1、地中海貧血現(xiàn)實(shí)狀況與討論中心試驗(yàn)室吳杰第1頁1925年，意大利醫(yī)生Cooley首次報(bào)道, 因?yàn)槿坎∪司鶃碜缘刂泻Ｖ疄I意大利和希臘，Cooley將其稱之為“地中海貧血” （Thalassemia）。在 世 界 上 瘧 疾 流 行 區(qū)域 最 常 見 。 因 為 雜 合 子 個(gè) 體 可 以 在 一 定 程 度 上 防 止 瘧 疾 ，這 種保 護(hù) 還 可 見 于 鐮 狀 細(xì) 胞 特 征 個(gè) 體 。背景介紹第2頁 地中海貧血是全世界廣為流行遺傳性溶血疾病，也是全球最大單基因遺傳病之一，全世界最少有 億多人攜帶此致病基因。第3頁額頭和顴骨突出雙目眼距較寬鼻梁塌陷或沒有鼻梁因?yàn)樨氀?，膚色蒼白肝脾腫大地中海

2、貧血面容第4頁在世界范圍的分布在中國的分布在廣東省的情況在梅州市的情況本院第5頁Thalassemia中國南方不一樣高發(fā)地區(qū)人群攜帶率 1 23%研究背景地中海沿岸國家：如意大利、希臘、塞浦路斯。非洲：主要在北非國家，阿爾及利亞及利比亞北部、埃及、蘇丹和索馬里北部亞洲：中東國家（沙特阿拉伯、伊朗、伊拉克）、中國、東南亞各國（印度、巴基斯坦、泰國、印度尼西亞、馬來西亞等）。中國：長江以南省份，尤其以廣東、廣西、海南、四川、云南、臺灣等省份為多發(fā)。 第6頁在世界范圍的分布在中國的分布在廣東省的情況在梅州市的情況本院第7頁中國地中海貧血藍(lán)皮書（）據(jù)中國地中海貧血藍(lán)皮書（）顯示，我國重型和中間型地貧患

3、者在30萬人左右，“地貧”基因攜帶者超出3000萬人，包括近3000萬家庭1億人口，主要集中在長江以南，尤以兩廣地域最為嚴(yán)重，其中廣東“地貧”基因攜帶者超出10%。第8頁中國南方和地貧人群攜帶率 地域攜帶率(%) 地貧 地貧 廣西 14.95 6.78 四川 1.92 2.18 貴州 4.72 臺灣 4.20 1.10 香港 5.02 3.41第9頁在世界范圍的分布在中國的分布在廣東省的情況在梅州市的情況本院第10頁廣東省地域地中海貧血遺傳流行病學(xué)調(diào)查珠海韶關(guān)廣州汕頭湛江廣東全省統(tǒng)計(jì)地貧占8.53%， 地貧占1.83%3.36%，累計(jì)10% 左右。第11頁在世界范圍的分布在中國的分布在廣東省的

4、情況在梅州市的情況本院第12頁有統(tǒng)計(jì)顯示梅州市地貧約為10.41%，地貧為3.09%，累計(jì)約占13.50% ，發(fā)生率顯著是高于省內(nèi)平均水平10%。第13頁在世界范圍的分布在中國的分布在廣東省的情況在梅州市的情況本院第14頁本院15-地貧基因檢測情況總量地貧地貧雜合地貧124432966129916823.84%10.44%1.35%第15頁 珠蛋白肽鏈基因人類及各種動(dòng)物Hb其血紅素部分都是相同，不一樣只是珠蛋白。珠蛋白肽鏈可分為兩大類： 類肽鏈: 基因定位于16號染色體 、 非類肽鏈：基因定位于11號染色體 ， 第16頁電泳分析篩查慣用方法濾紙電泳醋酸纖維素薄膜電泳凝膠電泳法（瓊脂糖、聚丙烯酰

