相關(guān)性，檢測(cè)胚胎發(fā)育及著床，協(xié)助研究生指導(dǎo)，論文發(fā)表。作為主要完成人參與本項(xiàng)目2017年獲大連市科技進(jìn)步獎(jiǎng)一等獎(jiǎng)主要完成人情況表姓 名謝云鵬排 名3行政職務(wù) 技術(shù)職稱副研究員工作單位大連醫(yī)科大學(xué)第二臨床學(xué)院完成單位大連醫(yī)科大學(xué)、大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院、大連市婦女兒童醫(yī)療中心對(duì)本項(xiàng)目技術(shù)創(chuàng)造性貢獻(xiàn)： 2009年進(jìn)入本課題組攻讀碩士、博士學(xué)位，2015年

13、畢業(yè)。期間圍繞第一、二、五創(chuàng)新點(diǎn)，探討特異糖蛋白、糖 基轉(zhuǎn)移酶、轉(zhuǎn)錄后加工修飾在胚胎發(fā)育及著床調(diào)控中的作用，建立了高低接受態(tài)子宮內(nèi)膜細(xì)胞RL-952及模擬胚 胎的JAR細(xì)胞的體外胚胎著床模型，拓寬了胚胎發(fā)育及著床調(diào)控機(jī)制研究的廣度與深度。攻讀學(xué)位期間發(fā)表相 關(guān)論文9篇，其中以第一作者身份發(fā)表論文4篇。（附件13、15-17、19、23）主要完成人情況表姓 名燕秋排 名4行政職務(wù) 主任技術(shù)職稱教授工作單位大連醫(yī)科大學(xué)完成單位大連醫(yī)科大學(xué)、大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院、大連市婦女兒童醫(yī)療中心對(duì)本項(xiàng)目技術(shù)創(chuàng)造性貢獻(xiàn)： 從事生殖醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究30年，負(fù)責(zé)免疫組化檢測(cè)糖蛋白在不同發(fā)育時(shí)期胚胎的表達(dá)，分析與胚胎

14、發(fā)育速度的關(guān)系，協(xié)助研究生指導(dǎo)。分析蛋白質(zhì)糖基化表達(dá)與生殖醫(yī)學(xué)疾病研究，以通訊作者共同發(fā)表SCI論文40篇，作為主要完成人參與本項(xiàng)目2017年獲大連市科技進(jìn)步獎(jiǎng)一等獎(jiǎng)主要完成人情況表姓 名邵小光排 名5行政職務(wù) 技術(shù)職稱主任醫(yī)師工作單位大連市婦女兒童醫(yī)療中心完成單位大連醫(yī)科大學(xué)、大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院、大連市婦女兒童醫(yī)療中心對(duì)本項(xiàng)目技術(shù)創(chuàng)造性貢獻(xiàn)： 從事生殖醫(yī)學(xué)、胎兒醫(yī)學(xué)、遺傳診斷學(xué)臨床與基礎(chǔ)研究30年，負(fù)責(zé)研究項(xiàng)目實(shí)施、臨床樣品收集、免疫組化蛋白表達(dá)分析、數(shù)據(jù)分析、論文發(fā)表。觀察臨床增生期、分泌期子宮內(nèi)膜蛋白質(zhì)糖基化表達(dá)，將單胚胎培養(yǎng)液檢測(cè)蛋白分泌量方法應(yīng)用于檢測(cè)移植前體外培養(yǎng)的不同發(fā)育階

15、段胚胎培養(yǎng)液，同為A級(jí)胚胎具有不同LeY分泌水平；選擇移植的胚胎LeY糖蛋白分泌水平較高；單胚胎培養(yǎng)液特異糖蛋白表達(dá)應(yīng)用于IVF的相關(guān)臨床醫(yī)院作為輔助優(yōu)質(zhì)胚胎選擇的新指標(biāo)。以通訊作者共同發(fā)表SCI論文1篇（IF 5.104）作為主要完成人參與本項(xiàng)目2017年獲大連市科技進(jìn)步獎(jiǎng)一等獎(jiǎng)主要完成人情況表姓 名樊建慧排 名6行政職務(wù) 技術(shù)職稱副教授工作單位大連醫(yī)科大學(xué)完成單位大連醫(yī)科大學(xué)、大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院、大連市婦女兒童醫(yī)療中心對(duì)本項(xiàng)目技術(shù)創(chuàng)造性貢獻(xiàn)： 建立聯(lián)合指導(dǎo)小組，協(xié)助研究生培養(yǎng)，共同文章發(fā)表，負(fù)責(zé)臨床應(yīng)用與推廣，負(fù)責(zé)臨床IVF體外胚胎培養(yǎng)液的收集、糖蛋白分析、臨床樣本回顧新分析。作為主

