1、關(guān)于細(xì)胞化學(xué)染色PPT第一張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 細(xì)胞化學(xué)染色 細(xì)胞化學(xué)染色是細(xì)胞學(xué)和化學(xué)相結(jié)合而形成的一門科學(xué)，是以細(xì)胞形態(tài)學(xué)為基礎(chǔ)，結(jié)合運(yùn)用化學(xué)反應(yīng)的原理對(duì)血細(xì)胞內(nèi)的各種化學(xué)成分(如酶類、酯類、鐵、蛋白質(zhì)、核酸等)作定性、定位、半定量分析的方法。 定義：第一節(jié) 概 述 第二張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 細(xì)胞化學(xué)染色第一節(jié) 概 述 基 本 步 驟 第三章 細(xì)胞化學(xué)染色固 定 顯 示 復(fù) 染 第三張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 細(xì)胞化學(xué)染色第一節(jié) 概 述 第三章 細(xì)胞化學(xué)染色固定物 理 法 化 學(xué) 法 干燥固定 火焰固定 蒸汽固定 液體

2、固定 第四張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 概 述 偶 氮偶 聯(lián) 法 雪 夫反 應(yīng) 聯(lián) 苯胺 法 普 魯士 藍(lán)反 應(yīng) 金 屬沉 淀法 顯 示 第三章 細(xì)胞化學(xué)染色第五張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 細(xì)胞化學(xué)染色 復(fù)染的目的在于使各種細(xì)胞能顯示出來以便于觀察。選擇復(fù)染液的顏色應(yīng)與有色沉淀的顏色有明顯的對(duì)比度，即能使細(xì)胞結(jié)構(gòu)顯示又能清楚地看出細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)果。復(fù) 染 第一節(jié) 概 述 第六張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月臨床應(yīng) 用 第一節(jié) 概 述 輔助判斷急性白血病的細(xì)胞類型 輔助血液系統(tǒng)等疾病的診斷和鑒別診斷 觀察疾病療效和預(yù)后 探討發(fā)病機(jī)制 第三章 細(xì)胞化學(xué)

3、染色第七張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月過氧化物酶染色 酯 酶 染 色 蘇 丹 黑 染 色 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色 第三章 細(xì)胞化學(xué)染色過碘酸-雪夫反應(yīng)中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色酸性磷酸酶染色 鐵 染 色 第八張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色一、過氧化物酶（POX）染色【原理】 POX的染色方法有多種，如復(fù)方聯(lián)苯胺法、二氨基聯(lián)苯胺法、四甲基聯(lián)苯胺、改良的pereira染色法等等。二氨基聯(lián)苯胺染色是臨床常用的方法。 二氨基聯(lián)苯胺法：血細(xì)胞內(nèi)的POX，能分解H2O2而釋放出新生氧，后者氧化二氨基聯(lián)苯胺，形成金黃色不溶性沉淀，定位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)酶所在的部位。 第九

4、張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色一、過氧化物酶（POX）染色【正常血細(xì)胞的染色反應(yīng)】 1.粒細(xì)胞系統(tǒng) 分化差的早期原始粒細(xì)胞為陰性，分化好的晚期原始粒細(xì)胞至中性成熟粒細(xì)胞均呈陽性，且隨著細(xì)胞的成熟，陽性反應(yīng)的程度逐漸增強(qiáng)；中性分葉核粒細(xì)胞呈強(qiáng)陽性，衰老的粒細(xì)胞陽性程度減弱甚至呈陰性；嗜酸性粒細(xì)胞陽性反應(yīng)最強(qiáng)，嗜堿性粒細(xì)胞為陰性。第十張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色一、過氧化物酶（POX）染色【正常血細(xì)胞的染色反應(yīng)】 1.粒細(xì)胞系統(tǒng) 2.單核細(xì)胞系統(tǒng) 原始單核細(xì)胞呈陰性，幼稚及成熟單核細(xì)胞多呈弱陽性，其顆粒細(xì)少稀疏，分布不均