5、、淀粉膠）等電聚焦電泳法毛細(xì)管電泳法第17頁因?yàn)槊?xì)管電泳既含有凝膠電泳固有高分辨率、生物相容性優(yōu)點(diǎn)，又俱有快速液相色譜法特點(diǎn)，可方便地連續(xù)洗脫樣品。檢測方便、快捷，重復(fù)性好，靈敏度高。已成為血紅蛋白電泳首選方法。Peltier溫控橋Anode +Cathode -檢測器氘光燈電泳高電壓9800伏第18頁血紅蛋白電泳圖200多條變異帶第19頁血紅蛋白變異體在Sebia毛細(xì)管電泳儀上電泳區(qū)域第20頁第21頁Hb AHb A2正常成人血紅蛋白電泳圖Hb F 第22頁新生兒血紅蛋白電泳圖Hb AHb 第23頁成人血紅蛋白A2參考值：2.5% HbA2 3.5%HbA2 3.5% 血紅蛋白A2升高，提

6、議做深入地中海貧血基因分析。第24頁 而嬰兒（新生兒）因血紅蛋白還不穩(wěn)定， 鏈還未完全表示，要2歲以后才能穩(wěn)定下來，不能排除輕型地中海貧血，但此時(shí)對地中海貧血檢出率較高，能檢出包含靜止型在內(nèi)地貧。第25頁基因型Hb HHb A2Hb F血常規(guī)靶細(xì)胞其它特征-a/aa（靜止型）0正常正常輕微小紅細(xì)胞癥MCV 75-80fLMCH: 20-240出生時(shí)少許 (2%) Hb Barts-a/-a或- -/aa（輕型）0正?；蚪档驼Ｐ〖t細(xì)胞癥血紅蛋白降低Hb:110-12 0MCV: 65-75 MCH: 20-240出生時(shí)Hb Barts (5%)-/-a（Hb H?。?0-15%降低可能增加小紅

7、細(xì)胞癥血紅蛋白降低Hb: 8-11 g/dLMCV: 55-65 MCH: 20-24+不穩(wěn)定血紅蛋白溶血性貧血 (Hb H)-/- -(重型）-100 % Hb Barts嚴(yán)重貧血 水腫胎Hb: 8-11 g/dLMCV 100-110 MCH -胎兒水腫綜合癥 (hydrops fetalis)第26頁Hb K帶慣用內(nèi)標(biāo)法來確定未知區(qū)帶位置Hb AHb A2未知區(qū)帶確定第27頁注意影響原因：使A2降低疾?。喝辫F性貧血、HPFH、地貧、鉛中毒、骨髓增生性疾病、鐵幼粒貧血使A2升高疾?。函懠病⒓卓?、HbS病第28頁基因檢測方法Gap-PCR 跨越斷裂點(diǎn)PCR 檢測地貧常見缺失RDB 反向斑點(diǎn)雜

8、交法 檢測地貧地貧突變檢測6種常見-地貧基因：SEA基因、3.7、4.2、CS、QS、 WS。16種常見地貧基因突變：41-42位點(diǎn)、654位點(diǎn)、 17位點(diǎn)、 71-72位點(diǎn)、 -29位點(diǎn)、 -28位點(diǎn)、E位點(diǎn)、43位點(diǎn)、14-15位點(diǎn)、27-28位點(diǎn)突變、CapM、IVSI-5M、IVS1-1M、31M。第29頁第30頁討論：純合子(THAITHAI)和雙重雜合子(THAI SEA)可表現(xiàn)為經(jīng)典巴氏胎兒水腫綜合征，泰國缺失型地貧1復(fù)合其它常見地貧基因雜合子，能夠造成中間型地貧發(fā)生。有泰國缺失型地貧1引發(fā)血紅蛋白H病貧血程度比東南亞缺失型引發(fā)血紅蛋白H病嚴(yán)重，應(yīng)防止由泰國缺失型引發(fā)重型和中間型

9、地中海貧血嬰兒出生。同理，當(dāng)一方為常見地中海貧血基因型檢測結(jié)果陰性，另一方為東南亞缺失型地中海貧血，還應(yīng)考慮有沒有合并少見地中海貧血，預(yù)防漏檢。第31頁日期姓名年紀(jì)地貧檢測結(jié)果-7-21黎麗芳29歲檢測結(jié)果正常 (Hb電泳提醒，異常HbJ 24.3%)-8-23楊仕耀28歲檢測結(jié)果正常(Hb電泳提醒，HbD22.3 )-4-11石梓歆5月檢測結(jié)果正常(Hb電泳提醒，HbK39.6%)-2-6黃愷14歲檢測結(jié)果正常(Hb電泳提醒，HbE位置可見一區(qū)帶9.3%)-4-9李青32歲檢測結(jié)果正常（Hb電泳提醒，HbJ 28.4%）-4-23王永發(fā)32歲檢測結(jié)果正常(Hb電泳提醒，HbQ 27.0%)-

