1、農(nóng)藥殘留檢測(cè)的前處理技術(shù)近年來，由于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)過程中忽視農(nóng)藥的正確、合理使用， 農(nóng)藥污染問題經(jīng)常發(fā)生， 農(nóng)藥殘留量超標(biāo)現(xiàn)象相當(dāng)嚴(yán)重， 并呈現(xiàn) 逐年加劇的趨勢(shì)。 為保障人民的身體健康、 有效控制農(nóng)藥在農(nóng)產(chǎn) 品生產(chǎn)中的使用和對(duì)其殘留量進(jìn)行監(jiān)控， 大力開展農(nóng)藥殘留檢測(cè) 技術(shù)特別是相關(guān)的前處理技術(shù)的研究是非常必要的。 農(nóng)藥殘留測(cè) 定之前要有適合于各種樣品的理化性質(zhì)的萃取、 凈化、 濃縮等前 處理步驟， 這些前處理過程往往對(duì)農(nóng)藥殘留分析的準(zhǔn)確性、 精確 程度有重要影響。由于農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)涉及的樣品種類繁多、 樣品組成及其濃度復(fù)雜多變、 樣品物理形態(tài)范圍廣泛， 對(duì)農(nóng)藥殘 留測(cè)定構(gòu)成的干擾因素特別多， 所以

2、需要選擇科學(xué)有效的處理方 法。據(jù)統(tǒng)計(jì)表明 1 ，大部分農(nóng)藥殘留檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室中用于農(nóng)藥殘 留檢測(cè)樣品前處理過程的時(shí)間約占整個(gè)分析時(shí)間的2/3 。為了提高分析測(cè)定效率， 改善和優(yōu)化農(nóng)藥殘留檢測(cè)樣品制備的方法和技 術(shù)是一個(gè)重要問題。 在現(xiàn)代農(nóng)藥殘留分析中， 有些提取方法已經(jīng) 能夠達(dá)到部分凈化或完全凈化的效果。 因此， 提取和凈化方法的 界限已十分模糊。 這些新技術(shù)的共同特點(diǎn)是節(jié)省時(shí)間， 減輕勞動(dòng) 強(qiáng)度，節(jié)省溶劑，減少樣品用量，提高提取或凈化效率以及自動(dòng) 化水平。目前，得到廣泛應(yīng)用的新技術(shù)主要有超臨界流體提取、 固相微萃取、微波輔助萃取技術(shù)、膠滲透色譜、基質(zhì)固相分散萃 取、固相萃取等。、超臨界流體萃取（

3、 Supercritical Fluid ExtractionSFE)超臨界流體(supercritical fluid , SCF是指處于臨界溫 度和臨界壓力的非凝縮性的高密度流體。 這種流體介于氣體和液 體之間，兼具二者的優(yōu)點(diǎn)。超臨界流體萃取(SFE是指利用處于超臨界狀態(tài)的流體為溶劑對(duì)樣品中待測(cè)組分的萃取方法。 Lehotay等2首次報(bào)道了應(yīng)用SFE技術(shù)檢測(cè)蔬菜中五氯硝基苯 殘留，樣品無需進(jìn)一步凈化即可通過氣質(zhì)聯(lián)機(jī)(GC-M$檢測(cè)。隨后Lehotay等再次使用SFE GC-MS僉測(cè)了蔬菜、水果中46種 農(nóng)藥殘留，除甲胺磷和乙酰甲胺磷外，其他農(nóng)藥的回收率都在 80%以上。為提高SFE的萃取效

4、果，常在超臨界流體CO沖加入少量的極性溶劑。Rhan通過在洋蔥、胡蘿卜前處理過程中加入 甲醇，有效地提高了被檢農(nóng)藥的回收率。劉瑜等 3 應(yīng)用此技術(shù) 對(duì)蘋果中 5 種氨基甲酸酯農(nóng)藥進(jìn)行檢測(cè)，其結(jié)果支持了這一觀 點(diǎn)。SFE技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是可進(jìn)行選擇性萃取，萃取物不會(huì)改變其原 來的性質(zhì)，萃取過程簡(jiǎn)單易于調(diào)節(jié)；缺點(diǎn)是萃取裝置較昂貴，不 適于分析水樣和極性較強(qiáng)的物質(zhì) 4 。二、固相微萃取( Solid- phase microextraction ， SPME) 固相微萃取是 20 世紀(jì) 80 年代末由加拿大 Waterloo 大學(xué) Pawliszyn 和 Arhturhe 教授提出的，它是在固相萃取技術(shù)基