5、。 3.其他細(xì)胞 淋巴細(xì)胞系統(tǒng)、紅細(xì)胞系統(tǒng)及巨核細(xì)胞系統(tǒng)的細(xì)胞均呈陰性，漿細(xì)胞、組織細(xì)胞也呈陰性，吞噬細(xì)胞有時(shí)呈陽性。 第十一張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月1.中性成熟粒細(xì)胞，呈強(qiáng)陽性；2.晚幼紅細(xì)胞，呈陰性；3.單核細(xì)胞，呈弱陽性；4.漿細(xì)胞，呈陰性 第十二張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色一、過氧化物酶（POX）染色成熟中性粒細(xì)胞過氧化物酶活性的變化 臨 床 意 義是輔助判斷急性白血病細(xì)胞類型的首選、最重要的細(xì)胞化學(xué)染色幫助鑒別急性白血病的類型 第十三張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色一、過氧化物酶（POX）染色

6、【臨床意義】 1.幫助鑒別急性白血病的類型 （1）POX染色是鑒別急性淋巴細(xì)胞白血病和急性粒細(xì)胞白血病的重要指標(biāo)。 急性粒細(xì)胞白血病時(shí)，原始粒細(xì)胞可呈陽性。急性淋巴細(xì)胞白血病時(shí)，原始淋巴細(xì)胞和幼稚淋巴細(xì)胞均呈陰性。急性單核細(xì)胞白血病時(shí)，原始單核細(xì)胞、幼稚單核細(xì)胞多數(shù)呈陰性或弱陽性。第十四張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月急性粒細(xì)胞白血?。∕2a) 的POX染色原始粒細(xì)胞均呈陽性 第十五張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月急性淋巴細(xì)胞白血病的POX染色1.中性成熟粒細(xì)胞，呈強(qiáng)陽性；其他原始淋巴細(xì)胞均呈陰性 第十六張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色一、過

7、氧化物酶（POX）染色【臨床意義】 1.幫助鑒別急性白血病的類型 （2）急性早幼粒細(xì)胞白血病有時(shí)需與急性單核細(xì)胞白血病鑒別，如果白血病細(xì)胞呈過氧化物酶強(qiáng)陽性，應(yīng)確定為急性早幼粒細(xì)胞白血病。 第十七張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月急性早幼粒細(xì)胞白血病的POX染色.原始紅細(xì)胞，呈陰性；其他早幼粒細(xì)胞均呈強(qiáng)陽性 第十八張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色一、過氧化物酶（POX）染色【臨床意義】 1.幫助鑒別急性白血病的類型 （3）急性單核細(xì)胞白血病有時(shí)需與組織細(xì)胞白血病、惡性組織細(xì)胞病相鑒別，異常組織細(xì)胞的過氧化物酶呈陰性，而白血病性幼單核細(xì)胞和單核細(xì)胞呈弱陽

8、性。 第十九張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月急性單核細(xì)胞白血病的POX染色1.中性成熟粒細(xì)胞，呈強(qiáng)陽性；2.原始單核細(xì)胞，呈陽性；3.原始單核細(xì)胞，呈弱陽性；其他原幼單核細(xì)胞呈陰性 第二十張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色一、過氧化物酶（POX）染色【臨床意義】 1.幫助鑒別急性白血病的類型 2.成熟中性粒細(xì)胞過氧化物酶活性的變化 活性增高：見于再生障礙性貧血、感染、急性淋巴細(xì) 胞白血病和慢性淋巴細(xì)胞白血病。 活性減低：見于急性粒細(xì)胞白血病、慢性粒細(xì)胞白血 病、急性單核細(xì)胞白血病、骨髓增生異常 綜合征、放射病及退化性中性粒細(xì)胞。 第二十一張，PPT共八

9、十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色二、蘇丹黑（SB）染色 【原理】 蘇丹黑是一種脂溶性重氮染料，能溶解于細(xì)胞內(nèi)的含脂結(jié)構(gòu)（如中性脂肪、磷脂、糖脂和類固醇）中，使脂類物質(zhì)呈棕黑色或深黑色而顯示出來。脂類物質(zhì)在粒細(xì)胞中含量豐富，在單核細(xì)胞中也有少量。 第二十二張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色二、蘇丹黑（SB）染色 【正常血細(xì)胞的染色反應(yīng) 】 結(jié)果與POX染色基本一致 【臨床意義 】與POX染色基本相似 第二十三張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月三、酯 酶 染 色 根據(jù)酯酶特異性高低分為 :特異性酯酶(氯乙酸AS-D萘酚酯酶) 非特異性酯