16、要完成人參與本項(xiàng)目2017年獲大連市科技進(jìn)步獎(jiǎng)一等獎(jiǎng)。主要完成人情況表姓 名徐躍飛排 名7行政職務(wù) 主任技術(shù)職稱教授工作單位大連醫(yī)科大學(xué)完成單位大連醫(yī)科大學(xué)、大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院、大連市婦女兒童醫(yī)療中心對(duì)本項(xiàng)目技術(shù)創(chuàng)造性貢獻(xiàn)： 課題組 聯(lián)合指導(dǎo)教師，負(fù)責(zé)技術(shù)培訓(xùn)，研究生管理，負(fù)責(zé)細(xì)胞培養(yǎng)、轉(zhuǎn)染、收集、蛋白質(zhì)提取、鑒定及基因表達(dá)分析，共同發(fā)表文章多篇。作為主要完成人參與本項(xiàng)目2017年獲大連市科技進(jìn)步獎(jiǎng)一等獎(jiǎng)。主要完成人情況表姓 名嚴(yán)濱排 名8行政職務(wù) 主任技術(shù)職稱教授工作單位大連醫(yī)科大學(xué)完成單位大連醫(yī)科大學(xué)、大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院、大連市婦女兒童醫(yī)療中心對(duì)本項(xiàng)目技術(shù)創(chuàng)造性貢獻(xiàn)： 課題組聯(lián)

17、合指導(dǎo)教師，也是與項(xiàng)目負(fù)責(zé)人共同時(shí)間段就讀本實(shí)驗(yàn)室的研究生，涉及實(shí)驗(yàn)技術(shù)的共同探討，后協(xié) 助負(fù)責(zé)技術(shù)培訓(xùn)，研究生管理，對(duì)本項(xiàng)目第一、第五貢獻(xiàn)大，負(fù)責(zé)收集臨床樣品用于蛋白質(zhì)提取、鑒定及基因表達(dá)分析，共同發(fā)表文章、申報(bào)獎(jiǎng)勵(lì)（見(jiàn)附件 19、21、25）；。四、主要完成單位情況表單位名稱大連醫(yī)科大學(xué)排 名第一完成單位對(duì)本項(xiàng)目科技創(chuàng)新和推廣應(yīng)用情況的貢獻(xiàn)：糖生物學(xué)研究是大連醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院特色研究領(lǐng)域，遼寧省糖生物學(xué)與糖生物工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室依托申請(qǐng)人所在團(tuán)隊(duì)，且為遼寧省重點(diǎn)生物化學(xué)與分子生物學(xué)重點(diǎn)學(xué)科，擁有完成本課題所需的所有主要設(shè)備。本研究團(tuán)隊(duì)1998年開(kāi)始從事受精卵分裂、分化過(guò)程中其表面糖抗原發(fā)生階

18、段特異性的變化研究，發(fā)現(xiàn)“著床窗口期”介導(dǎo)細(xì)胞分裂及識(shí)別、聚集有特異表達(dá)的糖蛋白參與胚胎著床調(diào)控。以此延伸研究胚胎發(fā)育、著床過(guò)程中特異性糖蛋白變化及功能。本研究連續(xù)受到國(guó)家自然科學(xué)基金資助，取得突出成果。近十年一直與大連市生殖醫(yī)學(xué)研究機(jī)構(gòu)（大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院及大連市婦女兒童中心）探討基礎(chǔ)研究的臨床應(yīng)用，并確定糖蛋白表達(dá)差異可作為臨床試管嬰兒移植前胚胎質(zhì)量除鏡下形態(tài)學(xué)判斷之外的輔助指標(biāo)。研究具有潛在的臨床應(yīng)用前景。 主要完成單位情況表單位名稱大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院排 名第二完成單位對(duì)本項(xiàng)目科技創(chuàng)新和推廣應(yīng)用情況的貢獻(xiàn)：本研究團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)“著床窗口期”介導(dǎo)細(xì)胞分裂及識(shí)別、聚集有特異表達(dá)的糖蛋白參與胚胎著床調(diào)控。以此延伸研究胚胎發(fā)育、著床過(guò)程、及著床異常所引起的生殖醫(yī)學(xué)疾病中特異性糖蛋白變化及功能。作為大連市生殖醫(yī)學(xué)臨床應(yīng)用中心，在課題初始階段即參與課題設(shè)計(jì)、研究方案制定、臨床樣品選擇、功能指標(biāo)確定及臨床應(yīng)用，并確定糖蛋白表達(dá)差異可作為臨床試管嬰兒移植前胚胎質(zhì)量除鏡下形態(tài)學(xué)判斷之外的輔助指標(biāo)。本項(xiàng)目組謝云鵬博士在本室攻讀博士學(xué)位期間，參與發(fā)表SCI論文9篇，其中作為第一作者4篇，單篇最高影響因子5.104.。嚴(yán)濱教授從事生殖醫(yī)學(xué)研究30年，2004年開(kāi)始與課題組合作（共同申報(bào)課