5、礎(chǔ) 上發(fā)展起來的一種兼樣品制備的前處理技術(shù)。SPME勺原理是利用待測(cè)物在基體和萃取相之間的非均相平衡，使待測(cè)組分?jǐn)U散吸附到石英纖維表面的固定相涂層， 待吸附平衡后， 再以氣相色譜 或高效液相色譜分離和測(cè)定待測(cè)組分。SPME技術(shù)具有簡(jiǎn)便、快捷、無需萃取溶劑的特點(diǎn)， 非常適用于揮發(fā)或半揮發(fā)農(nóng)藥殘留分 析。影響固相微萃取結(jié)果的因素包括萃取頭類型、萃取時(shí)間、離 子強(qiáng)度、解吸附溫度和解吸附時(shí)間等。陳偉琪等5利用100卩m聚二甲基硅氧烷萃取頭浸入勻漿液的萃取方式，由GC-FPD測(cè)定了茼蒿中的甲拌磷等 4 種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量，討論了攪拌速 度、離子強(qiáng)度、平衡時(shí)間等影響因素對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響； Lambropo

6、ulou等采用100卩m聚二甲基硅氧烷萃取頭、頂空 - 固相微萃取(HS-SPME方式，用GC-MS方法測(cè)定了草莓和櫻桃 中的乙硫磷、對(duì)硫磷、倍硫磷等 7 種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量； Sakamoto 等發(fā)展了一種采用85 ym聚丙烯酸酯萃取頭、頂空-固相微萃 取測(cè)定水中的158種農(nóng)藥殘留量的GC-MS方法，探討了不同種類 萃取頭、鹽濃度、pH值和萃取溫度等參數(shù)的影響。固相微萃取 的優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單快速，價(jià)廉實(shí)用，適用于現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)；缺點(diǎn)是因 固定相吸附容量有限， 定量結(jié)果誤差相對(duì)較大， 主要用于定量測(cè) 定。三、微波輔助萃取技術(shù) ( Microwave Aided Extraction ， MAE) 微波

7、輔助萃取是 1986 年匈牙利學(xué)者 Ganzler 等人通過利用 微波能萃取土壤、食品、飼料等固體物中的有機(jī)物，提出一種新 的少溶劑樣品前處理方法。 微波輔助萃取技術(shù)是對(duì)樣品進(jìn)行微波 加熱，利用極性分子可迅速吸收微波能量的特性來加熱一些具有 極性的溶劑，達(dá)到萃取樣品中含目標(biāo)化合物，分離雜質(zhì)的目的。Akhtar等 先用MAE法從精飼料中萃取出鹽霉素，而后用HPLC法測(cè)定其濃度。Hummer7用MAE法萃取后用GC-ECDM定了 海洋哺乳動(dòng)物脂肪組織中的有機(jī)氯化合物， 經(jīng)該方法與索氏提取 方法萃取的樣品中類酯的含量相似。 微波輔助萃取技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是 快速節(jié)能、節(jié)省溶劑、污染?。蝗秉c(diǎn)是不易自動(dòng)化，且一

8、般僅用 于有機(jī)氯類農(nóng)藥的提取。四、凝膠滲透色譜（ gel permeationraphy ， GPC）凝膠滲透色譜技術(shù)是根據(jù)溶質(zhì) （被分離物質(zhì)） 分子量的不同， 通過具有分子篩性質(zhì)的固定相（凝膠），使物質(zhì)達(dá)到分離。凝膠 滲透色譜法最初主要用來分離蛋白質(zhì)， 但隨著適用于非水溶劑分 離的凝膠類型的增加， 凝膠滲透技術(shù)應(yīng)用于農(nóng)藥殘留量?jī)艋靡?發(fā)展。Bal in ova采用GPC提純步驟，用HPLC僉測(cè)了 5種GC無 法檢測(cè)的農(nóng)藥（殺蟲隆、氟蟲脲、四螨嗪、噻螨酮、除蟲脲）， 方法靈敏度高， 準(zhǔn)確度及精密度好， 數(shù)據(jù)線性范圍寬 （240 ng）， 能夠很好地分離共萃取基質(zhì)。 該方法的操作難度相對(duì)較高，