10、酶 pH值不同 第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色酸性酯酶(酸性- 醋酸萘酚酯酶 )堿性酯酶( -丁酸萘酚酯酶 )中性酯酶 - 醋酸萘酚酯酶 醋酸AS-D萘酚酯酶 第二十四張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色【原理】 血細(xì)胞內(nèi)的氯乙酸AS-D萘酚酯酶水解基質(zhì)液中的氯乙酸AS-D萘酚，產(chǎn)生AS-D萘酚，進(jìn)而與基質(zhì)液中的重氮鹽偶聯(lián)形成不溶性的有色沉淀，定位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)酶所在的部位。本試驗(yàn)常用的重氮鹽為堅(jiān)牢紫醬GBC，形成的有色沉淀為紅色。 （一）氯乙酸AS-D萘酚酯酶(NAS-DCE)染色第二十五張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色（一）氯乙

11、酸AS-D萘酚酯酶(NAS-DCE)染色【正常血細(xì)胞的染色反應(yīng) 】1.粒細(xì)胞系統(tǒng) 分化差的原始粒細(xì)胞呈陰性，分化好 的呈陽性，自早幼粒細(xì)胞至成熟中性 粒細(xì)胞均呈陽性。嗜酸性粒細(xì)胞呈陰 性或弱陽性，嗜堿性粒細(xì)胞呈陽性。2.單核細(xì)胞系統(tǒng) 絕大多數(shù)為陰性。3.其他細(xì)胞 如淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞、巨核細(xì)胞、有核 紅細(xì)胞、血小板等均呈陰性；肥大細(xì)胞 呈陽性。第二十六張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色【臨床意義 】1.急性粒細(xì)胞白血病 原始粒細(xì)胞呈陽性或陰性。2.急性早幼粒細(xì)胞白血病 早幼粒細(xì)胞呈強(qiáng)陽性。3.急性單核細(xì)胞白血病 原始單核及幼稚單核細(xì)胞幾 乎呈陰性。4.急性粒-單

12、核細(xì)胞白血病 原始粒細(xì)胞及早幼粒細(xì)胞 呈陽性，原始單核及幼稚單核細(xì)胞呈陰性。5.急性淋巴細(xì)胞白血病和急性巨核細(xì)胞白血病 白血 病細(xì)胞均呈陰性。 （一）氯乙酸AS-D萘酚酯酶(NAS-DCE)染色第二十七張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月急性粒細(xì)胞白血病（M2a）氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色1.原始粒細(xì)胞，呈弱陽性；2.幼稚粒細(xì)胞，呈強(qiáng)陽性；3.中性桿狀核粒細(xì)胞，呈強(qiáng)陽性 第二十八張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色【原理】 血細(xì)胞內(nèi)的-醋酸萘酚酯酶在pH中性的條件下，水解基質(zhì)液中的-醋酸萘酚，釋放出-萘酚，進(jìn)而與基質(zhì)液中的重氮鹽偶聯(lián)形成不溶性的有色沉淀，定位

13、于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)酶所在的部位。 （二）-醋酸萘酚酯酶(-NAE)染色 第二十九張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色【正常血細(xì)胞的染色反應(yīng) 】1.單核細(xì)胞系統(tǒng) 分化差的原始單核細(xì)胞呈陰性， 分化好的原始單核細(xì)胞呈陽性， 幼稚單核及單核細(xì)胞也呈陽性， 陽性反應(yīng)能被氟化鈉抑制。2.粒細(xì)胞系統(tǒng) 各期粒細(xì)胞多數(shù)呈陰性，少數(shù)呈弱 陽性，陽性反應(yīng)不能被氟化鈉抑制。（二）-醋酸萘酚酯酶(-NAE)染色 第三十張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色【正常血細(xì)胞的染色反應(yīng) 】3.淋巴細(xì)胞系統(tǒng) 各期淋巴細(xì)胞多呈陰性，少數(shù)呈弱 陽性，陽性反應(yīng)不能被氟化鈉抑制。4

