1、 背景介紹（特性及藥理作用、危害、檢測方法以及相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)）GB/T22286-2008 檢測原理及適用范圍檢測流程（酶解、提取、凈化）儀器條件注意事項(xiàng) 主要內(nèi)容主要內(nèi)容一、背景介紹一、背景介紹 -受體激動(dòng)劑是一類化學(xué)合成的苯乙醇胺類物質(zhì)，早期主要用于防治人、動(dòng)物支氣管哮喘和支氣管痙攣，后來發(fā)現(xiàn)在飼料中添加該類藥物后具有營養(yǎng)再分配作用，可明顯提高動(dòng)物的瘦肉率（提高10%），因此曾被作為促生長添加劑被廣泛關(guān)注，但是人們食用了該類藥物殘留的畜禽產(chǎn)品后會出現(xiàn)面色潮紅、頭痛、頭暈、胸悶、心悸、四肢麻木等不良反應(yīng)，嚴(yán)重的可危及生命。因此歐盟、美國等都先后立法禁止在養(yǎng)殖業(yè)中使用該類藥物，我國政府也明令禁止其使

2、用。1.1.“瘦肉精瘦肉精”的危害的危害鹽酸克倫特羅在動(dòng)物體內(nèi)主要發(fā)生氧化作用，也發(fā)生硫酸化反應(yīng)和葡萄糖醛酸絡(luò)合反應(yīng)(存在形式為結(jié)合態(tài)和游離態(tài))。其主要代謝場所是肝臟，最終大部分隨尿液排出，實(shí)驗(yàn)證明，鹽酸克倫特羅在動(dòng)物體內(nèi)代謝周期長，易富集和殘留，耐熱性較高，在100的沸水中很穩(wěn)定。2 2. .“瘦肉精瘦肉精”體內(nèi)代謝體內(nèi)代謝目前，針對-興奮劑有效檢測方法主要集中在膠體金快速檢測卡法、酶聯(lián)免疫法（ELISA）、高效液相色譜法（HPLC）、液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法(LC-MS/MS)、氣相色譜-質(zhì)譜法(GC-MS)3 3. .檢測方法及相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)檢測方法及相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)二、二、GB/T 22286-2008G

3、B/T 22286-2008適用范圍及原理適用范圍及原理 范圍：本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了動(dòng)物源性食品中（適用于豬肝和豬肉）克倫特羅、沙丁胺醇、特布他林、萊克多巴胺、塞曼特羅、塞布特羅、溴布特羅、苯氧丙酚胺、馬布特羅、溴代克倫特羅殘留量的檢測方法，檢出限均為0.5g/kg。 實(shí)驗(yàn)室還針對鰻魚及烤鰻等動(dòng)物源性食品進(jìn)行了方法驗(yàn)證檢測原理檢測原理 原理：試樣中的殘留物經(jīng)酶解，用高氯酸調(diào)節(jié)pH值，沉淀蛋白后離心，上清液用異丙醇-乙酸乙酯提取，再用陽離子交換柱凈化，液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測定，內(nèi)標(biāo)法定量（沙丁胺醇-D3作為沙丁胺醇、特布他林和萊克多巴胺的內(nèi)標(biāo)物，克倫特羅-D9作為其余-受體激動(dòng)劑的內(nèi)標(biāo)物質(zhì)）克倫特羅 沙丁

4、胺醇 特布他林 萊克多巴胺 賽曼特羅-NH- + H20 -NH2- + OH+-水解作用三、檢測流程三、檢測流程 檢測流程：-NH- + H20 -NH2- + OH+-水解作用 酶解酶解 提取提取 凈化凈化1.1.酶的最適酶的最適pHpH2.2.在酸性條件下溶于水，在酸性條件下溶于水，易提取易提取四四、液相色譜、液相色譜- -串聯(lián)質(zhì)譜條件串聯(lián)質(zhì)譜條件五、注意事項(xiàng)五、注意事項(xiàng) 1、每批檢測樣做樣順序?yàn)樵噭┛瞻住悠房瞻?、空白樣品加?biāo)曲線、樣品。 2、加標(biāo)回收：取0.25 mL 10.0 ng/mL的四種興奮劑混標(biāo)到5g樣品中，相當(dāng)于0.5g /kg添加水平 3、初測加標(biāo)選用同等基質(zhì)的任一樣品，復(fù)測時(shí)做平行樣，初測濃度較高的樣品復(fù)測時(shí)應(yīng)先將樣品稀釋