1、機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)大綱實(shí)驗(yàn)名稱:茶多酚對(duì)心律失常的保護(hù)作用課題來源：自選設(shè)計(jì)班級(jí):2011級(jí)護(hù)理本科4班設(shè)計(jì)人員：龍 慧,7組，設(shè)計(jì)日期:2013年1月7日指導(dǎo)老師:楊拯基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心2013年1月制一、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的目的意義:實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的目的意義，國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀，存在的問 題，解決問題的思路。目的與意義:心律失常時(shí)，運(yùn)用茶多酚來影響心率，本實(shí)驗(yàn)的目的在于研究茶 多酚對(duì)心律失常的保護(hù)作用，從而進(jìn)一步使茶多酚更好的運(yùn)用于臨床治療。國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀:任何原因引起的心臟激動(dòng)的起源、頻率、節(jié)律及激動(dòng)傳導(dǎo)速 度與順序的異常，都會(huì)導(dǎo)致心率失常（或快或慢）。茶多酚是從茶葉中提取的多酚類物質(zhì)，據(jù)目前所知，具有降

2、低血脂、抗動(dòng)脈粥 樣硬化、抗癌、抗突變等多種藥理作用，有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道其對(duì)心肌損害具有保護(hù)作 用，然而，茶多酚對(duì)心率的保護(hù)作用的研究還不是很全面，茶多酚可通過抑制鈣離 子內(nèi)流而發(fā)揮抗心率失常作用。結(jié)合本實(shí)驗(yàn)的目的，即探討茶多酚對(duì)心率失常的保護(hù)作用，利用茶多酚來治療 心律失常具有重要意義，使其可以更好的應(yīng)用于臨床。存在的問題：目前市場(chǎng)上已有茶多酚類藥物，用于治療疾病，但對(duì)于心率失常 的作用的準(zhǔn)確性，有待加強(qiáng)。解決問題的思路:本實(shí)驗(yàn)通過分別運(yùn)用烏頭堿、氯化鈣、氯仿、哇巴因以及結(jié) 扎冠脈復(fù)灌復(fù)制心律失常模型，運(yùn)用茶多酚進(jìn)行救治，設(shè)計(jì)給藥組與對(duì)照組。參考文獻(xiàn)：1楊賢強(qiáng)，王岳飛茶多酚化學(xué)【M】.上海.上?？?/p>

3、學(xué)技術(shù)出版社2003.1-72黃健，茶多酚對(duì)異丙腎上腺素致大鼠心肌肥厚的保護(hù)作用，今日藥學(xué)-2012年10期3唐莉，期前收縮臨床分型證治，中國(guó)健康月刊:B-2011年3期4葉建文，淺談抗心律失常藥物的臨床應(yīng)用，中國(guó)醫(yī)藥指南-2011年9期5譚建國(guó)楊旭東，心律失常的中醫(yī)治療，中醫(yī)臨床研究-2010年13期6覃中瓊，藥物治療烏頭堿導(dǎo)致惡性室性心律失常30例療效觀察，中國(guó)醫(yī) 藥導(dǎo)報(bào)-2006年20期7付志材 魏學(xué)蘭，與抗心律失常藥物配伍應(yīng)用易誘發(fā)心 率失常的藥物研究，中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)-2006年23期二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案（實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)目標(biāo),擬解決的主要問題，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)計(jì)，實(shí)驗(yàn)專 業(yè)設(shè)計(jì)，實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)設(shè)計(jì),實(shí)驗(yàn)方法設(shè)

4、計(jì)，可行性分析，預(yù)期結(jié)果，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)工作時(shí)間 安排）。（一）實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)目標(biāo)，擬解決的關(guān)鍵問題設(shè)計(jì)目標(biāo):探討茶多酚對(duì)心律失常的保護(hù)作用，從而研究茶多酚具體對(duì)什么類 型的心律失常具有治療作用。擬解決的關(guān)鍵問題:實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷闹苽洹?duì)試驗(yàn)性心律失常的模型進(jìn)行分組與實(shí) 驗(yàn)結(jié)果分析。（二）實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)計(jì)我們選用大鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，有以下幾點(diǎn)理由：1）、大鼠易得到，容易飼養(yǎng)，在科研工作中被廣泛利用。2）、大鼠體型大小合適，易于觀察。、適用于復(fù)制快速性心律失常模型。2、實(shí)驗(yàn)專業(yè)設(shè)計(jì)選用大鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，分別給予烏頭堿、氯化鈣、氯仿、哇巴因以及結(jié)扎冠 脈復(fù)灌，然后給予茶多酚進(jìn)行解救，觀察對(duì)實(shí)驗(yàn)性心律失常的作用