14、.其他細(xì)胞 巨核細(xì)胞和血小板呈陽性，陽性反應(yīng)不 能被氟化鈉抑制；少數(shù)有核紅細(xì)胞呈弱 陽性，陽性反應(yīng)不能被氟化鈉抑制；漿 細(xì)胞呈陰性。 （二）-醋酸萘酚酯酶(-NAE)染色 第三十一張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色【臨床意義 】1.急性單核細(xì)胞白血病 單核系細(xì)胞多呈陽性，陽性 反應(yīng)能被氟化鈉抑制。2.急性粒細(xì)胞白血病 原始粒細(xì)胞呈陰性或弱陽性， 陽性反應(yīng)不能被氟化鈉抑制。3.急性早幼粒細(xì)胞白血病 早幼粒細(xì)胞呈強(qiáng)陽性，陽 性反應(yīng)不能被氟化鈉抑制。（二）-醋酸萘酚酯酶(-NAE)染色 第三十二張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色【臨

15、床意義 】4.急性淋巴細(xì)胞白血病 原始淋巴細(xì)胞及幼稚淋巴細(xì) 胞呈陰性或陽性，陽性反應(yīng) 不被氟化鈉抑制。5.急性粒-單核細(xì)胞白血病 原始粒細(xì)胞呈陰性至陽 性，陽性反應(yīng)不被氟化鈉 抑制；原始單核及幼稚單 核細(xì)胞呈陽性，單核系陽 性反應(yīng)能被氟化鈉抑制。（二）-醋酸萘酚酯酶(-NAE)染色 第三十三張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月 A圖：急性單核細(xì)胞白血病-NAE染色 原始、幼稚單核細(xì)胞多呈強(qiáng)陽性 B圖：急性單核細(xì)胞白血病 -NAE氟化鈉抑制染色原始、幼稚單核細(xì)胞陽性反應(yīng)被氟化鈉抑制（與A圖為同一標(biāo)本） A B 第三十四張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色【原理

16、】 血細(xì)胞內(nèi)的-NBE在pH堿性條件下，水解基質(zhì)液中的-丁酸萘酚，釋放出-萘酚，進(jìn)而與基質(zhì)液中的重氮鹽偶聯(lián)形成不溶性的有色沉淀，定位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)酶所在的部位。 （三）-丁酸萘酚酯酶（-NBE）染色 第三十五張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色【正常血細(xì)胞的染色反應(yīng) 】1.粒細(xì)胞系統(tǒng) 各階段粒細(xì)胞呈陰性。2.單核細(xì)胞系統(tǒng) 分化差的原始單核細(xì)胞呈陰性， 分化好的原始單核細(xì)胞呈陽性， 幼稚單核及單核細(xì)胞呈陽性，陽 性反應(yīng)能被氟化鈉抑制。3.淋巴細(xì)胞系統(tǒng) T淋巴細(xì)胞、非T非B淋巴細(xì)胞可呈 陽性，B淋巴細(xì)胞呈陰性。4.其他細(xì)胞 巨核細(xì)胞、有核紅細(xì)胞、漿細(xì)胞呈陰 性或弱陽性；

17、組織細(xì)胞也可呈陽性， 但不被氟化鈉抑制。（三）-丁酸萘酚酯酶（-NBE）染色 第三十六張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色【臨床意義 】 與-NAE染色的臨床意義相同。 （三）-丁酸萘酚酯酶（-NBE）染色 第三十七張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色【原理】 血細(xì)胞中的酸性-醋酸萘酚酯酶在pH弱酸性(pH 5.8)條件下，可水解基質(zhì)液中的-醋酸萘酚，產(chǎn)生-萘酚，進(jìn)而與重氮鹽六偶氮付品紅形成不溶性紅色沉淀，定位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)酶所在的部位。 （四）酸性-醋酸萘酚酯酶（ANAE）染色 第三十八張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章