9、 初學(xué) 者不易掌握。五、基質(zhì)固相分散萃取（ Matrixsolid-phase dispersion extr-action ， MSPD）基質(zhì)固相分散萃取由 Barker 于 1989 年首次提出。 這項(xiàng)技術(shù) 的優(yōu)點(diǎn)是不需要進(jìn)行組織勻漿、沉淀、離心、pH 調(diào)節(jié)和樣品轉(zhuǎn)移等操作。MSPD勺原理是將C18等固相萃取吸附劑與固體、半 固體或黏性的樣品一起研磨， 得到半干狀態(tài)的混合物并將其作為 填料裝柱，然后用不同勺溶液淋洗柱子， 將各種待測(cè)物洗脫下來。 MSP哆應(yīng)用于從動(dòng)物組織、蔬菜、水果中分離藥品、除草劑、 殺蟲劑和其他污染物，BARBER S A和王運(yùn)浩等認(rèn)為影響 MSPD效 果勺因素包括吸附

10、劑勺粒徑、 鍵合相勺性質(zhì)、 樣品基質(zhì)勺性質(zhì)以 及基質(zhì)勺修飾、淋洗劑勺性質(zhì)以及加入勺順序等。 Kristenson 等發(fā)展了一種簡(jiǎn)便快速的 MSPD/GC-M方法測(cè)定水果中的氯菊酯 和倍硫磷、馬拉硫磷等10種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量。選擇C8作為吸 附劑，每次分析僅需25 mg樣品和100卩L溶劑；Pico等利用 C18做分散吸附劑、硅膠柱凈化、GC-NPD和 GC-ECD測(cè)定的方法檢測(cè)了水果和蔬菜中的克菌丹、 滅菌丹等 8 種殺菌劑； Morzycka 建立了一種簡(jiǎn)便的多殘留分析的 MSPD/GC-NP方法測(cè)定蜂蜜中 的乙硫磷、 毒死蜱等 12 種農(nóng)藥的殘留量， 采用 Florisil 和硅膠 作分散

11、吸附劑， 氧化鋁和硅膠作為凈化吸附劑， 達(dá)到了較好的凈 化效果和良好的回收率。該方法僅適用于一類化合物的分離。六、固相萃取( Solid Phase Extraction ， SPE) 固相萃取(SPE是利用固體吸附劑將液體樣品中的目標(biāo)化 合物吸附， 與樣品的基體和干擾化合物分離， 然后再用洗脫液洗 脫或加熱解吸附，達(dá)到分離和富集目標(biāo)化合物的目的。與液 /液 萃取相比， 固相萃取有很多優(yōu)點(diǎn)： 固相萃取不需要大量互不相溶 的溶劑，處理過程中不會(huì)產(chǎn)生乳化現(xiàn)象；采用高效、高選擇性的吸附劑（固定相），能顯著減少溶劑的用量，簡(jiǎn)化樣品的預(yù)處理 過程，同時(shí)所需費(fèi)用也有所減少。一般來說，固相萃取所需時(shí)間 為液

12、/液萃取的 1/2 ，而費(fèi)用為液 /液萃取的 1/5 。固相萃取實(shí)質(zhì) 上是一種液相色譜分離， 其主要分離模式也與液相色譜相同， 可 分為正相（吸附劑極性大于洗脫液極性）、反相（吸附劑極性小 于洗脫液極性），離子交換和吸附。目前，用于HPLC的填料幾乎均可用于SPE但SPE柱的填料粒徑大于 HPLC填料，SPE柱效 會(huì)遠(yuǎn)低于HPLC色譜柱。因此，該方法適于分離保留性質(zhì)差別很 大的化合物，主要用于處理樣品。固相萃取主要用于復(fù)雜樣品中微量或痕量目標(biāo)化合物的分 離和富集。例如生物體（如血液、尿等）中藥物及其代謝產(chǎn)物的 分析、食品中有效成分或有害成分的分析、 環(huán)保水樣中各種污染 物（可揮發(fā)性有機(jī)物和半揮發(fā)