10、10-18劉東龍44歲檢測結(jié)果正常（Hb電泳提醒，異常HbK為44.9%）-11-15王吉洛8月未檢出-地貧基因(Hb電泳提醒，HbK44%)-11-12朱美娥48歲未檢出-地貧基因(Hb電泳提醒，HbK40.7%)-12-13賴來華28歲未檢出-地貧基因(Hb電泳提醒，HbQ22.8%,HbQ衍生物0.7%)-12-15朱林豐26歲未檢出-地貧基因(Hb電泳提醒，HbD25.4%)第32頁分析中提到：當(dāng)患者同時(shí)遺傳有地貧基因和地貧基因雙重雜合時(shí)，因?yàn)楹碗逆溚瑫r(shí)缺點(diǎn)在體內(nèi)可出現(xiàn)互補(bǔ)現(xiàn)象，而在血液學(xué)上多表現(xiàn)為HbA2和HbF水平升高和紅細(xì)胞形態(tài)改變等地貧特征，地貧特征被掩蓋，所以臨床上多診療為地

11、貧。所以對篩查為地貧患者要注意有沒有復(fù)合地貧基因，及時(shí)進(jìn)行基因診療，方便準(zhǔn)確進(jìn)行產(chǎn)前診療。第33頁本院病例：-3-18 幸麗麗 女 27歲 電泳結(jié)果：HbA 80.2 HbA2 3.90 HbE:15.9 基因檢測結(jié)果： SEA雜合缺失地貧復(fù)合E位點(diǎn)雜合突變 地貧第34頁-3-23 曾聰聰 女 28歲電泳結(jié)果： HbA 93.70 HbF 1.30 HbA2 5.00 基因檢測結(jié)果： SEA雜合缺失地中海貧血 （已排除常見-地貧突變類型；Hb電泳提醒，HbA2為5.0%，懷疑合并少見-地貧突變類型，提議進(jìn)行珠蛋白基因測序分析。）第35頁-6-30 盧麗枚 女 38歲 電泳結(jié)果： HbA 87.

12、7 HbF 10.6 HbA2 1.7 基因檢測結(jié)果： SEA雜合缺失地中海貧血 Hb電泳提 示，HbF為10.6%，懷疑合并缺失型地貧 ，提議進(jìn)行珠蛋白基因測序。第36頁治療進(jìn)展對于地中海貧血治療，國內(nèi)則推薦中華醫(yī)學(xué)會(huì)兒科學(xué)分會(huì)重型 地中海貧血診療和治療指南，同時(shí)參考 TIF 最新診療提議。第37頁TIF 最新診療提議以規(guī)范性長久輸血為主，在有 HLA 相合情況下首選造血干細(xì)胞移植方法，對于 12 歲以下兒童不推薦采取姑息治療伎倆 。 結(jié)合臨床實(shí)踐，對于已確診為重型 地中海貧血患者，提議在血紅蛋白90 g/L 時(shí)開始輸血，單次輸血時(shí)間在 3 h 以上，輸入濃縮紅細(xì)胞間隔時(shí)間在 2 周以上，將

13、血紅蛋白維持在 120 g/L左右 。 去鐵治療是地中海貧血主要輔助治療伎倆，提議 4個(gè)月左右動(dòng)態(tài)檢測 1 次患者血清鐵蛋白水平，輸血次數(shù)在1020 次以上時(shí)， 或者血清鐵蛋白超出 1 000 g/L 時(shí)考慮開展此項(xiàng)治療方案 。 當(dāng)患者血清鐵蛋白低于 1 000 g/L 時(shí)能夠暫停治療，進(jìn)行動(dòng)態(tài)觀察。 鐵胺等藥品是慣用鐵螯合劑，對于患者去鐵治療含有良好臨床療效第38頁異基因造血干細(xì)胞移植同種異基因骨髓移植(Allogenic Bone Marrow Transplantation, BMT)臍血干細(xì)胞移植(Cord Blood Stem Cell Transplantation, CBSCT)外周血干細(xì)胞移植(Peripheral Blood Stem Cell Transpl