18、 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色【正常血細(xì)胞的染色反應(yīng) 】1.單核細(xì)胞系統(tǒng) 單核系細(xì)胞常呈彌散型強(qiáng)陽性， 陽性反應(yīng)可被氟化鈉抑制。2.淋巴細(xì)胞系統(tǒng) T淋巴細(xì)胞呈陽性，而B淋巴細(xì)胞 多數(shù)呈陰性。3.其他細(xì)胞 粒系細(xì)胞一般為陰性或弱陽性，但此 反應(yīng)不被氟化鈉抑制；紅系細(xì)胞、巨 核系細(xì)胞含量較少。 （四）酸性-醋酸萘酚酯酶（ANAE）染色 第三十九張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色【臨床意義 】1.可粗略地鑒別T、B淋巴細(xì)胞 2.鑒別其它急性白血病細(xì)胞類型同-NAE染色。3.多發(fā)性骨髓瘤、多毛細(xì)胞白血病細(xì)胞多為陽性；惡性組織細(xì)胞病呈強(qiáng)陽性；霍奇金淋巴瘤網(wǎng)狀高鐵紅細(xì)胞(R-S細(xì)

19、胞)呈陽性。（四）酸性-醋酸萘酚酯酶（ANAE）染色 第四十張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色【原理】 過碘酸是氧化劑，能使含有乙二醇基（-CHOH-CHOH）的多糖類物質(zhì)（糖原、粘多糖、粘蛋白、糖蛋白及糖酯等）氧化，形成雙醛基（-CHO-CHO），醛基與雪夫試劑中的無色品紅結(jié)合，使無色的品紅變成紫紅色化合物，定位于含有多糖類的細(xì)胞內(nèi)。以前又稱為糖原染色。 四、過碘酸-雪夫（PAS）反應(yīng) 第四十一張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色【正常血細(xì)胞的染色反應(yīng) 】1.粒細(xì)胞系統(tǒng) 分化差的原始粒細(xì)胞呈陰性，分化 好的原始粒細(xì)胞至中性分葉

20、核粒細(xì) 胞均呈陽性，并隨著細(xì)胞的成熟而 逐漸增強(qiáng)；嗜酸性粒細(xì)胞中顆粒之 間的胞質(zhì)呈紅色；嗜堿性粒細(xì)胞中 的嗜堿性顆粒呈陽性。2.紅細(xì)胞系統(tǒng) 有核紅細(xì)胞及紅細(xì)胞均呈陰性。3.單核細(xì)胞系統(tǒng) 分化差的原始單核細(xì)胞呈陰性， 其他為陽性。四、過碘酸-雪夫（PAS）反應(yīng) 第四十二張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色【正常血細(xì)胞的染色反應(yīng) 】4.淋巴細(xì)胞系統(tǒng) 大多數(shù)呈陰性，少數(shù)呈陽性。5.巨核細(xì)胞系統(tǒng) 巨核細(xì)胞和血小板呈陽性，陽性 反應(yīng)的程度隨細(xì)胞的發(fā)育成熟而 增強(qiáng)。6.其他細(xì)胞 漿細(xì)胞一般呈陰性，少數(shù)呈陽性，巨 噬細(xì)胞可為陽性。 四、過碘酸-雪夫（PAS）反應(yīng) 第四十三張，

21、PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月正常血細(xì)胞PAS染色1.原始粒細(xì)胞（-） 2.早幼粒細(xì)胞（+）3.中性中幼粒細(xì)胞（+）4.中性晚幼粒細(xì)胞（+）5.中性桿狀核粒細(xì)胞（+）6.中性分葉核粒細(xì)胞（+）7.嗜堿性粒細(xì)胞（+）8.嗜酸性粒細(xì)胞（+）9.單核細(xì)胞（） 10.淋巴細(xì)胞（+） 第四十四張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色【臨床意義 】 1.紅細(xì)胞系統(tǒng)疾病 紅血病、紅白血病、骨髓增生異常綜合征中有核紅細(xì)胞呈陽性，有時(shí)有核紅細(xì)胞陽性反應(yīng)強(qiáng)且陽性率高，甚至紅細(xì)胞也呈陽性。某些紅系良性疾病，如嚴(yán)重缺鐵性貧血、重型地中海貧血中的有核紅細(xì)胞也可呈陽性；巨幼細(xì)胞性貧血、再