5、，記錄每組中的 死亡數(shù)和生存數(shù)，心電圖數(shù)據(jù)，室顫發(fā)生率等。3、實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)設(shè)計(jì)中應(yīng)始終貫徹隨機(jī)、對(duì)照、重復(fù)三大原則。隨機(jī):選正常成年健康重相近的大鼠100只，雌雄兼有，將100只大鼠按體 重由小變大編號(hào)后，從隨機(jī)數(shù)字表中查取隨機(jī)數(shù)字，依次抄錄于大鼠編號(hào)下。具體 方法:動(dòng)物編號(hào)為1100號(hào)，運(yùn)用計(jì)算機(jī)產(chǎn)生隨機(jī)數(shù)，把100只大鼠隨機(jī)分成5 組，每組20只大鼠;再把每組中的20只大鼠運(yùn)用隨機(jī)數(shù)分組，分為給藥組(10只) 和對(duì)照組(10 只)，分別為 A 組(1,2,3,4,5,6,7,8,9,10，1，2,3,4,5,6,7,8,9,10 前10只為給藥組(A1)，后10只為對(duì)照組(A2);

6、B組(1,2,3,4,5,6,7,8,9,1010前10只為給藥組(B1)，后10只為對(duì)照組(B2);以 此類推，分為A、B、C、D、E組對(duì)照:本組實(shí)驗(yàn)做了給藥組和對(duì)照組對(duì)照，在前面的專業(yè)設(shè)計(jì)里已經(jīng)提及。重復(fù):本實(shí)驗(yàn)采用的是每實(shí)驗(yàn)小組有20只大鼠，具有一定的重復(fù)性。統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)收集:本實(shí)驗(yàn)搜集計(jì)量資料，初步確定對(duì)各組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的比較分為 實(shí)驗(yàn)值和基礎(chǔ)值比較。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)收集記錄A組(對(duì)氯化鈣誘發(fā)大鼠室顫的作用)編組實(shí)驗(yàn)前的試驗(yàn)后的是否存活率(%)心率(次/min)心率(次/min)存活A(yù)1A2基礎(chǔ)值比較B組（對(duì)氯仿誘發(fā)大鼠室顫的作用）編組實(shí)驗(yàn)前的試驗(yàn)后的是否存活率（%）心率（次/min）心率（次/min

7、）存活B1B2基礎(chǔ)值比較以此類推，C（對(duì)烏頭堿誘發(fā)大鼠心率失常的作用），D（對(duì)哇巴因誘發(fā)大鼠心率失 常的作用），E（對(duì)結(jié)扎冠脈復(fù)灌誘發(fā)大鼠心率失常的作用）組記錄同樣的數(shù)據(jù)。表15組茶多酚對(duì)實(shí)驗(yàn)性心率失常的作用比較組別對(duì)照組的給藥（茶多酚）組的茶多酚對(duì)心率失常存活率（%）存活率（%）是否有作用A組B組C組D組E組實(shí)驗(yàn)值比較（5）統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)分析本實(shí)驗(yàn)采用計(jì)量資料來測(cè)定各種指標(biāo)的數(shù)值，所有數(shù)據(jù)均采用平均數(shù)?標(biāo)準(zhǔn)差 （?s）表示，五組間實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)比較行完全隨機(jī)單因素方差分析，組間兩兩比較行q檢 驗(yàn)，如B1、B2組模型心率行兩樣本比較t檢驗(yàn)，均以0.05作為顯著性檢驗(yàn)水準(zhǔn)。 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄如B組。五組間實(shí)驗(yàn)數(shù)