22、生障礙性貧血、其他溶血性貧血中的有核紅細(xì)胞常呈陰性，但有時(shí)個(gè)別有核紅細(xì)胞可呈陽性。 四、過碘酸-雪夫（PAS）反應(yīng) 第四十五張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色【臨床意義 】 2.白細(xì)胞系統(tǒng)疾病 急性淋巴細(xì)胞白血病時(shí)原始淋巴細(xì)胞及幼稚淋巴細(xì)胞的陽性率升高，陽性反應(yīng)物質(zhì)呈粗顆粒狀或塊狀；急性粒細(xì)胞白血病時(shí)原始粒細(xì)胞呈陰性或弱陽性；急性單核細(xì)胞白血病時(shí)原始單核及幼稚單核細(xì)胞可呈陽性；慢性淋巴細(xì)胞白血病時(shí)淋巴細(xì)胞的陽性率增加；惡性淋巴瘤時(shí)淋巴瘤細(xì)胞陽性率高、陽性強(qiáng)。 四、過碘酸-雪夫（PAS）反應(yīng) 第四十六張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化

23、學(xué)染色【臨床意義 】1.紅細(xì)胞系統(tǒng)疾病2.白細(xì)胞系統(tǒng)疾病 3.其他細(xì)胞 戈謝細(xì)胞呈強(qiáng)陽性，尼曼-皮克細(xì)胞呈陰 性或弱陽性，故PAS染色有助于二者的鑒 別； Reed-Sternberg（RS）細(xì)胞陰性或 弱陽性；骨髓轉(zhuǎn)移性腺癌細(xì)胞呈強(qiáng)陽性。 四、過碘酸-雪夫（PAS）反應(yīng) 第四十七張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月急性淋巴細(xì)胞白血病PAS染色原始、幼稚淋巴細(xì)胞均陽性，呈粗顆粒狀陽性 第四十八張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色【原理】 偶氮偶聯(lián)法：成熟中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶在pH 9.6左右的堿性環(huán)境中，能水解基質(zhì)液中的磷酸萘酚鈉底物，釋放出萘酚，萘酚與重氮

24、鹽偶聯(lián)，生成不溶性的有色沉淀，定位于細(xì)胞質(zhì)酶活性所在之處。不同的底物與重氮鹽的組合不同，其陽性反應(yīng)物質(zhì)的顏色可有不同，但其化學(xué)反應(yīng)過程基本相似。 五、中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶（NAP）染色 第四十九張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色【正常血細(xì)胞的染色反應(yīng) 】 1.NAP主要存在于中性成熟粒細(xì)胞(包括中性桿狀核粒細(xì)胞和中性分葉核粒細(xì)胞)，故中性成熟粒細(xì)胞呈陽性反應(yīng)，其他細(xì)胞基本呈陰性。陽性反應(yīng)表現(xiàn)在胞質(zhì)中出現(xiàn)棕黑色或棕紅色顆粒。 五、中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶（NAP）染色 第五十張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色【正常血細(xì)胞的染色反應(yīng)

25、】 2.成熟中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶積分值的計(jì)算 血涂片經(jīng)染色后，在油鏡下，連續(xù)觀察100個(gè)成熟中性粒細(xì)胞，記錄其陽性反應(yīng)細(xì)胞所占百分率即為陽性率；并對(duì)所有陽性反應(yīng)細(xì)胞逐個(gè)按其反應(yīng)強(qiáng)度作出（+）（+）的分級(jí)，將各級(jí)所占的百分率乘以級(jí)數(shù)，然后相加，即為積分值。結(jié)果以陽性率和積分值來表示。 五、中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶（NAP）染色 第五十一張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色1.中性成熟粒細(xì)胞（+）；2.中性成熟粒細(xì)胞（+）；3.中性成熟粒細(xì)胞（+）；4.中性成熟粒細(xì)胞（+）；5.淋巴細(xì)胞 （-）第五十二張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色【參

26、考范圍】陽性率40；NAP的積分值為30130分。 (各單位應(yīng)建立本實(shí)驗(yàn)室參考值) 五、中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶（NAP）染色 第五十三張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色【臨床意義 】1.NAP積分增加 見于細(xì)菌性感染、類白血病反應(yīng)、再 生障礙性貧血、某些骨髓增殖性疾 病、慢性粒細(xì)胞白血病加速期或急變 期、急性淋巴細(xì)胞白血病、慢性淋巴 細(xì)胞白血病、惡性淋巴瘤、骨髓轉(zhuǎn)移 癌等。 五、中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶（NAP）染色 第五十四張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月真性紅細(xì)胞增多癥NAP染色1.中性成熟粒細(xì)胞（+）；2.中性成熟粒細(xì)胞（+）；3.淋巴細(xì)胞（-） 第五

27、十五張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色【臨床意義 】1.NAP積分增加 2.NAP積分下降 見于慢性粒細(xì)胞白血病慢性期、陣發(fā) 性睡眠性血紅蛋白尿癥、骨髓增生異 常綜合征、惡性組織細(xì)胞病等。 五、中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶（NAP）染色 第五十六張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色【臨床意義 】3.疾病的鑒別（1）慢性粒細(xì)胞白血病與類白血病反應(yīng)：前者明顯下降且常為零分，后者明顯增加。（2）慢性粒細(xì)胞白血病(慢性期)與慢性中性粒細(xì)胞白血病：前者明顯下降，后者明顯增加。（3）細(xì)菌性感染與病毒性感染：前者明顯增加，后者常無明顯變化。（4）再生

28、障礙性貧血與陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥：前者常增加，后者常下降。五、中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶（NAP）染色 第五十七張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色【臨床意義 】3.疾病的鑒別（5）急性白血病類型的鑒別：急性粒細(xì)胞白血病常下 降，急性淋巴細(xì)胞白血病常增加，急性單核細(xì)胞 白血病一般正?；驕p低。（6）惡性淋巴瘤與惡性組織細(xì)胞?。呵罢叱Ｔ黾樱?者常下降。（7）惡性組織細(xì)胞病與反應(yīng)性組織細(xì)胞增多癥：前者 常下降，后者無明顯變化。（8）真性紅細(xì)胞增多癥與繼發(fā)性紅細(xì)胞增多癥：前者 常增加，后者無明顯變化。（9）原發(fā)性血小板增多癥與繼發(fā)性血小板增多癥：前 者常增加，后者無明顯

29、變化。 五、中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶（NAP）染色 第五十八張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色【原理】 偶氮偶聯(lián)法：血細(xì)胞內(nèi)的酸性磷酸酶在酸性（pH 5.0）條件下水解基質(zhì)液中的磷酸萘酚AS-BI，釋放出萘酚AS-BI，后者與基質(zhì)液中的重氮鹽偶聯(lián)形成不溶性的有色沉淀，定位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)酶所在的部位。六、酸性磷酸酶（ACP）染色 第五十九張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色【原理】 Gomori硫化鉛法：血細(xì)胞內(nèi)的酸性磷酸酶水解基質(zhì)液中的-甘油磷酸鈉，形成磷酸根，磷酸根與硝酸鉛作用生成磷酸鉛，定位于胞質(zhì)中的磷酸鉛再與硫化銨反應(yīng)生成棕黑色硫

30、化鉛沉淀。 六、酸性磷酸酶（ACP）染色 第六十張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色【原理】 抗酒石酸酸性磷酸酶染色：用相同方法制備兩份基質(zhì)液，一份加入適量的L-酒石酸（左旋酒石酸）,另一份不加酒石酸。取兩張相同標(biāo)本的涂片，分別用這兩種不同的基質(zhì)液做酸性磷酸酶染色。如果血細(xì)胞內(nèi)的酸性磷酸酶耐L-酒石酸，兩張涂片均呈陽性；如不耐L-酒石酸，不加L-酒石酸的涂片呈陽性反應(yīng)，而加L-酒石酸呈陰性反應(yīng)。 六、酸性磷酸酶（ACP）染色 第六十一張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色【正常血細(xì)胞的染色反應(yīng) 】粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、巨核細(xì)胞