8、據(jù)比較行完全隨機(jī)單因素方差分析，如各組心率總體均值的比 較，其方法如下：建立檢驗(yàn)假設(shè)H0:,1=(各組心率總體均值相等)。，2,3H1:,1、(不等或全不等)，a,0.05。,2,3計(jì)算統(tǒng)計(jì)量利用統(tǒng)計(jì)學(xué)專業(yè)軟件SPSS做One-way ANOVA。(3 )查F值表，確定P值，得出結(jié)論。A、B、C、D、E組每個(gè)組模型心率兩樣本比較t檢驗(yàn)，如A1與A2組之間模型 心率的比較，其方法如下：建立檢驗(yàn)假設(shè)H0: = (兩組心率模型形成總體均值相等)。,1,2H1:、不等，a,0.05。,1,2計(jì)算統(tǒng)計(jì)量X=(X1+X2+X3+Xn)/n呻？(Xi-X)2/(n-1) t=(x-u)/Sx(3 )查t值表

9、，確定P值，得出結(jié)論。4、實(shí)驗(yàn)方法設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線獲取大鼠(1)復(fù)制心律失常模型與解救：A組運(yùn)用氯化鈣，給藥組用茶多酚解救，對(duì)照組用生理鹽水，分別記錄心率 和存活率;B組運(yùn)用氯仿，給藥組用茶多酚解救，對(duì)照組用生理鹽水，分別記錄心率和 存活率；C組運(yùn)用烏頭堿，給藥組用茶多酚解救，對(duì)照組用生理鹽水，分別記錄心率 和存活率；D組運(yùn)用哇巴因，給藥組用茶多酚解救，對(duì)照組用生理鹽水，分別記錄心率 和存活率；E組運(yùn)用結(jié)扎冠脈復(fù)灌，給藥組用茶多酚解救，對(duì)照組用生理鹽水，分別記 錄心率和存活率。實(shí)驗(yàn)技術(shù)方法隨機(jī)抽樣:隨機(jī)100只正常的大鼠，并分別編號(hào)，再隨機(jī)平分成五組，并稱 重。實(shí)驗(yàn)分組:實(shí)驗(yàn)室共10組同學(xué)，1

10、、2組做A組實(shí)驗(yàn)，3、4組做B組實(shí)驗(yàn)，5、6組做C組實(shí)驗(yàn),7、8組做D組實(shí)驗(yàn),9、10組做E組實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)手術(shù):各組同時(shí)領(lǐng)取大鼠，稱重。模型復(fù)制:根據(jù)各組的模型復(fù)制藥物的不同，分別給予不同的藥物。A組10%氯化鈣130mg/kg,B組取1.5g脫脂棉，浸含氯仿8ml(每換一鼠加氯仿1.0ml),C 組滴注烏頭堿10毫克每千克每分鐘，直至引發(fā)心律失常，D組恒速輸入哇巴因50 毫克每千克每分鐘，直至心率失常;E組將冠脈左前降支結(jié)扎，造成心肌缺血， 5min后剪斷結(jié)扎線，使冠脈重新得到血液灌注。（5）處理措施:模型復(fù)制后，向給藥組注入茶多酚10mg/kg分別觀察心率，存活 數(shù)。（三）可行性分析：1、大鼠易得到，容易侍養(yǎng)，在科研工作中被廣泛利用。2、操作比較簡(jiǎn)單。3、手術(shù)器材和設(shè)備均為實(shí)驗(yàn)室常用，手術(shù)方法我們也相對(duì)熟練。（四）預(yù)期效果：1、茶多酚對(duì)心律失常具有保護(hù)作用2、為臨床上進(jìn)一步研制有關(guān)茶多酚對(duì)心率失常的治療提供可靠依據(jù)。（五）實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)工作時(shí)間安排：1、共計(jì)1D完成藥物的配制與儀器設(shè)備的準(zhǔn)備；2、共計(jì)0.5D完成實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型制備和處理；3、共計(jì)0.5D完成材料重量分析；4、總共實(shí)驗(yàn)在2D完成。三、完成實(shí)驗(yàn)的條件1、儀器設(shè)備情況:本實(shí)