31、、血小板、漿細(xì)胞、巨噬細(xì)胞均呈陽性。 六、酸性磷酸酶（ACP）染色 第六十二張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色【臨床意義 】 臨床ACP染色應(yīng)用較少，主要用于多毛細(xì)胞白血病的診斷及脂質(zhì)代謝障礙性疾病的鑒別。1.診斷多毛細(xì)胞白血病 多毛細(xì)胞呈陽性（常呈強(qiáng)陽性），陽性反應(yīng)不被L-酒石酸抑制。慢性淋巴細(xì)胞白血病的淋巴細(xì)胞和惡性淋巴瘤細(xì)胞ACP染色也可呈陽性，但可被L-酒石酸抑制。2.鑒別戈謝細(xì)胞和尼曼-匹克細(xì)胞 前者陽性，并具有抗酒石酸功能；后者陰性。 六、酸性磷酸酶（ACP）染色 第六十三張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月多毛細(xì)胞白血病酸性磷酸酶染色多毛細(xì)胞

32、呈陽性反應(yīng) 第六十四張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色【原理】 正常人骨髓中的貯存鐵以鐵蛋白和含鐵血黃素的形式貯存，主要存在于骨髓小粒和幼紅細(xì)胞中。骨髓中的鐵在酸性環(huán)境下與亞鐵氰化鉀作用，形成普魯士藍(lán)色的亞鐵氰化鐵沉淀，定位于含鐵的部位。 七、鐵染色 第六十五張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色【正常血細(xì)胞的染色反應(yīng) 】 骨髓中的貯存鐵分為細(xì)胞外鐵和細(xì)胞內(nèi)鐵。細(xì)胞外鐵主要存在于骨髓小粒的巨噬細(xì)胞中，細(xì)胞內(nèi)鐵是指存在于中幼紅細(xì)胞、晚幼紅細(xì)胞及紅細(xì)胞中的鐵（鐵粒幼紅細(xì)胞、鐵粒紅細(xì)胞）。 七、鐵染色 第六十六張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于

33、2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色【正常血細(xì)胞的染色反應(yīng) 】 1.細(xì)胞外鐵 觀察骨髓小粒中的鐵，陽性結(jié)果呈彌散性、顆粒狀、小珠狀或塊狀藍(lán)色。根據(jù)骨髓小粒中鐵的存在方式及量，將細(xì)胞外鐵分為（-）、（+）、（+）、（+）、（+）。 七、鐵染色 第六十七張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月A骨髓細(xì)胞外鐵染色 A圖：細(xì)胞外鐵 + ；B圖：細(xì)胞外鐵 + B第六十八張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月骨髓細(xì)胞外鐵染色 C圖：細(xì)胞外鐵 + ；D圖：細(xì)胞外鐵 + CD第六十九張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 第二節(jié) 細(xì)胞化學(xué)染色【正常血細(xì)胞的染色反應(yīng) 】2.細(xì)胞內(nèi)鐵 觀察100個(gè)中幼紅細(xì)胞和晚幼紅細(xì)胞，計(jì)算 出鐵粒幼紅細(xì)胞的百分比。鐵粒幼紅細(xì)胞：指胞質(zhì)中出現(xiàn)藍(lán)色鐵顆粒的幼紅細(xì)胞， 根據(jù)藍(lán)色鐵顆粒的多少及粗細(xì)，分為： 型、型、型、型及環(huán)形鐵粒幼紅細(xì)胞 。環(huán)形鐵粒幼紅細(xì)胞：指幼紅細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)含鐵粒6顆以上，并環(huán)繞細(xì) 胞核排列超過核周徑2/3以上者。鐵粒紅細(xì)胞：指成熟紅細(xì)胞中出現(xiàn)鐵顆粒。 七、鐵染色 第七十張，PPT共八十頁，創(chuàng)作于2022年6月骨髓細(xì)胞內(nèi)鐵染